全 文 ：［收稿日期］ 20110721(009)
［基金项目］ 新世纪优秀人才支持计划
［第一作者］ 段琼，从事中药化学成分结构及生物活性分析和
体 内 药 物 分 析，Tel: 010-84738619， E-mail:
huangjm@ mail． bucm． edu． cn
［通讯作者］ * 黄建梅，教授，硕士生导师，从事中药化学成分
结构及生物活性分析和体内药物分析，Tel:010-
84738619，E-mail:huangjm@ mail． bucm． edu． cn
HPLC测定灯心草中去氢厄弗酚含量
段琼，王杨，林婷婷，孙道涵，简伟杰，黄建梅 *
(北京中医药大学中药学院，北京 100102)
［摘要］ 目的:建立灯心草中去氢厄弗酚含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱法，Agilent HC-C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ，流动相甲醇-水(65∶ 35) ，流速 1. 0 mL·min － 1，检测波长 270 nm，柱温 23 ℃。结果:去氢厄弗酚线性范围为
0. 017 4 ～ 0. 870 4 μg，与峰面积线性关系良好。平均加样回收率为 98. 3%，RSD 0. 61%。结论:所建立的方法分离效果好、操
作简便、准确、灵敏度高、重复性好，可用于灯心草中去氢厄弗酚的含量测定。
［关键词］ 高效液相色潽法;灯心草;去氢厄弗酚;菲类;含量测定
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2011)20-0092-03
Determination of Dehydroeffusol in Juncus effusus by HPLC
DUAN Qiong，WANG Yang，LIN Ting-ting，SUN Dao-han，JIAN Wei-jie，HUANG Jian-mei*
(School of Chinese Materia Medica，Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100102，China)
［Abstract］ Objective:To establish a method of determined the content of dehydroeffusol in Juncus effusus．
Method:The content of dehydroeffusol was determined by HPLC． The separation employed Agilent HC-C18 column
(4. 6 mm × 250 mm，5 μm)in 23 ℃，using methanol-water (65∶ 35)as mobile phase at flow rate was 1. 0 mL·
min － 1 and UV detection at 270 nm． Result:The method of validation parameters indicate a linear range of between
0. 017 4-0. 870 4 μg． The recovery was 98. 3%(RSD 0. 61%)． Conclusion:The method is simple，accurate and
sensitive． It is adoptable for quantitative analysis of dehydroeffusol in J． effusus．
［Key words］ HPLC;Juncus effusus L．;dehydroeffusol;phenanthrene;determination
灯心草为灯心草科灯心草属植物灯心草 Juncus
effusus L． 的干燥茎髓，具有清心火、利小便之功效，
用于心烦失眠，尿少涩痛，口舌生疮［1］。其主要含有
9，10-二氢菲类、菲类、芘类、三萜类、甘油酯类等成
分［2-11］，本课题组通过小鼠高架十字迷宫模型及洞
板实验模型，证实灯心草中菲类成分去氢厄弗酚
(dehydroeffusol)具有镇静、抗焦虑作用，为灯心草清
心除烦作用的物质基础之一［12］。通过前期对灯心
草化学成分及指纹图谱研究发现，去氢厄弗酚在灯
心草药材中含量较高［13］。本试验利用高效液相色
谱法，建立了灯心草中去氢厄弗酚的含量测定方法，
并对不同批次的灯心草药材中去氢厄弗酚含量进行
测定，为灯心草药材的质量控制及开发利用提供了
依据。
1 仪器与试药
SARTORIUS AG BS110S 型电子天平(德国赛多
利斯公司) ，METTLER AE-240 型电子天平(德国梅
特勒-托利多公司) ，TU-1901 型双光束紫外-可见分
光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司) ，BL-
100 型高速多功能粉碎机(浙江省永康市五金有限
公司) ，岛津 LC20A 型高效液相色谱仪(LC-20AT 高
效泵，SPD-20A 检测器，LC solution 工作站，日本岛
津公司) ，Agilent HC-C18色谱柱(4. 6 mm × 250 mm，5
μm) ，去 氢 厄 弗 酚 对 照 品 (实 验 室 自 制，含 量
·29·
第 17 卷第 20 期
2011 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 17，No． 20
Ope．，2011
97. 20%) ，甲醇为色谱纯，水为去离子水，从各地药
材市场购买灯心草药材共 11 批，经北京中医药大学
中药学院生药系杨瑶珺副教授鉴定均为灯心草 J．
effusus 的干燥茎髓。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件 Agilent HC-C18色谱柱(4. 6 mm ×
250 mm，5 μm) ，流动相甲醇-水(65 ∶ 35) ，流速 1. 0
mL·min － 1，检测波长 270 nm，柱温 23 ℃，进样量
10 μL。
A. 对照品;B. 供试品;1. 去氢厄弗酚
图 1 去氢厄弗酚 HPLC
2. 2 对照品溶液的制备 精密称取去氢厄弗酚对
照品 21. 76 mg，加甲醇适量使溶解，置 250 mL 量瓶
中甲醇定容，得 87. 04 mg·L － 1的对照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取供试品粉碎后过 60 目
筛，混匀，称取粉末 0. 3 g，精密称定，置 100 mL 具塞
锥形瓶中，精密加入甲醇 25 mL，密塞，称定质量，超
声处理(功率 240 W，频率 40 kHz)30 min，放冷，称
定质量，甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
2. 4 线性关系考察 精密量取去氢厄弗酚对照品
溶液 0. 2，0. 5，1，3，5，8 mL 分别置于 10 mL 量
瓶，定 容 稀 释 至 刻 度 线，得 1. 74，4. 35，8. 70，
26. 11，43. 52，69. 63，87. 04 mg·L － 1的 7 份去氢厄
弗酚溶液。按照拟定的色谱条件测定，以峰面积积
分值为纵坐标，去氢厄弗酚对照品量为横坐标绘制
标准曲线，计算得回归方程 Y = 9. 075 × 106X +
19003(r = 0. 999 7) ，去氢厄弗酚的线性范围是
0. 017 4 ～ 0. 870 4 μg。
2. 5 精密度试验 取去氢厄弗酚溶液(26. 11 mg·
L － 1) ，依上述方法，连续进样 5 次，测定峰面积，RSD
1. 076%，表明仪器精密度良好。
2. 6 稳定性试验 取同一对照品及供试品(购自贵
州贵阳)溶液，按照所确定的测定方法分别于 0，3，
6，9，12，18，24 h 按照上述方法进行测定，记录去
氢厄弗酚峰面积积分值，测得对照品 RSD 2. 357%，
供试品 RSD 1. 089%，表明对照品及供试品溶液在
24 h 内稳定性良好。
2. 7 重复性试验 取同一批供试品(购自贵州贵
阳)粉末 0. 24，0. 30，0. 36 g 各 3 份，精密称定，按
2. 3 项下的方法操作，制成供试品溶液，按上述检测
方法测定，供试品的平均含量为 2. 40 mg·g － 1，
RSD 1. 27%。
2. 8 加样回收率试验 取供试品(购自贵州贵阳)
精密称定 9 份，每份 0. 15 g，每 3 份为 1 组，分别加
入高、中、低质量浓度的去氢厄弗酚对照品溶液，按
2. 3 项下的方法制备，制成供试品溶液，按上述检测
方法测定，根据测得量和加入量计算回收率。结果
去氢厄弗酚的平均回收率 98. 3%(RSD 0. 61%)。
表 1 去氢厄弗酚加样回收试验
称样量
/ g
供试品中含量
/mg
加入量
/mg
实测量
/mg
回收率
/%
0. 150 0 0. 360 0 0. 203 8 0. 560 0 98. 1
0. 150 0 0. 360 0 0. 203 8 0. 561 1 98. 6
0. 150 0 0. 360 0 0. 203 8 0. 559 9 98. 1
0. 150 5 0. 361 2 0. 336 5 0. 688 1 97. 1
0. 150 9 0. 362 2 0. 336 5 0. 691 6 97. 9
0. 148 9 0. 357 4 0. 336 5 0. 690 4 99. 0
0. 149 9 0. 359 8 0. 474 0 0. 825 3 98. 2
0. 150 4 0. 361 0 0. 474 0 0. 829 7 98. 9
0. 150 9 0. 362 2 0. 474 0 0. 830 6 98. 8
2. 9 供试品含量测定 取购自不同购买地的灯心草
样品按前述 2. 3 项下的方法操作，制成供试品溶液，
按上述检测方法测定，计算供试品的含量(表 2)。
表 2 灯心草供试品去氢厄弗酚含量测定(n = 2) mg·g － 1
No. 购买地 产地 去氢厄弗酚
1 江西 江西 2. 12
2 安徽亳州 四川 2. 10
3 广东广州 广东 2. 60
4 黑龙江齐齐哈尔 河南 5. 47
5 湖南张家界 湖北 0. 54
6 河北安国 江西 1. 32
7 贵州贵阳 四川 2. 44
8 陕西西安 安徽 0. 75
9 云南 未知 3. 49
10 福建古田 福建 2. 01
11 四川成都 四川 0. 69
3 讨论
去氢厄弗酚为 9，10-二氢菲类，具有联苯骨架结
·39·
段琼，等:HPLC 测定灯心草中去氢厄弗酚含量
构。通过 UV-vis 全波长扫描对去氢厄弗酚标准品
进行测定，最大吸收波长为 270 nm 左右，故选择 270
nm 作为检测波长。
考察了甲醇-水(80 ∶ 20) ，(70 ∶ 30) ，(66 ∶ 34) ，
(65∶ 35) ，(64 ∶ 36)5 种溶剂系统，当流动相为甲醇-
水(65 ∶ 35)时，去氢厄弗酚与其他物质色谱峰分离
度为 2. 0，保留时间 13. 8 min，理论塔板数大于 3
000，具有较好分离度及较短的保留时间，故选择甲
醇-水(65∶ 35)作为最终的流动相。
市售灯心草中去氢厄弗酚的含量变动范围比较
大，从 0. 54 mg·g － 1到 5. 47 mg·g － 1。尽管含量不一，
但主要集中在 2 个范围内，分别为(2. 25 ± 0. 25)mg
·g － 1和(0. 66 ± 0. 11)mg·g － 1。灯心草中去氢厄弗
酚的含量差异可能与灯心草生长环境、采收时间及
存放方法及时间有关，其影响因素有待进一步的
研究。
［参考文献］
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［责任编辑 蔡仲德］
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第 17 卷第 20 期
2011 年 10 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
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