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江南卷柏中双黄酮类化学成分研究



全 文 :  4 
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(收稿日期:2011-08-11;修回日期:2011-09-09)
江南卷柏中双黄酮类化学成分研究
邹振兴1,徐康平1,邹辉1,张琼1,刘敏桢1,谭桂山1,2* (1.中南大学药学院,长沙 410013;2.中南大学湘
雅医院,长沙 410008)
摘要:目的 研究江南卷柏中的双黄酮类成分。方法 利用色谱法对江南卷柏75%醇提部分的化学成分进行系统
分离纯化,利用理化性质及核磁共振图谱等手段对分离得到的单体化合物进行结构鉴定。结果 从江南卷柏中分离
得到了5个化合物,分别为穗花杉双黄酮 (ametoflavone,1),罗巴斯塔双黄酮-4′-甲醚 (4′-O-methylrobustafla-
vone,2),穗花杉双黄酮-4′-甲醚 (4′-O-methylametoflavone,3),穗花杉双黄酮-7-甲醚 (7-O-methylametoflavone,
4),7,4′-二甲氧基穗花杉双黄酮 (7,4′-di-O-methylametoflavone,5)。结论 其中化合物4为首次从江南卷柏中分
离得到。
关键词:江南卷柏;化学成分;双黄酮类化合物
中图分类号:R284.2    文献标识码:A    文章编号:1672-2981 (2012)01-0004-03
doi:10.3969/j.issn.1672-2981.2012.01.002
Biflavonoids fromSelaginella moellendorfi Hieron
ZOU Zhen-xing1,XU Kang-ping1,ZOU Hui 1,ZHANG Qiong1,LIU Min-zhen1,TAN Gui-shan1,2* (1.School
of Phatmaceutical Sciences,Central South University,Changsha410013;2.Xiangya Hospital,Central South Uni-
versity,Changsha410008)
Abstract:Objective  To study biflavonoids fromSelaginella mellendorfii Hieron.Methods The constituents were
isolated and purified by several column chromatographic methods,and their structures were identified by their physico-
chemical properties and spectrum.Results Five compounds were isolated fromSelaginella mellendorfii Hieron and
elucidated as ametoflavone(1),4′-O-methylrobustaflavone(2),4′-O-methylametoflavone(3),7-O-methylametofla-
vone(4),and 7,4′-di-O-methylametoflavone(5).Conclusion Compound 4 has been isolated fromSelaginella mel-
lendorfii Hieron for the first time.
Key words:Selaginella moellendorfii;chemical constituents;biflavonoids
  基金项目:国家自然科学基金 (No.30873149)。
作者简介:邹振兴,男,在读硕士研究生,主要从事天然药物活性成分研究,E-mail:kenman237@126.com  *通讯作者:谭桂山,
男,教授,博士研究生导师,主要从事天然药物活性成分研究,Tel:(0731)82650395,E-mail:tgs395@yahoo.com.cn
Central South Pharmacy.January 2012,Vol.10No.1 中南药学2012年1月第10卷第1期
  5 
  江南卷柏 (Selaginella moellendorfii)为卷柏科 (Se-
laginellaceae)卷柏属 (Selaginella)植物,主要分布于我
国长江流域以及长江以南各地,北至秦岭山区,全草为常用
中草药与民族药。其味微淡、苦、性寒,并具有清热解毒、
抗癌、止血生肌等功能,用于治疗癌症、肺炎、急性扁桃体
炎、眼结膜炎和乳腺炎等症[1]。目前为止,江南卷柏中报
道[2-5]的化学成分主要有双黄酮类,木脂素类及生物碱等类
型化合物,其中所含双黄酮类成分具有显著的抗病毒及抗肿
瘤活性[6-7],为江南卷柏特征活性成分。本课题组对其75%
乙醇提取物中70%乙醇分离提取部位进行化学成分研究,
从中分离得到5个双黄酮类化合物,通过化学和光谱方法确
定它们的结构分别为穗花杉双黄酮 (ametoflavone,1),罗
巴斯塔双黄酮-4′-甲醚 (4′-O-methylrobustaflavone,2),穗
花杉双黄酮-4′-甲醚 (4′-O-methylametoflavone,3),穗花杉
双黄酮-7-甲醚 (7-O-methylametoflavone,4),7,4′-二甲氧
基穗花杉双黄酮 (7,4′-di-O-methylametoflavone,5),其中
化合物4为首次从江南卷柏中分离得到,各化合物化学结构
见图1。
图1 化合物1~5结构式
Fig 1 Structure of compound 1-5
1 仪器与材料
B-540型BUCHI熔点测定仪 (瑞士BUCHI公司),
未校正;Bruker AV-500 核磁共振仪 (瑞士);安捷伦
1200高效液相色谱仪 (Agilent 1200高效液相色谱仪,
配备 四 六 梯 度 在 线 脱 气,自 动 进 样,DAD 检 测 器,
chemstation色谱工作站,美国安捷伦);薄层色谱硅胶及
柱层析硅胶 (青岛海洋化工有限公司);穗花杉双黄酮对
照品为本课题组分得,经 HPLC检测纯度达99%;其余
试剂均为分析纯。
江南卷柏 [购于河北安国冷背药材市场,经厦门大学生
命科学学院李振基教授鉴定为卷柏科卷柏属植物江南卷柏
(Selaginella moellendorfii Hieron)的全草,样本存放于中
南大学药学院药物化学系]。
2 提取与分离
取江南卷柏干燥全草15kg,粉碎成粗粉,用20倍量
75%乙醇回流提取2次,每次2h,滤过,滤液减压回收乙
醇,真空干燥得回流提取物 (2kg),并将其装入 (30~60
目)大孔树脂柱中,分别用水、40%乙醇、70%乙醇、95%
乙醇洗脱,洗脱液减压回收溶剂,真空干燥,得水部位、
40%乙醇部位、70%乙醇部位、95%乙醇部位。取70%乙
醇部位150g,将其装入 (16~30目)聚酰胺柱中,分别用
水、40%乙醇、70%乙醇、95%乙醇洗脱,洗脱液减压回收
溶剂,真空干燥,得水部位、40%乙醇部位、70%乙醇部
位、95%乙醇部位。取70%乙醇部位60g,经硅胶柱层析
分离,采用三氯甲烷-甲醇-水梯度 (1∶0∶0~0∶1∶1)洗
脱,得到Fr.1~50个流分,再经反复硅胶柱层析、Sepha-
dex LH-20柱层析及制备液相色谱等分离纯化手段,分离
得到 化 合 物 1 (15g)、化 合 物 2 (50 mg)、化 合 物 3
(20mg)、化合物4 (25mg)、化合物5 (16mg)。
3 结构鉴定
化合物1:黄色粉末,难溶于三氯甲烷、甲醇,易溶于
二甲基亚砜;mp:283~284℃;FeCl3 试液显黑色,氨熏
后黄色荧光颜色加深。1 H-NMR (500MHz,DMSO-d6)δ:
13.17(1H,S,HO-5′′),13.05(1H,S,HO-5),8.17(1H,
d,J=1.5Hz,H-2′),7.92(1H,dd,J=2,8.5Hz,H-
6′),7.64(2H,d,J=8.5Hz,H-2″′,6″′),6.98(1H,d,
J=8.5Hz,H-5′),6.80(1H,s,H-3),6.72(1H,s,H-
3″),6.61(2H,d,J=8.5Hz,H-3″′,5″′),6.36(1H,d,
J=2.0Hz,H-8),6.17(1H,d,J=2.0Hz,H-6),6.15
(1H,s,H-6″)。以上波谱数据与穗花杉双黄酮的文献[8]报
道值基本一致,并与穗花杉双黄酮的对照品共薄层,Rf 值
相同,HPLC分析与对照品保留时间一致,故鉴定化合物1
为穗花杉双黄酮 (ametoflavone)。
化合物2:黄色粉末,难溶于三氯甲烷、甲醇,易溶于
二甲基亚砜;FeCl3 试液显黑色,氨熏后黄色荧光颜色加
深。1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6)δ:13.24(1H,s,HO-
5′′),12.96 (1H,s,HO-5),10.84 (1H,br.s,HO-7),
10.82(1H,br.s,HO-7′),10.38 (1H,br.s,HO-4′′′),
8.09(1H,dd,J=2.5,9Hz,H-6′),7.97(2H,d,J =
8.5Hz,H-2″′,6″′),7.84(1H,d,J = 2.5Hz,H-2′),
7.25(1H,d,J=8.5Hz,H-5′),6.95(2H,d,J =8.5
Hz,H-3″′,5″′),6.89(1H,s,H-3),6.83(1H,s,H-3″),
6.64(1H,s,H-8′′),6.51(1H,d,J =2.0Hz,H-8),
6.20(1H,d,J=2,H-6),3.81(3H,s,4′-OCH3);13 C-
NMR(125MHz,DMSO-d6):182.3(C-4″),182.2(C-4),
164.7(C-7),164.2 (C-2″),163.9 (C-2),161.9 (C-7″),
161.7(C-4″′),161.1(C-4′),159.4(C-5′′),157.9(C-9),
157.3(C-9),156.9(C-9″),130.6(C-2′),129.0(C-2″′,C-
6″′),128.4(C-6′),123.1(C-3′),122.9(C-1′),121.7(C-
1″′),116.5 (C-3″′,5″′),112.2 (C-5′),109.1 (C-6″),
104.2(C-10),104.0(C-10″),104.0(C-3),103.3(C-3″),
99.3(C-6),94.6(C-8),94.0(C-8″),56.3(C-4′-OCH3)。
以上波谱数据与文献[9]报道值基本一致,故鉴定化合物2为
罗巴斯塔双黄酮-4′-甲醚 (4′-O-methylrobustaflavone)。
化合物3:黄色粉末,难溶于三氯甲烷,微溶于甲醇,
中南药学2012年1月第10卷第1期 Central South Pharmacy.January 2012,Vol.10No.1
  6 
易溶于二甲基亚砜;mp:235℃;FeCl3 试液显黑色,氨熏
后黄色荧光颜色加深。1 H-NMR (500MHz,DMSO-d6)δ:
13.09(1H,br.s,HO-5′′),12.92(1H,br.s,HO-5),8.18
(1H,d,J=8.5Hz,H-6′),8.07 (1H,s,H-2′),7.51
(2H,d,J=8.5Hz,H-2″′,6″′),7.35(1H,d,J=8.5Hz,
H-5′),6.92(1H,d,J=2,H-3),6.80(1H,s,H-3″),
6.72(2H,d,J =8.5Hz,H-3″′,5″′),6.50(1H,s,H-
8),6.41(1H,s,H-6″),6.20(1H,s,H-6);13 C-NMR
(125MHz,DMSO-d6):182.5(C-4″),182.2(C-4),164.8
(C-2″),163.8 (C-7),163.8 (C-2),163.1 (C-7″),161.9
(C-5),161.6(C-4″′),161.1(C-4′),160.9(C-5′′),157.9
(C-9),154.7(C-9″),131.4(C-6′),128.5(C-2″′,C-6″′),
128.5(C-2′),122.9(C-1′),122.2(C-3′),121.7(C-1″′),
116.3(C-3″′,5″′),112.2(C-5′),104.1(C-10),104.1(C-
10″),102.9(C-3),102.9(C-3″),99.4(C-6′′),99.2(C-
6),94.6(C-8),56.3(C-4′-OCH3)。以上波谱数据与文
献[10]报道值基本一致,故鉴定化合物3为穗花杉双黄酮-4′-
甲醚 (4′-O-methylametoflavone)。
化合物4:黄色粉末,难溶于三氯甲烷,微溶于甲醇,
易溶于二甲基亚砜;mp:342~343℃;FeCl3 试液显黑色,
氨熏后黄色荧光颜色加深。1 H-NMR(500MHz,DMSO-d6)
δ:13.16(1H,s,HO-5′′),13.03(1H,s,HO-5),10.18
(1H,br.s,HO-4′′′),8.18(1H,s,H-2′),7.98(1H,d,
J=8.5Hz,H-6′),7.63(2H,d,J =9Hz,H-2″′,6″′),
7.02(1H,d,J = 8.5Hz,H-5′),6.88(1H,s,H-3),
6.75(1H,s,H-3″),6.58(1H,s,H-8),6.54(2H,d,
J=8.5Hz,H-3″′,5″′),6.35(1H,s,H-6′′),6.21(1H,
s,H-6),3.81 (3H,s,7-OCH3);13 C-NMR (125 MHz,
DMSO-d6):182.3 (C-4′′),182.3 (C-4),165.5 (C-7),
164.5(C-2),164.1(C-2″),162.3(C-7″),161.6(C-4″′),
161.2(C-5),161.0(C-5′′),160.0(C-4′),157.7(C-9),
155.1(C-9′),131.9(C-2′),128.6(C-2″′,C-6″′),128.3
(C-6′),121.7(C-1″′),121.4(C-1′),120.9 (C-3′),116.5
(C-5′),116.1(C-3″′,5″′),105.1(C-10),104.1(C-10″),
103.0(C-3),102.9(C-3″),99.0(C-6′′),98.5(C-6),93.0
(C-8),56.4(C-7-OCH3)。以上波谱数据与文献[11]报道值
基本一致,故鉴定化合物4为穗花杉双黄酮-7-甲醚 (7-O-
methylametoflavone)。
化合物5:黄色粉末,难溶于三氯甲烷、甲醇,易溶于
二甲基亚砜;mp:347~348℃;FeCl3 试液显黑色,氨熏
后黄色荧光颜色加深。1 H-NMR (500MHz,DMSO-d6)δ:
13.11(1H,s,HO-5′′),12.93 (1H,s,HO-5),10.87
(HO-7′),10.34(HO-4′′′),8.23(1H,dd,J=2,8.5Hz,
H-6′),8.11(1H,d,J=2Hz,H-2′),7.50(2H,d,J =
9Hz,H-2″′,6″′),7.37(1H,d,J=8.5Hz,H-5′),7.02
(1H,s,H-3),6.83(1H,s,H-3″),6.82(1H,d,J=
2Hz,H-8),6.72(2H,d,J =9Hz,H-3″′,5″′),6.41
(1H,s,H-6″),6.34 (1H,d,J=1.5 Hz,H-6),3.84
(3H,s,4′-OCH3),3.80(3H,s,7-OCH3);13 C-NMR (125MHz,
DMSO-d6):182.5 (C-4″),182.4 (C-4),165.7 (C-2″),
164.1(C-2),164.0(C-7),162.2(C-7″),161.6(C-5′′),
161.5(C-5),161.1(C-4″′),161.1(C-4′),157.8(C-9),
154.8(C-9′),131.4(C-2′),128.8(C-6′),128.5(C-2″′,
C-6″′),122.8(C-3′),122.1(C-1″′),121.7(C-1′),116.3
(C-3″′,5″′),112.2 (C-5′),105.2 (C-8′)104.1 (C-10),
104.0(C-10″),103.0 (C-3″),99.0 (C-6′′),98.6 (C-6),
93.2(C-8),56.5(C-4′-OCH3),56.4(C-7-OCH3)。以上波
谱数据与文献[12]报道值基本一致,故鉴定化合物5为7,4′-
二甲氧基穗花杉双黄酮 (7,4′-di-O-methylametoflavone)。
致谢:感谢中南大学研究生学位论文创新项目 《江南卷
柏中新型炔酚类化学成分及抗帕金森病作用研究》对本课题
的资助及湖南师范大学化学与化工学院尹帮少老师代测核磁
数据。


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