全 文 ：　山 东 农 业 科 学　2011, 2:80 ～ 82 ShandongAgriculturalSciences
收稿日期:2010-09-30
基金项目:山东省莱芜市科技发展计划项目 “异型眼蕈蚊在生姜上的发生消长规律及生物防治研究 ”(LWKJ2008001)
作者简介:孙　霞(1974-),女 ,副教授 ,主要从事经济作物的病虫害防治研究。 E-mail:lwzysx@126.com
毛茛粗提物对异型眼蕈蚊的毒力活性研究
孙　霞 ,苏有刚 ,王峰祥
(莱芜职业技术学院生物研究所 , 山东 莱芜　271100)
　　摘　要:在室内条件下 ,测定了 5种浓度的乙醇对毛茛全草的提取效果 ,并研究了毛茛中乙醇提取物对异
型眼蕈蚊幼虫的毒杀活性。结果显示 , 55%的乙醇对毛茛的提取率最高 , 为 28%;75%的乙醇提取物活性最
强 , 对异型眼蕈蚊幼虫有很强的毒杀作用 , 24h的毒力回归方程为 Y=-1.297+0.022X, LC50为 57.913 g/L,
而且毒杀效果随着提取物浓度的提高和处理时间的延长而增强。
关键词:毛茛;乙醇提取物;异型眼蕈蚊;毒力
中图分类号:S436.32　　文献标识号:A　　文章编号:1001-4942(2011)02-0080-03
BiologicalActivityofExtractsfromRanunculusjaponicusagainst
Pnyxiascabiei
SUNXia, SUYou-gang, WANGFeng-xiang
(BiologyInstitute, LaiwuVocationalandTechnicalColege, Laiwu271100, China)
Abstract　Theextractionefectsof5concentrationsofethanolonRanunculusjaponicusweredetermined
andthetoxicityofethanolextractsagainstlarvaeofPnyxiascabieiwasstudiedinlaboratory.Theresults
showedthattheextractionrateof55% ethanolwasthehighest, whichwas28%.Thetoxicityof75% ethanol
extractwasthebestagainstPnyxiascabieilarvaewiththetoxicityregressionequationasY=-1.297 +
0.022XandtheLC50 as57.913g/Lafter24hours.Thetoxicitywasenhancedwiththeincreaseoftheextract
concentrationandtheextensionoftreatingtime.
Keywords　Ranunculusjaponicus;Ethanolextract;Pnyxiascabiei;Toxicity
　　异型眼蕈蚊(PnyxiascabieiHopkins)幼虫
(俗称姜蛆)是生姜贮藏期的主要害虫 [ 1, 2] 。为防
治该虫 ,姜农施用大量化学农药 ,使生姜仅农药残
留超标原因所导致的损失每年高达数亿元 。面对
化学农药暴露出来的种种问题 ,人们逐渐认识到
从植物中寻找新的杀虫活性物质对现代农药研究
的巨大推进作用 。毛茛 (Ranunculusjaponicus
Thunb.),又名鱼疗草 、五虎草 、野芹菜等 ,是毛茛
科毛茛属多年生草本植物 ,生长于河沟 、池沼 、水
堤旁及阴湿的草丛中 ,全国各地都有分布 ,来源丰
富 。毛茛具有祛风止痛 、杀虫解毒 、退翳 、截疟等
多种功效[ 3, 4] ,毛茛全草提取物对小菜蛾 、柑橘全
爪螨有较好的毒杀作用 [ 5, 6] ,对菜粉蝶幼虫有较
高的拒食率 [ 7] ,但毛茛提取物对异型眼蕈蚊的毒
杀活性 ,未见报道 。为探索毛茛提取物对异型眼
蕈蚊幼虫的毒杀作用 ,为今后开展毛茛杀虫活性
物质的作用机制及开发利用等研究提供依据 ,笔
者以毛茛为材料试验了不同浓度的乙醇提取液对
姜蛆的防治效果 ,为姜蛆植物源农药的研究开发
提供理论依据。
1　材料与方法
1.1　材料
1.1.1　供试植物　毛茛采自莱芜市莲花山山沟
阴湿地 。将毛茛带根铲起 ,用清水洗净根上的泥
土 ,阴干 ,磨碎 ,装入保鲜袋密封贮于冰箱中备用。
1.1.2　供试昆虫 　异型眼蕈蚊幼虫 , 2009年 9
月采于姜田 ,室内人工继代饲养 [ 8] 。
DOI :10.14083/j.issn.1001-4942.2011.02.030
1.2　方法
1.2.1　提取方法　称取毛茛全草粉碎样 50 g,置
于 500 ml圆底烧瓶中 , 用不同浓度 (设 35%、
55%、75%、85%、95%,共 5个浓度)的乙醇 400
ml回流提取 2h,倾出滤液 ,再用 400ml乙醇回流
提取 2 h,合并提取液 ,用旋转蒸发器回收溶剂 ,浓
缩至膏状。将滤渣平摊于托盘并置于烘箱中烘至
恒重 ,计算提取率 。
提取率(%)=(提取前干粉重 -提取后滤渣
干重)/提取前干粉重 ×100
1.2.2　毛茛提取物对姜蛆的触杀活性测定　参
考慕卫等(2002)[ 9]的培养皿法 。用无菌水做溶
剂 ,将 35%、55%、 75%、 85%的乙醇提取的毛茛
浸膏分别配成 200、 100 g/L浓度的溶液。在 9
cm的培养皿内铺两层滤纸 ,取 2 ml配好的药液
均匀滴加在滤纸表面 ,使之正好完全湿润。将姜
切成大小一致的姜片于药液中浸泡 15 s后 ,取出
放在铺有药液处理滤纸的培养皿内 ,然后用自制
移虫环轻轻挑取生长一致的 3龄幼虫置于皿内姜
片上。每处理 20头 ,重复 3次 ,同时设清水对照。
将携带试虫的培养皿置于 (25 ±1)℃、相对湿度
(60±10)%避光的智能人工气候培养箱内 ,分别
于 24、48、72、96h记录试虫的死亡情况 ,按 Abbot
公式计算死亡率及校正死亡率 。用移虫环轻触虫
体 ,以肢体不动者为死亡。
将优选出的对姜蛆毒力活性较强的乙醇浓度
的毛莨提取物进一步稀释为 200、 100、 50、 25、
12.5g/L浓度的溶液 ,重复上述触杀试验 ,根据
浓度 、供试虫数 、死亡虫数的数据通过 SPSS软件
形成毒力回归方程 ,并用 Duncans新复极差法比
较数据之间的差异显著性 。
校正死亡率(%)=(处理组死亡率 -对照组
死亡率)/(1-对照组死亡率)×100
2　结果与分析
2.1　不同浓度的乙醇对毛茛全草的提取率
试验结果表明 ,不同浓度的乙醇对毛茛全草
的提取率相差不大 ,其中 55%乙醇浓度的提取率
最高 ,为 28%;95%乙醇的提取率最低 ,为 20%。
2.2　不同浓度的乙醇提取液对姜蛆的毒杀活性
室内毒杀测定结果(表 1)表明 ,毛茛 4种浓
度的乙醇提取液对 3龄蛆虫均具有一定的毒杀活
性 。作用 24h时 ,在 200g/L高浓度处理下 ,其毒
杀活性大小次序为 75%乙醇提取液 >85%乙醇
提取液 >55%乙醇提取液 >35%乙醇提取液 ,幼
虫死亡率依次为 100%、50.0%、 45.5%、4.8%。
在 100 g/L浓度处理时 ,毒杀活性大小次序为
75%乙醇提取液 >55%乙醇提取液 >35%乙醇提
取液 =85%乙醇提取液 。而且随着时间的推移各
个浓度处理下的幼虫死亡率呈上升趋势。同时也
显示 ,用 75%的乙醇从毛茛中提取的粗提物对姜
蛆的毒杀效果最强 ,相对于其它各处理差异显著。
　　表 1　　4种浓度的乙醇提取液毒杀姜蛆
　的死亡率比较 (%)
乙醇浓度
(%)
药液浓度 200(g/L)
24h 48h 72h
药液浓度 100(g/L)
24h 48h 72h
35 4.8c 12.2d 18.9c 0b 6.7c 11.1b
55 45.5b 54.1c 76.3b 2.3b 2.3d 17.1b
75 100a 100a 100a 88.4a 90.7a 93.0a
85 50.0b 78.8b 81.8b 0b 13.2b 15.6b
　　注:同列数据后不同小写字母表示 0.05水平上的差异显著
性 ,下同。
2.3　优选乙醇浓度的毛茛提取液对姜蛆的毒力
测定
优选 75%的乙醇提取液对姜蛆的毒杀活性
进行分析。结果(表 2)表明 ,在同一时间段 ,毛茛
提取液对姜蛆的毒杀活性随粗提物处理浓度的升
高而增强 ,毒杀活性最强的浓度为 200 g/L,姜蛆
3龄蛆虫的校正死亡率为 100%,而且提取物同一
浓度的毒杀活性 ,随着处理时间的延长呈上升趋
势 。处理 96 h效果较好 ,说明该提取物的药效持
续时间较长 。
　　表 2　　　不同浓度的 75%乙醇毛茛提取物
　　　对姜蛆的毒杀作用
浓度
(g/L)
供试虫数
(头)
校正死亡率(%)
24h 48h 72h 96h
200 45 100a 100a 100a 100a
100 43 88.4b 90.0b 92.5b 94.8b
50 82 35.4c 37.5c 45.1c 51.2 c
25 87 28.7d 29.4d 39.7d 40.3d
12.5 95 16.8e 21.7e 32.9e 40.2d
CK 30 0f 6.67f 6.67f 10e
　　将各个时间段不同浓度的毛茛提取物对姜蛆
的毒力拟合成线性回归方程(表 3),可以看出:毛
茛粗提物对姜蛆具有一定的生物活性 , 24 h的
81　第 2期　　　　　孙　霞等:毛茛粗提物对异型眼蕈蚊的毒力活性研究
LC50为 57.913 g/L,毒力回归方程为 Y=-1.297
+0.022X。从毒力回归方程来看 , 24 h的斜率
(0.022)最大 ,说明用 75%的乙醇提取液 , 24 h的
毒力最大。
　　表 3　　　毛茛 75%乙醇提取液对姜蛆的
　　室内毒力测定结果
时间(h) 毒力回归方程 LC50(g/L) 95%置信区间 相关系数(R)
24 Y=-1.297+0.022X 57.913 50.553 ～ 67.823 0.970
48 Y=-1.135+0.021X 53.285 45.533 ～ 63.599 0.959
72 Y=-0.798+0.019X 42.174 34.589 ～ 51.557 0.943
96 Y=-0.647+0.018X 35.215 27.294 ～ 44.131 0.935
3　讨论
毛茛是一种有毒植物 ,也是我国较早利用的
土农药之一 [ 10] 。全草中含有毛茛苷 、原白头翁
素 、白头翁素 、小毛茛内酯等化学成分 [ 3, 11] 。其主
要杀虫活性成分为原白头翁素 ,原白头翁素在植
物鲜株中含量约为 0.18%[ 12] ,根据推算 ,防治害
虫的实际用量较大 ,本研究结果 24 h的 LC50为
57.913g/L也证明了这一点。原白头翁素性质不
稳定 ,室温下易聚合为白头翁素 ,聚合物的生物活
性显著降低 [ 12, 13] 。但是原白头翁素结构简单 ,合
成容易 ,目前国内已对原白头翁素的结构进行了
改造 ,并合成类似物 ———拟原白头翁素 ,活性高 ,
效果显著 , 2 mg/ml人工合成的原白头翁素的乙
醇 —水溶液 ,对果蝇有较高的毒杀活性[ 12] 。
本试验结果为利用毛茛进一步研究和开发新
型植物源农药有一定的参考价值。但是提取液容
易污染 ,残效期短是所有植物源农药面临的共同
问题 ,毛茛提取液也不例外 ,因此深入研究毛茛全
草中杀虫活性成分 、改良剂型 、延长残效期是今后
研究的主攻方向 。
参　考　文　献:
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82 山 东 农 业 科 学　　　　　　　　　　　　　　2011年