全 文 ：第 24卷　第 3期 内蒙古民族大学学报(自然科学版) Vol.24　No.3
2009年 5月 JournalofInnerMongoliaUniversityforNationalities May2009
萹蓄多糖的提取及含量测定＊
马俊杰 ,马玉山 ,王　丽 ,司志鑫 ,赵玉英
(内蒙古民族大学 化学化工学院 ,内蒙古通辽　 028043;2.内蒙古赤峰林东中蒙医院 ,内蒙古林东　 025450)
〔摘　要〕本文采用水提醇析的方法提取了萹蓄中多糖 ,采用硫酸 -苯酚法进行了糖含量的测定 , 求得其回归
方程为 Y=0.00502x+0.0105,相关系数 r=0.9992;平均回收率为 100.46%, RSD=0.67%(n=5), 萹蓄中多
糖含量为 1.67%.
〔关键词〕萹蓄;多糖;提取;分光光度法
〔中图分类号〕TQ028　　〔文献标识码〕A　　〔文章编号〕1671-0185(2009)03-0282-02
DeterminationfortheContentofPolysaccharidefrom
andchemicalengineeringPolygonumaviculareLinn
MAJun-jie, MAYu-shan, WANGLi, SIZhi-xin, ZHAOYu-ying
(1.ColegeofChemistry, InnerMongoliaUniversityforNationalities, TongLiao028043, China;
2.InnerMongoliaChifengLindongTraditionalMongolianandChineseMedicineHospital, LinDong025450, China)
Abstract:PolysaccharidewasextractedfromXiheri-Dgedawithhotwater-ethanoldepositmethodanditscontent
wasdeterminedbyphenol-sulphuricacidmethod(λ=484nm).TheregressionequationisY=0.00502x+0.0105
andcoeficientofcorrelationr=0.9992, Thecontentofpolysaccharideis1.67% andtheaveragerecoveryis100.
46%, RSD=0.67%(n=5).
Keywords:PolygonumaviculareLinn;Polysaccharides;Extraction;Spectrophotometry
多糖几乎存在于所有生物体中 ,具有能量储存 、防御功能 、抗肿瘤作用 、免疫促进活性等多方面的生物功能 , 所以近年
来多糖成为天然药物研究的热点 〔1, 2〕.萹蓄是常用中药 , 性寒 , 味苦.具有清热利尿 、解毒驱虫 、消炎 、止泻等功效.《本草纲
目》中载用于 “治霍乱 , 黄疸 ,利小便”.《滇南本草》载:“治五淋白浊 、热淋 、瘀精涩闭关窍 ,并治妇人气郁 , 胃中湿热 ,或白带
之症”等效用.现民间广泛用其治疗泌尿系统的感染 , 结石及肾炎等疾病 〔3 〕.关于萹蓄多糖成分的提取及含量测定的研究
尚未见报导.本文用水溶醇析法提取了萹蓄多糖 , 并采用硫酸 -苯酚法 〔4〕对其多糖含量进行了测定 ,为天然药物的开发应
用提供了理论依据.
1　实验材料与试剂
1.1　原料及仪器
萹蓄(产地:河北.批号:0706160);R206型旋转蒸发器(上海申生科技有限公司);SHZ-D(Ⅲ)循环水式真空泵(巩义
市英峪予华仪器厂);722S型分光光度计(上海精密科学仪器有限公司).
1.2　试剂
无水乙醇 , 丙酮 ,乙醚 , 苯酚 ,浓硫酸等均为国产分析纯 , 双蒸馏水.
2　实验方法
2.1　萹蓄多糖的提取
＊收稿日期:2009-01-10
项目基金:内蒙古自然科学基金资助课题(200711020207)
作者简介:马俊杰 (1982-),男,内蒙古通辽市人 , 在读硕士研究生, 研究方向为金属有机.通信联系人:赵玉英.
DOI :10.14045/j.cnki.15-1220.2009.03.024
第 3期 马俊杰等:萹蓄多糖的提取及含量测定
称取粉碎的萹蓄粉末 90g,均匀分成三份 , 分别放入 300 mL大烧杯中 ,加蒸馏水至 200 mL处 , 将其置于水浴恒温振荡
器中 , 温度控制在 65℃左右 , 3小时后 , 用布式漏斗热过滤 ,将滤液放入另外的 800 mL大烧杯中;用同样的方法重复提取三
次;合并三次的滤液 ,用旋转蒸发仪浓缩至 80-100 mL,冷却至室温后 ,加入 600mL乙醇 , 在背光处静置 24小时.用砂芯漏
斗抽滤 , 滤饼依次用乙醇和乙醚洗两次 , 得到灰色粉末状固体 6.0克.
2.2　多糖含量测定
2.2.1　标准溶液的配制
(1)精确称取 12.50 g苯酚 ,置于 250 mL容量瓶中 ,用蒸馏水定容至刻度 , 得 5.0%的苯酚溶液.
(2)精确称取 0.01000g葡萄糖溶于 100 mL容量瓶中 ,用蒸馏水定容至刻度 ,得 0.1mg/mL的葡萄糖溶液.
2.2.2　标准曲线的绘制
精确称取葡萄糖对照品 100 mg, 制成 0.1 mg· mL-1的对照品溶液 ,分别稀释至 10.0, 20.0, 40.0, 60.0, 70.0μg· mL-1
的 5个不同浓度的对照品系列溶液 ,准确吸取 1.0mL置 50mL比色管中 , 分别加入 1.5mL苯酚溶液 ,再加 7.5mL浓硫酸 ,
混合均匀后放置 20min, 用 722型可见分光光度计 , 在 484nm处测其吸光度 ,以对照品浓度为横坐标 , 吸光度为纵坐标做标
准曲线.得葡萄糖浓度 -吸光度回归方程:Y=0.00502x+0.0105,相关系数 R=0.9992.
2.2.3　萹蓄多糖含量测定
精确称取萹蓄粗多糖 0.01020g置于 100mL容量品瓶中 , 加入 1 mol· L-1H2SO4 2 mL加热水解 2h,冷却至室温 , 稀释
至刻度.按照绘制标准曲线的方法 , 分别精密量取 1.0mL样品液 5份 , 分别置于 50mL的比色管中 ,加 1.5 mL苯酚溶液 , 再
加 7.5mL浓硫酸溶液 ,混合均匀后放置 20 min,用可见分光光度计在 484nm处测其吸光度值 , 由回归方程计算萹蓄中多糖
含量为 1.67%.
2.2.4　回收率的测定
准确称取萹蓄多糖 5mg置于 50 mL容量瓶中 ,加入 1mol· L-1H2SO4 2mL加热水解 2h,冷却至室温,稀释至刻度,按 “2.2.2”
方法,往不同浓度的对照品系列溶液中 ,分别加入 0.1mL上述溶液.进行含量测定,结果回收率为 100.46%, RSD=0.67%(n=5).
3　结果与讨论
3.1　萹蓄多糖含量为 1.67%,平均回收率为 100.46%, RSD=0.67%(n=5).
3.2　将多糖水解成单糖时 ,水解不完全则测不准 , 过度又会导致多糖的差向异构化 , 故需准确确定水解时酸的浓度 、温度
和时间等条件.
3.3　从实验结果可以看出 ,用硫酸 -苯酚法测定多糖含量 ,结果相对标准偏差较小 , 实验结果重现性较好 ,所得数据准确.
参　考　文　献
〔 1〕DongQ, FangJN.Applicationsofpolysaccharidesinmedicine〔J〕.ChinPharmJ(中国药学杂志), 2001, 36(10):649
-652.
〔2〕WangR, WuJB.Advancesinstudiesonbioactivityofpolysaccharides〔J〕.WorldNotes-Antibiotics(国外医药·抗生
素分册), 2001, 22(3):97-99.
〔3〕江苏新医学院编.中药大词典〔M〕.上海:上海科学技术出版社 , 1977.2329.
〔4〕赵玉英 , 海平 ,等.蒙药广枣多糖组分分析和糖含量测定〔J〕.药物分析杂志 , 2001, 21(6):440.
〔责任编辑　郑　瑛〕
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