全 文 ：收稿日期:2010-07-27; 修订日期:2010-11-08
基金项目:科技部科技人员服务企业行动项目(No． 2009GJE20035)
作者简介:梁振益(1969-) ，男(汉族) ，海南文昌人，现任海南大学材料与
化工学院工程师，学士学位，主要从事天然产物的研究与开发工作．
* 通讯作者简介:林栖凤(1938-) ，女(汉族) ，广西桂林人，现任海南大学
生物科学技术研究所教授，硕士学位，主要从事分子生物学研究工作．
芦荟皮的抗氧化活性研究
梁振益1，孙达远1，张敬迎1，林栖凤2*
(1．海南大学材料与化工学院，海南 海口 570228;
2．海南省耐盐作物生物技术重点实验室·海南大学生物技术研究所，海南 海口 570228)
摘要:目的 研究芦荟皮的抗氧化活性，促进芦荟资源的综合利用。方法 分别以水、95%乙醇作溶剂，用超声波法和回流
法，得到 4 种芦荟皮提取物。再通过分析其黄酮含量和对自由基的清除能力，比较各提取物的性能。结果与结论 各提
取物对 DPPH自由基(二苯代苦味肼基自由基，1，1 － diphenyl － 2 － picryhydrazyl)均有一定的清除能力，且超声波法强于
回流法，以 95%乙醇作溶剂的提取物对自由基的清除效果优于水的提取物。各提取物对 DPPH 自由基的消除能力与其
黄酮含量有一定的量效关系。
关键词:芦荟皮; DPPH自由基; 清除能力
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 05． 051
中图分类号:R284． 1 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)05-1152-01
芦荟为百合科(Liliaceae)芦荟属(Aloe)多年生常绿肉质草本
植物，品种繁多。它所含的化学成分也十分复杂，其中已证明的
芦荟化学成分有 160 多种，包括 72 种药用成分(多糖、蒽醌类、黄
酮类、脂类、有机酸、脲甘酸、酶、氨基酸、抗生素、维生素等) ，具
有免疫调节、抗肿癌、抗病毒、抗菌消炎、促进伤口愈合及护肤保
健等重要功效［1］。然而人们往往忽视对芦荟皮的研究和利用，
以致造成了芦荟资源的浪费。黄酮类化合物具有一定的抗氧化
活性和消除自由基的功能［2］。根据已提出的衰老自由基学说，
衰老是自由基对细胞成分的过度反应所造成的［3］，芦荟皮提取
物中包括黄酮类化合物在内的抗氧化活性物质，可用于维持适当
的自由基 －自由基清除剂水平，从而延缓衰老。
本文采用回流和超声波两种提取方法，分别以水和 95%乙
醇作提取溶剂，对干芦荟皮进行浸提，得到芦荟皮提取物。再用
DPPH法，分别测定和比较了它们对自由基的清除能力，为芦荟
皮资源的应用提供参考。
1 材料与仪器
1． 1 原料与试剂 芦荟采于自海南省澄迈，为库拉索芦荟品种;
95%乙醇，广州化学试剂厂产品;芦丁(Rutin)标准品，中国医药
集团上海生化试剂厂产品;氢氧化钠，广州化学试剂厂产品;亚硝
酸钠，天津化学试剂厂产品;硝酸铝，天津化学试剂厂产品;无水
乙醇，广州化学试剂厂产品;DPPH，Sigma公司。实验用水均为一
次蒸馏水;所列试剂，除特殊说明规定外，均指分析纯试剂。
1． 2 仪器 电子天平(BP211D，d = 0． 01mg，Satorius 公司) ;冷冻
干燥机(FD － 1C － 50，北京博医康实验仪器有限公司) ;紫外 －可
见分光光度计(UV －2450，日本岛津分析仪器公司)。
2 方法
2． 1 芦荟皮提取物的制备 取新鲜完好的芦荟叶，去除凝胶，将
芦荟皮切碎，称 300 g，倒入打浆机中，分若干次共加 300 ml 水，
打成均匀的糊状物，冷冻干燥成芦荟皮干粉。
2． 1． 1 回流法 称取芦荟皮干粉样品 5 g ，分别以水、95%乙醇
为溶剂，按固液比 1∶ 20，在水浴锅中回流提取 2 h，抽滤。回收
滤渣进行两次提取，溶剂用量和提取时间减半，合并两次提取滤
液，真空冷冻干燥，得芦荟皮提取物。
2． 1． 2 超声波法 称取芦荟皮干粉样品 5 g，分别以水、95%乙醇
为溶剂，按固液比 1∶ 20，在超声波清洗仪中回流提取 1 h，抽滤。
两次提取，合并两次提取液，回收乙醇，真空冷冻干燥，得芦荟皮
提取物。
2． 2 芦荟皮提取物中黄酮含量测定［4］ 精确称取干燥至恒重的
芦丁标准品 5． 0 mg置于 50 ml容量瓶中，加入乙醇溶解并定容配
成浓度为 0． 1 mg /ml的芦丁标准溶液。精确量取芦丁标准溶液
0． 0，0． 5，1． 0，2． 0，3． 0，4． 0 ml 分别置于 10 ml 的容量瓶中，加入
30%的乙醇溶液使各体积至 5． 0 ml，分别加入 5%亚硝酸钠溶液
0． 5 ml，摇匀后放置 5 min，再分别加入 10%硝酸铝溶液 0． 5 ml，
摇匀后放置 5 min，最后分别加入 1． 0 mol /L 的氢氧化钠溶液 3
ml，用 30%的乙醇溶液定容至刻度，摇匀，放置 15 min。在 510
nm波长测定其吸光度，测定结果得回归方程为:A = 0． 011C +
0． 003 7，r = 0． 999 8。
称取 5． 0 mg左右提取物，用 30%的乙醇溶解，按上述方法操
作，根据测得的吸光度，利用标准曲线计算黄酮的含量。
2． 3 芦荟皮提取物对 DPPH消除率的测定［5］ 确称取 DPPH12． 5
mg用于无水乙醇溶解并定容至 250 ml，则 DPPH 试剂的浓度为
0． 05 mg /ml，避光保存。取 2 ml DPPH 溶液(0． 05 mg /ml)加入到
2 ml一定浓度的提取液中，充分混匀，30 min后在波长 517 nm处
测定其吸光度。提取物对 DPPH 自由基的清除率:K % = ［1 －
(Ai － Aj)/ Ac］× 100%
式中:Ai = 2 ml DPPH 溶液 + 2 ml提取液吸光度;Aj = 2 ml 提
取液 + 2 ml溶剂的吸光度;Ac = 2 ml DPPH 溶液 + 2 ml 溶剂的吸
光度。
3 结果
3． 1 不同提取方法、不同溶剂的芦荟皮提取物比较 取一定量芦
荟皮干粉，分别以水、95%乙醇为溶剂，采用超声波法和回流法进
行提取，分析各提取物的提取率和黄酮含量。结果见表 1。
表 1 不同提取方法、不同溶剂的芦荟皮提取物比较 %
提取方法 提取率 黄酮含量 黄酮类化合物提取率
超声波法水提 46． 8 9． 88 4． 63
超声波法醇提 15． 5 21． 43 3． 32
回流法水提 42． 4 8． 70 3． 69
回流法醇提 13． 5 20． 97 2． 83
由表 1 可看出，超声波提取对提高芦荟皮提取物的提取率和
黄酮含量均有一定的促进作用。其主要原因可能是:由于超声波
的机械效应、空化作用和热效应等系列特性，加速了水分子的运
动，加强了水分子的渗透力，提高了相关物质的溶出浓度，有利于
芦荟皮提取物中各组分的扩散溶出。
3． 2 芦荟皮提取物对 DPPH 的清除作用 DPPH 自由基是一种
·2511·
时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL． 22 NO． 5
合成的有机自由基，它的稳定性主要来自 3 个苯环的空间障碍，
使中间氮原子上不成对的电子不能发挥其应有的电子成对作用，
但它易从抗氧化活性物质接受电子而使氮原子上的单电子配对，
达到清除 DPPH自由基的效果［6］。若提取物中的抗氧化活性成
分能将其清除，则提示提取物具有降低氧化自由基的有效浓度和
打断脂质过氧化链反应的作用。DPPH·有个单电子，在波长
517 nm有强吸收，其乙醇溶液呈深紫色，当有自由基清除剂存在
时，自由基清除剂与其单电子配对而使其吸收逐渐减弱，其褪色
程度与接受的电子数量成定量关系［7］。结果见图 1。
图 1 各提取物系列浓度对 DPPH自由基消除率的曲线图
从图 1 可以看出:①在 0% ～ 0． 04%的浓度范围内，各提取
物溶液对 DPPH自由基的消除率随其浓度的增大而显著增大，呈
一定的正相关关系;在 0． 04% ～ 0． 30% 的浓度范围内，随着它浓
度的增大其对 DPPH自由基的消除率的作用趋于平缓，但各提取
物溶液都有较好的消除自由基的能力。②不同提取溶剂得到的
提取物清除 DPPH自由基的能力顺序为:95%乙醇 ＞水。③超声
波法提取的各提取物对 DPPH 自由基的清除效果明显优于回流
法。
3． 3 芦荟皮提取物对 DPPH 自由基清除能力评价 半数有效浓
度是指自由基清除率在 50%时的浓度，以 EC50表示;自由基清除
能力(antiradical efficiency)AE = 1 /EC50，AE 越大，则清除自由基
的能力越强［7］。根据图 1 结果，比较各芦荟皮提取物对 DPPH自
由基的消除能力。结果见表 2。
从表 2 可以看出，各提取物的 AE 存在一定差异，主要原因
可能是天然产物中含有多种抗氧化活性成分(包括黄酮类、鞣质
类、不饱和脂肪酸类、维生素类等化合物) ，并且多种抗氧化活性
成分共同作用，加上提取溶剂和方法的差异，导致了芦荟皮提取
物中各抗氧化成分组成和活性的不同。再结合表 1 数据可知，芦
荟皮提取物中黄酮含量与其 AE的强弱有一定的量效关系。
表 2 芦荟皮自由基清除能力的比较
提取方法 EC50 /mg·ml －1 AE /ml·mg －1
超声波法水提 0． 31 3． 23
回流法水提 1． 04 0． 96
超声波法醇提 0． 09 11． 11
回流法醇提 0． 11 9． 09
4 小结
实验结果表明，两种提取方法得到的芦荟皮提取物对自由基
均有较好的清除作用，其中超声波法优于回流法，95%乙醇提取
物优于水提取物，各提取物对 DPPH自由基的消除能力与黄酮类
化合物含量有一定的量效关系。在较低的浓度范围内量效关系
比较明显，在较高的浓度范围中影响作用趋于平缓。
芦荟皮提取物中黄酮含量较高，尤其是以乙醇作溶剂的提取
物中黄酮含量高达 21． 43%，自由基清除能力为 11． 11 ml /mg，具
有广泛的药理活性及抗氧化活性，在天然医药的抗氧化领域中有
一定的应用发展空间，其对自由基的清除效果明显，稳定性好，作
为天然抗氧化物质具有较好的市场前景。
参考文献:
［1］ 杨大庆．芦荟的药用机理研究［J］．陕西中医，2004，25(7) :641．
［2］ Choi C W，Kim S C，Hwang S S，et al． Antioxidant activity and free
radical scavenging capacity between korean medicine plants and fla-
vonoids by assay － guided comporison［J］． Plant Science，2002，163:
1161．
［3］ 王锋青，陈秉初．生物衰老机理研究进展［J］． 生物学教学，2004，
29(2) :4．
［4］ 周建青，徐爱列，王永宁，等．正交实验法研究芦荟中黄酮类化合物
的提取及含量的测定［J］．安徽农业科学，2008，36 (20) :8413．
［5］ 吴翠云，周忠波，邓小勤，等．刺山柑提取物对 DPPH 自由基的清除
作用［J］．西北农业学报，2009，18 (1) :230．
［6］ 刘志东，郭本恒，王荫榆．抗氧化活性检测方法的研究进展［J］． 天
然产物研究与开发，2008，20:563．
［7］ 张丽平，童华荣．抗氧化能力测定方法的研究进展［J］．中国食品添
加剂，2004，3:108．
收稿日期:2010-05-11; 修订日期:2010-07-27
基金项目:河北省科技厅科技攻关项目(No． 06220159)
作者简介:芦站根(1971 －) ，女(汉族) ，河北武邑人，现任衡水学院副教
授，硕士学位，主要从事植物学教学与研究工作．
衡水湖黄顶菊叶提取液抑菌作用实验研究
芦站根，周文杰 ，孙世卫 ，王艳超，王春玲
(衡水学院，河北 衡水 053000)
摘要:目的 探讨黄顶菊的抑菌作用。方法 用 K － B纸片扩散法，测定黄顶菊不同浓度的醇提物及水提物对大肠杆菌、
枯草杆菌、产气杆菌的抑制效果。结果 黄顶菊不同溶剂提取液对以上细菌均有不同程度抑菌作用与阳性对照比较;在
各种不同提取物中，80%的乙醇提取物抑菌作用最强;大肠杆菌对黄顶菊提取物最敏感。结论 黄顶菊叶有明显抑菌作
用。
关键词:黄顶菊; K － B纸片扩散法; 细菌; 抑菌活性
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2011． 05． 052
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2011)05-1153-02
黄顶菊 Flaveria bidentis是近年来在衡水湖最新发现的一年 生外来入侵植物 ，隶属菊科黄菊属［1］。近年来，对黄顶菊的研究
主要集中在其对本地植物及杂草的化感作用，而对其是否具有抑
菌作用缺乏研究。黄顶菊具有很好的抗虫、抗菌活性［2］。黄菊
属的近缘属植物万寿菊已被列入杀虫性植物，其主要杀虫成分 α
－三连噻吩是一种典型的光活化毒素，对植物病原菌具有光活化
·3511·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2011 VOL ． 22 NO． 5 时珍国医国药 2011 年第 22 卷第 5 期