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瑶山梭罗果实不同提取部位的抗氧化活性研究



全 文 :食 品 科 技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY 年 第卷 第期提取物与应用
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瑶山梭罗(Reevesia glaucophylla Hsue)是梧桐
科梭罗树属植物[1-2],主要分布在广西壮族自治区
收稿日期:2012-04-28
基金项目:北京林大学合作国家项目(物种10-二-6(01));贵州省教育厅2010年度自然科学研究基金项目(黔教科2010094)。
作者简介:钟雪莲(1976—),女,硕士,讲师,研究方向为天然作物药用精细化工研究及化学教育。
象州、龙州、贺县、阳蒴,广东省乐昌,湖南省
西部,贵州主要分布在独山、丹寨等地;生于山
钟雪莲1,罗亨铭1,杨再波1,郭治友2
(1.黔南民族师范学院化学系,都匀 558000;
2.黔南民族师范学院生命科学系,都匀 558000)
摘要:以乙醇为溶剂提取瑶山梭罗果实,经减压浓缩后,依次用乙酸乙酯和正丁醇进行萃
取。用DPPH自由基的清除能力来评价2个部位的抗氧化活性。结果表明,乙酸乙酯部位浓
度为280.80 μg/mL时自由基清除率大于56%,IC50=210.21 μg/mL,正丁醇部位浓度为368.00
μg/mL时自由基清除率大于68%,IC50=291.03 μg/mL。乙酸乙酯部位的抗氧化活性是正丁醇
部位的1.4倍。
关键词:瑶山梭罗;果实;抗氧化活性;DPPH自由基;清除率
中图分类号:R 285 文献标志码:A 文章编号:1005-9989(2012)08-0232-03
Antioxidant activity of different extract parts of the fruit of
Reevesia glaucophylla Hsue
ZHONG Xue-lian1, LUO Heng-ming1, YANG Zai-bo1, GUO Zhi-you2
(1.Department of Chemistry and Chemical Engineering, Qiannan Normal College for
Nationalities, Duyun 558000; 2.Department of Life Science, Qiannan Normal College for
Nationalities, Duyun 558000)
Abstract: The fruit of Reevesia glaucophylla Hsue were extracted using the ethanol as solvent and then
extracted with ethyl acetate and n-butanol successively after vacuum concentration. Scavenging activity
of DPPH radical was studied for evaluating antioxidant activity of the two parts. The results showed that
radical scavenging rate was greater than 56% and IC50 equaled to 210.21 μg/mL when the part of ethyl
acetate concentration was 280.80 μg/mL, and radical scavenging rate was greater than 68% and IC50
equaled to 291.03 μg/mL when the part of n-butanol concentration was 368.00 μg/mL. Antioxidant activity
of ethyl acetate part is 1.4 times better than that of n-butanol part.
Key words: Reevesia glaucophylla Hsue; fruit; antioxidant activity; DPPH radical; scavenging rate
瑶山梭罗果实不同提取部位的
抗氧化活性研究
DOI:10.13684/j.cnki.spkj.2012.08.016
食 品 科 技
FOOD SCIENCE AND TECHNOLOGY年 第卷 第期 提取物与应用
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坡上或山谷疏林中;乔木,高8~16 m;树皮灰色
或灰褐色,有纵裂纹,嫩枝几无毛;叶纸质或薄
革质,椭圆形、矩圆形或矩圆状卵形。花期5~6
月,果期8~9月,蒴果长椭圆形或倒卵形,长约
1.5 cm,5瓣裂,有5棱,密被淡黄褐色星状短柔
毛;种子连翅长约1.4 cm,翅膜质,红褐色,顶端
尖。主要适用于园林绿化,而关于化学成分及其
活性未见报道。因此,本工作拟以70%乙醇为溶
剂从瑶山梭罗果实中化学成分进行提取,并对其
不同极性部位化学成分进行外抗氧化作用研究,
以期为瑶山梭罗果实营养保健及药用方面的开发
应用提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
1.1.1 仪器 电子天平:北京赛多利斯公司;粉
碎机:浙江金华武义屹立仪器公司;恒温电热
套:天津市泰斯特公司;TU1901紫外分光光度
计:北京普析通用设备有限责任公司;DZKW-D
水浴锅:河北省黄骅航天仪器厂;RE-52旋转蒸
发器:上海亚荣生化仪器厂;2XZ-1型片式真空
泵:上海博尔康真空电子有限公司。
1.1.2 试剂 乙酸乙酯、正丁醇、95%乙醇:分析
纯;DPPH自由基:日本东京化成工业株式会社。
1.2 材料
瑶山梭罗果实于2011年8月14日采于贵州省丹
寨县扬武乡五一村,经鉴定为梧桐科梭罗树属植
物瑶山梭罗果实。自然阴干粉碎过80目筛备用。
1.3 瑶山梭罗果实活性成分提取
称取经粉碎的瑶山梭罗果实250.00 g于2000
mL圆底烧瓶中,浸泡24 h后,加入70%的乙醇
1000 mL回流提取3 h,提取液经过滤除去残渣后,
得提取液;残渣再加入70%的乙醇1000 mL回流再
提取2 h;过滤,合并提取液,然后将提取液浓缩
至无醇味得浸膏;浸膏再用适量乙醇溶解后浓缩
至干得初提物;初提物用适量水分散后,先用乙
酸乙酯进行萃取3次(每次40 mL乙酸乙酯),静置分
层,分出水层,合并乙酸乙酯层,将其浓缩至干
得乙酸乙酯提取部位。将上述分出的水层用正丁
醇3次萃取(每次40 mL正丁醇),静置分层,分出水
层,合并正丁醇层,将其浓缩至干,得正丁醇提
取部位。
1.4 抗氧化活性筛选方法
1.4.1 DPPH法 按照文献[3-7]的方法,测定样
品及阳性对照品在515 nm处吸光度,并计算出对
DPPH自由基的清除能力。将不同溶剂的提取物
样品用甲醇配制成一系列浓度,取1 mL样品加入
2×10-4 mol/L DPPH的无水乙醇溶液2.5 mL,并用
无水乙醇定容至5 mL;混合反应30 min后,再测
定515 nm波长处吸光度。每份样品平行操作3次,
取平均值,计算出自由基清除率,并计算出半数
抑制率(IC50)。
1.4.2 不同提取部位溶液制备 称取乙酸乙酯部
位提取物1.17 g于500 mL容量瓶中用无水乙醇定容
即得2.34 mg/mL的乙酸乙酯部位提取物的溶液,
从该溶液中分别吸取2、4、6、8、10 mL于50 mL
容量瓶中,用无水乙醇定容即得93.60、187.20、
280.80、374.40、468.00 μg/mL的溶液,此溶液用
于抗氧化活性测试。
称取正丁醇部位提取物1.15 g于500 mL容量
瓶中用无水乙醇定容即得2.30 mg/mL的正丁醇部
位提取物的溶液。从该溶液中分别吸取2、4、6、
8、10 mL于50 mL容量瓶中,用无水乙醇定容即得
92.00、184.00、276.00、368.00、460.00 μg/mL的
溶液,此溶液用于抗氧化活性测试。
1.4.3 抗氧化活性测试 取不同浓度的乙酸乙酯
部位提取物(或正丁醇部位提取物)溶液1 mL与2.5
mL 2×10-4 mol/L DPPH溶液,用无水乙醇定容至
5 mL,充分混匀,在室温下静置反应30 min后,
在515 nm处测定其吸光度Ai。同时用同法测定2.5
mL 2×10-4 mol/L DPPH 溶液与用无水乙醇定容
至5 mL,混合均匀30 min后测吸光度A0。用1 mL
不同浓度各部位提取物溶液与用无水乙醇定容至
5 m L,混合后30 min后测吸光度Aj。清除率计算
公式为:
清除率Y(%)=(1-(Ai-Aj)/A0)×100
2 结果与讨论
2.1 乙酸乙酯提取部位抗氧化活性
乙酸乙酯提取部位抗氧化活性测试结果见
表1。
将表1数据以清除率为Y,样品浓度为X,进
行线性回归,计算回归方程,得回归方程为:
Y=0.094X+30.24,相关系数R=0.985。由此可知,
回归方程线性较好,同时从分析数据及回归方程
可知随着样品浓度的增加,乙酸乙酯部位提取物
对DPPH自由基的清除能力是逐渐增加,当浓度
为280.80 μg/mL时,自由基的清除率大于56%以
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上,表现出较好的抗氧化能力。
2.2 正丁醇提取部位抗氧化活性
正丁醇提取部位抗氧化活性测试结果见表2。
表2 正丁醇提取部位抗氧化活性测试结果
样品浓度/
(μg/mL )
DPPH吸
光度 A0
样品+DPPH+无水
乙醇吸光度Ai
样品+无水乙
醇吸光度Aj
清除率
/%
92.00 0.630 0.532 0.018 18.41
184.00 0.630 0.484 0.024 26.98
276.00 0.630 0.470 0.026 29.52
368.00 0.630 0.229 0.033 68.89
460.00 0.630 0.094 0.036 90.79
将表2数据以清除率为Y,样品浓度为X,进
行线性回归,计算回归方程,得回归方程为:
Y=0.203X-9.079,相关系数R=0.943。由此可知,
回归方程线性较好,同时从分析数据及回归方程
可知随着样品浓度的增加,正丁醇部位对DPPH自
由基的清除能力是逐渐增加,当浓度为368.00 μg/
mL时,自由基的清除率大于68%以上,表现出较
好的抗氧化能力。
2.3 半清除率IC50值的计算
半清除率IC50值是指抑制率为50%时抑制剂
的浓度。因此,应用IC50值可以用来衡量药物对
DPPH自由基的抑制能力,即抑制能力越强,该数
值越低,即说明某种药物的抗氧化能力较强。由
上述方法可得乙酸乙酯部位提取物的DPPH自由基
的清除能力IC50=210.21 μg/mL,正丁醇部位提取
物为IC50=291.03 μg/mL。由实验结果得知,乙酸
乙酯部位提取物的抗氧化能力高于正丁醇部位提
取物,乙酸乙酯部位提取物IC50是正丁醇部位提取
物的1.4倍。
3 结论
通过对瑶山梭罗果实乙酸乙酯部位提取物与
正丁醇部位提取物抗氧化活性的研究表明,2种
部位的提取物均具有较好的抗氧化活性能力,而
且乙酸乙酯部位的抗氧化活性是正丁醇部位的1.4
倍。这一结果提示我们,在对瑶山梭罗果实营养
保健及药用有效成分进行提取时,应该同时对这2
个部位特别是乙酸乙酯部位的活性成分进行系统
研究与分析。
参考文献:
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表1 乙酸乙酯提取部位抗氧化活性测试结果
样品浓度/
(μg/mL)
DPPH吸
光度 A0
样品+DPPH+无
水乙醇吸光度Ai
样品+无水乙
醇吸光度Aj
清除率
/%
93.60 0.630 0.422 0.028 37.46
187.20 0.630 0.353 0.029 48.41
280.80 0.630 0.300 0.031 56.83
374.40 0.630 0.226 0.032 69.21
468.00 0.630 0.218 0.035 70.95
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