免费文献传递   相关文献

维药异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠的影响及机制研究



全 文 :基金项目:新疆维吾尔自治区自然科学基金(2012211B09)
作者简介:司丽君(1987-),女,硕士,研究方向:心血管药理学。
通信作者:帕尔哈提·克力木,男(维吾尔族),博士,教授,博士生导师,研究方向:心血管药理学,E-mail:parhatke@vip.sina.com。
维药异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠的
影响及机制研究
司丽君1,马晓玲2,何 雯1,3,王雪飞1,萨迪克·诺莫诺夫4,帕尔哈提·克力木1
(1新疆医科大学基础医学院药理教研室,乌鲁木齐 830011;2新疆中药民族药研究所,乌鲁木齐 830002;
3新疆医科大学第五附属医院,乌鲁木齐 830011;4中国科学院新疆理化技术研究所,乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 探讨异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠血压的影响及其降压机制。方法 利用肾动脉狭窄
法建立两肾一夹高血压大鼠模型;将成模的高血压大鼠随机分为假手术组、模型组、异叶青兰高剂量组(DHBE-
H)、异叶青兰低剂量组(DHBE-L)、卡托普利组;灌胃给药5w,每周无创尾套法测量大鼠尾动脉血压;5w后用颈
总动脉插管测血流动力学指标,采用硝酸还原酶法测定心肌组织中一氧化氮(NO)水平,化学比色法测定心肌组织
中一氧化氮合成酶(NOS)水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定心肌组织中内皮素(ET)和血管紧张素Ⅱ(AngII)水
平。结果 与模型组相比,异叶青兰醇提物能使肾性高血压大鼠尾动脉收缩压明显降低;颈动脉收缩压(SBP)、舒
张压(DBP)、左室收缩压(LVSP)、降低左室舒张末期压(LVEDP)均显著降低,室内压对数值最大变化速率(±dp/
dtmax)/LVSP和收缩指数(CI)升高,NO水平升高,ET水平降低;AngII水平降低。结论 异叶青兰醇提物能降
低肾性高血压大鼠血压,增强心脏舒缩功能。
关键词:异叶青兰;高血压;一氧化氮;内皮素;血管紧张素Ⅱ
中图分类号:R29;R363  文献标识码:A  文章编号:1009-5551(2013)04-0467-05
Effect and mechanisms investigation of Dracocephalum heterophylum
Benth from Uighur Medicine in the renal hypertensive rats
SI Li-jun1,MA Xiao-ling2,HE Wen1,3,WANG Xue-fei 1,Sodik Nuomonuofu4,Parhat Kelimu1
(1 Department of Pharmacology,Xinjiang Medical University,Urumqi 830011;2Institute of
Traditional Chinese Medicine National Drug,Urumqi 830002,China;3 Department of Parmacy,
The Fifth Affiliated Hospital,Xinjing Medical University,Urumqi 830011,China;4 Xinjiang
Technical Institute of Physics and Chemistry,Chinese Academy of Sciences,Urumqi 830011,China)
Abstract:Objective To observe the effects of Dracocephalum heterophylum Benth(DHBE)on blood
pressure in renovascular hypertensive rats(RHR)and explore its mechanisms.Methods Two-kidney-one-
clip RHRs were obtained by narrowing left kidney arteries.6groups were divided as control,model,DH-
BE high dose group(DHBE-H),DHBE low dose group(DHBE-L)and captopril groups.The drugs were
 第36卷 第4期 新 疆 医 科 大 学 学 报 Vol.36 No.4
 2013年4月 Journal of Xinjiang Medical University Apr.2013
given by intragastric administration for 5weeks.Systolic blood pressure(SBP)were measured by tail cuff
approach every week.After the fifth week,we utilized left ventricular incubation to measure hemodynamic
parameters.The levels of nitric oxide(NO),nitric oxide synthase(NOS)in heart were respectively meas-
ured by nitrate reductase method and chemical colorimetry.The levels of endothelin(ET)and AngⅡin
heart were measured by enzyme linked immunosorbent assay(ELISA)approach.Results Compared with
model group,DHBE significantly reduced RHR blood pressure,systolic blood pressure(SBP),diastolic
blood pressure(DBP),left ventricular systolic pressure(LVSP),left ventricular end-diastolic pressure
(LVEDP)and increased(±dp/dtmax)/LVSP and CI,increased the concentration of NO while decrease
the content of ET,and level of AngⅡ.Conclusion DHBE could reduce RHR blood pressure,and im-
prove cardiac systolic and diastolic functions.
Key words:Dracocephalum heterophylum Benth;hypertension;nitric oxide(NO);endothelin(ET);AngⅡ
  高血压病是一种常见疾病,是引起冠心病、脑卒
中、肾功能衰竭的最危险因素。目前,治疗高血压的
药物具有显效快、疗效明确等优势。但同时其也有
毒副作用大、血压变化过快等缺点。因此积极寻找
作用缓和、能通过多途径多靶点调节血压且降压平
稳、毒副作用小的降压药物具有十分重要的意义。
异叶青兰维吾尔语中称“阿勒黑力龙普勒马占居
力”[1],维吾尔族民间常全草入药,味辛、苦,性寒,具
平肝、清热之功效,可治疗头痛、眩晕、肺热咳嗽、支
气管炎等。本研究利用两肾一夹肾性高血压大鼠,
探讨异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠血压的影响
及降压的机制,为该药材的开发提供实验室资料及
理论基础。
1 材料与方法
1.1 动物 雄性SD大鼠70只,体质量160~200g,
由新疆医科大学实验动物中心提供,饲养于新疆医
科大学实验动物中心SPF级实验室。
1.2 药物、试剂及仪器 异叶青兰提取物(由中国
科学院新疆理化技术研究所提供,加乙醇回流提取,
1kg药材相当于107g浸膏),卡托普利片(中美上
海施贵宝),大鼠一氧化氮(NO)测定试剂盒、大鼠一
氧化氮合成酶(NOS)测定试剂盒(南京建成生物工
程研究所),大鼠内皮素(ET)ELISA检测试剂盒、
大鼠血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)ELISA检测试剂盒(上
海研辉生物科技有限公司),BP-6无创血压测试仪
(成都泰盟),PowerLab四通道生理信号采集与处
理系统(澳大利亚埃德仪器有限公司),内切式匀浆
机(XHF-D宁波新芝生物科技股份有限公司)。
1.3 方法
1.3.1 实验动物模型建立及分组 大鼠麻醉后分离
肾动脉,肾动脉上套上U型银夹(内径为0.2mm),
假手术组只分离左肾动脉不套银夹。4w后用BP-6
动物无创血压测定仪测定尾动脉收缩压,安静状态下
测定3次取平均值,以收缩压(SBP)≥140mmHg为
筛选标准,血压高于此标准进入实验,低者剔除。除
假手术组外,造模成功的大鼠按收缩压水平随机分
为模型组、卡托普利组(20mg/kg)、异叶青兰低剂
量组(DHBE-L,300mg/kg)、异叶青兰高剂量组
(DHBE-H,600mg/kg),每组8只。药物均以蒸馏
水配置,灌胃容积为1mL/100g,假手术和模型组
给予等量蒸馏水。每天1次,连续给药5w。
1.3.2 无创血压测定 灌胃5w期间,采用无创尾
套法每周连续测定尾动脉收缩压,测定时间均选在
每日灌胃给药后。在安静的环境中,BP-6无创血压
测试仪加热至36.5℃恒温后,将大鼠置恒温加热箱
中预热20min后测收缩压。
1.3.3 血流动力学指标测定 灌胃5w后,动物麻
醉,钝性分离右侧颈总动脉,在右侧颈总动脉插入充
满肝素化生理盐水的PE50导管,将导管连接压力
换能器,信号输入至Powerlab生物信号处理系统,
稳定后,经Charts生物信号记录分析系统记录颈总
动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)。再经右侧颈总
864 新 疆 医 科 大 学 学 报 第36卷 
动脉向左心室内推送导管,至出现明显的心室压波
形,分别记录和测定左室收缩压(left ventricular
systolic pressure,LVSP)、左室舒张末期压(left
ventricular end-diastolic pressure,LVEDP)、收缩
时间(SD)、舒张时间(DD)、收缩指数(CI)、等容舒
张期时间常数(tau)、室内压最大上升速率(+dp/
dtmax)、室内压最大下降速率(-dp/dtmax)。
1.3.4 生化指标测定 取心室肌制备组织匀浆;硝
酸还原酶法测定心肌组织中一氧化氮(NO)水平,化
学比色法测定心肌组织中一氧化氮合成酶(NOS)
水平,酶联免疫吸附法(ELISA)测定心肌组织中内
皮素(ET)水平和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)水平。
1.4 统计学方法 采用SPSS 17.0统计软件对数
据进行处理,采用方差分析,检验水准α=0.05。
2 结果
2.1 异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠血压的影
响 给药前及给药1、2、3、4、5w模型组大鼠的尾动
脉收缩压较假手术组明显升高,差异有统计学意义
(P<0.01);各给药组1w后血压开始下降,连续给
药5w。从给药3w起,与模型组相比,DHBE组大
鼠尾动脉收缩压明显降低,差异有统计学意义 (P
<0.01);卡托普利组自给药1、2、3、4、5w大鼠尾动
脉收缩压明显低于模型组,差异有统计学意义 (P
<0.01),见表1。
表1 给予异叶青兰醇提物前后各组大鼠尾动脉收缩压变化(mmHg,珔x±s)
给药前 1w  2w  3w  4w  5w 
假手术组 119±4  123±7  118±4  119±6  121±6  115±10
模型组 160±13** 161±18** 163±14** 163±12** 163±10** 162±9**
卡托普利组 161±14  135±4## 118±4## 115±5## 110±5## 110±7##
DHBE-L  160±15  151±17  148±29  134±8## 134±10## 134±13##
DHBE-H  157±11  149±9  146±7  144±18  140±10## 135±12##
  注:与假手术组比较,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01。
2.2 异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠血流动力
学的影响 与假手术组相比,模型组SBP、DBP、
MBP、LVSP、LVEDP均显著升高 (P <0.05~
0.01);DD、tau缩短 (P <0.01)、HR加快 (P <
0.01);(+dp/dtmax)/LVSP 和 (-dp/dtmax)/
LVSP显著降低 (P<0.01);收缩指数CI显著降低
(P<0.05)。与模型组相比,卡托普利和DHBE-L、
DHBE-H组SBP、DBP、MBP、LVSP、LVEDP均显
著降低 (P<0.05~0.01),DD、tau延长 (P<0.05
~0.01),HR减慢 (P <0.05~0.01),(+dp/dt-
max)/LVSP和(-dp/dtmax)/LVSP显著升高 (P
<0.05~0.01),收缩指数CI显著升高 (P <0.05
~0.01),见表2。
2.3 异叶青兰醇提物对各组大鼠AngⅡ、ET、NO
和NOS水平的影响 与假手术组比较,模型组Ang
Ⅱ、ET含量明显升高,差异有统计学意义 (P <
0.01);NO、NOS含量明显下降,差异有统计学意义
(P<0.01);与模型组比较,各给药组 AngⅡ、ET
含量明显下降,差异有统计学意义 (P <0.05~
0.01),NO、NOS水平明显升高,差异有统计学意义
(P<0.05~0.01),见表3。
3 讨论
青兰属植物的药理作用有抗氧化、保护心肌、治
疗冠心病和降血压等作用[2],由于青兰属植物异叶
青兰在新疆和田地区资源丰富,在维吾尔族民间常
传统用于治疗高血压、支气管炎等。应用现代技术
研究发现异叶青兰可提高缺氧耐力[3],降低血液的
粘滞性,改善血循环。王索安等[4]研究发现其对低
氧环境中动物的神经、呼吸、心血管系统的组织细胞
有保护作用。
本实验中给药剂量的确定是依据异叶青兰的急性
毒性实验的结果(小鼠经口给药LD50值为11.8g/kg),
实验中阳性药卡托普利是一类常用的抗高血压的药
物,设置卡托普利阳性对照组的意义既可验证本实验
方法和指标的可靠性,又用来比较与维药异叶青兰对
肾性高血压的作用强度、起效快慢和作用特点。
964 第4期 司丽君,等:维药异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠的影响及机制研究
表2 给药后各组大鼠血流动力学参数的变化(珔x±s)
假手术组 模型组 卡托普利组 DHBE-L  DHBE-H
SBP/mmHg   121±4   176±8**   114±15##   145±15##   146±13##
DBP/mmHg   103±8   145±15**    85±19##   119±14#   122±10#
MBP/mmHg   112±6   160±11**    98±18##   132±14##   134±11##
LVSP/mmHg   128±6   181±22**   127±18##   143±15#   142±21#
+dP/dtmax/(mmHg/s)  4 004±527  4 243±559  5 076±1016  4 335±497  4 036±433
(+dP/dtmax)/LVSP  31.08±3.34  23.48±2.40**  39.66±3.86##  30.34±2.79##  28.85±3.52#
-dP/dtmax/(mmHg/s) -3 732±359 -4 109±647 -3 803±433 -3 763±367 -3 884±398
(-dP/dtmax)/LVSP -29.08±3.12 -22.63±1.76** -30.12±2.42## -26.31±1.13## -27.71±2.79#
LVEDP/mmHg   8.38±2.68  14.66±3.38*   9.36±1.26#   2.83±1.25##   5.39±1.35##
SD/ms   101±9    92±9    94±8    95±6    95±5
DD/ms    84±16    53±5**    81±18#    68±6##    68±6##
HR/min   334±48   423±21**   352±50#   369±22##   370±19##
Tau/ms  30.02±1.67  24.79±1.77**  27.82±1.59#  27.45±1.11#  27.54±1.11#
CI/s-1  66.38±3.77  56.17±6.15*  77.79±8.03##  74.79±6.08##  66.87±6.02#
  注:与假手术组比较,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01。
表3 异叶青兰醇提物后各组大鼠AngⅡ、ET、NO和NOS含量的比较(珔x±s)
AngⅡ含量/(pg/mL) ET含量/(pg/mL) NO含量/(μmol/L) NOS含量/(U/mL)
假手术组 224.72±11.02  109.64±11.59  33.47±4.74  34.71±3.24
模型组 320.07±22.08** 141.73±9.37** 25.00±2.68** 25.57±3.19**
卡托普利组 236.91±13.84## 110.18±9.10## 32.53±2.49## 31.95±3.55#
DHBE-L  277.02±11.20# 118.64±5.91## 30.91±3.39# 30.97±2.23#
DHBE-H  278.30±15.81# 122.55±6.93# 29.70±3.75# 31.51±1.91##
  注:与假手术组比较,**P<0.01;与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01。
  本研究结果显示异叶青兰醇提物对肾性高血压
大鼠有降低血压和改善心功能的作用。左心室内压
变化速度+dp/dtmax和-dp/dtmax是测定心肌舒
缩性能简单而常用的指标[5],但一般认为其受心室
前后负荷的影响较大,用于评价心血管的作用需进
一步测算左心室内压对数值最大变化速率(+dp/
dtmax)/LVSP和(-dp/dtmax)/LVSP。本研究结
果显示,DHBE给药干预能降低模型大鼠的SBP、
DBP、MBP、LVSP、LVEDP,减慢心率,延长 DD、
tau,升高 CI、(+dp/dtmax)/LVSP和(-dp/dt-
max)/LVSP,说明DHBE对高血压大鼠的心脏具
有一定的保护作用,这不仅由于DHBE能够降低模
型大鼠的血压,同时能够减慢心率,延长舒张时间,
从而降低心肌耗氧量,改善收缩功能。
高血压是由多种因素参与使正常血压调节机制
失代偿的复杂过程,其中最为重要的是肾素-血管紧
张素系统(rennin-angiotensin-system,RAS)的激
活。RAS是调节血压和钠/水内环境稳定的一个重
要途径[6-7]。本研究结果表明,模型组大鼠 AngⅡ
水平明显高于假手术组,DHBE各给药组大鼠Ang
Ⅱ水平较模型组均明显下降,说明DHBE的降血压
的作用可能与其降低AngⅡ水平有关。
ET是目前所广泛承认的体内最强的血管收缩
因子,ET-1活性增加与高血压、动脉硬化症等炎症
相关的血管疾病的发生有关[8]。AngII是ET产生
和分泌的最有效的刺激剂,ET又可促进 AngII、醛
固酮的合成与分泌,并与这些物质协同促进心肌肥
厚[9-10]。NO是广泛认知的血管内皮舒张因子,是
一种具有多种功能的分子信使物质。NO通过内皮
细胞生成后再由旁分泌途径与鸟苷酸环化酶(GC)
相结合,激活 GC使胞内环磷鸟苷(cGMP)水平升
高,使平滑肌细胞内 Ca2+ 减少,引起血管舒张作
用[11]。本实验结果显示,DHBE能够明显降低An-
gII、ET含量,升高 NO、NOS水平,提示DHBE通
074 新 疆 医 科 大 学 学 报 第36卷 
过抑制 RAS系统的激活,抑制 ET的生成,激活
NOS活性从而升高 NO水平,保护内皮细胞功能,
是其降低血压和改善心功能可能的机制之一。
参考文献:
[1] 中国科学院中国植物志.中国植物志[M].北京:科学出版社,
2010:358-361.
[2] 洪秀芳,魏好,刘文杰.香青兰对心肌缺血的保护作用[J].新
疆医学院学报,1997,20(2):35-37.
[3] 马志军,贾炜,王可,等.异叶青兰对高原低氧肝损伤的保护作
用[J].青海医学院学报,1995,16(4):7-8,22.
[4] 王索安,马志军,王晋青,等.异叶青兰对高原实验家兔红细胞
作用的形态的计量学研究[J].青海师范大学学报,1994,
(4):41-48.
[5] 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生
出版社,2002:9772-9781.
[6] Dzau VJ,Bernstein K,Celermajer D,et al.The relevance of tis-
sue angiotensin-converting enzyme:manifestations in mechanis-
tic and endpoint data[J].Am J Cardiol,2001,88(9A):1L-20L.
[7] Paul M,Poyan MA.Physiology of local renin-angiotensin sys-
tems[J].Physiol Rev,2006,86(3):747-803.
[8] 王红,张向阳.血管内皮功能障碍的研究进展[J].新疆医科大
学学报,2005,28(2):180-182.
[9] Westendorp B,Schoemaker RG,Buikema H,et al.Progres-
sive left ventricular hypertrophy after withdrawal of long-term
ACE inhibition folowing experimental myocardial infarction
[J].Eur J Heart Fail,2006,8(2):122-130.
[10] Porrelo ER,Huggins CE,Curl CI,et al.Elevated dietary
Sodium intake exacerbates myocardial hypertrophy associated
with cardiac-specific overproduction of angiotensin II[J].J
Renin Angiotensin Aldosterone Syst,2004,5(4):169-175.
[11] Haynes MP,Li L,Sinha D,et al.Src kinase mediates phos-
phatidylinositol 3-kinase/Akt-dependent rapid endothelial ni-
tric-oxide synthase activation by estrogen[J].Biol Chem,
2003,278(4):2118-2123.
[收稿日期:2013-01-09]
(本文编辑 杨晨晨


(上接466页)
  维药毛头牛蒡子含有多种重要的脂肪酸,亚油
酸占到总脂肪酸的78%左右,亚油酸人体不能合
成,必须从食物中摄取。胆固醇必须与亚油酸结合
后,才能在体内进行正常的运转和代谢。如果缺乏
亚油酸,胆固醇就会与一些饱和脂肪酸结合,发生代
谢障碍,在血管壁上沉积下来,逐步形成动脉粥样硬
化,引发心脑血管疾病。亚油酸具有抗癌、降低胆固
醇、抗氧化、预防血栓和动脉粥样硬化等功效,同时
还是人体合成前列腺素的主要物质[10]。亚油酸含
量可作为维药毛头牛蒡子药用质量标准评价指标之
一。该结果为进一步认识毛头牛蒡子的活性成分和
研究其药理药效作用提供了理论依据。
参考文献:
[1] 肖培根.新编中药志(第二卷)[M].北京:化学工业出版社,
2002:48.
[2] 韩潇,赵艳龙.毛头牛蒡子中总黄酮最佳提取工艺研究[J].亚
太传统医药,2010,6(8):34-37.
[3] 张浩科,葛亮,田树革.毛头牛蒡子醇提物抗氧化活性研究
[J].西北药学杂志,2010,25(5):346-348.
[4] 刘军海,崔庆新,程霜.牛蒡籽油理化特性及脂肪酸组成的研究
[J].中国油脂,2000,25(2):51-53.
[5] 卢淑君,杨燕云,许亮,等.气相色谱法测定牛蒡子脂肪油中3
种脂肪酸含量[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(20):5-8.
[6] 袁苏宁,杜卫军,刘丛,等.GC-MS法测定不同来源薰衣草挥发
油中芳樟醇和乙酸芳樟酯的含量[J].新疆医科大学学报,
2012,35(11):1478-1482.
[7] 张彦丽,韩艳春,阿依吐伦·斯马义,等.GC-MS对昆仑雪菊挥
发油成分的研究[J].新疆医科大学学报,2010,33(11):1299-
1300.
[8] 赵敏,翟延君,翟羽.水红花子炮制前后脂肪油的GC-MS联用
分析[J].中药材,2008,31(5):658.
[9] 姜显光,侯冬岩,回瑞华,等.马兰籽油中脂肪酸的不同甲酯化
方法与GC-MS分析[J].食品科学,2009,30(22):714-716.
[10] 汪晓莉,王祝举,唐力英,等.天南星中脂肪酸成分研究[J].中
国实验方剂学杂志社,2010,16(7):33.
[收稿日期:2013-01-02]
(本文编辑 施洋)
174 第4期 司丽君,等:维药异叶青兰醇提物对肾性高血压大鼠的影响及机制研究