全 文 ：罗勒提取物对肾性高血压大鼠的影响
古孜力努尔·依马木1＊ , 邬利娅·伊明1 , 依巴代提·托合提1 , 努尔江·肉孜1 ,
阿迪力·阿不都热合曼1 ,蒋　进2 , 艾尼瓦尔·吾买尔1＊＊
(1新疆医科大学药学院药理学教研室 , 新疆　乌鲁木齐　830011;2新疆昌吉州人民医院药剂科 , 新疆　昌吉　831100)
摘要:目的:通过验证罗勒(全草)提取物(OBL)对肾性高血压模型大鼠的降压作用 , 探讨 OBL 的降压作用机
理。方法:正常 Sprague-Daw ley(SD)大鼠适应性喂养 1 周后测基础血压。然后进行左肾动脉狭窄手术。手术后 4
周 ,形成两肾一夹(2K1C)肾性高血压。将高血压大鼠 60 只随机分成 5 组:罗勒提取物高剂量组(H , 400 mg/kg)、
罗勒提取物中剂量组(M , 200 mg/ kg)、罗勒提取物低剂量组(L , 100 mg/ kg)、卡托普利组(Cap , 30 mg/ kg)、高血压
模型组(M ode l)。从肾动脉狭窄手术后 4 周开始灌胃给予相应药物 , 持续 4 周 , 每周末测血压;外加假手术组
(Sham)10 只。处死动物取血测血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)、内皮素(ET)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。结
果:两肾一夹(2K1C)术后 4 周 ,假手术组血压为(138±2.04)mmHg , 模型组血压为(201±3.69)mmHg , 两组血压
差异有统计学意义(P <0.05)。同时 AngⅡ 、ET 以及 MDA 含量明显增高;而 SOD活性降低。给予罗勒提取物后
血压(收缩压和舒张压)均有下降。 ET 、MDA 明显下降 、而 SOD活性增高(P <0.05), 且作用强于卡托普利组(P
<0.05)。同时 Ang Ⅱ也明显下降。结论:罗勒提取物对肾性高血压大鼠具有降压作用 , 其降压作用机制可能与
通过抗氧化反应来保护内皮细胞 ,改善血管内皮功能紊乱 ,抑制缩血管物质(内皮素 、血栓素 A2 、血管紧张素Ⅱ)的
释放有关。
关键词:罗勒;肾性高血压;肾素-血管紧张素系统;内皮素
中图分类号:R282.71;R544.14　　文献标识码:A　　文章编号:1009-5551(2009)03-0259-04
Antihypertensive effects of Ocimum Basilicum L(OBL)on
renal hypertensive rats
Guzilinuer·Yimamu , Wuliya·Yimin , Yibadeiti·Tuheti , et al
(Department o f P harmacolog y , X inj iang Medical Universi ty , Urumqi 830011 , China)
Abstract:Objective:T o investig ate the ef fects of the ext ract ion of Ocimum basilicum L(OBL)on renal hy-
pertensive rats and investig ate it s mechanism.Methods:SD rats received fo od and w ater adlibi tum in 1
week of acclimat ion.After that baseline blood pressure (sy stolic and diasto lic blood pressure)was meas-
ured by noninvasive tai l cuff photosenso r under aseptic condit ions , thi rty general anesthesia rats we re given
a modif ided 2 kidney-1 clip(2K1C)operation w hile six rats w ere sham-ope rated(the animals received iden-
tical t reatment w ithout lef t renal artery ligation).Four w eeks late r , hypertensive rats we re random ly allo-
cated to four g roups such as OBL(higher , 400 mg/kg), OBL(middle , 200 mg/kg), OBL(lower , 100 mg/kg),
captopril(cap , 30 mg/kg)and model group af ter allocat ion , the t reatment period w as 4 w eeks.The blood
pressure w as measured w eekly.At sacrifice , blood w as harvested to measure the levels of angio tensin Ⅱ
(AngⅡ), supero xide dismutase(SOD), malonaldehyde(MDA)and endo thelin(ET)at the end of the 4th
week.Kidneys and hearts w ere collected to observe the patho1ogical changes of ar teriole too.Results:
Four weeks af ter 2K1C ope ra tion , the blood pressure of the 2kidney-1clip operation g roup increased signif-
icant ly (201±3.69)mmHg vs(138±2.04)mmHg of sham group(P <0.05).And the levels of AngⅡ ,
MDA , ET was slightly increased in plasma.SOD was decreased significant ly.Treated w ith captopril and
259新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2009 Mar., 32(3)
＊
＊＊
作者简介:古孜力努尔·依马木(1982-),女(维吾尔族),硕士研究生 ,研究方向:心血管药理。
通讯简介:艾尼瓦尔·吾买尔(1962-),男(维吾尔族),硕士生导师 ,研究方向:心血管药理。 E-mail:anw arumar@126.com。
OBL , the blood pressure (sy stolic blo od pressure and diasto lic blood pressure)decreased significantly and
cont inually(P <0.05).During the course of administrat ion , the levels of A ng Ⅱ , MDA and ET w ere
slightly decreased in plasma.Mean while , SOD in plasma increased respeetively(P <0.05).Conclusions:
OBL can reduce the blood pre ssure of the renal hypertensive rat , Which is likely related to through the an-
tio xidate reaction , to improve the blood vessel endo thelium function.I t should be mo re than one ant ihy-
pertensive targ et of OBL.
Key words:Ocimum Basi licum L (OBL);renal hypertension;renin-angio tensin sy stem;endo thelin
　　高血压是一种以体循环动脉压升高为主要特点
的临床综合征 ,可导致靶器官如心脏 、肾脏 、脑和血
管的损害 ,并伴有全身代谢性改变[ 1-2] 。高血压病
是一种常见病 、多发病 ,并能导致心 、脑和肾等重要
脏器的损伤 ,严重危害人类的健康 。因此寻找安全
有效的防治高血压病的药物成为一个普遍关心的问
题。现已证实 ,罗勒具有抗血栓 、抗血小板聚集 、抗
氧化 、降血脂 、抗溃疡等诸多生理功效[ 3-4] ,本实验
旨在研究罗勒提取物对肾性高血压大鼠的降压作用
及其作用机制。
1　材料和方法
1.1　实验动物　健康 SD大鼠 70 只 ,雄性 ,体重
(200±20)g ,由新疆医科大学实验动物中心提供 。
动物饲养于干燥 、通风 、安静的环境中 ,每日饲以本
校动物所提供的颗粒全价饲料 ,饮清洁自来水 。
1.2　试剂和仪器　罗勒提取物:由新疆医科大学药
理教研室提供 , 1 kg 药材相当于 120 g 浸膏.卡托普
利(批号:0601002);Ang-Ⅱ测定盒和 ET 测定盒(由
北京北方生物技术研究所生产);SOD 试剂盒和
MDA 试剂盒(由南京建成生物工程研究所生产)。
BP-6动物无创血压测试仪 , TDL80-2B离心机 。
1.3　模型的建立及分组
1.3.1　两肾一夹(2K1C)高血压模型的制备[ 5] 　测
基础血压后 ,按经典造模方法进行:取健康雄性 SD
大鼠 60 只 ,无菌操作条件下 , 用 3%戊巴比妥 30
mg/kg 腹腔注射麻醉 ,仰卧位固定 ,备皮 ,皮肤消毒
后于剑突下1.5 cm 沿腹中线切开皮肤及肌层 ,将分
离左肾动脉 ,在近主动脉端放置 U 型银夹[ 6-7] ,内
径 0.25 mm ,常规缝合切口 ,术后肌肉注射青霉素 5
万单位/只 ,以预防感染 。术后置于干净笼内饲养 。
手术过程中腹腔脏器不移出腹腔外 ,右侧肾脏未触
及。另 10只 SD大鼠 ,手术方法与模型组相同 ,但
只分离左肾动脉 ,不套银夹 ,作为假手术对照组。
1.3.2　分组及给药　参照上海高血压研究所顾德
官等的标准[ 8-9] ,术后 4周 ,收缩压>140 mmHg 者
即为两肾一夹型模(2K1C)。肾性高血压大鼠共 60
只 ,随机分为 5组 ,每组 12只:假手术组 、肾性高血
压模型组 、罗勒低剂量组(100 mg/kg)、罗勒中剂量
组(200 mg/kg)、罗勒高剂量组(400 mg/kg)、卡托
普利组(30 mg/kg)。每日一次灌胃给药 ,连续给药
4周。每周测体重一次 ,根据体重随时调整给药量。
大鼠饲养于恒温(24±2)℃室内通风柜内 ,每笼 5只
标准饲料饲养 ,自由饮水。
1.4　指标检测
1.4.1　血压测定[ 10-11] 　每周末连续测尾动脉收缩
压和舒张压 3次 ,取其平均值为该周血压 。在干燥 、
安静的环境中 ,无创血压测试仪预热后 ,将大鼠置恒
温加热箱中预热 10 ～ 15 min 后测收缩压 、舒张压 ,
每个时点测 3次 ,取平均值。血压测定在以下时点
进行:手术前 、术后第 4周末 、给药后第 1周末 、2周
末 、3周末 、4周末 。给药后血压测定在末次给药后 1
h开始进行。
1.4.2 　血液中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛
(MDA)及内皮素(ET)测定　第 4 周灌胃 1 h后测
血压 ,测完血压后次晨 ,各组大鼠以 3%戊巴比妥钠
(30 mg/kg)腹腔麻醉后 ,经腹主动脉插管采血。分
A 、B 两管 , A 管不抗凝 ,测 SOD 、MDA 。B 管内预
先加入 10%EDTA 二钠 30 μl和抑肽酶 40μl ,将血
加入后混匀 4℃, 3 000 r/min 离心 10 min ,分离血
浆 , -20℃以下保存待测 ,测定血浆中 SOD 、MDA
及 ET 的含量 。
1.4.3　血浆中 Ang Ⅱ含量测定　测定步骤如下:
(1)酶抑制剂的配制:按取血 1 ml计 ,每管加 10 μl
0.3 mmol/L EDTA二钠 、10 μl 0.34 mmo l/L 8-轻
基哇琳 、5μl 0.32 mmol/ L 二琉基丙醇;(2)采血:经
腹主动脉采血 1 m l左右 ,迅速注入放在冰水冷却的
含酶抑制剂的抗凝管中 ,摇匀 、即刻再放回冰水中冷
却 ,待离心时取出 。4 ℃1 000 r/min 离心 5 m in ,分
离血浆。此操作在 15 min内完成。然后 ,血浆放入
-20℃低温冰箱保存待测 ,测定血浆 AngⅡ含量 。
1.4 .4　统计学处理　采用SPSS14.0统计软件 ,所
有数据均以( x ±s)表示 ,各组组间差异比较采用单
因素方差分析。经方差齐性检验后 ,方差不齐的采
用 Tamhane′s方法检验各组间差异的显著性;方差
齐同的则采用 LSD检验或 SNK 检验各组间差异的
显著性 。检验水准α=0.05。
260 新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2009 Mar., 32(3)
2　结果
2.1　各组大鼠体重变化　大鼠饲养于干燥 、通风 、安
静的环境中 ,每日喂食颗粒全价饲料 ,自由饮水后 ,一
般情况良好 ,体重持续增加。各组大鼠体重增长速度
相近 ,经方差分析 ,个体间无显著性差异 ,组间也无显
著性差异 ,证明实验方法稳定可靠 ,见表 1。
表 1　各组大鼠体重的变化( x±s , g)
组别 给药前 1周 2周 3周 4周
假手术组 245.3±12.3 245.5±28.1 252.5±31.6 260.8±33.2 269.8±39.1
模型组 229.6±24.6 237.5±41.0 250.5±32.6 267.0±30.5 278.3±37.4
Cap组 242..2±31.1 243.7±46.5 225.3±35.1 242.0±16.4 263.8±34.2
OBL(低)组 238.1±32.7 243.7±35.1 245.5±37.2 256.5±33.5 262.9±63.2
OBL(中)组 239.1±32.1 244.7±32.1 244.5±27.2 266.5±36.5 286.9±53.2
OBL(高)组 241.6±22.4 245.1±27.9 246.6±35.6 279.5±40.1 296.6±43.2
2.2　罗勒提取物对血压的影响　大鼠施行 2K1C
手术后 ,模型组与假手术组比较 ,血压平均值明显升
高(P <0.05),表明造模成功。与模型组比较 ,罗
勒高 、中 、低剂量组和卡托普利组均有下降 ,见表 2。
表 2　罗勒提取物对大鼠血压的影响( x±s , mmHg)
组别 数量 剂量(mg/kg) 收缩压 舒张压
假手术组 10 - 138±2.04 67±3.16
模型组 10 - 201±3.69＊ 100±3.13＊
Cap组 12 30 165±5.67# 78±2.94#
OBL(低)组 12 100 184±4.45# 90±4.16
OBL(中)组 12 200 177±8.48# 85±5.58#
OBL(高)组 12 400 180±3.14# 84±4.05#
　　注:与假手术组比较 , ＊P <0.05;与模型组比较 , #P <0.05
2.3　罗勒提取物对血浆 ET 的影响 　大鼠施行
2K1C手术后 ,模型组与假手术组比较 ,血浆中 ET
的含量显著升高(P <0.05),与模型组比较 ,罗勒
高 、中 、低剂量组和卡托普利组显著下降 (P <
0.05),见表 3。
表 3　罗勒提取物对血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ和
内皮素(ET)的影响( x±s)
组别 数量 剂量(mg/kg) ET(pg/ ml) Ang-Ⅱ (pg/ ml)
假手术组 10 - 116±31 1 064±88
模型组 10 - 174±72＊ 1 244±145＊
Cap组 12 30 113±72# 1 070±75#
OBL(低)组 12 100 78±15#■ 1 223±142
OBL(中)组 12 200 80±22#■ 1 086±79#
OBL(高)组 12 400 82±15#■ 1 132±74
　　注:与假手术组比较 , ＊P <0.05;与模型组比较 , #P <0.05;与卡托普
利组比较 , ■P <0.05
2.4　罗勒提取物对 SOD和 MDA 的影响　模型组
与假手术组比较 ,血清中 SOD的含量显著下降(P
<0.05), 而血清中 MDA 含量显著升高 (P <
0.05);与模型组比较 ,罗勒高 、中剂量组和卡托普利
组血清中 SOD的含量显著升高 ,而血清中 MDA 含
量显著下降(P <0.05),见表 4。
2.5　罗勒提取物对血浆 AngⅡ的影响　大鼠施行
2K1C手术后 ,模型组与假手术组比较 ,血浆中 AngⅡ
含量显著升高(P <0.05),与模型组比较 ,罗勒中剂
量组和卡托普利组显著下降(P <0.05),见表 4。
表 4　罗勒提取物对超氧化物歧化酶(SOD)和
丙二醛(MDA)的影响( x±s)
组别 数量 剂量(mg/ kg) SOD(U/ml) M DA(nmo l/ml)
假手术组 10 - 　117±21 6.25±2.6
模型组 10 - 98.41±7.7＊ 13.93±2.0＊
Cap组 12 30 141.7±42 7.33±1.3#
OBL(低)组 12 100 118.9±18 8.78±0.8#
OBL(中)组 12 200 113.9±19# 　5.9±1.6#
OBL(高)组 12 400 　115±19# 　6.0±1.4#
　　注:与假手术组比较 , ＊P <0.05;与模型组比较 , #P <0.05
3　讨论
罗勒是维吾尔医应用历史悠久的常用药材之
一 。罗勒的化学成分主要为挥发油 、黄酮 ,香豆素 、
甾体化合物等 ,其中挥发油的含量最大。全草性为:
有开窍 、降血脂 、苏醒 、祛风散肿 、祛痰作用 。用于心
悸失眠 、房颤 、咳嗽哮喘 、脾胃湿寒 、口腔炎 、目赤流
泪 、尿路结石 、催乳 、浮肿。种子性为:一级干热 ,有
止泻 、开通阻滞 、止血 、爽身悦志 、散气作用 。用于各
种心脏病 、心悸 、痔疮出血 、久泻等。中医认为 ,罗勒
茎 、叶有疏风行气 、发汗解表 、散瘀止痛 、保护内皮细
胞损伤 、抑制血小板聚集和抗血栓形成 、降血脂 、抗
氧化及抗炎等功效[ 4] 。本研究结果显示 ,给药 4周
后 , 罗勒高 、中 、低剂量组和卡托普利组血压均显著
低于模型组 ,差异有统计学意义(P <0.05);罗勒
高 、中剂量组和卡托普利组 SOD 含量明显升高 ,
MDA 含量明显降低 , 差异有统计学意义 (P <
0.05),说明罗勒具有明显的抗氧化作用 , 与 Toht i
等[ 4] 的研究结果一致。
血管内皮功能不全与高血压谁是因谁是果目前
还无定论。就其病理机制而言 ,能互为因果 。一方
面血管内皮功能不全所致 ET/NO失衡在高血压的
发生 、发展过程中起重要作用[ 12] ,另一方面高血压
本身又加重血管内皮功能不全 ,形成恶性循环。血
管内皮是人体最大的内分泌 、旁分泌器官 ,有重要生
理功能;在高血压等病理状态下存在血管内皮功能
不全 , 后者又加速了高血压靶器官的损害。同时本
(下转 264 页)
261新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2009 Mar., 32(3)
又是毒性成份 , LD 50(小鼠皮下)为 700 mg/kg ,对人
的最小致死量约为 100 mg ,极量为 30 mg ,对幼儿
则要小得多 ,且易成瘾。本品的上限量规定参照毒 、
极量和常用量要求 ,规定为 30 mg;下限量是在考虑
本品实际生产过程中药材来源不同造成的误差 ,在
含量测定 10 批数据的基础上下浮动 20%,规定本
品每片硫酸吗啡含量不小于 19 μg 。
3　讨论
3.1　色谱条件选择
3.1.1　流动相选择依据　根据文献报道[ 3-5] ,罂粟
壳含量测定 ,罂粟碱的 HPLC 色谱条件为:甲醇 —
0.5%醋酸铵溶液(含三乙胺 0.08%)65∶35为流动
相;流速:1.0 ml/min ,用此流动相进行预试 ,吗啡的
极性比罂粟碱强得多 ,保留时间短 ,主峰出峰时杂质
干扰大 ,不适合直接测定吗啡 ,经适当调节流动相中
有机相的比例 ,使有机相比例降低到 35%时 ,吗啡
对照品的峰形较好。
3.1.2　波长选择依据　硫酸吗啡的水溶液在 285
nm(E值为 41)处有最大吸收 ,在 261 nm 处有最小
吸收;其乙醇溶液在 287 nm(E 值为 55)波长处有最
大吸收 ,在 263 nm 有最小吸收 。吗啡在碱液和酸
液中的吸收波长都不尽相同 ,在碱液中 E 值最大 。
因供试品是在甲醇中定容 ,所以选择 287 nm 为测
定波长 。
3.2　供试品溶液的制备方法考察　用三氯甲烷提取
制得的供试品溶液 ,经 HPLC 分析 ,结果显示吗啡峰
包含在其他生物碱峰中;用乙醚提取制得的供试品溶
液结果显示 ,分离度达到基本要求(>1.0),理论塔板
数大于 3 000 ,峰形稍有拖尾 ,适当增加流动相中三乙
胺的比例(从 0.08%到0.1%)加以校正。
3.3　结论　本方法专属性强 、操作简单 、灵敏度高 、
结果准确 、重现性好 ,可用于制剂的质量控制 ,同时
完善并提高了原有的药品质量标准。
参考文献:
[ 1] 　中华人民共和国卫生部药典委员会.中华人民共和国卫生部药
品标准(维吾尔药分册)[ S] .乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 ,
1998:194.
[ 2] 　刘勇民.维吾尔药志[ M ] .乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 ,
1999:9.
[ 3] 　陈发奎.常用中草药有效成分含量测定[ M] .北京:人民卫生出
版社 , 1997:264.
[ 4] 　郑虎占.中药现代化研究与应用[ M ] .北京:学苑出版社 ,
1998:126.
[ 5] 　中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典[ S] .一部.
北京:化学工业出版社, 2005:257.
[ 收稿日期:2008-10-13]
(上接 261 页)
实验首次发现罗勒在降压的同时还具有降低内皮素
(ET)的作用 ,给药 4周后 ET 在罗勒高 、中 、低剂量
组和卡托普利组均显著低于模型组 ,有统计学差异
(P <0.05)。罗勒中剂量组和卡托普利组能降低血
管紧张素 Ⅱ(Ang-Ⅱ)的含量(P <0.05)。因此芝
麻木酚素具有明显的降压和抗氧化作用 ,其降压机
制可能是通过抗氧化作用 , 调节内皮细胞的分泌功
能 ,抑制缩血管物质(ET 和 Ang-Ⅱ)的释放 , 从而
达到降低血压 、保护内皮细胞的作用 ,但其确切降压
机制尚需进一步的研究探讨。
参考文献:
[ 1] 　郭振球 ,马长生 ,赵连友 ,等.实用高血压病学[ M ] .第 2 版.北
京:科学出版社 , 2000:22.
[ 2] 　王吉耀.内科学 [ M] .北京:人民卫生出版社 , 2001:229.
[ 3] 　C hian g LC , Ng LT , Cheng PW , et al.An tivi ral act ivit ies of
ext ract s and selected pure con sti tu ents of Ocimum basilicum
[ J] .Clin E xp Pharmacol Physiol , 2005 , 32(10):811-816.
[ 4] 　Toht i I , Tursun M , Umar A , et al.Queou s ex t ract s of Oci-
mum basi licum L decrease platelet aggregat ion in du ced by ADP
and thrombin in vit ro and rat s arterio-ven vu s shunt thromb osis
in vivo[ J] .2006 , 118(6):733-739.
[ 5] 　徐叔云.药理实验方法学[ M] .第 3 版.北京:人民卫生出版
社 , 2001:951.
[ 6] 　张笑丽 ,苏慧敏 ,孙天福.首乌降压胶囊治疗阴虚阳亢型高血压
288例临床观察[ J] .中国实验方剂学杂志 , 1998 ,4(5):55-57.
[ 7] 　Cooper RS , S immons BE , C as tane A , et al.Lef t vent ricu lar
hy pert rophy is associate w ith w orse su rvival indepen dent of
vent ricular fu nct ion and number of coronary arteries severely
narrow ed[ J] .Am J Cardiol , 1990 , 6(5):441-445.
[ 8] 　Ghli JK , Liao Y , Simmon s B , et al.The prognos tic role of lef t
vent ricular hypert rophy in pat ien ts w ith or w ith out cornary
artery diseas e[ J] .Ann in term Med , 1992 , 11(7):831-836.
[ 9] 　Levy D , Garri son RJ , Savage DD , et al.Progn ostic implica-
t ion of ech ocardiog raphical ly determined lef t ven t ricular mass
in the Framingham H eart S tudy[ J] .N Eng l J Med , 1990 , 32
(2):1561-1566.
[ 10] 　孔宪明 ,髙海赌.心血管疾病诊疗技术[ M ] .北京:人民卫生
出版社 , 2001:361-364.
[ 11] 　刘力生 ,龚兰生 ,陈孟勤 ,等.高血压[ M] .北京 :人民卫生出
版社 , 2003:917-918.
[ 12] 　李先伟 ,杨解人 ,曾贵运 ,等.芝麻木酚素对肾性高血压大鼠
降压作用及其机制的实验研究[ J] .中国中医药科技 , 2006 , 9
(13):330-332.
[ 收稿日期:2008-05-08]
264 新疆医科大学学报　JOURNAL OF XINJIANG MEDICAL UNIVERSITY　2009 Mar., 32(3)