全 文 ：小叶黑柴胡茎叶中的黄酮类成分
周　伟1 , 2 ,蔡光明1＊ ,何桂霞2 ,刘鄂湖1 , 2 ,杜方麓2
1解放军 302医院中医药研究所 解放军中药研究所 ,北京 100039
2湖南中医药大学药学院 ,长沙 410007
【关键词】　小叶黑柴胡;化学成分;黄酮类
【中图分类号】　R284.1　　【文献标识码】　A　　【文章编号】　1672-3651(2006)05-0387-03
【收稿日期】　2006-07-05
【＊通讯作者】　蔡光明:研究员,解放军 302医院全军中药研究所
副所长 , Tel:010-66933323;E-mail:cgm1004@vip.sina.com
　 　 小 叶 黑 柴 胡 (Bupleurum smithii Wolff
var.parvifolium Shan et Y.Li)为伞形科(Umbellifer-
ae)柴胡属植物 ,主要分布于我国的山西 、内蒙古 、
甘肃 、青海 、宁夏等地 ,并作柴胡药用 ,在宁夏为商
品柴胡的主流品种[ 1] 。
柴胡为我国传统中药道地药材 ,药用历史悠
久。《本草纲日》载柴胡能“治阳气下陷 ,平肝 、胆 、
三焦 ,包络相火以及头痛 、眩晕 、目昏诸疟 ,及妇人
热人血室 、经水不调 、小儿痘疹余热 、五疳赢热
等” 。现代药理研究证明柴胡具有解热 、镇痛 、抗
炎 、免疫增强 、保肝 、利胆 、抗病毒等作用[ 2-4] 。王
英华[ 5]等曾从小叶黑柴胡地下部分分出 7个皂苷
类成分 ,而小叶黑柴胡地上茎叶部分化学成分研
究目前尚未见文献报道 。为了进一步阐明小叶黑
柴胡的内在质量 ,为开发其新的药效作用提供药
效物质基础 ,本文就其茎叶部分的主要化学成分
进行了实验研究 ,分离鉴定了 5个化合物:5 ,7 ,4′-
三羟基-3′-甲氧基黄酮醇-3-O-芸香糖苷 ,即水仙苷
(Ⅰ);5 ,7 ,3′, 4′-四羟基黄酮醇-3-O -芸香糖苷 ,即
芦丁(Ⅱ);异鼠李素(Ⅲ);5 , 7 , 4′-三羟基-3′-甲氧
基黄酮醇-3-O -α-L-阿拉伯呋喃糖苷 ,即广寄生苷
(Ⅳ);槲皮素(Ⅴ),均系首次从该植物中分离获
得。
1　仪器和材料
原药材小叶黑柴胡地上茎叶(采自青海海北
自治州 ,由本所肖小河研究员鉴定为小叶黑柴胡
B.smithii Wolff var.parvifolium ,标本存放于解放军
302医院全军中药研究所标本室);Nexus-670 型傅
立叶变换红外光谱仪(美国尼高力 Nicolef公司);
Avance 500型超导核磁共振仪(德国布鲁克 Bruker
公司);ZabSpec 型高分辨磁质谱仪;聚酰胺薄膜
(台州市路桥四甲生化塑料厂);Sephadex LH-20
(Pharmacia公司);层析硅胶:200 ～ 300目 ,青岛海
洋化工有限公司;其他试剂均为分析纯 。
2　提取分离
取原药材 9.9千克粉碎成粗粉(≥20 目),以
85%乙醇回流两次 ,每次 1 h ,第一次加 10倍量乙
醇 ,第二次加 8倍量乙醇提取 ,合并提取液 ,浓缩
至成浸膏(D=1.15-1.20),浸膏依次用石油醚(60
～ 90℃)和乙酸乙酯萃取 , 得乙酸乙酯萃取物
111.10 g 。经聚酰胺柱层析分离 ,以水 、10%乙醇 、
30%乙醇 、50%乙醇 、70%乙醇 、95%乙醇梯度洗
脱 ,聚酰胺薄膜检识 ,合并相同流份。Fr.1 ～ 45以
硅胶柱层析进一步纯化分离 ,以氯仿-甲醇-水
梯度洗脱 ,得化合物 Ⅰ(10 mg)、化合物 Ⅱ(236
mg);Fr.111 ～ 120经Sephadex LH-20柱色谱 ,用 1∶
1的甲醇-水洗脱 ,得化合物Ⅳ(32 mg)和化合物
Ⅴ(22 mg);Fr.128 ～ 220 浓缩后析出黄色固体 ,再
经Sephadex LH-20柱色谱 ,用甲醇洗脱 ,得化合物
Ⅲ(39 mg)。
3　结构鉴定
化合物Ⅰ 　黄色粉末 ,盐酸-镁粉反应阳性 ,
Molish 反应为阳性 , FeCl3反应为阳性 。IR(KBr)
υmax3422 cm-1提示有羟基 , 1654cm-1 , 1605cm-1 ,
　2006年 9月　第 4卷　第 5期 Chin J Nat Med　Sep.2006　Vol.4　No.5　387　
1 508 cm
-1 , 1455 cm-1提示有苯环 , 1355 , 1 205 ,
1 127 ,1 064 cm-1 。DEPT谱显示有2个伯碳 ,1个仲
碳 , 15 个叔碳 , 10 个季碳 。1H-NMR (500 MHz ,
CD3OD)在较高场显示芳香质子信号 ,δ6.22(1H ,
d , J =2.0 Hz ,H-6),6.42(1H ,d , J =2.0 Hz ,H-8),
说明A环为5 ,7位取代。1H-NMR谱显示一组ABX
系统质子信号 ,δ7.97(1H , d , J =2.0 Hz , H-2′),
6.93(1H , d , J =8.3 Hz , H-5′), 7.65(1H , dd , J =
2.0 ,8.0 ,H-6′), 说明 B 环位 3′、4′位取代 , δ3.97
(3H , s ,-OCH3)说明甲氧基质子信号 。δ:3.28 ～
3.83(8H ,m ,糖 H), 5.25(1H , d , J =7.1Hz , H-1″),
4.55(1H , s , H-1 ), 1.12(3H , d , J =6.2 Hz , CH3)。
1H-NMR谱13C-NMR谱数据见表 1。综合以上波谱
解析 ,及氢谱及碳谱数据与文献[ 6]报道的水仙苷
(5 ,7 ,4′-三羟基-3′-甲氧基黄酮醇-3-O -芸香糖苷)
的氢谱碳谱数据一致 ,故确定化合物Ⅰ为水仙苷。
Table 1　13C-NMR data of compounds Ⅰ 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ、Ⅴ
C Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
2 157.4 155.6 147.8 156.8 147.9
3 134.0 133.7 136.1 133.9 136.4
4 177.8 176.5 176.0 178.1 176.2
5 161.6 160.1 156.7 161.4 160.9
6 98.8 97.0 98.9 99.0 98.5
7 165.4 163.1 165.3 164.5 164.1
8 93.7 91.9 94.2 94.1 94.1
9 157.2 156.4 160.8 157.4 156.6
10 104.1 102.7 103.0 104.4 103.4
1′ 121.6 120.2 122.5 122.2 122.4
2′ 113.2 113.2 115.9 115.9 115.4
3′ 149.5 142.9 146.7 145.4 145.7
4′ 146.9 146.9 149.0 148.7 147.2
5′ 114.7 114.8 112.1 115.9 115.9
6′ 122.6 120.7 122.1 121.4 120.5
OCH3 55.4 56.2
sugre-1″ 103.1 101.8 108.3
2″ 74.5 72.8 82.4
3″ 76.8 75.3 77.3
4″ 70.2 68.5 86.2
5″ 76.0 74.3 60.9
6″ 67.1 65.7
sugre -1 101.1 99.5
70.7 69.2
70.9 69.3
72.4 71.0
68.4 66.8
CH3 16.5 15.0
化合物 Ⅱ 　黄色无定形粉末 ,盐酸-镁粉反
应阳性 , Molish 反应为阳性 , FeCl3反应为阳性 。
HREI-MS m/z 302.042 8[M] + ,FAB-MS m/z [M+
H] +为 611。 IR(KBr)υmax 3 424 cm-1提示有羟基 ,
1 655 cm-1 ,1 600 cm-1 ,1 506 cm-1 , 1 456 cm-1提示有
苯环 ,1 363 ,1 296 ,1 203 cm-1 。DEPT 谱显示有 1个
伯碳 , 1 个仲碳 , 15 个叔碳 , 10 个季碳。 1H-NMR
(500 MHz , DMSO-d6)δ:6.20(1H ,d , J =1.7Hz ,H-
6),6.39(1H , d , J=1.7Hz , H-8), 7.65(1H , d , J =
1.8 Hz ,H-2′),6.87(1H , d , J =8.4 Hz ,H-5′)7.62
(1H , dd , J =1.8 , 8.4Hz ,H-6′), 3.26 ～ 3.82(8H ,
m ,糖基 H),5.11(1H , d , J =7.6 Hz , H-1″), 4.52
(1H , s , H-), 1.12(3H , d , J =6.2 Hz , CH3).
13
C-NMR谱数据见表 1。氢谱及碳谱数据与文献[ 7]
报道的芦丁氢谱碳谱数据一致 ,故确定化合物 Ⅱ
为芦丁。
化合物Ⅲ　黄色粉末 ,盐酸-镁粉反应阳性 ,
Molish 反应为阴性 , FeCl3反应为阳性 。FAB-MS
m/z 317[ M+H] + , 1H-NMR (500M , DMSO-d6)δ:
6.16(1H , d , J =1.8 Hz , H-6), 6.43(1H , d , J =
1.8 Hz ,H-8),7.74(1H ,d , J =2.7 Hz ,H-2′), 7.67
(1H ,dd , J =2.7 , 7.8 Hz , H-6′), 6.94(1H ,d , J =
8.4 Hz ,H-5′),3.84(3H , s ,-OCH3).13C-NMR谱数据
见表 1。氢谱及碳谱数据与文献[ 8] 报道的异鼠李
素氢谱碳谱数据一致 ,故确定化合物 Ⅲ为异鼠李
素。
化合物Ⅳ　黄色粉末 ,盐酸-镁粉反应阳性 ,
Molish 反应为阳性 , FeCl3反应为阳性 。FAB-MS
m/z 453[M+H] + , IR(KBr)υmax 3 350提示有羟基 ,
1 655cm-1 、1 605cm-1 、1 509cm-1提示有苯环 。DEPT
谱显示有 1个仲碳 ,9个叔碳 ,10个季碳 。1H-NMR
(500M ,DMSO-d6)δ:6.23(1H ,d , J =2.0Hz ,H-6),
6.44(1H ,d , J =2.0Hz ,H-8),7.48(1H ,d , J =2.0
Hz ,H-2′), 6.86(1H , d , J =8.7 Hz , H-5′), 7.55
(1H , dd , J =2.0 , 8.7 Hz , H-6′), 5.57(1H , s , H-
1″),3.31 ～ 4.15(4H ,m ,糖基 H)。 13C-NMR谱数据
见表 1 ,δ108.3 、82.4 、77.3 、86.2 、60.9的共振信号
提示为五碳糖 ,综合以上波谱解析 ,及氢谱及碳谱
数据与文献[ 9]报道的广寄生苷的氢谱碳谱数据一
致 ,故确定化合物Ⅴ为广寄生苷。
化合物Ⅴ　鲜黄色无定形粉末 ,盐酸-镁粉
反应阳性 ,Molish 反应为阴性 , FeCl3反应为阳性 。
FAB-MS m/ z 303 [M+H] + , IR(KBr)υmax 3 304提示
388　　Chin J Nat Med　Sep.2006　Vol.4　No.5 　2006年 9月　第 4卷　第 5期
有羟基 ,1 660 cm-1 ,1 611 cm-1 ,1 521 cm-1 ,1 448 cm-1
提示有苯环。DEPT 谱显示有 5 个叔碳 , 10 个季
碳。1H-NMR(500M ,DMSO-d6)δ:6.20(1H , d , J =
2.0 Hz , H-6), 6.43(1H , d , J =2.0 Hz ,H-8), 7.66
(1H , d , J =1.8 Hz , H-2′), 6.90(1H , d , J =8.4
Hz , H-5′), 7.54(1H , dd , J =1.3 , 7.0 Hz , H-6′),
13C-NMR谱数据见表 1。氢谱及碳谱数据与文
献[ 10]报道的槲皮素氢谱碳谱数据一致 ,故确定化
合物Ⅴ为槲皮素 。
致谢:IR, NMR由北京师范大学分析测试中心代测 ,MS 由
军事医学科学院分析测试中心代测。
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var.parvifolium
ZHOU Wei1 , 2 ,CAI Guang-Ming1 ＊ ,HE Gui-Xia2 ,LIU E-Hu1 , 2 ,DU Fang-Lu2
1
PLA Institute of Chinese Materia Medica 302 Hospital of PLA , Beijing 100019 ;
2School of Pharmacy , Hunan University of TCM , Changsha 410007
【ABSTRACT】　Five flavonoid compounds were isolated from stem and leaf of Bupleurum smithii Wolff var.parvifolium for the first time ,
their structures were identified as narcissin(Ⅰ), rutin(Ⅱ), isorhamnetin(Ⅲ), guaijaverin(Ⅳ), quercetin(Ⅴ).
【KEY WORDS】　Bupleurm smithii Wolff var.parvifolium ;Chemical constituent;Flavonoids
　2006年 9月　第 4卷　第 5期 Chin J Nat Med　Sep.2006　Vol.4　No.5　389