免费文献传递   相关文献

福禄桐组培快繁成苗技术研究



全 文 :福禄桐组培快繁成苗技术研究
高丽琼 ,林彦 (国家林业局桉树研究开发中心 ,广东湛江 524022)
摘要 [目的 ]研究圆叶福禄桐茎段为外植体离体培养的快繁技术。 [方法]以圆叶福禄桐茎段为外植体离体培养 ,探讨最佳培养基配
比。 [结果]用浓度 0.1%升汞溶液对福禄桐材料进行消毒 ,时间 8 ~ 10 min效果较佳;以茎段为外植体诱导出腋芽 , MS+6-BA3.0mg/L
+NAA0.5mg/L的激素配比对诱导发芽有利 ,诱导率高达 85.6%;增殖培养基 MS+6-BA1.5mg/L+NAA0.1mg/L最佳;不定芽在
1/2MS+IBA1.0mg/L的生根培养基上 ,生根率高达 94.9%,根多条、粗壮 ,植株长势良好、有活力;生根苗移栽在泥炭与椰糠 2∶1的基质
中 ,成活率最高。 [结论 ]该研究为圆叶福禄桐离体快繁提供了依据。
关键词 福禄桐;增殖;生根
中图分类号 S682.36  文献标识码 A  文章编号 0517-6611(2010)15-07774-02
StudyonTissueCultureSeedlingsofPolysicsbalfouriana
GAOLi-qiongetal (ChinaEucalyptResearchCentre, Zhanjiang, Guangdong524022)
Abstract [ Objective] TheresearchaimedtostudythetissuecultureseedlingsofPolysicsbalfouriana.[ Method] Softstemswereusedasex-
plantsandlotsofmediumwasusedtostudythetissuecultureregenerationpotentialofPolysicsbalfouriana.[ Result] ThesoftstemsofPolysics
balfourianasterilizedwith0.1%hydrargyrumfor8to10minutesweresuitableforexplants.ThebestmediumforinducingcaluswasMS+BA
3.0mg/L+NAA0.5mg/L, andtheinducingratioreached85.6%.ThebestmediumforshootregenerationwasMS+BA1.5mg/L+NAA
0.1mg/L.Whentheshootswereculturedonamediumof1/2MS+IBA1.0 mg/L, morethan94.9%rootedandsurvivedtodevelopthick
shoots.Thebestpotingmediaforsubsequentex-vitrodevelopmentofthetissuecultureplantletscomprised2∶1ofpeatandcompostedcoconut
powder.[ Conclusion] ThisstudyprovidedreferencesfortissuecultureseedlingsofPolysicsbalfouriana.
Keywords  Polysicsbalfouriana;Multiplication;Rooting
基金项目 国家 “十一五 ”科技支撑课题(2006BAD07B08)。
作者简介 高丽琼(1971-),女 ,广东湛江人 ,高级工程师 ,从事林木种
苗快繁技术研究。
收稿日期  2010-02-10
  圆叶福禄桐(Polysicsbalfouriana)又称圆叶南洋森 、圆叶
南洋参 ,为五加科 、南洋森属常绿灌木或小乔木 ,植株多分
枝 ,茎干灰褐色 ,密布皮孔。枝条柔软 ,叶互生 , 3小叶的羽状
复叶或单叶 ,小叶宽卵形或近圆形 ,基部心形 ,边缘有细锯
齿 ,叶面绿色。另有花叶 、银边品种 。此外 ,该属中的羽叶南
洋森 、蕨叶南洋森 、皱叶南洋森 、五叶南洋森 、栎叶南洋森等
品种也常见于栽培。通常少分枝 ,茎干表面密布明显的皮
孔 。叶互生 ,奇数羽状复叶 ,小叶圆形 ,茎部心形 ,伞形花序
成圆锥状 [ 1] 。喜温暖湿润和阳光充足的环境 ,耐半阴 ,不耐
寒 ,怕干旱 。家庭中可长期放在光线明亮的室内 ,如果每天
能在室内见到数小时的阳光则生长更为旺盛 ,夏季应避免室
外强烈阳光的直射。由于圆叶福禄桐的叶形别致 ,叶色美
丽 ,加上其既喜明亮光线又具有较强的耐阴性 ,所以适合大
厅 、门廊摆设装饰 ,也是园林绿化的优良美化植物。近年来 ,
国内外学者对福禄桐组织培养进行了研究 ,已掌握了一些关
键技术。
1 材料与方法
1.1 材料 试验材料为南方种苗示范基地盆栽大苗 ,植株
高约 60 cm,生长健壮 ,叶色深绿 ,无病虫害 。从母株上剪取
半木质化枝条 ,长度约 30 cm,剪掉叶片 ,留叶柄 ,保湿 ,快速
送回组培室。
1.2 方法
1.2.1 培养基。基本培养基以 MS为基础 ,添加一定量的细
胞分裂素和生长素。C源主要以蔗糖提供 ,诱导培养和增殖培
养用 30 g/L,生根培养用 15 g/L。凝固剂为卡拉胶 ,用量 5 ~ 7
g/L。pH值为 5.8。按照常规方法配制分装。
1.2.2 外植体的消毒。将选好的材料剪去叶片 ,叶茎段剪
成 5 cm长 ,留顶芽备用 。先用洗洁精清洗材料 ,流水冲洗 20
min,在超净台上换用消毒好的瓶子 ,用浓度 75%酒精泡 30
s,无菌水冲洗 3次 ,之后用浓度 0.1%HgCl2消毒 8 ~ 18 min
(根据枝条老嫩控制所需时间),再用无菌水冲洗 5次即可。
将消毒好的茎段用消毒过的滤纸吸干水分 ,切成 1 ~ 2cm长
至少带 1个节的小茎段 ,接种在启动培养基上。
1.2.3 培养条件。培养温度为(28±2)℃,光照强度 1 000
~ 2 000 lx,使用室内天窗自然光照 ,接种后的前 1周放弱光
处 ,之后放在光照较强处 ,但不能直接照射太阳光。
1.2.4 生根瓶苗的移栽与管理 。将生根后的瓶苗放在自然
条件(室外)下 ,散射光炼苗 20d左右 ,松开瓶盖 1 ~ 2 d后取
出 ,洗净根部培养基 ,种于泥炭土与椰糠(2∶1)的基质中 ,保
持一定的湿度 ,管理与一般组培苗移栽相似。
2 结果与分析
2.1 外植体的消毒 将准备好的枝条按要求剪成 5 cm
长 ,用浓度 0.1%HgCl2消毒 ,根据幼嫩程度选择不同的消毒
时间。消毒后按要求切成带 1 ~ 2个节 、长度 1 ~ 2 cm的小
段 ,每瓶接 1个外植体 。表 1表明 ,枝条越幼嫩消毒效果越
表 1 福禄桐外植体消毒效果比较
Table1 ComparisonofsterilizationefectsofPolysicsbalfourianaex-
plants
消毒时间∥minSterilizationtime
接种数量∥株Inoculationquantity
保存数量∥株Preservedquantity
污染率∥%Polutionrate
发芽数量∥株Germinationquantity
发芽率∥%Germinationrate
8 70 50 28.6 36 72.0
10 73 32 56.2 25 78.1
12 70 40 42.9 6 15.0
13 53 13 75.5 8 61.5
18 50 4 92.0 0 0
 注:接种 20d后调查结果。
 Note:Investigationresultsafterinoculation20d.
责任编辑 刘月娟 责任校对 卢瑶安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(15):7774-7775, 7809
好 ,污染率只有 28.6%,发芽率也越高 ,发芽率接近 80%,老
枝难消毒且难发芽 ,最差的没有发芽。
2.2 外植体的诱导 将消毒好的外植体材料按要求切好 ,
接入准备好的启动培养基中 ,每瓶接 1个外植体进行诱导 。
培养基以 MS为基本培养基 ,添加不同种类和不同浓度的细
胞分裂素和生长素。接种 10 d后部分外植体开始有新芽长
出 ,一般是单芽 ,偶见丛生芽。表 2表明 ,不同激素均可诱导
福禄桐发芽。组培中广泛使用的细胞分裂素 6-BA、KT与生
长素都可以诱导福禄桐发芽 ,激素浓度越高发芽率越高。但
是 ,发芽率还与接种时枝条的幼嫩程度密切相关。
表 2 不同培养基对外植体诱导发芽率的影响
Table2  ComparisonofinducinggerminationrateofPolysicsbalfourianaexplantswithdiferencemedium
培养基Medium
激素配比Ratioofhormone∥mg/L
6-BA NAA KT
接种数量∥株Inoculationquantity 发芽率∥%Germinationrate 小芽生长状态Growthstateofsprout
1 0.3 0.1 0.2 90 46.7 芽健壮,单芽和丛芽 ,无愈伤
2 3.0 0.5 0 46 85.6 芽健壮,芽单条,无愈伤  
3 2.0 0.2 0 52 64.6 芽健壮,芽单条,无愈伤  
 注:接种数量中已经去除污染外植体。接种 30d后统计。
 Note:Polutedexplantshadbeenremovedininoculationquantity, statisticsafterinoculation30d.
2.3 增殖培养 待新芽长到约 2cm长时 ,将长出的新芽切
下 ,接种在准备好的增殖培养基上。采用 2因素 3水平正交
设计 ,参考尹斌开等研究结果 [ 2] ,为防止枯梢 ,培养基中均加
入 Na2 S2 O3 150 mg/L,以 MS为基本培养基 ,附加不同浓度的
细胞分裂素和生长素 ,配制成 9种培养基 ,研究增殖情况 , 30
d转接 1次 ,重复 3次。表 3表明 ,不同配比的细胞分裂素和
生长素对福禄桐增殖的影响较大。当 NAA浓度为 0.1和 0.3
mg/L时 ,随着 6-BA浓度的增加增殖倍数也增加;当 NAA浓
度为 0.2 mg/L时 ,随着 6-BA浓度的增加增殖倍数减少。该
试验最佳的增殖配比为 6-BA1.5 mg/L+NAA0.1 mg/L,其
次为 6-BA0.5 ~ 1.0 mg/L+NAA0.2 mg/L。最佳增殖配比
时增殖倍数最高 ,接近 3倍 ,且芽条生长正常 ,苗高适当 ,有利
于下阶段生根。
表 3 不同浓度的激素对福禄桐增殖的影响
Table3 EffectsofdifferentconcentrationhormoneonproliferationofPolysicsbalfouriana
序号
SerialNo.
6-BA浓度∥mg/L
6-BAconcentration
NAA浓度∥mg/L
NAAconcentration
增殖倍数
Proliferationmultiples
生长状况    
Growthstatus    
1 0.5 0.1 1.81 丛芽 ,色绿,叶片伸展
2 1.0 0.1 2.72 丛芽 ,偶见顶部丛芽,色绿 ,叶片伸展
3 1.5 0.1 2.97 丛芽 ,色绿,偶见枯顶 ,叶片伸展
4 0.5 0.2 2.81 丛芽 ,色绿,叶片伸展
5 1.0 0.2 2.76 丛芽 ,色绿,偶见枯顶 ,叶片伸展
6 1.5 0.2 2.22 丛芽 ,部分有分枝 ,色绿 ,叶片伸展
7 0.5 0.3 1.79 丛芽 ,偶见枯顶 ,色绿 ,叶片伸展
8 1.0 0.3 2.01 丛芽 ,色绿,叶片伸展
9 1.5 0.3 2.05 丛芽 ,色绿,叶片伸展
 注:接种 25d左右统计 ,高度 0.5cm以上时计数。
 Note:Statisticsafterinoculation25d, heightabove0.5cm.
2.4 不同培养基对生根的影响 选取生长健壮 、苗高 2 cm
以上的小芽作材料 ,接入以 1/2MS为基本培养基附加不同激
素和不同浓度生长素的生根培养基 , 20 d后调查福禄桐生根
情况。表 4表明 ,生长素 IBA浓度 1.0 mg/L时生根率最高 ,
可达 94.9%,配合使用生长素 NAA后生根效果也不错 ,达
91.6%,且茎上正常 ,根系多且粗壮 ,对移栽有利。在该试验
中 ,最佳生根组合是 IBA1.0 mg/L和 IBA0.5 mg/L+NAA
0.2 mg/L,生根率达 90%以上 ,茎上生长良好 ,根系正常 ,有
利于苗木移栽。
表 4 不同激素和不同浓度生长素对福禄桐生根的影响
Table4 EfectsofdiferenthormoneanddifferentconcentrationofsomatotropinonrootingofPolysicsbalfouriana
序号
SerialNo.
IBA浓度∥mg/L
IBAconcentration
NAA浓度∥mg/L
NAAconcentration
生根率∥%
Rootingrate
生长状况
Growthstate
1 0.2 73.2 绿色,茎抽长,根白色,多条粗根,叶伸展
2 0.5 83.5 绿色,茎抽长,根白色,多条且粗,叶伸展
3 1.0 94.9 绿色,茎抽长,根白色,多条且粗,叶伸展,基部小块愈伤组织
4 0.2 0.2 80.3 绿色,茎抽长,根多 ,粗壮 ,叶伸展
5 0.5 0.2 91.6 绿色,茎抽长,根粗 ,多条根 ,
6 1.0 0.2 85.3 绿色,茎抽长,根粗 ,多条根 ,基部小块愈伤组织
对照(CK) 0.5 0.1 76.7 绿色,茎抽长,根粗 ,条根
 注:接种 20d统计生根数。
 Note:Rootingnumberstatisticsafterinoculation20d.
(下转第 7809页)
777538卷 15期                高丽琼等 福禄桐组培快繁成苗技术研究
赏期开花均衡植株等不同表现性状 。而在一定浓度范围内 ,
3种延缓剂对百子莲有相似的影响 ,均使花葶矮化增粗 ,最高
净花率下降 ,花径变小。 CCC可提高百子莲开花率 ,合适浓
度使植株全部开花。
表 5  B9处理对百子莲开花的影响
Table5  EfectofB9 onfloweringhabitofAgapanthuspraecoxssp.orientalis`BigBlue
处理浓度∥mg/L
Treatmentconcentration
开花数
Floralnumber
最高净花率∥%
Maximumnetfloweringrate
花径∥cm
Floraldiameter
花葶高∥cm
Scapeheight
花葶粗∥cm
Scapediameter
0(CK) 79.88b 25.16a 19.98a 107.93ab 0.98c
5 000 63.25bc 23.87a 20.85a 100.34ab 1.21b
10 000 75.14b 23.87ab 19.77a 93.06b 1.36a
20 000 86.38a 15.47b 18.79a 109.31a 1.36a
  植物生长延缓剂对植株开花的影响主要表现在花期和开
花习性 2个方面的差异。有研究表明 ,对马蹄莲 、水仙 、八仙
花 、白兰花及一些草花等不同花卉施用不同浓度的 PP333、
CCC、B9后 ,有延长花期 ,紧凑花型 ,矮化植株等作用 [ 5-9] ,这
与笔者的研究结果相似。也有结果不一样的 ,如大花蕙兰施
用 PP333则可大大提前花期 [ 10] 。施用同一延缓剂后不同科属 、
同科不同种的植物 ,在表现性状上均有差异 ,其吸收机制可能
存在明显的差异 ,对延缓剂的敏感性也不尽相同 [ 11] ,由此百子
莲在不同延缓剂处理后性状也就表现的不尽相同。
影响植物生长延缓剂作用效果的因素是多方面的 ,如施
用方式 ,施用间隔时间 、次数 ,施用浓度及环境因子等。笔者
在一定浓度范围内对百子莲进行了延缓剂单因子处理 ,可为
提高百子莲切花品质及花期调控提供理论依据。对于结合环
境因子精确应用植物生长延缓剂 ,以及其他调节剂对百子莲
进行花期控制影响 ,有待进一步研究。
参考文献
[ 1] 王三根.植物生长调节剂在花卉生产中的应用 [ M].北京:金盾出版社,
2003:8.
[ 2] 任吉君 ,王艳 ,孙秀华 ,等.多效唑、矮壮素和摘心对孔雀草的矮化效应
[ J] .沈阳农业大学学报 , 2006, 37(3):390-394.
[ 3] 孙颖.百子莲繁殖生物学研究[ D].哈尔滨:东北林业大学, 2009.
[ 4] 卓丽环 ,孙颖.百子莲的花部特征与繁育系统观察 [ J].园艺学报, 2009,
36(11):1697-1700.
[ 5] 朱佳文,洪亚辉,萧浪涛,等.PP333和 B9对白兰花生长的影响[ J].湖南农业大学学报:自然科学版, 2003, 29(6):482-484.
[ 6] 林竹隐.植物生长延缓剂对雁来红、八仙花和菊花的作用及影响 [ D] .重
庆:西南大学 , 2007.
[ 7] 彭映辉 ,曾冬琴,陈飞飞,等.赤霉素及多效唑对 3种草本花卉花期与株
高的影响[ J] .中南林业科技大学学报 , 2007, 27(4):100-103.
[ 8] 杨爽 ,苏智先.多效唑对中国水仙开花和生长的影响 [ J].安徽农业科学,
2006, 34(7):1345-1346.
[ 9] 彭峰 ,陈嫣嫣 ,郝日明 ,等.多效吐和矮壮素对盆栽彩色马蹄莲的矮化实验 [ J].植物资源与环境学报 , 2004, 13(4):32-34.
[ 10] 孙晶.外源激素和越夏方式对大花蕙兰开花的影响 [ D].北京:北京林
业大学 , 2007.
[ 11] 何武江 ,王艳霞.植物生长延缓剂在花卉生产中的应用研究进展 [ J] .内
蒙古民族大学学报, 2007(5):40-41.
(上接第 7775页)
2.5 移栽 接种 15~ 20d,生根基本完成 。将瓶苗移出培
养室 ,放在自然光下炼苗 , 15 d左右可以移栽。经过炼苗的
小苗更加健壮 ,叶色浓绿 。洗净生根苗基部培养基 ,用竹签
种于经过高锰酸钾消毒的基质中 ,基质采用泥炭土与椰糠(2
∶1),浇足定根水 ,必要时盖薄膜保湿 ,按照一般组培苗的常
规管理即可 ,成活率 90%以上。
3 结论与讨论
(1)福禄桐组培繁殖时外植体消毒相对容易。因其表皮
较光滑 ,切口处只有少量愈伤组织 ,最快的接种后 5 d即可看
到新芽 ,一般顶芽与第 2 ~ 4节较易发芽 。消毒时间不必过
长 。下一步可开展老枝诱导方面的研究。
(2)外植体诱导时 ,细胞分裂素和生长素的种类和浓度
有影响。福禄桐属于较易发芽的树种。该试验中 ,最好的组
合为 6-BA3 mg/L+NAA0.5 mg/L,诱导率达 85.6%;最差
的组合为 6-BA2mg/L+NAA0.2 mg/L,诱导率仅 34.6%。
但是 ,该次试验设计的诱导配方不完善 ,诱导率受到其他因
素影响的机率较大。
(3)在增殖培养阶段 ,细胞分裂素 1.0 ~ 1.5 mg/L与生
长素 0.1 ~ 0.2 mg/L发芽情况类似。总体来看 , 6-BA1.5
mg/L+NAA0.1mg/L和 6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的
增殖倍数最高 ,接近 3倍 ,且小芽生长正常 ,有利于下阶段生
根。该试验未过多使用细胞分裂素 KT,对照 6-BA0.3mg/L
+KT0.2 mg/L+NAA0.2 mg/L增殖倍数仅为 1.5左右 ,下
一步可以加大用量。
(4)生根率最高的组合为 IBA1.0 mg/L和 IBA0.5
mg/L+NAA0.2mg/L,生根率分别达 94.9%和 91.6%。小
苗茎上部分生长良好 ,根系正常 ,移栽易成活。
参考文献
[ 1] 祖爱民 ,戴美学.室内名贵观叶植物栽培技艺 [ M].济南:山东科学技术
出版社 , 2000.
[ 2] 尹斌开 ,龙相斌 ,胡庆,等.圆叶福禄桐组培快速繁殖技术研究[ J].现代农业科技 , 2008(20):18-19.
780938卷 15期                卓丽环等 植物生长延缓剂对百子莲开花的影响