全 文 ：6-BA和不同温度水处理对采后西兰花过氧化物酶活性的影响
颜福花1 , 叶荣华1 , 徐象华1 , 王 然2 , 徐选美3
(1.浙江省丽水市林业科学研究所 ,浙江丽水 323000;2.青岛农业大学园艺系 ,山东青岛 266109;3.浙江省丽水市庆元县林业局 ,浙江庆元 323800)
摘要　[目的] 明确采后西兰花过氧化物酶(POD)活性与其小花黄化的关系。[方法] 用愈创木酚法测定不同处理西兰花的 POD活性 ,
分析温水和 6-BA处理对其POD活性的影响。[结果] 45 ℃温水处理减缓黄化速率的效果最明显。0.04%6-BA比 0.02%6-BA的保绿效
果更明显。45℃温水处理的西兰花黄化速率和 POD活性较对照低。不同浓度 6-BA处理的西兰花中 POD活性均呈上升趋势。后期 , 6-
BA处理的 POD活性均低于对照 ,并且0.02% 6-BA处理中POD活性增加较 0.04%6-BA处理的慢。[结论] 45 ℃温水处理和 0.04%6-BA
处理均能较好地减缓西兰花小花的黄化速率。
关键词　西兰花;过氧化物酶;6-BA;热处理
中图分类号　S635.9　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2008)12-04852-02
Influences of Treatments by 6-BA and Water at Different Temperatures on the Peroxidase Activity in Harvested Broccoli
YAN Fu-hua et al　(Lishui Forestry Institute of Zhejiang Province , Lishui , Zhejiang 323000)
Abstract 　[Objective] The purpose was to confirm the relation between the peroxidase(POD)activity in harvested broccoli and the yellowing of its flo-
ret.[Method] The POD activities in broccoli in different treatments were determined by guaiacol method.The influences of treatments bywarm water and
6-BA on its POD activity were analyzed.[ Result] The effect on slowing yellowing rate of treatment by 45 ℃warm waterwas most significant.The keep-
ing-green effect of 0.04% 6-BA was more significant than that of 0.02%6-BA.The yellowing rate andPODactivity in broccoli in the treatment by 45 ℃
warm water were lower than that in CK.The POD activities in broccoli in the treatments by 6-BA with different concn.showed ascending trend.In the
anaphase, the POD activities in the treatments by 6-BA were lower than that in CK and the increment of POD activity in the treatment by 0.02%6-BA
was slower than that in the treatment by 0.04% 6-BA.[ Conclusion] The treatments by both 45 ℃warm water and 0.04%6-BA could slow the yellowing
rate of broccoli floret better.
Key words　Broccoli;Peroxidase;6-BA;Heat treatment
作者简介　颜福花(1980-),女 ,山东郓城人 ,助理工程师 ,从事园艺
植物种质资源收集及栽培技术研究。
收稿日期　2008-02-25
　　西兰花(Brassica oleracea L.var italica P .)又名青花菜 ,十
字花科植物 ,属甘蓝类蔬菜 ,富含 VA 和相当数量的VB1 、VB2 、
Vc及磷 、铁 、钙等无机物 ,但是西兰花收获期短 ,收获后花蕾
易开放变黄 ,失去商品价值。据报道 ,西兰花在室温(15 ～ 28
℃)下放置 24h后即开始变黄 , 48h后花蕾开放 , 叶绿素下降
为采收时的 1/2 ,72 h后花球全黄 ,失去食用价值[ 1-2] 。西兰
花是有呼吸高峰的蔬菜 ,其呼吸强度随贮藏温度的升高而升
高 ,因此 ,西兰花采后要及时预冷 ,在最短时间内达到 0 ～ 5
℃,以排除大量田间热。最常用的预冷方法是真空预冷和冰
水预冷[ 3] 。研究还表明 ,对果蔬采后热处理不仅可驱虫灭
菌 ,也可抑制某些果实的后熟 ,提高贮藏品质 ,减少青花菜的
黄化 ,延长贮藏寿命[ 4] 。但采后热处理延缓后熟的机制并没
有完全被阐明 ,有必要对其作用机制进行进一步的研究 ,以
利于热处理技术在果蔬采后保鲜上的广泛应用。人工合成
的细胞分裂素 6-BA是非移动型生长调节剂 ,可以延缓衰老 ,
具有良好的保绿保鲜效果 ,在西兰花的贮藏保鲜上已有应用
研究。过氧化物酶是植物体内普遍存在的一种酶 ,在植物的
生长发育衰老过程中 ,其活性不断发生变化 ,存在于高等生
物的过氧酶体中 ,担负过氧化氢和过氧化物的分解和转化任
务 ,在防止膜脂过氧化中起作用 。为此 ,笔者采用不同浓度
6-BA和不同水温处理的采后西兰花 ,研究其 POD活性的变
化 ,以期明确POD活性与西兰花黄化的关系。
1　材料与方法
1.1　材料　以从田间新采的西兰花绿岭为试材。
1.2　方法
1.2.1　材料处理。从花球上切下花枝 ,每处理所用花枝的
取材部位相同 ,花枝数 50个。设 5个处理 ,处理时间均为 10
min:A , 2 ℃冰水;B ,室温蒸馏水(25 ℃)(CK);C , 45 ℃温水;
D ,20 mg/kg 6-BA;E ,40 mg/kg 6-BA。处理后 ,用吸水纸将花
块上的水吸干 ,放在塑料筐内于室温下 ,相对湿度>90%。
每隔 12 h记黄化分值 1次 ,并取材用于POD活性等分析。黄
化分值判定方法为:全绿 5.0分;20%黄化 4.0分;40%黄化
3.0分;60%黄化 2.0分;80%黄化 1.0分;全部黄化 0分 。取
材方法是用手术刀从花梗上切下小花蕾 ,不可切碎花蕾 。每
处理取 3份 ,每份 0.5 g ,用硫酸纸包好 ,放入液氮速冻 ,然后
放入-80 ℃超低温冰箱中保存 ,备用。待花蕾完全黄化后停
止观察和取材 。
1.2.2　过氧化物酶活性测定 。
1.2.2.1　酶液提取及活性测定。将备用的每份材料取出 ,加
5 ml 0.05mol/L 、pH 5.8磷酸缓冲液 ,冰浴研磨 ,转入 10ml离
心管 ,4 ℃, 10000 r/min离心 10 min ,上清液即为酶粗提液 ,量
取上清液体积 ,冰浴保存。取 2.7 ml底物(0.05mol/L 、pH 5.8
磷酸缓冲液中愈创木酚浓度为 6 g/L)放入试管中 ,再加酶液
0.1ml ,在 37 ℃水浴中保温 15 min ,后加入 2%过氧化氢 0.7
ml ,启动反应 ,测定在 470 nm波长下的吸光度增加值 ,空白以
0.7 ml水代替过氧化氢。
1.2.2.2　酶活性计算。以1 min内 A470变化 0.01为 1个过氧
化物酶活性单位(U)。
过氧化物酶活性=吸光度变化×酶液总体积(ml)/[测
定酶液体积(ml)×样品重(g)×反应时间(min)×0.01]
1.2.2.3　蛋白质含量测定。用考马斯亮蓝G-250法测定可
溶性蛋白含量 。
2　结果与分析
2.1　不同处理对西兰花外观品质的影响　由图 1可知 ,处
理后 12 h内无黄化现象;24 h时 ,CK已有 30%黄化 ,40 mg/kg
6-BA处理仍无黄化现象 ,从总体情况看 ,45 ℃温水处理对减
安徽农业科学 , Journal of Anhui Agri.Sci.2008 , 36(12):4852-4853　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　责任编辑　罗芸　责任校对　李洪
缓黄化速率效果最明显。不同浓度 6-BA处理 , 40 mg/kg浓
度比 20 mg/kg浓度保绿效果明显。前 36 h内 , 45 ℃温水处
理与 20 mg/kg 6-BA处理效果差异不大 。
图 1　不同处理对采后西兰花黄化的影响
Fig.1　Effects of different treatments on yellowing of harvested broc-
coli
2.2　不同处理对过氧化物酶活性的影响
2.2.1　水温对过氧化物酶活性的影响。由图 2可知 ,45 ℃
温水处理的西兰花中 POD活性较CK低 ,且上升趋势平缓;
冰水处理的 POD活性较CK高 ,且上升较快 。POD是植物体
内清除过氧化氢的主要酶类 ,能清除果蔬体内过量的活性
氧 ,维持活性氧代谢平衡 ,保持膜结构 ,延缓果蔬衰老。45 ℃
温水处理的西兰花黄化速率较慢 ,POD活性较CK低 ,可能是
温水处理减少了活性氧的产生 ,从而降低了POD的活性 ,延
缓了衰老。
图 2　不同温度处理对西兰花中 POD活性的影响
Fig.2　Effects of different temperature treatments on POD activity of
harvested broccoli
图 3　不同浓度 6-BA处理对西兰花中 POD活性的影响
Fig.3　Effects of different 6-BA concentration on POD activity of
harvested broccoli
2.2.2　6-BA浓度对采后西兰花中过氧化物酶活性的影响 。
由图 3可知 ,不同浓度 6-BA处理的西兰花中 POD活性均呈
上升趋势。后期 , 6-BA处理的 POD活性均低于 CK ,且 20
mg/kg 6-BA处理的POD活性增加速率较 40 mg/kg 6-BA处理
的慢 。Leshem等(1981)指出自由基清除剂具有延缓机体衰
老的作用 ,6-BA作为自由基形成的抑制剂 、形成后的清除剂
及脂氧合酶的抑制剂(Leshem 等 1981 ,1990)可降低自由基含
量 ,阻止膜脂过氧化。因此 ,6-BA可延缓果蔬衰老 ,延长保鲜
期 ,这与图 1中 6-BA处理的西兰花黄化速率较慢相吻合 。
3　讨论
(1)自由基伤害学说认为果蔬衰老过程是活性氧代谢失
调积累过程。活性氧既能启动膜脂过氧化作用 ,导致膜的损
伤和破坏 ,又参与ACC合成乙烯的过程 ,促进衰老。与此同
时 ,生物体内存在超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶 、过氧
化氢酶(CAT)等内源活性氧清除剂 ,能清除果蔬内过量的活
性氧 ,维持活性氧代谢平衡 ,保持膜的结构 ,延缓果实的衰
老[ 5-6] 。45 ℃水处理的西兰花中 POD活性较低 ,可能与热
处理后西兰花产生较少过氧化氢和过氧化物等自由基有关。
(2)细胞分裂素有延缓叶片衰老的作用。原因:①细胞
分裂素抑制核糖核酸酶 、脱氧核糖核酸酶和蛋白酶等的活
性 ,延缓了核酸 、蛋白质和叶绿素等的降解。 ②细胞分裂素
促使营养物质向其应用部位移动[ 7] 。人工合成的细胞分裂
素 6-BA在贮藏保鲜上已有应用研究。田建文报道 , 6-BA处
理可降低柿子果肉组织的呼吸强度和乙烯生成量 ,抑制果肉
软化速度[ 8] 。采前或采后用 6-BA处理荔枝果实可明显降低
其呼吸强度 ,减少总糖和可滴定酸的消耗 ,延缓果实的衰老
作用 。贮前用一定浓度的 6-BA 处理青花菜 ,能明显延长贮
藏期 ,提高保绿保鲜效果 。试验中 6-BA处理的西兰花比对
照黄化速率明显慢 ,且 40mg/kg浓度处理比20mg/kg浓度处
理保绿效果明显 。6-BA在贮藏保鲜上的最佳应用浓度有待
进一步探讨。
(3)植物体内POD 、SOD 、CAT 协同作用 ,共同防御活性氧
及其他过氧化物自由基对细胞膜系统的伤害。试验仅研究
了各种处理对POD活性的影响 ,因为西兰花的采后衰老是十
分复杂的生理过程 ,不可能只受一种酶或激素的调控 ,而是
体内各系统的相对协调来调节的 ,这有待于深入研究 。
参考文献
[ 1] 高振茂.青菜花保鲜技术[ J] .长江蔬菜 ,1998(6):32.
[ 2] 林发.青花菜贮藏保鲜技术[ J] .北京农业 ,1996(8):41.
[ 3] 高振茂.绿菜花的营养与保鲜技术[ J] .现代农业 ,1996(5):6.
[ 4] 吴平,李武 ,郑淑芳.热水处理延长青花菜货架期[ J] .农业新技术 ,2003
(1):16-17.
[ 5] 潘瑞炽 ,董愚得.植物生理学[M] .北京:高等教育出版社 ,1995.
[ 6] 叶陈亮 ,柯玉芹 ,陈伟.自由基清除剂对延缓青花菜花蕾衰老的效应
[ J] .园艺学报, 1996 ,23(3):259-263.
[ 7] 叶陈亮 ,陈伟.青花菜花球衰老进程中呼吸及某些物质代谢的变化
[ J] .园艺学报, 1995 ,22(4):367-371.[ 8] 田建文 ,贺普超,许明亮.植物激素与柿子后熟的关系[ J] .园艺学报 ,
1994, 21(3):217-221.
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