全 文 ：[ 基金项目] 2009年陕西省中医药管理局项目(编号:zy28)　[ 作者简介] 戚志华 ,女 , 主管药师 , 电话:029-84777648 , E-mai l:qzhlily @yahoo.
com.cn　[ 通信作者] 张琰 ,女 ,副主任药师 ,电话:029-84777164 , E-mail:sunny51@fmmu.edu.cn
归辛胶囊中当归 、川芎提取工艺的正交试验
戚志华 ,徐媛 ,张琰 ,刘新友 ,赵敏杰　(第四军医大学唐都医院药剂科 , 陕西 西安 710038)
[ 摘要] 　目的:优选归辛胶囊中当归 、川芎的提取工艺。 方法:以阿魏酸 、川芎嗪提取率为考察指标 , 用高效液相色谱法进行
测定。采用正交试验与比较试验相结合的方法 , 对提取工艺进行优选。 结果:提取次数对考察指标具有显著性影响。 结论:
确定归辛胶囊的最佳提取工艺为:加 8倍量的 70%乙醇 ,回流提取 3 次 , 每次 2 h。
[ 关键词] 　归辛胶囊;正交试验;提取工艺;当归;川芎
[中图分类号] R943　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213(2010)21-1811-03
The orthogonal test of extraction technology of Radix Angelicae sinensis and Rhizoma Chuanx-
iong in Guixin capsule
QI Zhi-hua , XU Yuan , ZHANG Yan , LIU Xin-you , ZHAO M in-jie(Tangdu Hospital F our th M ilitary Medical
Univer sity , Shanxi Xian 710038 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To optimize the ex traction conditions of Radix Angelicae sinensis and Rahizoma Chuanxiong for
Guixin capsule.METHODS　The ex traction conditions w ere studied w ith o rthogonal test L 9(34)and compa rative test , the con-
tents of fe rulaic acid and chuanxiong zine were determined by H PLC as index.RESULTS　F requency o f ex trac tion w as remarka-
ble factor in the test.CONCLUSION　The optimum ex traction techno lo gy fo r Guixin capsule wa s to reflux and ex tract the mate-
rials fo r 3 times in 70% ethano l , the volume of w hich was 8 times the w eight of herbal medicine , w ith 2 hour for each time.
KEY WORDS:Guix in capsule;or thogonal test;ex traction technology;Radi x Angelicae sinensis;Rahiz oma Chuanxiong
　　归辛胶囊是第四军医大学唐都医院院内制剂
(兰制字[ 2006] F69015号),由当归 、川芎等 7 位味
中药组成 。具有温经散寒 、养血通脉 、行气活血止痛
之功效 。应用于临床 20多年来对防治偏头痛发作
有明显疗效 ,总有效率为88.6%,控制率达38.6%,
且未见不良反应。方中当归为君药 ,主要有效成分
为挥发油及阿魏酸 ,同时川芎中亦含有挥发油及阿
魏酸 ,尚含有川芎嗪等生物碱类有效成分。原工艺
阿魏酸提取率低 ,且无法提取到川芎嗪等生物碱类
成分 。为优选归辛胶囊提取工艺 ,以阿魏酸 、川芎嗪
提取率为考察指标 ,用 HPLC 法进行测定 ,采用正
交试验与比较试验相结合的方法 ,对当归 、川芎提取
工艺进行优选。
1　材料
高效液相色谱仪(岛津 SPD —10A vP);阿魏酸
对照品(中国药品生物制品检定所 ,含量测定用 ,批
号 110773-200611);盐酸川芎嗪对照品(中国药品
生物制品检定所 , 含量测定用 , 批号 110817-
200305);当归(甘肃产)、川芎(四川产)药材均购于
西安中药饮片厂 ,经第四军医大学药学院生药教研
室鉴定为伞形科植物当归的干燥根和伞形科植物川
芎的干燥根茎;甲醇 、乙腈为色谱纯;其他试剂均为
分析纯。
2　方法与结果
2.1　阿魏酸含量测定[ 1]
2.1.1　色谱条件与系统适用性试验　以十八烷基
硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-0.085%磷酸溶液
(17∶83)为流动相;检测波长:316 nm;柱温:35 ℃;
理论板数按阿魏酸峰计算应不低于 5 000。
2.1.2　对照品溶液的制备　精密称取阿魏酸对照
品 10 mg ,置 50 mL 棕色量瓶中 ,加 70%甲醇使溶
解并稀释至刻度 ,摇匀;精密量取 3 mL ,置 50 mL
棕色量瓶中 ,加 70%甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1
mL 含阿魏酸 12μg)。
2.1.3　药材供试品溶液的制备　取药材粉末(过 3
号筛)约0.2 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加
入 70%甲醇 20 mL ,密塞 ,称定 ,加热回流 30 min ,
放冷 ,再称定 ,用 70%甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,
静置 ,取上清液用微孔滤膜(0.45μm)滤过 ,取续滤
液 ,即得 。
2.1.4　提取液供试品溶液的制备　直接取正交试
验各试验提取液 ,加溶剂至 1 000 mL ,混匀 ,取约 10
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mL ,用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,取续滤液 ,即得 。
2.1.5　含量测定　分别精密吸取对照品溶液与供
试品溶液各 20 μL , 注入液相色谱仪 ,测定 ,即得 。
见图 1。
图 1　高效液相色谱图
A.阿魏酸对照品;B.提取液供试品
Fig 1　HPLC ch romatograms
A.standard solut ion of ferulaic acid;B.sample s olution of ext ract
2.2　川芎嗪含量测定方法[ 2-3]
2.2.1　色谱条件　Iner tsil ODS-3 色谱柱(5 μm ,
4.6 mm×250 mm);以加醇-水(60∶40)为流动相;
检测波长:296 nm;柱温:室温。
2.2.2　对照品溶液的制备　精密称取盐酸川芎嗪
对照品 10 mg ,置 5 mL 棕色量瓶中 ,加流动相溶解
并稀释至刻度 ,摇匀;精密量取 1 mL ,置 25 mL 棕
色量瓶中 ,加流动相至刻度 ,摇匀 ,即得(每 1 mL 含
盐酸川芎嗪 80 μg)。
2.2.3　药材供试品溶液的制备　取药材粉末(过 3
号筛)约0.2 g ,精密称定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加
入 80%甲醇 20 mL ,密塞 ,称定 ,加热回流 30 min ,
放冷 ,再称定 ,用 80%甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,
静置 ,取上清液用微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,取续滤
液 ,即得。
2.2.4　提取液供试品溶液的制备　直接取各试验
提取液 ,加溶剂至 1 000 mL ,混匀 ,取约 10 mL ,用
微孔滤膜(0.45 μm)滤过 ,取续滤液 ,即得。
2.2.5　测定法　分别精密吸取对照品溶液与供试品
溶液各 20μL ,注入液相色谱仪 ,测定 ,即得。见图 2。
图 2　高效液相色谱图
A.川芎嗪对照品;B.提取液供试品;C.阴性对照
Fig 2　HPLC ch romatograms
A.standard solut ion of chu anxion gzine;B.s amp le solu tion of ext rac-
t ion;C.negat ive cont rol
2.3　提取工艺
2.3.1　正交试验设计 　对主要因素醇浓度 、加醇
量 、回流次数进行 L9(34)正交试验对提取工艺进行
优选 ,以阿魏酸 、川芎嗪提取率为指标 ,正交因素水
平表见表 1。
表 1　因素水平表
Tab 1　Element s and levels for the o r thogonal design experi-
ment
水平 A 醇浓度/ % B加醇量/倍 C回流次数/次
1 60 6 , 4 , 4 1
2 70 8 , 6 , 6 2
3 80 10 , 8 , 8 3
2.3.2　正交试验结果及方差分析　按处方比例称
取当归 、川芎药材共 9份 ,按 1 ～ 9 号试验条件进行
试验 ,以各试验提取液作为供试品 ,测定提取液阿魏
酸及川芎嗪含量 ,测定方法同“2.1”项 ,以提取液含
量总量与药材含量总量的比值计算提取率 ,结果见
表 2。方差分析结果见表 3 ,4。
表 2　正交试验结果(n=3)
Tab 2　Results o f the or thogonal design experiment(n=3)
实验号 醇浓度/ %
加醇量
/倍
回流次数
/次 误差
阿魏酸
提取率/ %
阿魏酸
提取率/ %
1 1 1 1 1 48.04 41.84
2 1 2 2 2 84.34 71.08
3 1 3 3 3 94.36 85.63
4 2 1 2 3 76.13 85.71
5 2 2 3 1 99.84 86.21
6 2 3 1 2 62.80 63.34
7 3 1 3 2 84.99 82.26
8 3 2 1 3 56.65 64.42
9 3 3 2 1 82.42 80.36
75.58 69.72 55.83 76.77
阿魏酸 79.59 80.28 80.97 77.38
提取率 74.69 79.86 93.06 75.72
4.90 10.56 37.23 1.66
66.19 69.93 56.53 69.47
川芎嗪 78.42 73.91 79.05 72.23
提取率 75.68 76.45 84.70 78.59
12.24 6.51 28.17 9.11
表 3　阿魏酸方差分析结果
Tab 3　Results o f variance analy sis about fe rulaic acid
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
醇浓度 A 40.921 2 20.460 9.632 0.094
加醇量 B 214.436 2 107.218 50.476 0.019
回流次数 C 2164.416 2 1082.208 509.479 0.002
误差 4.248 2 2.124
表 4　川芎嗪方差分析结果
Tab 4　Results o f variance analy sis about chuanxiong zine
方差来源 离差平方和 自由度 均方 F P
醇浓度 A 247.430 2 123.715 1.886 0.346
加醇量 B 64.523 2 32.261 0.492 0.670
回流次数 C 1332.284 2 666.142 10.158 0.090
误差 131.162 2 65.581
　　结果表明 ,以阿魏酸提取率为指标 , 回流次数
C 、加醇量 B差异有显著性 ,影响因素回流次数 C>
加醇量 B>醇浓度 A;以川芎嗪提取率为指标 ,回流
次数 C 差异有显著性 ,影响因素回流次数 C>醇浓
度 A>加醇量 B。确定最佳工艺为 A 2B2C3 ,即乙醇
浓度 70%,加醇量 8倍 ,回流次数 3次。
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2.3.3　正交验证试验及提取时间比较试验　按以
上最佳工艺 ,70%乙醇 ,提取 3次 ,加醇量 8 ,6 , 6倍 ,
对正交试验结果进行验证试验 ,同时对提取时间进
行比较试验。结果见表 5。结果表明提取 2 h最佳 。
表 5　正交验证试验及提取时间比较试验
Tab 5　Comparative experiment o f o r thogonality v erification
test and ex traction time
提取时间/ h 阿魏酸提取率/ % 川芎嗪提取率/ %
2 79.19 94.12
1.5 73.00 86.31
1 69.93 88.82
2.4　结果　以阿魏酸提取率为指标 ,回流次数和加
醇量差异有显著性 ,以川芎嗪提取率为指标 ,回流次
数差异有显著性 。综合考虑最终确定最佳提取工艺
条件为:乙醇浓度 70%,加醇量 8 倍 ,回流次数 3
次 ,每次 2 h。
3　讨论
当归与川芎经常配伍使用 ,用于补血活血 , 活
血行气等 。对当归 、川芎共同提取工艺进行研究在
现代中药研究中具有重要意义。
当归与川芎共同提取的常见方法有水蒸气蒸馏
法提取挥发油 ,水煎煮提取 ,乙醇回流提取 ,本试验
对以上几种提取方法进行了比较试验 ,以共同主要
成分阿魏酸及川芎主要成分川芎嗪为指标 ,结果显
示:(1)水蒸气蒸馏法提取挥发油和水煎煮提取由于
提取时间长 ,温度高 ,阿魏酸几乎无法保留 ,川芎嗪
提取率也较低 。(2)乙醇回流提取阿魏酸 、川芎嗪提
取率均比较高 ,可达到对其有效成分的充分提取 ,进
而对乙醇回流提取工艺参数进行了正交试验优选。
参考文献:
[ 1] 　中国药典.一部[ S] .2005:89.
[ 2] 　韩汉林 ,付长华.高效液相色谱法测定盐酸川芎嗪葡萄糖注射
液中盐酸川芎嗪的含量[ J] .江西中医学院学报 , 2004 , 8 , 16
(4):64-65.
[ 3] 　兰顺.高效液相色谱法测定复方川芎胶囊中川芎嗪的含量
[ J] .中国实验方剂学杂志 , 2004 , 10, 10(5):1.
[收稿日期] 2010-03-09
[ 作者简介] 杨远荣 , 男 ,硕士 ,副主任药师 , 电话:0716-8499992 , E-mail:yangy r1970@sina.com 　[ 通讯作者] 曾繁典 , 男 ,教授 , 电话:027-
83630652 , E-mail:fdzeng@163.com
兰索拉唑在健康受试者体内药动学和药效学
杨远荣1 ,吴健鸿2 ,汤绍迁1 ,任贻军1 ,李华荣1 ,陈海燕1 ,高逢喜1 ,黄陵生1 ,曾繁典2 　(华中科技大学同济医学院
附属荆州医院国家药物临床试验机构 ,湖北 荆州 434020;2.华中科技大学同济医学院临床药理研究所 , 湖北 武汉 430030)
[ 摘要] 　目的:研究兰索拉唑在健康受试者体内的药动学和药效学。方法:选择健康受试者 20 名 , 男女各半 ,随机分为兰索拉
唑组(30 mg)和奥美拉唑组(40 mg),给药后监测 24 h 胃内 pH ,并用高效液相色谱法测定兰索拉唑和奥美拉唑血药浓度 ,数据
分别用 SPSS 11.5 和 DAS2.0 处理。结果:兰索拉唑药动学参数为 AUC0-t :(7.2±3.9)mg·h·L-1 ;AUC0-∞(7.7±4.6)mg·h·
L-1 ;AUMC0-t(24.0±21.2);AUMC0-∞(33.2± 35.6);M RT 0-t(2.8±1.1)h;M RT 0-∞(3.4±1.8)h;t1/2(2.2±1.3)h;CL(5.3±
3.1)L·h-1 ;Cmax(2.3±0.4)mg·L-1 。奥美拉唑药动学参数为:AUC0-t(4.8±4.1)mg·h·L-1 ;AUC0-∞(4.6±4.2)mg·h·L-1 ;
AUM C0-t(11.0±15.1);AUMC0-∞(12.2±17.1);M RT 0-t:(1.8±0.8)h;M RT 0-∞(1.9±0.9)h;t1/2(1.1±0.6)h;CL(13.6±
7.4)L·h-1 ;Cmax(2.1±0.8)mg·L-1 ;给药后胃内 pH 明显升高 , 给药结束后 12 h 胃内 pH 仍分别达(5.1±1.6)和(3.9±1.9)。
结论:健康受试者体内血药浓度未能实时反映该药在人体胃组织中的浓度及抑酸效果 ,该药能蓄积在人体胃组织中并维持较
长时间的抑酸作用。
[ 关键词] 　兰索拉唑;药动学;药效学;高效液相色谱法
[中图分类号] R969.1　　[ 文献标识码] A　　[文章编号] 1001-5213(2010)21-1813-05
Pharmacokinetics and pharmacodynamics of lansoprazole in the healthy volunteers
YANG Yuan-rong 1 , WU Jian-hong2 , TANG Shao-qian1 , REN Yi-jun1 , LI Hua-rong1 , CHEN Hai-yan1 ,
GAO Feng-xi1 , HUANG Ling-sheng1 , ZENG Fan-dian2(1.I nstitutions o f Na tional D rug Clinical T rials , Jingzhou
Hospital A ffiliated Tongji Medical Colleg e o f Huazhong Unive rsity o f Science and Techolo lg y , Hubei Jing zhou 434020 , China;
2.Institute o f Clinical Pha rmacology , Tong ji Medical College of Huazhong Univ ersity o f Science and Techo lo lg y , Hubei Wuhan
434100 , China)
ABSTRACT:OBJECTIVE　To study pharmacokine tics and pharmacodynamics of lansoprazole in the healthy volunteers.METH-
·1813·中国医院药学杂志 2010年第 30卷第 21期 Chin H osp Pharm J , 2010 Nov , Vol 30 , No.21