全 文 ：的含谷幽醇进行 T L C 、 I R比较 ,结果两者 T L C一致 , I R
光谱一致 。 I R , ,袋奥e m 一 ’ : 3 7 3 6 ( o H ) , 2 0 3 6 , 2 8 5 2
(
一
C H
3
C H
C H
1 6 6 5 ( C一 C )
R
l理GS , 1 3 8 1
H
e H
一 ,
2 0 6 0 ( e 一。 ) , 8 0 0 、 e
/
R
,
_ /一 C 又M S m / e ( 相对强度 ) : 4 z d ( M 4 , 2 0 0 ) ,
R
”
3 9 6 ( 3 2
,
M
+ -
H
2
0 )
,
3 8 1 ( 1 8
,
M
干
H
ZO
一
C H
3
)
,
5 6 9 ( 1 1 )
,
3 2 9 ( 2 5 )
,
3 0 0 ( 2 2 )
,
2 8 9 ( 7 )
,
2 7 1 ( 2 5 )
,
2 7 3 ( 2 3 )
,
2 5 5 ( 4 0 )
,
1 5 9
( 1 6 )
,
1 0 7 ( 1 2 )
,
9 5 ( 1 1 )
,
8 1 ( 1 2 )
,
6 9 ( 1 0 )
,
5 7
C H
` ” , “ , 一 洛e H一 e H , , 5 5 ( 1 1 ) 。 ` , C N M R 一 D E p T
C l l 3
( C D C 13
,
6 p pm ) 显示有 2 9个碳 , 其中有 6 个一 C H 3 :
12
.
1 0 2
,
1 2
.
2 6 5 ( drJ 碳 二甲 基 ) , 1 9 . 4 6 7 ( 一 C H : -
C H 3 之甲基 ) , 29 . 8 6 4 ( 2 1一 C H 3 ) , 2 1 。 0 9 2 , 2 1 . 2 5 4
( 1 9
、
1 8两个角甲基 ) , 一z个 一 C H Z : 2 6 . 1 8 4 ( 一 C H Z一 M e
之 C H : ) , 2 8 。 2 9 2 ( 2 3 一 C H : ) , 2 8 . 9 4了 ( 2 2一
C H
: )
,
2 9
.
3 5 1 ( 1 6
一
C H : )
,
2 9
.
7 0 6 ( 1 5
一
C H : )
,
3 1
。
j 1 1 ( 1 2
一
C H : )
,
3 1
。
9 8 2 ( 1 1
一
C H : )
,
3 3
.
9 8 7 ( 1
-
C H Z )
,
3 7
。
2 9 1 ( 7
一
C H : )
,
4 2
.
3 3 0 ( 通一 C H : ) , 3 9 .
7 R3 ( 2
一
C H
: ) ; 9 个 = C H一 1 3 3 , Q Z纽( ) C 一 C l l 一 之
C H )
,
7 2
.
8 J 3 ( C H
一
O H )
, 厂6 . 9 0 2 ( 乏卜 C l压) , S C ,
7 9 3 ( 9
一
C H )
,
5 6
.
0 3 5 ( 1遭 C H ) , 5 1。 2 6 7 ( 1了 C蚤丁) ,
5 0
。
1 8 3 ( 2 0
一
C H )
,
4 8
。
4 8 8 ( 2 注一 C H ) , ;飞1 . 9 2邑
( 2 7
~
C H b 3 个 季 碳 : 1连0 . 8 17 ( ) C = C H 一 之 季
碳 , 2 3 7 . 2 5 7 ( 1 0 一 C ) , 2 2 9 . 3 8 6 ( 1 3 一 C ) 。 ’ H N 入住又
( C D C 13 ) 6 P Pm : 5
.
4 ( i H
,
d
,
C = C l l )
,
5
.
2 ( 2 1!
,
t
,
3 C H )
,
3
。
6 ( I H
一
m
, 重 水交换消失 , 一 O H ) ,
0
.
6 8 ( 6H
,
d
, 一
C H
一
( C H 3 ) : 之 二 个甲基 ) 。 综上所
述 , 确定结晶 l 为 p一谷街醇 。 ( 日一 s i t o s t e r o 一)
参 考 文 献
1 郭关琴 . 临界 C 0 2 萃取 一明日的新方法 , 中
美 S F E 技术交流会资料 , 1 9 9 2年 , 广州
2 M ar c is m s
. 利用超界 C O : 萃取夭然产物的最
佳化 , 中美 S F E技术交流会资料 , 1 9 9 2年 ,
广州
3 青篙素结构协作组 . 一种新型倍半菇内醋一
青篙素 . 科学通报 , 19 7 , ( 3 ) : 1 4 2
4 伍仁安 , 等 . 中草药鉴定学 , 上海 : 上海科
学技术出版社 , 1 98 6 : 5 1
ō\/玩
胖大海中多糖的成分分析和含量测定`
中国医学科学院药用植物资源开发研究所 ( 北京 1 0 0 0 9 4 )
陈建民 李文魁 沈一行 彭会明 . 笼 徐未坎什
胖大海为梧桐科苹婆属植物歇邵 c以 ia L y c 瓦。 p瓦于 溶解于 1 5 o m l 容瓶中定容 , 冰箱中保存备用。
ar H a n ca 的成熟种子 , 是我国重要的进 口南药之一 , 胖大海由我所巫金华教授和朱兆仪 教授鉴定为梧
主治干咳无痰 , 咽 痛音 哑 、 ’漫 性 咽 炎 、 热 结 便秘 桐科苹婆属植物 tS el^ uC zia L y比 。 p儿or a H a n ca . 的成
等 lt] 。 我们从中分离出的多糖 , 初步药理实验表明 : 熟干燥种子 。
具有一定的抗炎活性 。 中国医学科学院药植所 云南分 所有试剂均为分析纯 。
所引种 了这种植物 , 我们对国产与进 口 的胖大海的多 3 方法及结果
糖进行了成 分分析和含量测定 。 样品液的制备 称取 已粉碎过筛的胖大海1。。岛
1 仪器和药品 经石油 醚 ( 6 0一 9 0 0 ) 脱 脂 ( s o om l x Z ) , 每 次 回流
G C
一 7 A 气相色谱 仪 , S Q 一 2 0 4 气 相 色谱 仪 , Zh, 再用 80 % 乙醇回流提取 (5 帕 m主 x 2) ) 每次 Zh or
S P S一 1型色谱数据处理机 , 色谱 柱 ( 自涂 ) x E 一 60 , 药渣加蒸馏水于 90 ℃温浸 l h 公 , 不时搅伴 。 过滤 ,液体
Zo m x o
.
32 m m石英毛细管柱 , 液膜厚。 . 2 5林m 。 P u 一 减压浓缩至 2 50 m l , 用氯仿 : 正丁 醇 ( 5 : 1 )多次萃取除
80 o U v / vl s 分光光度计 。 去蛋白 , 活性炭脱色后加入 95 % 乙醉 使 其 含 醇量达
苯酚试剂 : 苯酚 2 0 9 加铝片 0 . 2 9 和 碳酸氢钠 80 % 。 静置过夜 , 过滤 , 粉末状沉 淀 先 后 用无水乙
。 . 1 9 , 蒸馏 , 收集 18 2℃馏份 。 称取 1 0 9 加水 1 5 0 9 醇 、 丙酮 、 乙醚洗涤 , 真空干燥即得白色粉末状胖大
一 一 一一一— 海多糖 。铃国 家自然科学基金资助课题 称取 15 m g胖大海多糖 , 以 l m ol / L H声 o ` 3m l回流
” 北京医科 大学分析教研室 水解 , 以碳酸钡中和后 ,取 1 5。司滤液 5。℃真 空 干燥 , 然
3 2 中药材第 17 卷第 8 期 1 , 9 乎午 。 刀
DOI : 10. 13863 /j . i ssn1001 -4454. 1994. 08. 021
表 1
项
胖大海多糖中三种单糖组 分 含量比
叹李糖 阿拉 伯沽 半乳糖
8 5 1 1 0 0
nō Q口
t` no. . 1奋 40山
.… O口八匕月任 1qé月任 001丫 t日… O内曰卜 QU 1 no
后加入 1. Om l醋配 :冰乙酸 :高氯酸 (1 0:5 1 : 0. 1)混合
液〔 , 1 , 溶解后静置 45 m in , 然 后加 入 0 . 凌m飞水使醋配
水解为醋酸 , 加入 1 . cm 1 C玉I Z C I: 振摇 , 分去 水层 ,
再用水洗 。 C H Z jC : 层转入 离心管 , 室温吹干 , 再加入
1
.
Om l C H ZCI
: 溶解乙酞化 产物 , 吹气浓缩至约50 协 l,
此浓缩液供气相分析 。
精密称取胖大海 粉 末 20 m g , 置园底烧瓶中 , 加
8 0% 乙醇 1 0 m l回流提取二次 , 每次 l h , 趁热过滤 ,
残渣以 80 % 乙醇洗涤 , 残渣 及滤纸转移至 烧瓶中 , 加
蒸馏水 1叮 m l , 加热提取 l h , 趁热 过滤 , 热水洗涤 ,
合并放冷定容为 2 0 m l 。 各种胖 大海同法处理供比色
法测定多糖含量用 。
定性分析 定性采 用标准品 加入法 。 在相同色谱
条件下 , 比较胖大海样品与该样品分 别加入各种单糖
标准品后所得到的色谱图 , 确定胖大海多糖中组分为
鼠李糖 、 阿拉伯糖 、 半乳糖 。
精密称取 1 4 . 5m g 鼠李糖 、 9 . s m g阿拉伯糖 , 8 . 7 m g
半乳糖配成 l om l水溶液作为标准品 , 与样品在同样条
件下 乙酞化后 , 精确吸取一定量进样 , 以每种单糖所有
峰面积的总和为定量依据 , 在同样色谱条件下 测定胖
大海样品对应各组分峰面积 。
多糖含量 侧定
标准曲线: 精密称取 1 05 ℃干燥至 恒 重的阿拉伯
糖 1 0 m g , 置 1 0 m l 容量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻
度 。 精密吸 取标 准 品溶液 3 0协l , 6 0卜1, 9比 l , i Zc协l ,
1 5 0卜 l , 1 8 0协i , 分置于 1 0 m l具塞试管中 , 各加蒸馏水
使体积为 2 . c m l , 再加苯酚试液 t . om l , 摇匀 。 迅速滴
加浓 H声o ; 5 . Om l , 摇匀后 , 放置 s m il , 置沸水浴
Em ln
, 取出冷却 。 另取蒸馏水 2 . Om l 为空 白操作 , 于
4 9 o n m 处测定吸光度 , 得一回归方程 :
A 二 5
.
5 9 5 1 x 2 0
一 。 + 2 6 . 2 0 4 x C (卜g ) , r = 0 . 9 9 9 1
含量测定 : 精密吸取供试液一定量 , 加水至 2 . 。
m l
, 按标准曲线项下方法测定 , 按 回归方程求出样品
供试液中阿拉伯糖的含量 , 再按下 式 求 出多糖含量
( 表 1 ~ 2 ) 。
1 6 4
1 4
。
:
.
tl`1
一 .n乙11
分于量
重量 ( n l g )
峰面积芳
峰而积
重量比
标准品样
座尔比
2
。
2 9
2
。
5 1
璐 峰积分面积为组分中对应 峰全部面 积的总和
表2 胖大海中多糖含量测定结果
来 源 多糖含 量 ( % )
进 口商 品 1 2 。 5 5
On厅`门ù11月钻Odo曰八匕
.…口Un甘n.片了1鑫. .上进 口商 品
( 购于北 京药材公司 )
( 购 于云南药材公司 )
柬埔寨 ( 药植所 云南分所提供
泰国 ( 药植所云南分所提供 )
国产 ( 药植所云南分所提供 )
义 F
X 1 00
3 结果与讨论
采用标准品加入法 , 比较样品和样品加入标准单
糖样品的气相色语图确定胖大海多糖由鼠李糖 、 阿拉
伯糖和半乳糖组成 。 通过对应各单糖所有吸收峰面积
总和之 比与标准品对照测得鼠李糖 : 阿拉 伯糖 : 半乳
糖的摩尔比为 1 : 2 . 5 1 : 1 . 28 (表 2 ) 。 此结果与 文献报
道 3[J 胖大海水解产物仅为阿拉伯糖 和半 乳 糖有所不
同 , 可能由于文献中没有先制备胖大海多糖 , 而且采
用纸层扫描法测定结果可能不够准确 。
目前常用来进行气相分析的糖衍生化方法 , 有硅
烷化和乙酚化两种 。 乙酞化条件也有所不同 , 我们对
阿拉伯糖曾试用了不同的乙酞化条件 , 均出现四个峰 ,
可能是多经基 乙酸化程度不同所致 , 不能得到单峰 ,
硅烷化也有类似问题 [’] 。
由于多糖中主要为阿拉伯糖 , 故以阿拉伯糖为标
准进行测定 , 结果见表 2 。 本法简便 、 灵敏 、 重现性好 ,
测定结果表明胖大海多糖含量范围 为 7 . 6 1%一 1 2 . 5
%
。 进 口胖大海中多糖含量稍高 , 国产胖大海仅有 7
个果实 , 代表性差些有待进一步采收样品加以证实 。
参 考 文 献
1 中国医学科学 院药物研究所编 . 中药志 . 第
三册 . 北京 : 人民卫生 出版 社 , 1 9 8理: 5 38
2 C h a d w i e k V S
, e t a l
.
C h e m i e a l A n a l v s i s
D一W多糖含糖 ( % ) C X
C 为供试液中阿拉伯糖浓度 ( m g / m ! )
D 为供试液的稀释 因素
F 为换算因子 ( 经测定 F = 1 . 57 )
W为样品重量 ( m g )
回收率试验 精密称取胖大海粉 末 15 m g 于园底
烧瓶中 , 加入一定量 的胖大 海 多 糖 , 按测定方法操
作 , 计算回收率为 98 . 1肠 。
中药材第 17 卷第 8 期 1 9 0 4 年 8 月 3 3
n aB d io lo g ie王 t lPo rPe rt io s cfE P G土 0 0。
Ga st ro en ie ro lo g y
,
1 9了7 , 7 3 : 2 4 1一 2选6
朱兆仪 , 等 . 两种胖大海的比较研究 . 中药
材 , 1 9 8 6 , 2 ( 4 ) : 2 6
M a s a s h i T o m o d
a , e t a l
.
P l a n t M u e i l a g e s
.
X I V
.
I s o l a t i o n a n d C h a r a e f e r i z a t i o n o f
a M
t l c o t LS P l y 只几 c e h a r i d e , `
、
L i! i u m
一
L 云之g l t ze -
o m a n n a n
, ,
f r o m t h
e B u l l b s o f L i l i u m L a
-
n e i f o 飞i u m . C ll e m . P h a r m . B ul l , 1 9 7 6 , 2 4
( 1 1 ) : 2 7 4 4~ 2 7 5 0
( 1 9 9 3
一 0 8一 0 6收稿 1 9 9 4一 0 2一 2 5修回 )
· 药理 ·
人参五灵脂配伍对正常小鼠免疫功能的影响’
湖南中医学院 ( 长沙 4 1 0 0 0 7 )
普耀部 部国华 唐忠林料 蒋茂恒村 张鹤鸣苦料 姜玉芳
摘要 采用正常小鼠进行人参五灵脂配伍免疫实验 。 通过以人参煎取液 、 五灵脂煎取液各 5 9 / kg ,
人参五灵脂合煎液 5 9k/ g , 10 9 k/ g ( 总含药量 ) 灌胃给药 7 天后 , 发现各给药组 对正常小 鼠免疫器官
发育 、 单核吞噬细胞系吞噬功能、 溶血素抗体形成均有显著增强作 用 ( p < 。 . 05 , 尸 < 。 . 0 1 ) 。 配伍组
与人参 、 五灵脂单煎液组比较无显著性差异 , 即人参五灵脂配伍后未呈免疫降低作用 。
关键词 人参 五灵脂 配伍 禁忌 免疫
祖国医学历来将人参五灵脂配伍作为中药配伍禁
忌 ( 十九畏 ) 。 然而历代不少文献对二者合用有确切
记载 1[] 。 现代临床二者合 用 , 也 常 可 获 得 满意 疗
效〔 2一们 。 近年来 , 国内学者对二者配伍 进行了一些药
理研究 , 但大多局限在毒性方 面 5[ 一 6 1 。 二者配伍对正
常动物免疫功能的影响迄今未见报道 。 我们通过近年
的研究发现 , 人参五灵脂煎剂对正常小鼠和大鼠无明
显毒性损害〔 ` 01 。 为了进一步从药物功效方面探讨人参
五灵脂的配伍实质 , 本文从免疫学的角度出发 , 观察
了人参五灵脂在配伍及非配伍情况下对 正常小鼠免疫
功能的影响 。
1 实验材料
药材
人参 : 为人参 p a n a x g艺s1I 翻咭 C . A . M e y . 的根 ,
产于吉林省抚松县 。
五 灵 脂 : 为 复 齿 裕 鼠 T r o g o p t e r u s 劣 a n 公h￡p e s
M il en
一 E d w ar ds
. 的干燥粪便 。 产于河北省赤峰县 。
以上药材均购自湖南省药材公司 , 并 经我院鉴定
教研室周天达副教授鉴定 。
试剂 瑞氏色素 ( 广州 8 3 1 2 0 2 一 5 ) ; 吉氏染色素
( 上海 5 5 0 6 2 5 ) ; 印度墨汁 ( 上海 8 2 0 5 1 5 ) ; 可溶性
淀粉 ( 广东台山 8 4 0 7 0 1 ) ; 5%鸡红细胞 ( C R B C ) 、
10 % 豚鼠血清 , 自制 。 其它试剂均为 A R 级 。
仪 器 7 2 1吃 A 型分光光 度 计 ( 益 阳分 析 仪器
厂 ) ; 光学显微镜 ( 江南光学显微镜厂 ) 多 分析天平
( 湘仪天平仪器厂 ) 。
动物 B A L B / C 纯系小白鼠 , 豚鼠 , 均购自湖南
医科大学 。
药物制 剂 人参单煎液 : 称取人参 (红参 ) 1 0 9 ,
蒸软 , 切片 。 加水适量 , 浸泡 60 m in , 然后于水浴 中
保沸 1 . 5 h , 纱布过滤 。 残渣加水适量 , 再煮沸 l h,
过滤 。 合并滤液 , 水浴浓缩至 10 0% ( W / V ) , 置冰
箱备用 。
五灵脂单煎液 : 取五 灵 脂 1 0 9 , 纱布包裹 , 加
水浸泡 30 m in , 直 火煎煮 2 次 ( 第 1 次 l h , 第 2 次
4 5 m in )
, 纱布过滤 , 合并滤液 , 水 浴浓缩 至 1 。。叮
( W /V )
。 冰箱保存备用 。
人参五灵脂合煎液 : 取上述人参 、 五灵脂单煎液
按 1 : 1 混合 , 摇 匀 , 置冰箱保存 。
以上制剂 , 在实 验 时 根 据 实 验 要 求 以蒸馏水
( D
.
W ) 稀释至所需浓度 。
2 方法与结果
衬 小鼠 兔疫 器官重量 的影响 取 21 士 3 9 小鼠 5。
只 , 雌雄各半 , 按体重 、 性别随机分为人参单煎液组
( 以下简称人参组 ) 、 五 灵脂单煎液组 ( 以下简称五
灵脂组 ) 、 人参 五灵脂合煎液低剂组 ( 以下 简称人五
3 4 中药材第 17 卷第 8 期 1 9 9 4 年 S 月