全 文 ：吉林农业大学学报 2X (衬 , 26 ( 6 ) : 6 3 2 一 6 3 5 ,翻 l
oJ “砌正of iuJ n Ag irC 政“耐 nU 诚 sr 勿
兔眼越橘芽的诱导及再生 ’
刘树英’ , 安 伟’ , 孔令学’ , 李亚东’ ” , 张志东’ , 林东慧2
( 1
. 吉林农业 大 学园艺学院 , 长春 13 0 1 18 ; 2 . 吉林市船营区林业局 , 吉林 13 20 1 1)
摘 要 : 利 用组织培养方法研究 了影响兔眼越橘 芽诱导 、 芽增 技及其植株再 生的主要 因素 。 结 果表明 : 在芽
诱导和摧代培养基中添加 N从 、 2币有利 于兔眼越橘 芽的诱导 , 2币对再 生能 力其有保持作用 ; 外植体基 因型
对长期培养的 芽再 生能力的影响 不 大 ;不 同的外源激素 ( N从 , iZ p , zr 等 )影 响 芽分化频 率 , 其中 iZ p 可明显提
高芽分化组率 ; 4 . 3 , 5 . 0 比 光照沃度处理时胜代培养效果较好 ;在生根培莽基 中添加 适黄 的 IBA , N AA 可有
效促进生根 , BI A 效果好于 NA A 。
关 . 询 : 兔眼越横 ; 芽诱导 ; 芽分化 ; 植株再生
中圈分类号 : 肠 63 . 9 文献标识码 : A 文 t 绷号 : l X( X) . 5684 ( 2以抖 )协肠3 .2 以
In d u Ct io n a n d R e g e n e瞰 io n o f R a b b it e y e B lu e b e r yr B u d s
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一厂嗯 , , AN W e i , , K o N G U n g 一 x u e , , u Y a 一 d o n g , ’ ` , Z H A N e Z hi一 do n g , , u N D七n分 h滋 ,
( 1
. 肠止叭卯 of oH材 ic政 u 、 , ilJ in A夕交政 “ alr 刀h i优 sr iyt , C入“ 昭 c人“ n 130 118 , hC a`n ; 2 . oF , 勺 uB -
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,
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,
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A b s tar tC : Se ve la faC t
o 比 o n a fe e it n g abr b i t e” b lu e be 卿 b u d i n d u e t i o n , d ife 花 n t i at io n an d p lan t er 罗 n -
e ar t ion 蛇 er s ut d i e d . hT e er s u lst idn i e at ed ht at su P Pl e me n t i n g t h e i n d u e t io n an d s u bc u l t u er m ed i u m 初ht
N AA
,
Z ip be n ief ted ht
e i n d u e ti o n of b l u e be 叮 b u ds , b u t Z i p anI i n而en d ht e ab i l iyt Of d i fe er n t iat i o n .
lP ant so
u比 e e s伴 e i al l y 罗n o t y p吧 p l a y e d on olr e i n b u d d i fe er n ti at i o n of l o n g 一 t e mr e u l tu er ; D ife er n t ho r -
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,
Z i p an d 盯 e et . ) a fe e te d bu d d i fe er n t iiat on fer q u e n e y . A mo n g ht e m , Z ip icn er ase d t he
玩 q u e n e y Of b u d fo n 的 a tion . nI au t u mn , ht e e却 lan t per 一h an d led b y lo w 一 t e m伴art u er e o ul d e hn an e e b u d
d硫er n it at i o n fer 叫 e n e y ; A t ht e s u bC ul ut 二 s往唱e , we fo 助d that 4 . 3 , 5 . 0 k lx l ihg t i n te n s i yt was be t te r
ht an hOt
e 比 ; S u P P le me n tign mo t m ed i u m iw ht IB A o r NA A i n e easr
d ht e fo r’ma t ion Of 树 , b u t s u P P le -
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n it gn 伽 t m e d i u m 初ht IB A was be t e r .
K e y we dsr
:
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t e y e bl u e be 叮 ; bu d i n d u e t i o n ; b u d d政 er n ti iat o n ; p lan t er 罗en耐 o n
兔眼越擂 ( 认鱿以成“ 。 as hie eR ad e) 为杜鹃花科
( irE
c
~
)越橘属植物 , 原产于美洲亚热带地区 ,
是 目前广泛栽培 的一个重要种 ,适宜 于热带及亚
热带丘陵地区种植 。 在我国主要适于长江流域 以
南 、华南等地 区的丘陵地带栽培 。
兔眼越播的繁殖方法 主要有扦插繁殖法 、 嫁
接繁殖法及组织培养繁殖法 。 扦插和嫁接繁殖方
法繁殖速度慢 、短期 内不能满足生产需求 ,而且苗
木生长势 、果实 品质等诸 多方面较组培苗有不足
之处 [” ] 。 利用组织培养快 繁已有报道 , 幼比en 〔’ 〕
提出用改良 nK 叩 培养基繁殖兔眼越橘的体系 , 但
其繁殖周期过长 ;金炜等 {’] 研究 了兔眼越橘快繁
` t 砚目 :
作衡蔺介 :
收箱 日期 :
通讯作者
国家科技部农业科技成果转化项目 (仍 E FN Z I Z刀义X) 7 7 ) , 吉林省科技厅国际合作项 目 (双刃义刀似 ) , 国家人事部 留学人 员
择优项 目 . 长春市科技局项 目 (长科合字第 03 一 肠3 N 2)
刘树英 ( 19 7今 ) ,女 .硕 士 ,助教 ,研究方向 : 园艺植物组织培养 。
么义抖~ 0 8 .的
DOI : 10. 13327 /j . j jl au. 2004. 06. 011
第 6 2卷 第 6期 刘树英等 :兔眼越擂芽的诱导及再生
体系的最佳激素组合 ;刘树英等 {’ ]对兔眼越橘初
代培养的基本 培养基进行 了筛选 ,但并未对快繁
体系作进一步的探讨 。 本试验在前人研究 的基础
上 ,对兔眼越橘再生体系 的几个影响因素进行 了
探讨 。
1 材料与方法
,
.
, 试材
供试兔眼越橘品种 oP dw e ht lu e (粉蓝 ) 、 C ho ice
(精华 ) 、 Gadr e bn l u e (园蓝 ) 、 阮而 e r (杰兔 ) 、 D e li t e
(巨丰 ) 、 B al d衍 n (芭尔德温 ) 、 Bl u e b e l le (蓝美人 ) 均
由南京植物所赠送 , 于 ZIX刃 年 3 月栽植 于吉林
农业大学浆果园 。
,
.
2 试验处理
,
.
2
.
1 不 同基本培养墓 对兔眼越橘 茎段培养的
影响 试材为 Cho ic e , 采用 WMP , M S , A dn e sr on ,
肠叩 4 种基本培养基 , 蔗糖 30 以L , 琼脂 6 . 5 砂L ,
pH 5
.
4
,培养 40 d 后观察芽的生长情况 。
1
.
2
.
2 不 同激素组合对兔眼越橘茎段萌芽诱 导
的影响 试材为 Cho ic e , 以 WMP 为基本培养基 ,
采用 3 种激素处理 : 激素 iZ p ( 2一异物烯腺 嗦吟 )的
质量浓度为 5 , 10 , 巧 , 20 吨 I L ; N A A 的质量浓度
为 0 . 01 , 0 . 02 , 0 . 03 , 0 . 04 呵 L ; rZ 的质量浓度为 1 , 2 , 3 , 4 m g儿 。 培养 40 d 后调查诱导情况 。
,
.
2
.
3 不 同品种 对茎段萌芽的影响 将 7个不
同品种兔眼越橘茎段分别接种在 w MP + 巧 m岁L
iZ p + 0
.
02 m g l L N AA 培养基 上培养 40 d ,观察芽
的生长情况 。
,
.
2
.
4 外植体预 处理对 芽诱 导的影响 试材为
Cho ic e
, 取 幼 嫩枝 条 在 4 ℃ 低 温 下 进 行 预 处 理
( 10 h)
,以室温处理为对照 , 培养基同 “ 1 . 2 . 3 ” 项 ,
培养 40 d 后观察芽的生长情况 。
1
.
2
.
5 不 同激素组合对 茎段 增殖的影响 在基
本培养基 w叹 中分别加人 Z i p 10 , 15 , 20 m gl L ;
N AA 0
.
0 1
,
0
.
0 2
,
0
.
0 3 m gl L
,接种 e h o ie e 茎段 , 培养
40 d 后 ,调查芽分化数 , 统计增殖系数 。
,
.
2
.
6 不 同光 照 条 件 对 芽增 殖 的影 响 取
Cho i e e 茎段接种于 w四 + 15 m gl L Zi p + 0 . 0 2 m g l L
NA A培养基上 , 光 照 强 度设 1 . 50 , 2 . 95 , 4 . 30 ,
5
.
0
,
10
.
50
,
12
.
0 k h 6 个处理 , 培养 40 d 后 , 调
查芽分化情况 。
,
.
2
.
7 不 同激素组合对兔眼越橘培 养物 生根的
影响 以 114 W PM 为基本培养 基 , 分别加入 B A
o
,
0
.
l m创L ; N A A 0 . 1 , 0 . 2 , 0 . 3 m gl L 共 6 个处理 ,
接种组培茎段进行生根培养 , 40 d 后统计生根率。
1
.
2
.
8 兔眼越橘瓶外生根 状况 将组培幼枝剪
成 3 。 m 的段 ,然后在不同质量浓度的 BI A 溶液内
快速浸蘸基部 , 再插人 72 孔 的育苗盘中 , 盘 内盛
装腐苔醉 、 锯末或河沙等基质 ,盘上方分别或集中
扣小拱棚以保持湿度 , 自然采光 , 每 7 d 喷洒 l 次
1 0以〕倍多菌灵药液 ,待 O4 d 后观察生根率 。
2 结果与分析
2
.
1 芽的诱导
2
.
,
.
1 不 同基本培养基对兔眼越橘 茎段培养的
影响 接种 于 M S , W PM 的试 材萌芽率分别为
72
.
5% 和 73 . 8% , 2 处理间差异不显著 , 都适于兔
眼越橘茎段 萌芽的诱导 , 但从芽 的长势看 , WMP
更好 。 A dn e 、 on 和 nK 叩 不太适合兔 眼越橘茎段
诱导萌芽 , 其萌芽率与 M S , W PM 相 比较 差异显
著 (表 l ) 。
衰 1 不 同鑫本培养甚对免眼越栩茎段培养的影晌
T sb 拍 1 . 〔什以鹅 of va ir ou s b8 s沁 m ed ia on ar 以城e y e 以ue ·
be 叮 s阮以 翻。 m CU 加er
基本培养基
B as i c n le di u m
接种数
NO
.
of
e x P】助st
萌芽数
NO
.
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肠
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萌芽率 ,%
氏概 n t叫乒 of
bu d fo n阴曰 t i o n
MS 40 2 9 72
.
5
.
73
.
8
.
A耐 e r以〕 n 引」 13 32 50
K n o p 4 2 1 1 26
.
2`
2
.
1
.
2 不 同激素组合对芽诱导的影响 试验结
果表明 ,在相 同条件 下 , iZ p 质量浓度为 巧 吨儿 、
zT 质量浓度为 3 州 L 对芽的萌发有利 ,萌芽率分
别为 85 . 3 % 和 73 . 5 % , 正常芽分别 占 75 . 9% 和
68 %
, 分别有 40 % 和 30 % 的芽能 展开 , 但用 iZ p
处理的长势好于 ZT 处理 。 质量浓度过高或过低 ,
正常芽的 比例明显下降 。 低质量浓度 的 N AA 对
芽萌发有促进作用 。 由表 2 可见 : 适宜兔眼越擂
茎段芽萌发 的激素配 比为 巧 m砂L iZ p + 0 . 02 n喇 L
N AA
。 在 iZ p 为 巧 州 L 时 , 萌芽率最高 , 正常萌芽率也高 , iZ p 的质量浓度过高或过低 , 其萌芽率
均明显下降 。 在 iZ p 质量浓度相 同的情况下 , 含
.0 02 m以L N AA 的 培 养 基 其 萌 芽 率 略 高于 含
0
.
03 m岁L N A A 的培养基 。 综合分析认为巧 m g儿
iZ p + 0
.
02 mg lL N A A 较适合芽的萌发与生长 。
6 4 3吉 林 农 业 大 学 学 报 刀义娜年
裹2 不同滋资组合对免眼越栩茎段萌芽的影晌
T址触2. 〔拍湘相 of厅. 旧0 5 山 x笼旧 t ra t io们旧 of Va味筑. 伙川朴以拍` m以 K ls i闻嘴曰 扮侧 m ra址城 e y e以州睦拍卿. 伙” 怕
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接种数
N O
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萌芽数
N o
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拓 n n时 i o n
萌芽率 l%
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正常芽数
NO
.
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正常芽率 l%
eP欣 n l叫乒 of加爪囚 卜.讨 .
5 0
.
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0
.
02
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.
02
6 1
.
8
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5 2
.
3
7 5
.
9
1292198618为50734
0
.
02 翻 . 7 54 . 5
0
.仍 5 5 . 9 4 7 . 3
0
.
03
0
.
03
5 2
.
9 5 5
.
6
76
.
5
l 0
l 9 7 3
.
1
48 4二9170730
.
03 5 2
.
9
orls加510
0
.似 5 8 . 8 55 0
0
.位
0
.
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6 1
.
8 42
.
7
7 3
.
5 6 8
.
0
O 02 5 8
.
8 5 0
.
0
0
.
03 50
.
0
0
.
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.
9
47
.
1
3 8
.
9
0
.
03 6 1
.
8 6 1
.
9
4 0
.
03 34 16 47
.
1 5 3 1
.
8
2
.
1
.
3 不 同品种 芽诱导的差异 比较 对 7 个兔
眼越播品种进行茎段萌芽诱导 4O d 后 , 调查萌芽
率 ,其结果经显著性 t 测验差异不显著 (表 3 ) ,可
见兔眼越播茎段芽的萌芽率与品种无关 。
衰 3 不同免眼越栩品种在茎段蔺芽时的整异
的缘故 , 或是低温解除了高温胁迫 ,使外植体处于
旺盛的生长状态 ,减少了褐变的发生 。
衰 4 外植体低通预处理对芽增殖形晌
T吐自 4 . E角翔触 of 幻w tef 娜拍m加 er ot e喇an t 翻 以托怡 们 -
d J 蔑心 伽抓 r创比成甸阳 bl u以拍 fyr
下吐翻 3 . 〔价鱿加 of d附8戊叭 t CU 州沁日 sr On bU dS idn 几目目 介口m
旧栩城钾 . bI Oet 拍叮 6阮d tS . 川防 处理T n , 山旧 e nt
接种数
N O
. 过
萌芽数 拐变率 /%
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N O
. 试
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.
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福变数
N o
.
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萌芽率
l %
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品种 接种致
NO
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萌芽数
NO
.
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萌芽率 ,% 一
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常沮
N o ur 目 30 12 20 40 肠 . 7
证 . 声扭 t u er
2
.
2 芽的增殖
2
.
2
.
1 激紊对芽增殖的影响 由表 5 可以看出 ,
不同激素组合均能分化幼芽 , 但以 or 州 L iZ p 十
0
.
02
n l
gl L N A A 的增殖系数最高 , 可达 到 3 . 25 , 而
含有 20 毗 I L iZ p 的组合增殖系数最低 ,说明高质
量浓度的 iZ p 会抑制芽的分化 。
5264研肠8刀26317950ùóó
2
.
,
.
4 低沮预处理对 芽诱 导的影响 试验结果
表明 , 经 4℃ 低温处理的枝条较常温处理萌芽率
高 ,揭变率低 (表 4 ) ,可能是低温抑制多酚氧化酶
第 6 2卷 第 6期 刘树英等 :兔眼越播芽的诱导及再生5 3 6
裹5 不同滋索组合对免 眼越拐茎尖增殖的影晌
下刊以e 5 .E 月e C加f d o附e r曰欣h o n”Oe c o nmb ia nt i o nS o n rt a 角吮e e yb lue e b y rsh (幻t 柱p 『娜扣e n ra 七。
p ( Zp i) , (吨 · L一 ’ ) 户( N A ^ ) , (吨 · L 一 ’ ) 接种数N O . of e xP lan st 分化芽数N o . o f b u d d ife 花 n t i a t i阅
增殖系数
M u l一i Pl icat ion
e此 m e i e n l
10 0
.
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.
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.
25
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0 02
0
.
03
0
.
0 3
2015
20 0
.
0 3 4() 47 1
.
18
2
.
2
.
2 光照 强度对芽增殖的影响 本试验结果
表明 , 4 . 3 , 5 . 0 k h 光强处理不仅芽增殖系数高 ,
而且生长势强 ,植株颜色正常 , 而其余几个处理则
明显不如此 2 个处理 (表 6) 。
裹 6 不同光照 强度对芽增殖的影晌
T a以e 6 . 任竹以怨 ot d川e r日成 勺心h l int en s币es on s h( 泊 t Up 旧ge en 旧t祀旧
光服强度kI h
U协 t in * e画 t y 接种数N o . of ex 讨的 .
分化芽数
NO
.
of bu d
dife er
n t iat i即
增殖 系数
M u l t iPl i
e at ion
e沈币 e i e n t
培养物生长状况
S at t u . of . h。 叻
分枝少 ,生长势强 ,颇色黄绿色
分枝少 , 生长势中等
分枝多 ,生长势强 ,翻色绿色
分枝多 , 生长势强 ,颇色绿色
分枝中等 . 生长势中等 . 翻色发黄
分枝中等 , 生长势中等 ,妞色发黄
l43osol
4
.
0
4
.
50
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.
50
2
.
9 5
4
.
30
5
.
0
! 0
.匆
! 2 0
2
.
3 生根和移栽
2
.
3
.
, 瓶内生根 不同激素组合生根率差异较
大 (表 7) 。 在 1 14 WMP 中单独加人 N A A 生根率
均较低 ,加人 B A 后生根率上升 , 最佳的激素组合
为 0 . 1 11喇 L B A + 0 . 3 mg 几 NAA , 生 根率 可 达
4 2
.
9 %
o
衰 7 不同傲索组合对免眼越拐培养物生根的影晌
下吐触 7 . E角湘伪 Of 厅旧 5 8 0 以洲蔑价 tr日t io n of va iOr U S ho rm o n e S
m 旧以晰 e y e bl u 6t 拍叮 内 n let 『。 改s
2
.
3
.
2 瓶 外 生根及 移裁 生 根 率结 果表 明 :
1
.
5
,
2
. 。 砂L BI A 浸蘸处理 的生根效果较好 , 可达
到 80 % 以上 (表 8 ) 。
衰 8 免暇组一瓶外生根状况
下曲!e 8 . S ha at 七防 of 倒比 e y e bl u et 拍 fyr 『以川 gn ex J 七。
p ( IB A )
(mg
·
L
-
扦擂枝数
N O
.
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生根数
N O
.
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川班 i昭
生根率 l肠
氏~ 卿乒of or d ign
0
.
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.
4
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·
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-
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( mg
·
L
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接种数
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.
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生根率 l肠
R ot ign晌 u e cn y
3 1
.
9
8
.
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.
3
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.
4
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.
0
2 5
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5 1
.
4
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3
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.
2
(下转第 64 1页 )
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.
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0.0.
第2 6卷 第 6期 黄敏玲等: 百合顶芽离体诱导小鳞茎及开花球培育4 61
稳定 ,证明本试验方法是可行的 ,可 以在较短时间
内萦育出大量优质百合种球 。
今考文献 :
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(上接第 6 35 页 )
通过对表 7 和表 8 的数据分析 , 我们认为瓶
外生根比瓶内生根更适合于工厂化生产 , 其优点
是简化了程序和操作方法 , 可显著提高工作效率 ,
省去培养基及相应设备 ,能降低成本 , 便于大量生
产 ,生根后的组培苗移栽成活率可达 10 % 。
用的瓶外生根方法使培养成本降低 ,有利于进行
工厂化育苗 。
3 小 结
通过对兔眼越橘组织培养的几个影响因素的
研究 , 首次确立 了兔眼越橘微芽繁殖程序 , 得出各
个阶段的生产条件 : 外植体建立 阶段适宜培养基
为 w p M + 15 m g l L iZ p + 0 . 02 m gl L N AA ;增殖阶
段适宜培养基为 w MP + 巧 m创L iZ p + 0
.
02 m岁L
N AA
, 光照 3 . O kl : ;生根阶段采用瓶外生根 , 扦
插时以 BI A 1 s o m创L 进行浸根处理 。 此组培程
序与前人研究 [’一 的组 培程序的不同之处在于采
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