全 文 ：乌梅 20 g，白芍 20 g，麦门冬 15 g，栀子 15 g，石韦20 g，
蒲公英 20 g，白花蛇舌草 20 g，甘草 10 g。7 剂水煎，每
日 2 次分服。
2010 年 3 月 28 日二诊，用药后自觉所有症状有
所好转，患者要求继续副药。继服前方 7 剂后，已无尿
频、尿急症状，入夜能够安睡，腰酸乏力明显缓解，尿检
白细胞阴性。更改前方，以扶正为主，巩固疗效。处
方:党参 20 g，黄芪 20 g，白术 20 g，山药 20 g，茯苓
15 g，石莲子 20 g，石韦 20 g，乌梅 20 g，蒲公英 20 g，甘
草 10 g。再服药 2 周，嘱其生活规律，预防感冒，增强
体质，多饮水勤排尿。用药后 6 周随访，一切正常;半
年后电话咨询，再未犯病，告愈。
按语:反复发作的尿路感染、慢性肾盂肾炎，多属
于中医劳淋范畴。初始之因，皆由下焦湿热，热结膀胱
而成;患者又因近期反复发作及抗生素治疗，抗生素临
床观察相当中药苦寒之品，频繁使用势必伤及正气，致
使气阴两伤，可谓不离乎热，又不止于热。方选党参、
黄芪、白术、山药、甘草，益气固本;白芍、乌梅、麦门冬，
补养阴精;栀子、石苇、公英、蛇舌草，专事清热除邪;石
莲子、茯苓，利湿清热而补虚损。初诊治疗期间，病人
正值正气虚邪气实，治疗则扶正与祛邪并重。实邪易
去，正气难复，用药后实邪症状迅速退却，故逐渐调整
为扶正为主，提高全身和局部免疫功能，使病情不再
复发
檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱
。
专 题
尖叶假龙胆醇提物含药血清对 A549 细胞凋亡
和细胞周期的影响
芦冲，张睿苏，高彦宇，胡晓阳，马育轩，曹明明，赵志宏，管伟，王琳，李冀*
(黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:探讨尖叶假龙胆醇提物(EEGA，ethanol extract from Gentianella acuta)含药血清对人肺癌
A549 细胞株诱导凋亡和影响细胞周期的作用。方法:采用四甲基偶氮盐(MTT)比色法检测 EEGA含药
血清对 A549 细胞作用 24 h、48 h、72 h的增殖抑制率，使用流式细胞仪观察 EEGA 含药血清处理 A549
细胞 48 h后，细胞凋亡率和细胞周期阻滞率变化的检测。结果:MTT 显示 EEGA 低、中、高剂量含药血
清都能抑制 A549 细胞增殖(P ＜ 0． 05)，其抑制率与作用时间相关。低、中、高剂量含药血清处理 A549
细胞 48 h后凋亡率显著高于空白组(P ＜ 0． 05)，同时低、中、高剂量含药血清处理 A549 细胞 48 h 后，
G0 /G1 期细胞明显较空白组增加(P ＜ 0． 01)，提示 EEGA含药血清可促进细胞凋亡，并且将细胞生长周
期阻滞于 G0 /G1 期。结论:尖叶假龙胆对人肺癌 A549 细胞有抑制作用，机制可能与抑制细胞生长、阻
滞细胞生长周期及诱导细胞凋亡有关。
关键词:尖叶假龙胆;含药血清;细胞凋亡;A549 细胞;细胞周期
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2016)03 － 0068 － 04
作者简介:芦冲(1986 －)，男，博士研究生，主要研究方向:方剂配伍规律及药效物质基础研究。
通讯作者:李冀* (1960 －)，男，教授，博士研究生导师，主要研究方向:方剂配伍规律及药效物质基础研究。
收稿日期:2015 － 12 － 21
修回日期:2016 － 01 － 10
Effect on Medicated Serum of Ethanol Extracts from Gentianella Acuta
for Treating A549 Cells in Apoptosis and Cycle
LU Chong，ZHANG Ｒui － su，GAO Yan － yu，HU Xiao － yang，MA Yu － xuan，CAO Ming － ming，
ZHAO Zhi － hong，GUAN Wei，WANG Lin，LI Ji*
(Heilongjiang University of Chinese Medicine，Harbin 150040，China)
·86·
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016

Abstract:Objective:To investigate the effect of medicated serum of ethanol extract from Gentianella acuta
(EEGA)on growth inhibition and induced apoptosis of human Lung cancer A549 cells． Methods:The MTT
method was used to detect the cell growth inhibition rate after 24 h，48 h and 72 h，and flow cytometry instru-
ment was used to observe the changes of apoptosis and cell cycle arrest of A549 cells after serum containing
EEGA． Ｒesults:MTT showed that serum containing EEGA with low，medium，high doses could inhibit the pro-
liferation of A549 cells (P ＜ 0． 05)，which was related to the function time． According to low，medium and high
dose drug － containing serum treatment after 48 h A549 cell apoptosis rate was significantly higher than that in
the blank group (P ＜ 0． 05)． At the same time according to low，medium and high dose of medicated serum
processing A549 cells after 48 h，G0 /G1 phase cell obviously increased than that in the blank group (P ＜
0. 01)． It showed Gentianella acuta could promote cell apoptosis，and arrested in the cell cycle in G0 /G1
phase． Conclusion:Gentianella acuta has an inhibitory effect on the human lung cancer A549 cells，and the
mechanism may be related to inhibiting the growth of cells，blocking the cell cycle and inducing apoptosis．
Key words:Gentianella acuta;Medicated serum;Cell apoptosis;A549 cells;Cell cycle
尖叶假龙胆(Gentianella acuta)为龙胆科(Genti-
ananceae)假龙胆属(Gentianella Moench )的一种以干
燥全草植物入药的蒙、藏药，别名苦龙胆。蒙药中称其
为“阿古特 －其其格”，藏医中称为“桑地格”。味苦，
性凉，功用清热利湿，利胆退黄，健胃，愈伤［1］。现代
药理学发现其主要含(口山)酮类化合物、黄酮类化合
物、环烯醚萜类化合物、三萜类化合物等。肺癌是源自
支气管黏膜上皮的恶性肿瘤，男性肺癌发病率和死亡
率均占所有恶性肿瘤的第一位，早期诊断手术治疗是
延长生命的关键。可见肺癌是威胁人类健康的一种常
见病。化疗是肺癌的主要治疗方法，90%以上的肺癌
需要接受化疗治疗。化疗药物不仅抑制人体免疫力，
而且需要长期大量服用，严重损害肝肾功能，本课题组
利用含药血清方法学发开本药物的抗肿瘤作用，让具
有复杂成分的中药简单化并且作用于单一的肿瘤细
胞，又能联系动物整体作用。体内外结合研究，初步研
究其在肿瘤方面的作用。
1 实验材料
1． 1 动物和细胞
成年雄性清洁级 SD 大鼠 40 只，体质量 220 ～
250 g。由哈尔滨医科大学动物实验中心提供。动物
许可证号:SCXK(黑)2013 － 001。人肺癌细胞 A549
由本实验室常规培养保存。
1． 2 药物和试剂
尖叶假龙胆购于内蒙古根河市，经黑龙江中医药
大学药用植物教研室樊锐峰老师鉴定为龙胆科尖叶假
龙胆 Gentianella acuta (Michx．)Hulten 的全草。MTT
(biosharp公司);凋亡试剂 Guava Nenxin Ｒeagent(Cat
No． 4500 － 0450 美国 MILLPOＲE 公司);周期试剂
Guava Cell Cycle Ｒeagent (Cat． No． 4500 － 0220 美国
MILLPOＲE公司);ＲPMI Medium Modified(HyClone 公
司) ;四季青胎牛血清(Cat:20150529 浙江天杭生物科
技有限公司);氟尿嘧啶注射液(10 ml，0． 25 g，Cat No
FA141112，上海旭东海普药业有限公司);青霉素链霉
素混合液(Cat No:Top0016，biotopped 公司);，胰酶细
胞消化液(Cat No:C0201，Beyotime 公司);DMSO
(biotopped公司)。
1． 3 仪器
TC2323 二氧化碳培养箱(美国 SL);DL － CJ －
2NDI洁净工作台(北京东联哈尔仪器制造有限公
司);酶标仪 infinite M200PＲO(瑞士 TECAN 公司);流
式细胞仪 Guava easyCyte(美国 Millpore公司);低温高
速离心机 MIKＲO 220Ｒ(德国 Hettich公司);细胞培养
瓶 /管(NEST公司);细胞培养板(Coster 公司);旋转
蒸发器 ＲE52CS － 1(上海亚荣生化仪器厂);超纯水仪
(美国密理博公司)。
2 实验方法
2． 1 尖叶假龙胆醇提物制备
取生药材 250 g，适当粉碎，加 20 倍量 70%乙醇，
封口浸泡 2 h，煎煮 2 h，冷凝回流提取两次，合并两次
煎煮液，过滤除渣，旋转蒸发，收干到无醇味，加入超纯
水稀释成浓度为 1 g /ml。
2． 2 含药血清制备
采用李仪奎通法［2］，取成年雄性清洁级 SD 大鼠
40 只，随机分成四组:空白组和 EEGA 低、中、高剂量
组，每组各 10 只，空白组灌生理盐水，每 100 g 大鼠严
格按 1 ml灌胃，EEGA高剂量组给药量(20 g /kg)相当
于一个 70 kg 成人一天服用 10 g 生药的 20 倍左右;
EEGA中剂量组给药量为(10 g /kg)相当于成人的 10
倍左右，EEGA低剂量组给药量为(5 g /kg)相当于成
·96·
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine

人的 5 倍左右。前期急性毒性试验尖叶假龙胆最大耐
受量剂量是每日 1． 8 g /20 g。灌胃前禁食不禁水，保
证大鼠对药的充分吸收，2 次 /日，一共 3 天，末次灌胃
1 h后，3%戊巴比妥钠麻醉(30 mg /kg)，无菌条件下
腹主动脉采血，放置 4℃冰箱静置 3 h，等血液凝固后
剔除血块，3000 r /s，15 min，4℃离心，抽取上清液，
56℃，30 min水浴灭活，针式 0． 22 μl 滤膜除菌，分装
于 1． 5 ml EP管，冻存于 － 20℃冰箱备用。
2． 3 A549 细胞培养和分组
人肺癌 A549 细胞株，使用 10%胎牛血清含有双
抗的 ＲPMI 1640 培养基，放于 37 ℃、5% CO2、95%以
上湿度条件下培养，待细胞生长至近 70% ～ 80%左右
时，PBS洗两遍，1 ml 胰酶消化适当时间，均匀吹打收
集细胞于 15 ml 离心管，加至 10 ml 完全培养基。
1000 r /s，3 min，离心后弃上清，1 ml 完全培养基重悬
细胞，分装于 3 个新的培养瓶中，2 ～ 3 d传代 1 次。传
3 代后进行下述实验，本实验共分为 5 组:空白组、低
剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组。空白组使用
加有 10%空白血清的 1640 培养液，低剂量使用 10%
EEGA低剂量组含药血清，中剂量使用 10% EEGA 中
剂量含药血清，高剂量使用 10% EEGA 高剂量含药血
清，阳性药(50 μg /ml)使用 10%空白血清加氟尿嘧啶
注射液(25 μg /μl)。
2． 4 MTT法检测 A549 细胞活力
取处于对数生长期的 A549 细胞，PBS 清洗 2 次，
胰酶消化，完全吹打，用完全培养基调正细胞密度为
5 × 104个 /ml，每孔 100 ul，铺 96 孔板，置于培养箱
24 h，弃掉原培养液，分别加入提前配好的空白组、低
剂量组、中剂量组、高剂量组、阳性药组含药血清新鲜
ＲＲMPI培养基，同时设调零孔，调零孔除不加细胞外，
其余条件与阴性对照组相同。每组平行设置 6 个孔，
置于孵箱培养 24 h、48 h、72 h 后，每孔加 5 mg /ml
MTT溶液 20 μl，放入培养箱继续培养 4 h，取出 96 孔
板，弃掉其中溶液，加入 100 μl DMSO，放入酶标仪检
测，设置震荡 10 min，在 490 mm波长下，检测 96 孔板
每孔的 OD 值，按公式计算细胞抑制率(A)值，A =
(OD空白组 － OD实验组)/(OD空白组)× 100%，每组重复
3 次。
2． 5 A549 的凋亡和周期检测
取处于对数生长期的人肺癌细胞检测凋亡率，铺
于六孔板，24 h后待细胞贴壁，弃掉废液，分别加入空
白组含药血清和低、中、高浓度含药血清 10% 的 ＲPMI
培养液 2 mL，培养 48 h 后，1000 r /s，离心 5 min，PBS
洗 2 次，收集细胞 2 × 104 ～ 1 × 105个 /100 μl，用 PBS
重悬，另加入凋亡试剂 100 μl，最后总体积 200 μl，室
温避光孵育 20 min 后，立即在 1 h内完成上机检测。
取处于对数生长期的肺癌细胞检测周期分布，铺
于六孔板，使用无血清培养基，24 h 后，弃掉废液，分
别加入同上分组培养液每孔 2 ml，培养 48 h 后，收集
细胞 106个 /ml，PBS 清洗、800 r /s，5 min 离心，重复 2
次，用 70%冷乙醇 4℃固定过夜，冷 PBS 清洗两遍，上
机前收集细胞 106个 / sample 左右，用 200 μl周期试剂
重悬上述细胞，记录激发波长 488 mm 处的红色荧光
值。使用 Modfit LT软件分析结果。
2． 6 统计学处理
数据采用 SPSS 19． 0 软件进行统计。计量资料用
(珋x ± s)表示，多组间比较进行单因素方差分析。P ＜
0． 05 差异有统计学意义。
3 结果
3． 1 肺癌 A549 细胞在不同浓度含药血清下增殖抑
制情况
EEGA 以剂量和时间依赖性方式抑制人肺癌
A549 细胞的增殖。与阴性空白组比较，含药血清低、
中、高剂量组作用 A549 细胞后 OD 值下降，差异有统
计学意义(P ＜ 0． 05);同时 EEGA低、中、高剂量含药
血清组中，随作用时间延长，吸光度值越低，抑制率
越好。
表 1 EEGA含药血清对肺癌细胞作用的结果(n = 6，珋x ± s)
组别
吸光度(OD) 抑制率(%)
24 h 48 h 72 h 24 h 48 h 72 h
空白组 0． 413 ± 0． 007 0． 648 ± 0． 011 0． 788 ± 0． 008 － － －
EEGA低剂量组 0． 400 ± 0． 005* # 0． 616 ± 0． 008* # 0． 706 ± 0． 007* # 3 5 10
EEGA中剂量组 0． 374 ± 0． 009* # 0． 556 ± 0． 005* # 0． 564 ± 0． 008* # 9 14 28
EEGA高剂量组 0． 353 ± 0． 003* # 0． 503 ± 0． 013* # 0． 498 ± 0． 002* # 14 22 36
5 － FU阳性药组 0． 252 ± 0． 005* # 0． 310 ± 0． 012* # 0． 271 ± 0． 005* # 38 52 65
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药比较，#P ＜ 0． 05。
·07·
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016

3． 2 EEGA含药血清对 A549 细胞凋亡的影响
Annexin V － PE /7 － AAD 双标法检测 EEGA 含药
血清对人肺癌细胞凋亡的影响，其中 Annexin V － PE
(－)、7 － AAD(－)表示正常细胞群，Annexin V － PE
(+)、7 － AAD(－)表示早期凋亡细胞群，Annexin
V － PE(+)、7 － AAD(+)表示晚期凋亡细胞群，总凋
亡率为早期凋亡率加晚期凋亡率的之和。EEGA 含药
血清作用人肺癌 A549 细胞 48 h 后出现凋亡，呈药物
浓度依赖性变化。凋亡结果如图 1。
3． 3 EEGA含药血清对 A549 细胞周期的影响
PI单标法检测人肺癌 A549 细胞 48 h后的周期变
化。实验结果显示，EEGA含药血清通过使 A549 细胞
阻滞在 G0 /G1 期而影响其细胞周期的调控，不同浓度
EEGA含药血清均引起 A549 细胞周期阻滞，表现在
G0 /G1 期细胞比例增加，S期细胞比例减少，与阴性对
照组比较差异具有统计学意义(P ＜ 0． 01)。实验结果
如图 2 和表 2。
表 2 EEGA含药血清对 A549 细胞周期变化(n = 3，珋x ± s)
组别 G0 /G1 S G2 /M
空白组 46． 06 ± 1． 88 22． 15 ± 2． 67 31． 80 ± 3． 72
EEGA低剂量组 52． 14 ± 1． 54* # 21． 77 ± 2． 13* # 30． 09 ± 3． 16* #
EEGA中剂量组 61． 05 ± 2． 21* # 17． 40 ± 3． 90* # 22． 55 ± 5． 21* #
EEGA高剂量组 67． 88 ± 3． 41* # 10． 04 ± 4． 12* # 22． 09 ± 6． 13* #
5 － FU阳性药组 65． 97 ± 8． 12* # 23． 30 ± 2． 13* # 10． 74 ± 1． 10* #
注:与空白对照组比较，* P ＜ 0． 05;与阳性药比较，#P ＜ 0． 05。
图1 A －E为 EEGA含药血清对 A549细胞作用48 h后凋亡的影响
注:A －空白组;B －低剂量组;C －中剂量组;D －高剂量组;E －
阳性药组。
4 讨论
尖叶假龙胆是一种含有(口山)酮类、黄酮类、萜
类等化合物的天然药物，现代药理研究主要集中在治
疗缺血性心律失常和肝损伤，抗肿瘤作用尚未有人研
究报道。首先开发抗肿瘤天然药物，首选清热解毒药，
图2 A －E为 EEGA含药血清对 A549细胞作用48 h后周期的变化
注:A －空白组;B －低剂量组;C －中剂量组;D －高剂量组;E －
阳性药组。
因为它是最有可能具有抗肿瘤作用的药物，尖叶假龙
胆是一味味苦性凉的清热解毒药。其次尖叶假龙胆中
尚有环烯醚萜苷类和三萜类，比如龙胆苦苷、獐牙菜苦
苷和齐墩果酸与熊果酸，这些物质在国内外的研究中
已经发现具有抗肿瘤作用，最后总结以往文献发现有
治疗心脏病作用的药物，同时有抗肿瘤作用比如苏
木［3］、苦参［4］、丹参［5］、蝙蝠葛［6］。尖叶假龙胆具有治
疗心肌缺血性心律失常的作用，我们思考是否其也具
有抗肿瘤的作用。
本实验采用血清药理学方法，研究尖叶假龙胆对
人肺癌细胞的作用。具体是把尖叶假龙胆经口给大鼠
灌胃一定时间后，无菌采集大鼠血液，分离血清，无菌
处理血清后，作用于人胃癌细胞，使用 MTT 法观察药
物对细胞的抑制作用，发现含药血清和细胞有浓度依
赖性变化。这一方法实现了体外与体内实验较为理想
的结合。实验有以下特点:可重复性，可控性、费用小、
较接近体内实验等优点，可以作为前期中药筛选实验。
比直接把中药和复方加入离体实验体系更为科学和真
实，这样避免了药物的理化因素和杂质对细胞的不可
控性影响(假阳性)，含药血清是经过体内吸收代谢的
产物，比较接近客观事实，更加贴切实际。本方法的缺
点是含药血清毕竟是一种黑箱操作模式，入血成分不
清楚，而且添加剂量不可控制。
本实验通过 MTT法，把高、中、低不同剂量尖叶假
龙胆含药血清作用于人肺癌细胞与生理盐水灌胃的空
白血清作对比，同时参考阳性药组，发现其有抑制肺癌
细胞增殖的作用，在 72 h 达到 36%，随着加入的含药
血清浓度提高和作用时间延长，肿瘤细胞的抑制作用
增强，说明尖叶假龙胆在体外对于肿瘤细胞有一定的
毒性和抑制力。采用流式细胞仪发现为 Annexin V －
PE /7 － AAD双标法检测早期凋亡和晚期凋亡为研究
·17·
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine

尖叶假龙胆的凋亡作用机制提供了可靠的保证。PI
单标法检测尖叶假龙胆的抑制肿瘤细胞增殖的作用，
与把细胞阻滞于 G0 /G1 期有关，G0 /G1 期的细胞数量
增加，同时 S期细胞数量减少。综上所述，EEGA 含药
血清可以抑制 A549 细胞的增殖，这可能与其阻止肿
瘤细胞由 G0 /G1 期进入 S 期，延缓细胞周期进程及
促进肿瘤细胞凋亡有关。
参考文献:
［1］ 魏茜．尖叶假龙胆化学成分及含量测定研究［D］．北京:北京中医
药大学，2014．
［2］ 李仪奎，吴健宇．血清药理实验中采血时间的通法方案［J］．中国
药理学通报，1999，15(6):569 － 570．
［3］ 徐建国，郭素堂，乔丽娟，等． 苏木提取液抑制肿瘤作用的研
究［J］．肿瘤研究与临床，2006，18(11):726 － 727．
［4］ 苗抗立，张建中，董颖，等． 苦参的化学成分及药理的研究进
展［J］．天然产物研究与开发，2001，3(2):69 － 73．
［5］ 刘娟，刘颖．丹参药理活性成分研究进展［J］．辽宁中医药大学学
报，2010，12(7):15 － 17．
［6］ 姜峰玉，孙抒．蝙蝠葛化学成分和药理作用的研究进展［J］．辽宁
中医杂志，2013，40(12):
檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱檱
2612 － 2614．
尖叶假龙胆与石菖蒲配伍抗抑郁的作用机理研究
吴全娥1，高彦宇1，李在斯2，孟繁昊1，隋舒婷1，李冀1*
(1．黑龙江中医药大学，黑龙江 哈尔滨 150040;2．北京理工大学珠海学院，广东 珠海 519088)
摘 要:目的:探讨尖叶假龙胆与石菖蒲配伍(龙菖)对慢性轻度不可预计应激结合孤养模型大鼠的抗
抑郁作用。方法:雌性 Wistar大鼠 60 只，随机分为空白组、模型组、龙菖 1∶ 1 组、龙菖 1∶ 2 组、龙菖 2∶ 1
组、百忧解组。观察龙菖对大鼠行为学和海马神经递质的影响。结果:龙菖药物组较模型组比较均能提
高糖水偏爱度，缩短强迫游泳不动时间，均能提高海马 5 － HT 和 GABA 含量，降低 Glu 含量，尤以 1∶ 2
组效果明显。结论:龙菖配伍对慢性轻度不可预计应激结合孤养模型大鼠有抗抑郁作用，以 1∶ 2 组效
最好。
关键词:龙菖;抗抑郁;神经递质
中图分类号:Ｒ285． 5 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2016)03 － 0072 － 03
基金项目:国家自然科学基金项目(No． 81373536);黑龙江省自然科学
基金项目(No． H2015021)
作者简介:吴全娥(1986 －)，女，黑龙江中医药大学 2013 级方剂学专业
博士研究生，主要研究方向:方剂配伍规律及药效物质基础
研究。
通讯作者:李冀* (1960 －)，男，教授，博士研究生导师，主要从事方剂
配伍规律、作用机理及药效物质基础研究工作。
收稿日期:2015 － 12 － 01
修回日期:2015 － 12 － 20
尖叶假龙胆为龙胆科假龙胆属植物，别名苦龙胆，
全草入药，气微，味苦［1］。药理作用主要表现在保肝、
降糖、抗氧化、抗炎、抗抑郁等方面［2］。石菖蒲为天南
星科多年生草本植物石菖蒲的干燥根茎，性味辛、苦、
温，入心、胃经，豁痰开窍、醒神益智，研究也表明石菖
蒲对实验性抑郁具有抑制作用［3］。抑郁症是一种情
绪节律障碍的精神疾患，归属于中医“郁证”范畴，多
由情志不畅、忧思郁结等引起气机郁滞，脏腑功能失
调。郁证之初以气滞为主，宣泄失常，上犯清窍，则神
明失聪。气郁日久，气血交阻，瘀血停积，则心神不宁。
后期可继发血瘀、火郁、痰结、食滞等。经久不愈，由实
转虚而致不同病变。尖叶假龙胆味苦性凉入肝经，石
菖蒲辛开苦燥温通入心经，芳香走窜，豁痰辟秽，二者
配伍可疏肝解郁，宁心安神。本实验旨在通过建立慢
性轻度不可预计应激结合孤养模型探讨二者配伍抗抑
郁的作用机理。
1 材料与方法
1． 1 动物
实验动物为 SPF 级 Wistar 大鼠，雌性，体质量
180 ～ 220 g，共 70 只。由哈尔滨医科大学实验动物中
心提供，编号:2015060802，许可证号:SCXK(黑)
2013 － 021。
1． 2 仪器试剂
KDL －40 低速离心机(科大创新股份有限公司中
佳分公司);anthos 2010 酶标仪(安徽实达电脑科技有
限公司);百忧解(又名盐酸氟西汀胶囊，礼来苏州制
药有限公司);5 －羟色胺(5 － HT)、谷氨酸(Glu)和
Y －氨基丁酸(GABA)试剂盒(南京建成生物有限
公司)。
1． 3 分组给药
所有大鼠均自由饮水与进食，在光暗周期为 12 h，
温度为(23 ± 2)℃的安静环境适应性饲养两周后，采
用 Willner P 慢性轻度不可预计性应激动物模型
·27·
中 医 药 信 息
Information on Traditional Chinese Medicine
2016 年 5 月第 33 卷第 3 期
Vol. 33，No. 3，May． 2016
