全 文 ：中 国 民族 医 药 杂 志 2 01 0年 1 0月 第 1 0期
R P一 C H P L法测定木莲树皮中厚朴酚的含量
台海川 ’ 林艳芳 2彭 霞 ` 姜明辉 ’ 李 清 ’ 张 伟 ’
( L西双版纳州食品药品检验所 , 云南 景洪 6“ 10 ;
.2 西双版纳州民族医药研究所 , 云 南 景洪 肠 6 10 )
摘 要 : 目的 : 建立 PH Lc 法测 定傣 药木莲 ( M an gil iet o fo idr ~ O ivl
.
)树皮 中厚朴酚的含 量 。 方 法 : 2 1沈 h m m C I: ( 20 x4 . 6~ ,
5u )
, 乙猜 一 0 . 5 % 磷酸溶液 ( 50 : 50 )为流 动相 , 流速 l m .L m in 一 1 , 检测 波 长 29 0 n m , 柱 温 : 30 ℃ , 外标定童法 。 结 果 : 厚 朴酚在
0
.
05 89 6
一 5 . 89 6此范 围 内有 良好线性关 系 , r 二 0 . 9 9 ; 样品溶液在 2h4 内稳定 , 日 内精密度良好 , RS D = 0 . 82 % ; 平 均 回收率为
98
.
28 %
,
sR D为 3 . 3 % ( n = 9 ) 。 结论 : 本方 法测定 木莲树皮中厚朴盼的含量专属性 强 , 精密度好 , 结果准确可靠。
关键词 : 傣药 ; 木莲树皮 ;厚朴 酚 ; 含蚤测定 ; 高效液相 色语法
中图分类号 : 2B 95 .3 文献标识码 : A 文章编号 : 1以拓一8 1 0 ( 2 0 10 ) 10一0 36 一02
傣药木莲 树皮是木 兰 科植 物木莲 M an 幼 iet a fo idr an 。 甲醇制得 589 . 6 林 g’ m L~ 1 的溶液 , 作为对照 品储备液 ;精密
ol iv
. 的干燥树皮 , 性凉 , 味苦 、 微涩 , 人风 、 火 、 土塔 ; 有清 称取厚朴酚对照品适量 , 用甲醇制成 6o 协 g’ m L刁 的溶液 ,
火解毒 , 通气止痛之功效 ;用于胸腹胀痛 , 恶心呕 吐 ; 心烦 作为对照品溶液 。
意乱 , 心悸不安 , 咽干 口 渴 , 小便短赤 , 舌红 、 苔黄或黄厚
腻 , 脉行快 。 木莲树皮是西双版纳傣医 习用药材 , 作者未
见相关化学成分文献报道 , 系统预试验表明木莲树皮含有
酚类成分 。 通过高效液相法 (二级管阵列检测器 ) , 表明木
莲树皮含厚朴酚 ( M a , 0 10 1, c l尹 1必 2 ) 。 目前还没有关于木莲
树皮中的厚朴酚含量测定的报道 。 本实验采用 H PL C 法测
定其 中厚朴酚的含量 , 并考察 了方法学 。 试验结果表 明 ,
该法专属 性强 , 准确性高 。
l 仪器与试药
iD 。~ 高效液相色谱仪 ( A S卜 10 A ut 。~ d s am
p le I
n -
jce t
o r ,
6P 8 0 PH LC uP 哪 , Uhi M at e 3 《义旧 VW D ) , Chor m e leo n
icl en t 6
.
80 色谱 工 作 站 ; A ig le n t 12 0 高 效 液 相 色谱仪
( G 1 3 2 9A一A LS
,
G 13 1 6A一T C C , G 13 15 D一D A D , G 1 3 l l A一uQ at
-
uP m p
,
e l 3 2 2 A一n e脚 s e r ) , 120 化学工作站 ( GZ z 80A A ) ; 岛
津 u v 一2 401 P c 紫外可见光分光光度计 。
厚朴 酚对照品 ( 中国药品生物制品检定所 , 批号 :
1 07 29
一20 3 10 ;) 乙睛为色谱纯 , 其余试剂为分析纯 ; 供试
品由西双版纳傣族 自治州 民族医药研究所 ( 州傣医医 院 ) 图 , 对照品 《 A )和药材样品 ( B )高效液相色谱 图 ( O AO 检
提供 , 粉碎过三号筛 。 测 )
2 色谱条件与系统适用性考察 iF g l IH, cL c hor anr t o歹肚 sn of er fe r e cn e sub st~ e ( A ) 曲 d
色谱柱 : z流 h or m e ;: ( 20 x 4 . 6un , s u ) ; 流动相 : 乙 腊 s 别m p le ( B ) ( D A D d e tce t i o n ) 厚朴酚 ( M那笋 0 10 1 , e ,尹确 2 )
一 0 . 5% 磷酸溶液 ( 50 : 50 ) ; 流速 : lmL ·而 n 一 ;1 检测波长 : 3 . 2 供试品溶液的制备 : 取本 品粉末约 0 . 2 9 ,精密称定 , 置
29 0n m ; 柱温 : 30 ℃ ; 进样量 : 10 林 ;L 理论板数按厚朴酚峰 50 inl 量瓶 中 , 加甲醇 《 腼1 , 超声处 理 ( 25 0w , 频率 50k H : )
计算应不低 于 5该x x ) ; 厚朴 酚峰与最近峰的分离度 大于 30 分钟 ,放至室温 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 滤过 , 取续滤液
1
.
5
。 色谱图见图 l 。 作为供试品溶液 。
3 溶液制 备 4 分析方法学验证
3
.
1 对照 品溶液的 制备 : 精密称取厚朴酚对照 品适量 . 加 4 . 1 线性关系考察 : 取对照品储备液适量 , 加甲醇配制得
DOI : 10. 16041 /j . cnki . cn15 -1175. 2010. 10. 023
2 0 10年 0 1月 第 0 1期 中国 民族 医 药 杂 志
5
.
56 9
,
2 1
_
7 9
,
2 9
.
4 5
,
5 5
.
9 6
,
l兀 . 9 , 5 59 . 6 林 g · m L , 的对 照 品
溶液 , 摇匀 。 分别进样 10 协 l , 以进样量为横坐标 ( x ) , 峰面
积积分值 为纵坐标 ( Y ) , 进行线性回归 , 回 归方程 : Y二 .0
2 6 3 7
,
x +0
.
2 5 27
,。 0 . 9 999 ; 进样量在 0 . 05 8 96巧 . 5 9 6 林 g 的
范围内呈良好线性 。
4
.
2 精密度考察 : 精密吸取厚朴酚对照品溶液 , 测定 6 次 ,
结果表明 , 重复性试验 R s D 为 0 . 34 % 。
4
.
3 重复性试验 : 取同一批样品 , 精密称取 6 份 , 照试验方
法测定 。 结果表明 ,重复性试验 R s D 为 0 . 64 % 。
4
.
4 专属性 : 分别取对照品溶液 、 供试品溶液 , 照试验方
法测定 。 试验表明 , 供试品色谱图中 , 在与厚朴酚对照品
色谱峰相同保留时间处 , 有一色谱峰 ; 再经二级管阵列检
测器扫描该峰 , 与厚朴酚对照品色谱峰的紫外吸收光谱一
致 。 由此确认木莲树皮供试品溶液色谱图中 , 与对照品保
留时间相同的色谱峰即为厚朴酚的色谱峰 。
4
.
5 供试品溶液的稳定性 :取 同一供试品溶液 , 照试验所
得条件 , 于 0 , 2 , 6 , 一2 , 1 8 , 2 4 小时进样测定 , 结果表明 , 峰
面积积分值 R SD 为 0 . 82 % 。 说明供试品溶液在 24 小时内
稳定 。
.4 6 准确度 (加样回收率试验 ) : 取 已知含量的供试品 9
份 , 每份约 0 . 1 9 , 精密称定 ,分三组 , 各精密加人含厚朴酚
为 80 % 、 10 % 、 12 0 % 的对照品溶液 , 按试验方法测定 , 结
果表明 , 该分析方法的回收率为 95 . 23一 1以 . 4% , 平均 回收
率为 98 . 2 8% , RS D 为 3 . 3 % 。
5 样品中厚朴酚的含 t 测定
取不同产地的 3 批样 品进行含量测定 。 结果样品中厚
朴酚的含量分别为 : 1 . 776 % , 1 . 737 % , 1 .印 7 % 。
6 讨 论
6
.
1 流动相的选择 在其他因素不变的情况下 , 比较不同
浓度和比例 的甲醇 一 磷酸溶液 、 甲醇 一 冰醋酸溶液 、 乙睛
一 磷酸溶液 、 乙睛 一 冰醋酸溶液 、 乙睛 一 水 、 甲醇 一 水作流
动相 。 结果表明 , 以 乙睛 刁 . 5 %磷酸溶液 ( 50 : 50 )作为流动
相 , 被测成分色谱峰拖尾因子和分离效果最佳 。
6
.
2 波长选择 : 厚朴酚对照品 , 以甲醇为溶剂 ,经 U V 法扫
描 , 确定厚朴酚在 1Z 3 lun 和 29 0 n l n 处有吸收峰 。 2 13 unr 已
处在溶剂末端吸收 , 因此 , 确定该方法厚朴酚 的检测波长
为 2 90 n l n 。
6
.
3 溶剂和提取条件的选 : 按试验所得方法 , 考察 甲醇 、
乙醇 、 无水乙醇作为溶剂对被测成分溶 出结果的影响 , 结
果表明 , 甲醇为最佳提取溶剂 。 以甲醇为溶剂 , 考察供试
品超声提取 30 、 45 、 60 而n 和 回流提取 60 、 120 、 18 0 n l i n 对测
定结果的影响 。 结果表明 , 最佳提取条件为 : 超声处理
3 0n 五n 。
6
.
4 线性范围考察 : 实验设计 了对照品浓度 由低到 高达
10 倍的浓度范围 , 结果表 明厚朴酚在所设计 的浓度范内
线性 良好 , 为厚朴酚的定量分析提供了较好的依据 。
6
.
5 专属性考察 : 本试验过程 中同时以薄层色谱法考察其
专属性 。 试验显示 , 木莲树皮供试 品溶液的色谱中 , 在与
厚朴酚对照品色谱相应的位置上 , 显相同颜色的斑点 ; 在
流动相的选择时 , 以不同的流动相组分和不同比例的流动
相试验 ,供试品溶液在与对照品溶液色谱峰相同保留时间
处 , 均只有一色谱峰 ,说明本实验方法专属性较强 。
.6 6 耐用性考察 : 研究 了柱温 ( 土 5 ℃ ) 、 波长 ( , 3 nm ) 、 流
速 ( 士 0 . 2 mL · 面 n一 1 ) 、 流动相组成比例 ( 土 3% )和不 同产
家色谱柱对实验结果的影响程度 。 结果表明 , 柱温 、 色谱
柱 、 流动相组成 比例和流速变化对保留时间影响比较大 ,
波长和流速变化对峰面积影响较大 , 但各因素对供试品与
对照品的峰面积比值影响不大 。 结果表明测定条件有小的
变动时 , 定量测定结果不受大的影响 , 在仪器稳定的情况
下 ,仍可以 准确进行定量测定 。
6
.
7 结论 : 本实验以 RP一 H PL C 法测定木莲树皮中厚朴酚
的含量 , 分离效果好 、 重现性好 、 定量准确 , 为建立 以厚朴
酚为指标评价木莲树皮的质量提供 了依据 。
2 0 10 年 8 月 10 日收稿
刃峡妞 n . 加 . 柱。 n of M a g n ul ul 加 b a r k of M u il an by R P 一 E卫 L C
T A I H a i一山皿 n ` , L刃N Y a n 一众口梦 , P E N G 刀a ` , JU创 G M i n g 一 h公 , , L l Q in g l , Z n A N G W d ,
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