全 文 ： 2007, Vol. 28, No. 11 食品科学 ※工艺技术186
收稿日期：2007-07-25 *通讯作者
基金项目：吉林省科技厅应用基础研究项目(20050567)；吉林大学农学部大学生科技创新基金资助项目(2007051848)
作者简介：张兴茂(1987-)，男，本科生，研究方向为营养与功能食品。
长白山笃斯越桔果实原花青素
浸提工艺的研究
张兴茂，林松毅，刘静波*，王二雷
(吉林大学军需科技学院营养与功能食品研究室，吉林 长春 130062)
摘 要：本实验以吉林省长白山野生笃斯越桔为研究对象，对比分析了料液比、浸提温度、浸提时间、浸提次
数等工艺参数对原花青素浸提率影响情况，并利用L9(34)正交试验设计优化出最佳浸提工艺参数为：浸提溶剂60%
乙醇，浸提温度60℃，料液比1:50，浸提时间80min，浸提两次，原花青素得率9.40%，为深入研究笃斯越桔
中原花青素分离纯化工艺奠定工作基础。
关键词：笃斯越桔；原花青素；浸提；最佳工艺
Study on Extracting Process of Proanthocyandins from Fruit of Vaccinium uliginosumL.
ZHANG Xing-mao，LIN S ng-yi，LIU Jing-bo*，WANG Er-lei
(Laboratory of Nutrition and Functional Food, College of Quartermaster Technology,
Jilin University, Changchun 130062, China)
Abstract ：Vaccinium uligiosumL., which is distributed widely in Changbai Mountain of Jilin Province, was studied mainly.
In order to find the optimal conditons on extraction of proanthocyandins, the ratio of solid to liquid, extracting temperature,
extracting time, extracting times were investigated. And then, the L9(34)orthogo al design was conducted, the optimal parameters
of extraction were as follow: solvent 60% of alcohol, temperature 60℃, the ratio of solid to liquid 1:50, time 80min, times 2, the
yield of proanthocyandins was 9.4%, which lad a good foundation for the deep separation and purification of proanthocyandins.
Key words：Vaccinium uliginosum L.；proanthoeyandins；the optimal extraction process
中图分类号：TS201.21 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2007)11-0186-04
众多学者经试验研究证明原花青素是迄今为止所发
现的最强有效的自由基清除剂之一，其抗氧化活性是
VC的20倍，VE的50倍[1]；此外还有减少心肌缺血再
灌注损伤，抗动脉粥样硬化，降低血压，调节血糖及
血脂代谢，抑制血栓形成等作用[2]，对改善视力也有一
定的作用[3]。现在资料研究葡萄籽、苹果中原花青素较
多，但对笃斯越桔研究的报道却很少。本实验采用正
丁醇-盐酸法测定吉林省长白山野生笃斯越桔中原花青素
浸提工艺，为深入研究笃斯越桔中原花青素分离纯化工
艺以及综合利用奠定工作基础。
1 材料与方法
1.1材料与试剂
笃斯越桔 吉林大学军需科技学院营养与功能
食品研究室；原花青素标准品 天津尖峰天然产物
公司。
正丁醇、盐酸、无水乙醇等试剂(分析纯) 北京
化工厂。
1.2仪器
752PC型紫外可见分光光度计 上海光谱仪器有限
公司；MILLIPORE牌超纯水机 美国；水浴锅 北京长
源实验设备厂；高速万能粉碎机 北京中心伟业仪器有
限公司；FD-1冷冻干燥机 北京博医康技术公司；
AG204型电子天平 瑞士梅特勒-托利多公司。
1.3方法
1.3.1原花青素浸提工艺研究路线
野生笃斯越桔中原花青素浸提工艺研究路线如图1
所示。
1.3.2原花青素吸收峰波长扫描
称取10mg原花青素标准品定容于60%乙醇溶液至
187※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 11
10ml，精确称取0.6ml标准品溶液15ml试管中，加入1ml
盐酸-硫酸高铁铵溶液，再加入6ml盐酸-正丁醇溶液，
在90℃水浴锅里加热40min，在536nm至552nm范围扫
描吸收峰。
1.3.3原花青素标准曲线的绘制
精密称取10mg的原花青素标准品于10ml的容量瓶
中，加入60%乙醇定容，摇匀，分别精取0、0.1、
0.2、0.3、0.4、0.5ml放置于6只15ml的试管中，各
加入2.0、1.9、1.8、1.7、1.6、1.5ml的60%乙醇溶
液，按显色剂制备方法制备显色剂。用542nm的可见
光测定各自的吸光度值。
1.3.4单因素试验方法
利用对比分析的研究方法，考察了乙醇浓度0%、
20%、40%、60%、80%；浸提温度40、50、60、
70、80、90℃；浸提时间20、40、60、80、100、
120min；浸提料液比为1:20、1:50、1:100、1:150、
1:200；浸提次数1～3次等因素对长白山野生笃斯越桔中
原花青素浸提效率的影响情况。
1.3.5L9(34)正交试验方案
在单因素研究基础上，重点考察了乙醇浓度、
浸提时间、料液比三个主要因素，进行L9(34)正交试
验研究，以浸提率为指标，优化长白山野生笃斯越
桔中原花青素浸提工艺的最佳参数，因素水平表见表
1所示。
2 结果与分析
2.1原花青素标准品吸收峰波长扫描结果
原花青素标准品显色检测液在可见光波长为536～
546nm扫描结果由图2所示，原花青素的含量测量波长
为542nm。
因素
水平
A乙醇浓度(%) B浸提时间(min) C料液比
1 40 80 1:20
2 60 100 1:50
3 80 120 1:100
表1 L9(34)因素水平表
Table 1 Factors and levels of L9(34)
2.2原花青素标准曲线
原花青素含量C与吸光度A的标准曲线和回归方程
式C=0.0009A+0.023，(相关系数R=0.99151)，表明本方法
标准品溶液吸取量在0～0.5之间(显色液吸光度值在0～
0.472之间)测试结果与被测物质浓度直接呈正比关系的程
度良好。因此，本方法可作为笃斯越桔原花青素含量
含量的测定方法。
0.525
0.520
0.515
0.510
0.505
0.500
0.495
535 540 545 550
吸
光
度
扫描波长(nm)
图2 原花青素标准品显色检测液在可见光波长为 536～546nm
扫描图谱
Fig.2 Results of scanning solution of sophorin standard prepara-
tion at wavelength of 536～546nm
2.3浸提液浓度对笃斯越桔中原花青素浸提率影响情况
浸提液乙醇浓度和原花青素浸提率的关系如图4所
示，浸提液乙醇浓度最佳为60%。
2.4浸提温度对笃斯越桔中原花青素浸提率影响情况
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 100200300400500
吸
光
度
原花青素含量(μg)
图3 原花青素标准工作曲线及回归方程结果
Fig.3 Working curve of sophorin standard solution and results of
regression equation
原花青素提
取工艺研究
提供洗净，粉碎的
笃斯越桔冻干粉末
原花青素检测
波长的选择
对提取溶剂的单因素研究
对提取温度的单因素研究
对提取时间的单因素研究
对提取料液比的单因素研究
对提取次数单因素研究
原花青素标准工
作曲线的建立
对提取液浓度，提取时
间，料液比做正交试验
确定最佳提取
工艺
图1 原花青素浸提工艺研究路线图
Fig.1 Flow chart of extracting technology process
2007, Vol. 28, No. 11 食品科学 ※工艺技术188
浸提温度和原花青素浸提率的关系如图5所示，浸
提温度最佳为60℃。
浸提最佳料液比为1:50。
2.7浸提次数对笃斯越桔中原花青素浸提率影响情况
由图8可知，随着浸提次数增加，原花青素浸提
率累计增加。当浸提次数大于2时，曲线趋势已接近平
缓，即原花青素浸提率的增加已不明显。从节省溶剂
和时间考虑，确定浸提次数为两次。
10
8
6
4
2
0
0 20 40 60 80
提
取
率
(
%
)
提取液乙醇浓度(%)
图4 浸提液浓度对浸提率的影响
Fig.4 Effects of ethanol concentration on extractrion rate
6.6
6.4
6.2
6.0
5.8
5.6
0 40 60 80
提
取
率
(
%
)
提取温度(℃)
图5 浸提温度对浸提率的影响
Fig.5 Effects of extracting temperature on extractrion rate
2.5浸提时间对笃斯越桔中原花青素浸提率影响情况
浸提时间和原花青素浸提率的关系如图6所示，最
佳浸提时间为100min。
2.6浸提料液比对笃斯越桔中原花青素浸提率影响情况
浸提料液比和原花青素浸提率的关系如图7所示，
8.0
7.5
7.0
6.5
6.0
5.5
0 20406080100120140
提
取
率
(
%
)
提取时间(min)
图6 浸提时间对浸提率的影响
Fig.6 Effects of extracting time on extraction rate
9.2
9.0
8.8
8.6
8.4
8.2
8.0
7.8
0 1:201:501:1001:1501:200
提
取
率
(
%
)
提取料液比
图7 料液比对浸提率的影响
Fig.7 Effects of ratio of solid to liquid on extraction rate
6.7
6.6
6.5
6.4
6.3
6.2
6.1
6.0
0 1 2 3
提
取
率
(
%
)
提取次数
图8 浸提次数对浸提率的影响
Fig.8 Effects of extraction times on extraction rate
因素
试验号 A浸提液 B浸提时间 C浸提
D
原花青素含量
浓度(%) (min) 料液比 (%)
1 1 1 1 1 7.675
2 1 2 2 2 7.074
3 1 3 3 3 6.720
4 2 1 2 3 9.402
5 2 2 3 1 7.037
6 2 3 1 2 6.876
7 3 1 3 2 8.082
8 3 2 1 3 5.415
9 3 3 2 1 7.150
R 0.890 1.878 1.2200.108
优水平 A2 B1 C2
主次因素 B＞C＞A＞D
最优组合 A2B1C2
表2 正交试验结果及分析
Table 2 Scheme and results of orthogonal test
189※工艺技术 食品科学 2007, Vol. 28, No. 11
2.8L9(34)正交试验研究结果与分析
利用L9(34)正交试验极差分析结果如表2所示，影
响浸提效果的主次因素依次为浸提时间＞料液比＞乙醇
浓度。优化出笃斯越桔中原花青素的最佳浸提工艺为
A2B1C2，即为浸提溶剂60%乙醇，浸提时间80min，料
液比1:50，且最优组合即为第4组实验。方差分析结果
如表3所示，因素A、B、C影响均显著。
3 结 论
通过对比分析和L9(34)正交试验设计研究方法，优
化出笃斯越桔中原花青素浸提的最佳工艺条件为：浸提
溶剂60%乙醇，浸提温度60℃，料液比1:50，浸提时
间80min，浸提两次，得率达到9.40%。
参考文献：
[1] 剧红梅, 曲梓怡, 王召令, 等. 原花青素的抗氧化作用[J]. 中国组织
工程研究与临床康复, 2007(11): 3155.
[2] 张风雷. 葡萄籽原花青素对AGEs诱导的内皮细胞分泌NO及ET21
的影响[J]. 中国老年学杂志, 2007, 27: 1150.
[3] 魏彦锋. 葡萄籽浸提物原花青素功能及其应用[J]. 中外葡萄与葡萄
酒, 2005(3): 64-65.
表3 方差分析结果
Table 3 Variance analysis of of orthogonal test
方差来源 偏差平方和 自由度 均方和 F比 显著性水平
A 1.2454542 0.6227279.62 0.05
B 5.8561362 2.928068139.390.01
C 2.2315892 1.11579453.10 0.05
误差 0.0420432 0.021022
总和 S=9.3758 F0.01(2,2)=99.01
F0.05(2,2)=19.00
收稿日期：2006-05-29 *通讯作者
作者简介：范明辉(1980-)，男，博士研究生，研究方向为纳米技术在天然产物保健功能中的应用。
红景天苷纳米脂质体的制备及
若干工艺参数的优化
范明辉，许时婴*
(江南大学食品学院，江苏 无锡 214122)
摘 要：本实验首先比较了薄膜法、超声法、冻融法和反相蒸发法对红景天苷脂质体包封率的影响，结果表明
红景天苷低浓度下，不同方法制得的脂质体包封率影响依次为冻融法＞反相蒸发法＞超声法＞薄膜法，高浓度下的
包封率影响不大。粒径测定表明粒子均处于纳米尺度。其次，对影响红景天苷纳米脂质体制备的反相蒸发法工艺
参数进行了优化。结果表明，随着载量的降低包封率呈现上升后趋于平缓的变化。胆固醇/卵磷脂质量比1:2的嵌
入量得到的脂质体包封率最高。吐温80对脂质的增溶具有十分明显的作用，2%质量分数可使得脂质体的包封率达
到约80%。水合介质的离子强度对包封率的影响较大，脂质体在0.05mol/L、pH7.0的磷酸盐缓冲液体系中包封率
较高。
关键词：红景天；红景天苷；纳米脂质体；制备；包封率；反相蒸发法
Preparation of Salidroside Nano-liposomes and Study on Optimization of Technical Conditions
FAN Ming-hui，XU Shi-ying*
(School of Food Science and Technology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China)
Abstract ：Salidroside nano-liposomes were prepared by using 4 different methods: thin film evaporation, ultrasound method,
reverse phase evaporation, or freezing-thawing method. The effects of different preparation methods and salidroside concentra-
tions on the formation of liposomes were examined by means of encapsulating efficiency. The experimental results showed that
the encapsulating efficiency of liposomes prepared by different methods varies in the order: freezing-thawing method ＞ revers