全 文 ：西北农业学报　２０１２，２１（９）：１４５－１４８，１５３
Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ　Ｓｉｎｉｃａ
小花棘豆黄酮体外抗氧化作用
＊
王　帅，张　玲，陈根元，蒋　慧，席琳乔，马春晖
（新疆生产建设兵团塔里木畜牧科技重点实验室，塔里木大学 动物科学学院，新疆阿拉尔　８４３３００）
摘　要：通过测定小花棘豆黄酮的抗脂质过氧化活性、还原力、螯合力，以及对ＤＰＰＨ自由基、超氧阴离子自
由基和羟基自由基的清除作用，评价小花棘豆黄酮提取液的体外抗氧化活性。结果表明，样品具有较强的抗
脂质氧化能力，对菜籽油的抗氧化性的强弱依次为维生素Ｃ＞样品＞维生素Ｅ＞ＢＨＴ＞空白；对棉籽油的抗
氧化性的强弱依次为样品＞维生素Ｃ＞ＢＨＴ＞维生素Ｅ＞空白；对葵花籽油抗氧化性强弱依次为样品＞
维生素Ｃ＞维生素Ｅ＞ＢＨＴ＞空白；对猪油抗氧化性的强弱依次为ＢＨＴ＞维生素Ｃ＞样品＞维生素Ｅ＞
空白；样品ＤＰＰＨ清除率、超氧阴离子清除率和羟基自由基清除率均强于对照；样品还原力强于维生素Ｅ而
弱于维生素Ｃ；螯合力弱于ＥＤＴＡ。可见，小花棘豆黄酮提取液有作为天然抗氧化剂开发的价值。
关键词：小花棘豆；黄酮；抗脂质氧化；自由基
中图分类号：Ｓ１８８．２　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００４－１３８９（２０１２）０９－０１４５－０４
Ｉｎ　Ｖｉｔｒｏ　Ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　Ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｆｒｏｍＯｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ
ＷＡＮＧ　Ｓｈｕａｉ，ＺＨＡＮＧ　Ｌｉｎｇ，ＣＨＥＮ　Ｇｅｎｙｕａｎ，
ＪＩＡＮＧ　Ｈｕｉ，ＸＩ　Ｌｉｎｑｉａｏ　ａｎｄ　ＭＡ　Ｃｈｕｎｈｕｉ
（Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｔａｒｉｍ　Ａｎｉｍａｌ　Ｈｕｓｂａｎｄｒｙ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　＆Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ
Ｃｏｒｐｓ；Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｔａｒｉｍ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｌａｒ　Ｘｉｎｊｉａｎｇ　８４３３００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌｉｐｉｄ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ，ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｐｏｗｅｒ，ｃｌｅａｒａｎｃｅ　ｏｆ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ，ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉ－
ｃａｌ　ａｎｄ　ＤＰＰＨ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｔｏ　ｅｖａｌｕａｔｅ　ｔｈｅ　ｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｆｒｏｍ　Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ
ｈａｖｅ　ｆａｉｒｌｙ　ｓｔｒｏｎｇ　ｌｉｐｉｄ　ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｙ；ｔｈｅ　ｓｔｒｅｎｇｔｈ　ｏｆ　ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｆｏｒ　ｒａｐｅ　ｓｅｅｄ　ｏｉｌ
ｗａｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ：Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ＞ｓａｍｐｌｅ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ＞ＢＨＴ＞ＣＫ；ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ　ｆｏｒ　ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ　ｗａｓ：
ｓａｍｐｌｅ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ＞ＢＨＴ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ＞ＣＫ；ｆｏｒ　ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ　ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ　ｗａｓ：ｓａｍｐｌｅ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ
Ｃ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ＞ＢＨＴ＞ＣＫ；ｆｏｒ　ｌａｒｄ　ｔｈｅ　ｏｒｄｅｒ　ｗａｓ：ＢＨＴ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ＞ｓａｍｐｌｅ＞ Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ＞
ＣＫ；ｓａｍｐｌｅ　ｈａｓ　ｓｔｒｏｎｇｅｒ　ｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎ　ｐｏｗｅｒ　ｆｏｒ　ＤＰＰＨ ，ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｌ　ｒａｄｉｃａｌ　ｔｈａｎ
ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ；ｔｈｅ　ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｐｏｗｅｒ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｉｓ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ　ａｎｄ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ；
ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｓａｍｐｌｅ　ｉｓ　ｌｏｗｅｒ　ｔｈａｎ　ＥＤＴＡ．Ｔｈｅ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｆｒｏｍＯｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ
ｐｒｏｄｕｃｅｄ　ａｓ　ａ　ｎａｔｕｒａｌ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｎｄ　ｈａｖｅ　ａ　ｖａｌｕｅ　ｆｏｒ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ；Ｆｌａｖｏｎｏｉｄ；Ｌｉｐｉｄ　ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｏｎ；Ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ
　　小花棘豆（Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ）是豆科棘
豆属植物，在新疆分布极为广泛，据统计仅塔里木
河中下游分布面积已达１３．３３万ｈｍ２，危害严重
的草场平均盖度８０％，最高为９５％［１］。在牧草缺
乏的冬季和初春，如果家畜大量采食，会引起中毒
甚至死亡，严重影响畜牧业的发展［２］。但小花棘
＊ 收稿日期：２０１２－０３－３１　　修回日期：２０１２－０６－０７
基金项目：“十二五”国家科技支撑计划（２０１１ＢＡ０１７Ｂ０５）；新疆生产建设兵团博士基金专项（２００８ＪＣ０７）；新疆生产建设兵团塔里
木畜牧科技重点实验室开放课题（ＨＳ２０１２０７）。
第一作者：王　帅，男，从事牧草资源开发利用研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｗａｎｇｓｈｕａｉｄｋｙ＠１２６．ｃｏｍ
通讯作者：马春晖，主要从事牧草生产与牧草加工研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｃｈｕｎｈｕｉｍａ＠１２６．ｃｏｍ
豆有一定药用价值，能够治疗关节炎、牙痛、神经
衰弱等疾病，具有麻醉、镇静、止痛的功效［２］。黄
酮类化合物是小花棘豆的有效成分之一，于荣敏
等［３］分离得到小花棘豆中的黄酮甙，并对其进行
结构鉴定；罗扬等［２］以内蒙古小花棘豆为试验材
料，利用乙醇回流浸提的方法，测定小花棘豆不同
生长时期的黄酮含量。刘璐［４］比较５种棘豆属植
物的黄酮类物质含量，发现小花棘豆的黄酮含量
高于急弯棘豆、黄花棘豆和冰川棘豆，具有一定的
利用前景。目前，国内外对小花棘豆的生物碱成
分的研究较多，黄酮类物质的含量、组成及分离方
法研究相对较少，小花棘豆黄酮类物质的抗氧化
活性研究未见报道。本试验旨在探讨新疆小花棘
豆黄酮的抗氧化活性，为小花棘豆的综合利用提
供依据。
１　材料与方法
１．１　材料、试剂与仪器
小花棘豆于２０１１年８月采自新疆阿拉尔市
托喀依乡，由塔里木大学动物科学学院草业科学
学科组鉴定。取植株的地上部分，阴干、粉碎、过
２０目筛，备用。
芦丁标准品，德国 Ｄｒ．Ｅｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ公司；
ＤＰＰＨ，德国Ｓｉｇｍａ公司；２，６－二叔丁基－４－甲基苯
酚（Ｂｕｔｙｌａｔｅｄ　ｈｙｄｒｏｘｙｔｏｌｕｅｎｅ，ＢＨＴ）、维生素Ｃ、
维生素Ｅ，天津市光复精细化工研究所；亚硝酸
钠、硝酸铝、氢氧化钠等均为国产分析纯；菜籽油、
棉籽油、葵花籽油均购于塔里木大学农贸市场，猪
油为自行制备；实验室用水为超纯水。
Ｃａｒｒｙ　１００型紫外－可见分光光度计，澳大利
亚；ＢＳ１２４型精密电子天平，德国赛多力斯；Ｄｉ－
ｒｅｃｔ－Ｑ３型 超 纯 水 系 统，美 国 Ｍｉｌｉｐｏｒｅ；ＫＱ－
４００ＤＢ型医用数控超声清洗器，昆山市超声仪器
有限公司；７４３型氧化稳定性测试仪，瑞士 Ｍｅｔｒｏ－
ｈｍ；ＧＺＸ－９１４６ＭＢＥ型鼓风干燥箱，上海博讯实
业有限公司。
１．２　小花棘豆黄酮的提取
参考刘璐［４］的小花棘豆黄酮提取方法。精密
称取小花棘豆样品１０．００ｇ，加φ＝６０％乙醇
３０ｍＬ，超声浸提４５ｍｉｎ，超声波功率８００Ｗ，温
度４５℃。过滤后残渣再加φ＝６０％乙醇３０ｍＬ
浸提 １次，合并滤液，用φ＝６０％乙醇定容至
１００ｍＬ，４℃避光保藏，备用。
１．３　小花棘豆中黄酮的测定
１．３．１　定性检测　通过显色反应和纸层析法鉴
定［５］。
１．３．２　定量测定　精密称取１２０℃干燥至恒质
量的芦丁对照品１０．０ｍｇ，用φ＝６０％乙醇溶解，
完全移入１００ｍＬ容量瓶，加φ＝６０％乙醇定容至
刻度，摇匀即得质量浓度为０．１ｇ／Ｌ的芦丁标准
溶液。
准确吸取芦丁标准溶液０．０、１．０、２．０、３．０、
４．０、５．０、６．０、７．０、８．０ｍＬ，分别置于２５ｍＬ容量
瓶，加φ＝６０％乙醇补至１０ｍＬ，采用 ＮａＮＯ２－
Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＯＨ显色方法操作，以加有０．０ｍＬ
芦丁标准溶液的作为空白对照，在２７４ｎｍ波长
处测定吸光度［４］，以吸光度为纵坐标，质量浓度为
横坐标，绘制标准曲线。
准确吸取待测样品溶液１．０ｍＬ，平行样品
３份，采用ＮａＮＯ２－Ａｌ（ＮＯ３）３－ＮａＯＨ显色方法操
作，测定吸光度，计算黄酮含量。
１．４　小花棘豆黄酮的抗脂质过氧化作用
以ＢＨＴ、维生素Ｅ和维生素Ｃ为阳性对照，
以空白油脂为阴性对照，测定小花棘豆黄酮的抗
脂质过氧化作用。氧化稳定性测试仪参数设置
为：气体流量１５Ｌ／ｈ，温度１２０℃，诱导时间采用
活性氧法确定。在反应体系中最终Ｖ（油脂）∶
Ｖ（抗氧化剂）＝３∶２。采用 ＡＩ值表示抗氧化能
力的大小，ＡＩ值越大说明样品的抗氧化效果
越好。
ＡＩ＝抗氧化剂的诱导时间／空白油脂的诱导
时间
１．５　小花棘豆黄酮体外抗氧化活性测定方法
以ＢＨＴ、维生素Ｅ和维生素Ｃ作为阳性对
照，按王研等［６］的方法测定 ＤＰＰＨ 自由基清除
率。并根据样品对ＤＰＰＨ 清除作用曲线计算得
到ＤＰＰＨ自由基的起始浓度减少至５０％时样品
的添加量（ＩＣ５０）。按黄海霞等［７］的研究，采用邻
苯三酚自氧化法测定样品及对照品的超氧阴离子
自由基清除率。以φ＝５５％乙醇为空白对照，维
生素Ｅ和维生素Ｃ为阳性对照，参照樊青玲等［８］
的研究测定其清除羟基自由基的能力。以维生素
Ｅ和维生素 Ｃ作为阳性对照，参照Ｚｈａｎｇ　Ｑ　Ｆ
等［９］的研究测定还原力。以ＥＤＴＡ作为阳性对
照，参照Ｏｚｓｏｙ　Ｎ等［１０］的研究测定其螯合力。
１．６　数据分析
数据用Ｅｘｃｅｌ进行处理，采用ＳＰＳＳ　１１．５中
·６４１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１卷
Ｏｎｅ－Ｗａｙ　ＡＮＯＶＡ进行单因素方差分析。
２　结果与分析
２．１　小花棘豆黄酮含量
表１表明，小花棘豆样品待测液的显色反应
均为阳性，紫外灯下纸层析检测可见黄色斑点。
说明样品待测液含有黄酮类化合物。以ｘ表示
质量浓度、ｙ表示吸光度绘制标准曲线，得到芦丁
标准品回归方程为ｙ＝０．０１７　４６ｘ＋０．００４　５２，
ｒ２＝０．９９９　６，说明样品检测质量浓度在 ０～
３２ｍｇ／Ｌ时与吸光度线性关系良好（图１）。根据
回归 方 程，测 得 小 花 棘 豆 样 品 黄 酮 含 量 为
１６．５４ｍｇ／ｇ。
２．２　小花棘豆黄酮抗脂质过氧化效果
由表２可知，小花棘豆黄酮对菜籽油、棉籽油
和葵花籽油等植物油均有较好的抗脂质过氧化作
用，但对猪油的抗脂质过氧化作用较弱。对菜籽
油的抗氧化性的强弱依次为维生素Ｃ＞样品＞维
生素＞ＢＨＴ＞空白；对棉籽油的抗氧化性的强弱
依次为样品＞维生素Ｃ＞ＢＨＴ＞维生素Ｅ＞空
白；对葵花籽油的抗氧化性的强弱依次为样品＞
维生素Ｃ＞维生素Ｅ＞ＢＨＴ＞空白；对猪油的抗
氧化性的强弱依次为ＢＨＴ＞维生素Ｃ＞样品＞
维生素Ｅ＞空白。
２．３　小花棘豆黄酮清除ＤＰＰＨ自由基的效果
由图２可知，小花棘豆黄酮对ＤＰＰＨ有较好
的清除效果。其ＩＣ５０值为１６．５４ｍｇ／Ｌ，远低于维
生素Ｃ的２８．８０ｍｇ／Ｌ、维生素Ｅ的３５．６８ｍｇ／Ｌ
和ＢＨＴ的４０．２５ｍｇ／Ｌ。证明小花棘豆黄酮具
有较强的抗氧化性。
２．４　小花棘豆黄酮清除超氧阴离子自由基的
效果
图３表明，黄酮样品的质量浓度与超氧阴离
子的清除率呈现一定的正相关关系。其原因可能
为黄酮类物质对超氧阴离子自由基具有清除作
表１　小花棘豆黄酮的显色反应结果
Ｔａｂｌｅ　１　Ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｃｏｌｏｒ　ｒｅａｃｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ
ｉｎ　Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ
显色反应
Ｃｏｌｏｒ
ｒｅａｃｔｉｏｎ
盐酸－镁试验
Ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｃ　ａｃｉｄ－
ｍａｇｎｅｓｉｕｍ
荧光试验
Ａｓｓａｙ
ｔｅｓｔ
碱液试验
Ｌｙｅ
ｔｅｓｔ
现象
Ｐｈｅｎｏｍｅｎｏｎ
溶液呈红色
Ｔｈｅ　ｃｏｌｏｒ　ｏｆ　ｓｏ－
ｌｕｔｉｏｎ　ｉｓ　ｒｅｄ
３４５ｎｍ紫外灯下
观察到有黄绿色
荧光
Ｃｈａｒｔｒｅｕｓｅ　ｆｌｏｒｅｓ－
ｃｅｎｔ　ｌｉｇｈｔ　ｕｎｄｅｒ
ｕｌｔｒａｖｉｏｌｅｔ　ｌａｍｐ　ｉｎ
３４５ｎｍ
橙 黄 色
斑点
Ｙｅｌｏｗ－
ｏｒａｎｇｅ
ｓｐｏｔｓ
图１　芦丁标准曲线
Ｆｉｇ．１　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｒｕｔｉｎ
表２　小花棘豆黄酮的抗脂质氧化
活性测定结果（珔ｘ±ｓ）
Ｔａｂｌｅ　２　Ｒｅｓｕｌｔ　ｏｆ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ａｎｔｉ　ｌｉｐｉｄ　ｏｘｉｄａｔｉｏｎ
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄ　ｉｎ　Ｏｘｙｔｒｏｐｉｓ　ｇｌａｂｒａ　ＤＣ
试验设计
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ
ｄｅｓｉｇｎ
诱导时间／ｈ
Ｔｉｍｅ ＡＩ
菜籽油
Ｒａｐｅｓｅｅｄ　ｏｉｌ ２．７１±０．０８　 １．００
菜籽油＋０．１％ 维生素Ｃ
Ｒａｐｅｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ ４．６２±０．３４　 １．７１
菜籽油＋０．１％ 维生素Ｅ
Ｒａｐｅｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ ３．９２±０．２７　 １．４５
菜籽油＋０．１％ＢＨＴ
Ｒａｐｅｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ＢＨＴ ３．５０±０．１４　 １．２９
菜籽油＋０．１％ 样品
Ｒａｐｅｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｓａｍｐｌｅ ４．２７±０．４２　 １．５８
棉籽油
Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ ２．６６±０．１８　 １．００
棉籽油＋０．１％ 维生素Ｃ
Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ ４．１２±０．２０　 １．５５
棉籽油＋０．１％ 维生素Ｅ
Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ ３．４２±０．１９　 １．２９
棉籽油＋０．１％ＢＨＴ
Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ＢＨＴ ３．７５±０．２４　 １．４１
棉籽油＋０．１％ 样品
Ｃｏｔｔｏｎｓｅｅｄ　ｏｉｌ＋０．１％ｓａｍｐｌｅ ４．４５±０．３６　 １．６７
葵花籽油Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ　 １．０４±０．０８　 １．００
葵花籽油＋０．１％ 维生素Ｃ
Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ ２．５４±０．２１　 ２．４４
葵花籽油＋０．１％ 维生素Ｅ
Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ ２．４３±０．１５　 ２．３３
葵花籽油＋０．１％ＢＨＴ
Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ＋０．１％ＢＨＴ ２．１０±０．１７　 ２．０２
葵花籽油＋０．１％ 样品
Ｓｕｎｆｌｏｗｅｒ　ｏｉｌ＋０．１％ｓａｍｐｌｅ ３．００±０．２８　 ２．８８
猪油Ｌａｒｄ　 ０．２１±０．０２　 １．００
猪油＋０．１％ 维生素Ｃ
Ｌａｒｄ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｃ ２．９４±０．２２　 １４．００
猪油＋０．１％ 维生素Ｅ
Ｌａｒｄ＋０．１％ｖｉｔａｍｉｎ　Ｅ ２．５７±０．１６　 １２．２４
猪油＋０．１％ＢＨＴ
Ｌａｒｄ＋０．１％ＢＨＴ ４．０６±０．２９　 １９．３３
猪油＋０．１％ 样品
Ｌａｒｄ＋０．１％ｓａｍｐｌｅ ２．８６±０．３５　 １３．６２
·７４１·９期　　　　　　　　　　　　　　　　王　帅等：小花棘豆黄酮体外抗氧化作用
用，使反应体系中 Ｏ２－自由基浓度减小，从而加
速邻苯三酚自氧化反应的进行。由图３还可知，
小花棘豆黄酮在较低质量浓度时清除超氧阴离子
自由基的效果好于维生素Ｃ和维生素Ｅ，质量浓
度较高时清除率低于维生素Ｃ，但高于维生素Ｅ。
２．５　小花棘豆黄酮清除羟基自由基的效果
图４表明，随着小花棘豆黄酮质量浓度的增
加，其清除羟基自由基的活性也随之增加，黄酮质
量浓度与羟基自由基清除率呈量效的正相关关
系。由图４还可知，小花棘豆黄酮清除羟基自由
基的效果好于维生素Ｃ和维生素Ｅ。
２．６　还原力测定结果
由图５可知，小花棘豆黄酮的还原力随着质
量浓度的增加呈逐渐增强的趋势，其还原效果弱
于维生素Ｃ，但强于维生素Ｅ。说明其具有较强
的还原力，即小花棘豆黄酮有较强的抗氧化性。
２．７　螯合力测定结果
由试验结果可知，小花棘豆黄酮的螯合力弱
于ＥＤＴＡ，随着质量浓度的增加，其螯合力未能
显著增强，反而有下降的趋势（图６）。
图２　样品及对照对ＤＰＰＨ的清除作用
Ｆｉｇ．２　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｎ　ＤＰＰＨ
图３　样品及对照对超氧阴离子的清除作用
Ｆｉｇ．３　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｎ　ｓｕｐｅｒｏｘｉｄｅ　ａｎｉｏｎ
图４　样品及对照对羟基自由基的清除作用
Ｆｉｇ．４　Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ
ｃｏｎｔｒｏｌ　ｏｎ　ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ　ｆｒｅｅ　ｒａｄｉｃａｌ
图５　样品及对照品的还原力作用曲线
Ｆｉｇ．５　Ｒｅｄｕｃｉｎｇ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ
图６　样品及对照品的螯合力作用曲线
Ｆｉｇ．６　Ｃｈｅｌａｔｉｎｇ　ａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｓａｍｐｌｅ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏｌ
３　讨 论
根据小花棘豆黄酮及阳性对照的抗脂质过氧
化作用测定结果，小花棘豆黄酮提取液对不同油
样均有一定的抗氧化性。其对植物性油脂的抗氧
化性较强，而对动物性油脂的抗氧化性较弱。可
（下转第１５３页）
·８４１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１卷
参考文献：
［１］　Ｋｒｉｓｈｎａ　Ｓ　Ｈ，Ｃｈｏｗｄａｒｙ，Ｇ　Ｖ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ
ｓａｃｃｈａｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｅｔｈａ－
ｎｏｌ　ｆｒｏｍ　ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｉｃ　ｂｉｏｍａｓｓ［Ｊ］．Ｊ　Ａｇｒｉｃ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ，
２０００，４８（５）：１９７１－１９７６．
［２］　Ｈｏｎｇ　Ｊ，Ｔａｍａｋｉ　Ｈ，Ａｋｉｂａ　Ｓ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｌｏｎｉｎｇ　ｏｆ　ａ　ｇｅｎｅ　ｅｎｃｏ－
ｄｉｎｇ　ａ　ｈｉｇｈｌｙ　ｓｔａｂｌｅ　ｅｎｄｏ－β－１，４－ｇｌｕｃａｎａｓｅ　ｆｒｏｍＡｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ
ｎｉｇｅｒ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｙｅａｓｔ［Ｊ］．Ｊ　Ｂｉｏｓｃｉ　Ｂｉｏｅｎｇ，２００１，
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［３］　Ｌｉ　Ｙ　Ｈ，Ｄｉｎｇ　Ｍ，Ｗａｎｇ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｎｏｖｅｌ　ｔｈｅｒｍｏａｃｉｄｏｐｈｉｌｉｃ
ｅｎｄｏｇｌｕｃａｎａｓｅ，Ｂａ－ＥＧＡ，ｆｒｏｍ　ａ　ｎｅｗ　ｃｅｌｕｌｏｓｅ－ｄｅｇｒａｄｉｎｇ
ｂａｃｔｅｒｉｕｍ，Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｐ．ＡＣ－１［Ｊ］．Ａｐｐｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｂｉｏｔｅｃｈｎ－
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８５１－８６１．
（上接第１４８页）
能是由不同的油样中所含的不饱和脂肪酸成分及
组成比例的差异，造成小花棘豆黄酮提取液在不
同油样中的协同抗氧化能力表现不同。标准化合
物———维生素Ｅ是有效的油脂氧化抑制剂，被公
认为是一些低密度脂蛋白的主要保护因子［９］，本
研究中小花棘豆黄酮对４种油脂的抗氧化保护作
用均强于维生素Ｅ，可作为一种新的食品抗氧化
剂进行开发。
小花棘豆黄酮提取液对不同自由基的清除能
力均较强，根据刘璐［４］的研究，小花棘豆中黄酮类
成分主要以黄酮苷的形式存在。且均为氧苷，苷
元主要为芹菜素、白杨素、木犀草素、山柰酚、槲皮
素、鼠李素、异鼠李素、鼠李柠檬素、甲基鼠李素
等。其对自由基的清除为多种物质复合作用，具
有较强的自由基清除能力。
４　结 论
通过对小花棘豆黄酮提取液抗脂质氧化作
用、３种自由基的清除作用、还原力及螯合力的测
定，小花棘豆黄酮提取液表现出较强的抗脂质氧
化性和自由基清除能力，较高的还原力和一定的
螯合力，有作为天然抗氧化剂进一步开发利用的
价值。
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·３５１·９期　　　　　　　　张华姣等：枝状枝孢菌Ｆ４－１液体发酵产纤维素酶及部分酶学性质研究