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斑花黄堇化学成分的研究



全 文 :[成分分析]
斑花黄堇化学成分的研究
确 生1,2, 陈卫东1, 吴 江3, 林鹏程2*
(1. 天津大学管理与经济学部,天津 300072;2. 青海民族大学药学院,青海省青藏高原植物化学重点实
验室,青海 西宁 810007;3. 青海民族大学化工学院,青海 西宁 810007)
收稿日期:2016-04-28
作者简介:确 生 (1968—) ,男 (藏族) ,博士生,教授,从事藏医药传承与创新研究。Tel:13997389914,E-mail:qsyang96 @
163. com
* 通信作者:林鹏程 (1966—) ,男,博士,教授,博士生导师,从事天然药物化学研究。Tel:13897241263,E-mail:qhlpc@ 126. com
摘要:目的 研究藏药斑花黄堇 Corydalis conspersa Maxim. 的化学成分。方法 斑花黄堇 95%乙醇提取物采用硅胶和
Sephadex LH-20 柱进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果 从中分离得到 11 个化合
物,分别鉴定为黄连碱 (1)、巴马亭 (2)、原阿片碱 (3)、血根碱 (4)、比枯枯灵 (5)、紫堇碱 (6)、四氢非洲防
己胺 (7)、(S)-5-羟基-7-甲氧基黄烷酮 (8)、2,4-二羟基双氢查耳酮 (9)、芦丁 (10)、β-谷甾醇 (11)。结论
所有化合物均为首次从该植物中分离得到。
关键词:斑花黄堇;化学成分;分离鉴定
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1001-1528(2016)11-2405-04
doi:10. 3969 / j. issn. 1001-1528. 2016. 11. 019
Chemical constituents from Corydalis conspersa
QUE Sheng1,2, CHEN Wei-dong1, WU Jiang3, LIN Peng-cheng2*
(1. School of Management,Tianjin University,Tianjin 300072,China;2. School of Pharmacy,Qinghai University for Nationalities;Qinghai Provin-
cial Key Laboratory for Chemistry of Plant Resources of Qinghai-Tibet Plateau,Xining 810007,China;3. Institute of Chemical Industry,Qinghai Univer-
sity for Nationalities,Xining 810007,China)
ABSTRACT:AIM To study the chemical constituents from Tibetan medicine Corydalis conspersa Maxim. .
METHODS The 95% ethanol extract of C. conspersa was isolated and purified by silica and Sephadex LH-20
column,then the structures of obtained compounds were identified by physicochemical properties and spectral data.
RESULTS Eleven compounds were isolated and identified as coptisine (1) ,palmatine (2) ,protopine (3) ,
sanguinarine (4) ,bicuculline (5) ,corydaline (6) ,tetrahydrocolumbamine (7) ,(S)-5-hydroxy-7-methoxyfla-
vanone (8) ,2,4-dihydroxydihydrochalcone (9) ,rutin (10) ,β-sitosterol (11). CONCLUSION All the
compounds are obtained from this plant for the first time.
KEY WORDS:Corydalis conspersa Maxim.;chemical constituents;isolation and identification
紫堇属 (Corydalis DC.)在全球约有 428 种,
广泛分布于北温带,南至北非、印度沙漠区及边缘
地区,少数在东非草原地区,主要产于亚洲[1],
其中中国有 298 种,以西南地区为主,在青藏高原
有 120 余种[2-3]。药理研究发现,该属植物具有镇
痛、抗炎、抗焦虑、保肝、杀虫、抗肿瘤等活
性[4-7]。斑花黄堇 Corydalis conspersa Maxim. 为罂
粟科紫堇属多年生草本植物,产于甘肃西南部、青
海中南部、四川西北部和西部、西藏东部和中部,
是生长在海拔 4 300 m以上高寒流石滩中的青藏高
原特色药用植物,全草用于治疗瘟疫病、烧伤、赤
巴病 (热证)等,是重要的寒性藏药药材,但对
其化学成分和药理活性的研究报道较少。因此,本
实验采用硅胶柱和 Sephadex LH-20 柱,对该植物
进行研究。
1 仪器、试剂与材料
X4 显微熔点仪 (温度计未校正) ;FTS /65-IR
红外光谱仪;HP-5988AEI-MS 质谱仪;VXR-300
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核磁共振波谱仪 (TMS 为内标)。柱色谱、薄层色
谱用硅胶均为青岛海洋化工有限公司产品;Sepha-
dex LH-20 为美国 Pharmacia Bioteck 公司产品。所
用试剂均为分析纯 (北京化工厂)。药材采自青海
省互助北山,由青海民族大学药学院林鹏程教授鉴
定为罂粟科紫堇属植物斑花黄堇 Corydalis conspersa
Maxim.。
2 提取与分离
取斑花黄堇全草干燥粗粉 5. 0 kg,95%乙醇渗
漉提取,提取液减压浓缩,得到 811 g 浸膏。取
50 g,200 mL 5%盐酸溶解,酸液用 Na2CO3 碱化
至 pH8,氯仿萃取 3 次,浓缩得 A 部分 (18 g) ;
碱性溶液用 NaOH 碱化至 pH10,萃取 3 次,合并
氯仿层,减压浓缩,回收氯仿,得 B部分 (21 g)。
其他浸膏加适量水混悬,依次用石油醚、乙酸乙酯
和正丁醇萃取,回收溶剂,分别得到石油醚
(25 g)、乙酸乙酯 (129 g)、正丁醇 (40 ∶ 1)萃
取物 (25 g)。A 部分萃取物经硅胶柱和 Sephadex
LH-20 色谱分离,氯仿-甲醇洗脱,得到 5 个流份
A1 ~ A5,从 A1 ~ A2 中得化合物 2;A3 用氯仿-甲
醇洗脱,得化合物 3 ~ 4、7;A4 部分洗脱,得到
化合物 5 ~ 6。B 部分经反复硅胶柱色谱分离,石
油醚-丙酮 (9 ∶ 1)洗脱,得到化合物 1。乙酸乙
酯萃取物反复用硅胶柱色谱分离,石油醚-丙酮洗
脱,得到化合物 8 ~ 9、11。正丁醇萃取物经硅胶
柱色谱分离,氯仿-甲醇-水 (13 ∶ 7 ∶ 2)洗脱,得
到 5 个流份 Fr1 ~ Fr5。Fr3 经硅胶柱色谱分离,氯
仿-甲醇-水 (13 ∶ 7 ∶ 2)洗脱,再经 Sephadex LH-
20 柱色谱,得到化合物 10。
3 结构鉴定
化合物 1:黄色针晶(CHCl3-MeOH) ,mp 126 ~
127 ℃,薄层喷碘化铋钾溶液显橙黄色。EI-MS
m/z:320[M]+,IR (KBr)cm -1:3 037,2 910,
1 642,1 507,1 479,1 385, 1 360, 1 325,
1 286,1 216,1 130,1 057,1 038。1H-NMR (300
MHz,DMSO-d6) δ:9. 95 (1H, s,H-8) ,8. 96
(1H,s,H-13) ,8. 03 (1H,d,J = 7. 8 Hz,H-
11) ,7. 81 (1H,d, J = 8. 8 Hz,H-12) ,7. 76
(1H,s,H-1) ,7. 09 (1H,s,H-4) ,6. 51 (2H,
s,-OCH2O-) ,6. 12 (2H, s, -OCH2O-) ,4. 88
(2H,t,J = 6. 4 Hz,H-6) ,3. 18 (2H,t,J =
6. 4 Hz,H-5)。13 C-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:
103. 2 (C-1 ) ,145. 6 (C-2 ) ,147. 3 (C-3 ) ,
108. 2 (C-4) ,128. 9 (C-4a) ,27. 1 (C-5) ,55. 0
(C-6) ,142. 3 (C-8) ,110. 5 (C-8a) ,142. 9 (C-
9) ,143. 8 (C-10) ,120. 3 (C-11) ,120. 8 (C-
12) ,133. 5 (C-12a) ,120. 8 (C-13) ,137. 1 (C-
14) ,118. 9 (C-14a) ,101. 8 (2,3-OCH2O-) ,
103. 4 (9,10-OCH2O-)。以上数据与文献 [8]基
本一致,故鉴定该化合物为黄连碱。
化合物 2:黄色针晶 (CHCl3-MeOH) ,mp
250 ~ 251 ℃,薄层喷碘化铋钾溶液显橙黄色。EI-
MS m/z:352[M]+, IR (KBr) cm -1: 2 843
(OCH3) ,1 608,1 520,1 510 (芳香核) ,1 635,
1 570 (C = N)。1H-NMR (300 MHz,CDC13) δ:
9. 90 (1H,s,H-8) ,8. 60 (1H,s,H-13) ,8. 10
(1H,d,J = 9. 1 Hz,H-12) ,7. 66 (1H,d,J =
9. 1 Hz, H-11 ) ,7. 50 (1H, s, H-4 ) ,6. 98
(1H,s,H-1) ,4. 21 (2H,t,J = 6. 4 Hz,H-6) ,
4. 20 (3H,s,-OCH3) ,3. 91 (3H,s,-OCH3) ,
3. 89 (3H,s,-OCH3) ,3. 87 (3H,s,-OCH3) ,
3. 30 (2H, t,J = 6. 4 Hz,H-5)。13 C-NMR (300
MHz,CDCl3) δ:153. 1 (C-9) ,151. 0 (C-10) ,
150. 3 (C-3 ) ,146. 7 (C-2 ) ,145. 5 (C-8 ) ,
136. 9 (C-13a) ,135. 1 (C-12a) ,130. 2 (C-4a) ,
127. 8 (C-9a) ,124. 1 (C-13b) ,123. 1 (C-13) ,
119. 8 (C-12) ,118. 7 (C-11) ,110. 5 (C-4) ,
108. 1 (C-1 ) ,62. 4 (9-OCH3 ) ,57. 1 (10-
OCH3) ,56. 9 (2-OCH3 ) ,56. 30 (3-OCH3 ) ,
55. 6 (C-6) ,27. 3 (C-5)。以上数据与文献 [9-
10]对照基本一致,故鉴定该化合物为巴马亭。
化合物 3:白色无定型粉末 (CHCl3-MeOH) ,
mp 205 ~ 206 ℃,薄层喷碘化铋钾溶液显橙黄色。
EI-MS m/z:353[M]+, IR (KBr) cm -1:1 720
(-CO-) ,2 772, 1 505, 1 112, 717 (-O-CH2-
O-)。1H-NMR (300 MHz,CDCl3)δ:6. 98 (1H,s,
H-1) ,9. 91 (1H,s,H-8) ,8. 60 (1H,s,H-13) ,
8. 10 (1H,d,J = 9. 0 Hz,H-12) ,7. 68 (1H,d,
J = 9. 1 Hz,H-11) ,7. 50 (1H, s,H-4) ,4. 20
(1H, t, J = 6. 3 Hz, H-6) ,4. 30 (3H, s,
-OCH3) ,3. 91 (3H, s,-OCH3) ,3. 89 (3H, s,
-OCH3) ,3. 87 (3H, s,-OCH3) ,3. 30 (2H, t,
J =6. 4 Hz,H-5)。13 C-NMR (300 MHz,CDCl3)δ:
109. 1 (C-1) ,143. 4 (C-2) ,146. 0 (C-3) ,108. 1
(C-4) ,134. 5 (C-4a) ,32. 5 (C-5) ,55. 2 (C-6) ,
52. 1 (C-8) ,117. 2 (C-8a) ,143. 5 (C-9) ,145. 6
(C-10) ,106. 1 (C-11) ,126. 2 (C-12) ,129. 0 (C-
12a) ,46. 4 (C-13) ,189. 8 (C-14) ,135. 6 (C-
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14a) ,41. 5 (-NCH3 ) ,100. 8 (2, 3-OCH2O-) ,
100. 5 (9,10-OCH2O-)。以上数据与文献 [11]基
本一致,故鉴定该化合物为原阿片碱。
化合物 4:无色晶体 (CHCl3-MeOH) ,mp
242 ~ 243 ℃,薄层喷碘化铋钾溶液显橙黄色。EI-
MS m/z:332[M]+, IR (KBr) cm -1:2 941,
2 870,1 590,1 470,1 360,1 325,1 280,1 035,
945,830。1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:7. 70
(1H, s, H-1) ,8. 25 (1H, s, H-4) ,10. 05
(1H,s,H-6) ,8. 70 (1H,d,J = 8. 5 Hz,H-
9) ,8. 10 (1H, d, J = 8. 5 Hz,H-10) ,8. 50
(1H,d,J = 9. 0 Hz,H-11) ,8. 30 (1H,d,J =
9. 0 Hz,H-12) ,4. 30 (3H, s,5-CH3) ,6. 30
(2H, s, 2, 3-OCH2O-)。
13 C-NMR (300 MHz,
DMSO-d6)δ:161. 0 (C-1) ,148. 5 (C-2) ,147. 6
(C-3) ,130. 1 (C-4) ,120. 0 (C-4a) ,130. 1 (C-
4b) ,150. 6 (C-6) ,130. 8 (C-6a) ,150. 0 (C-
7) ,145. 3 (C-8) ,118. 5 (C-9) ,120. 0 (C-10) ,
125. 3 (C-10a) ,125. 0 (C-10b) ,119. 8 (C-11) ,
101. 8 (C-12) ,110. 5 (C-12a) ,101. 8 (2,3-
OCH2O-) ,103. 4(7,8-OCH2O-) ,50. 8(-NCH3)。
以上数据与文献 [10] 基本一致,故鉴定该化合
物为血根碱。
化合物 5:棱状晶体 (CHCl3-MeOH) ,mp
180 ~ 182 ℃。EI-MS m/z:367[M]+,IR (KBr)
cm -1:1 745,1 650,1 470,1 435,1 368,1 315,
1 256,1 116,1 046,986,957。1H-NMR (300
MHz,CDCl3)δ:6. 59 (1H,s) ,6. 60 (1H,s) ,
6. 48 (1H,s) ,6. 56 (1H,d,J = 8. 0 Hz) ,6. 95
(1H,d,J = 8. 0 Hz) ,5. 66 (1H,d,J = 4. 0
Hz,-CH) ,4. 04 (1H, d, J = 4. 0 Hz,-CH) ,
2. 25 (2H,m,-CH2) ,2. 83 (2H,m,-CH2) ,
6. 21 (2H, s,-OCH2O-) ,2. 60 (-NCH3)。
13C-
NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:67. 0 (C-1) ,48. 0
(C-3) ,27. 5 (C-4) ,107. 0 (C-5) ,123. 9 (C-
5a) ,146. 8 (C-6) ,146. 2 (C-7) ,107. 8 (C-8) ,
130. 5 (C-8a) ,102. 5 (C-9) ,85. 6 (C-10) ,
168. 9 (C-11) ,141. 5 (C-1) ,116. 3 (C-2) ,
114. 5 (C-3) ,148. 0 (C-4) ,145. 3 (C-5) ,
110. 3 (C-6) ,102. 5 (C-7) ,50. 8 (-NCH3)。
以上数据与文献 [11] 基本一致,故鉴定该化合
物为比枯枯灵。
化合物 6:棱柱晶体 (EtOH) ,mp 135 ~
137 ℃,薄层喷碘化铋钾溶液显橙黄色。EI-MS
m/z:370 [M + 1]+, IR (KBr) cm -1:2 964,
2 900,1 617,1 490,1 220。1H-NMR (300 MHz,
CDCl3)δ:6. 90 (1H,s,J = 8. 2 Hz) ,6. 90 (1H,
d,J = 8. 2 Hz) ,6. 63 (1H,s) ,6. 60 (1H,s) ,
3. 80 (1H,s) ,1. 01 (1H,d,J = 6. 2 Hz) ,6. 89
(1H,d,J = 8. 4 Hz,H-12) ,6. 83 (1H,d,J =
8. 4 Hz,H-11) ,6. 69 (1H,s,H-1) ,6. 60 (1H,
s,H-4) ,4. 21 (3H,d, J = 15. 8 Hz,He-8) ,
3. 81 (12H,m,-OCH3 × 4) ,3. 70 (1H,d,J =
2. 3 Hz,H-14) ,3. 60 (1H,d,J = 15. 8 Hz,Ha-
8) ,3. 27 (3H,m,H-13) ,3. 12 (2H,m,H-
6) ,2. 63 (2H,m,H-5) ,1. 01 (3H,d,J = 6. 9
Hz,-CH3)。
13C-NMR (300 MHz,CDCl3)δ:150. 0
(C-9) ,148. 1 (C-3) ,146. 7 (C-2) ,146. 1 (C-
10) ,134. 5 (C-12a) ,128. 7,128. 4 (C-4a,C-
14a,C-8a) ,124. 8 (C-12 ) ,112. 7 (C-11 ) ,
110. 2 (C-4) ,107. 9 (C-1) ,63. 0 (C-14) ,61. 1
(-OCH3) ,57. 1 (-OCH3) ,55. 7 (-OCH3) ,55. 0
(C-8) ,51. 5 (C-6) ,40. 1 (C-13) ,29. 8 (C-5) ,
19. 2 (-CH3)。以上数据与文献 [12-13] 基本一
致,故鉴定该化合物为紫堇碱。
化合物 7:白色粉末,mp 218 ~ 219 ℃。EI-MS
m/z:342 [M + 1]+, IR (KBr) cm -1:2 968,
2 910,1 615,1 465,1 210。1H-NMR (300 MHz,
CDCl3)δ:8. 60 (1H,s) ,6. 87 (2H,d,J = 8. 0
Hz) ,6. 60 (1H,s) ,6. 63 (1H,s) ,6. 60 (1H,
s) ,3. 90 (1H,d,J = 15. 8 Hz) ,3. 80 (3H,s) ,
3. 69 (3H,s) ,3. 70 (3H,s) ,3. 40 (2H,m) ,
3. 15 (2H,m) ,2. 80 (1H,m) ,2. 50 (3H,
m)。13C-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:110. 2 (C-
1) ,144. 7, 143. 3 (C-2, 3) ,111. 2 (C-4) ,
131. 2 (C-4a) ,29. 1 (C-5) ,52. 8 (C-4a) ,28. 5
(C-5) ,50. 8 (C-6) ,54. 2 (C-8) ,151. 2 (C-9) ,
147. 1 (C-10) ,111. 8 (C-11) ,123. 8 (C-12) ,
127. 9 (C-12a) ,35. 9 (C-13) ,59. 3 (C-14) ,
131. 0 (C-14a) ,59. 2 (9-OCH3 ) ,55. 9, 55. 6
(-OCH3 × 2)。以上数据与文献 [11] 基本一致,
故鉴定该化合物为四氢非洲防己胺。
化合物 8:淡黄色晶体,mp103 ~ 104 ℃。1H-
NMR (300 MHz,CDCl3) δ:12. 02 (1H, s,5-
OH) ,7. 45 (5H,m,H-2→H-6) ,6. 06 (1H,
d,J = 2. 4 Hz,H-6) ,6. 04 (1H,d,J = 2. 4 Hz,
H-8) ,5. 40 (1H,dd,J = 3. 2,13. 2 Hz,H-2) ,
3. 06 (1H,dd,J = 13. 2,17. 2 Hz,H-3α) ,2. 81
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(1H,d,J = 3. 2,17. 2 Hz,H-3β) ,3. 78 (3H,
s,-OCH3)。
13 C-NMR (300 MHz,CDCl3)δ:79. 1
(C-2) ,43. 3 (C-3) ,195. 7 (C = O) ,164. 0 (C-
5) ,95. 0 (C-6) ,167. 8 (C-7) ,94. 2 (C-8) ,
162. 7 (C-9) ,103. 0 (C-10) ,138. 0 (C-1) ,
126. 0 (C-2) ,128. 8 (C-3) ,128. 8 (C-4) ,
128. 8 (C-5) ,126. 0 (C-6)。以上数据与文献
[14]基本一致,故鉴定该化合物为 (S)-5-羟基-
7-甲氧基黄烷酮。
化合物 9:黄色无定型粉末,mp 83 ~ 85 ℃。
1H-NMR (300 MHz,CDCl3) δ:12. 80 (1H, s,
2-OH) ,7. 62 (1H,d,J = 8. 8 Hz,H-6) ,6. 36
(1H,dd,J = 2. 0,8. 8 Hz,H-5) ,7. 31 ~ 7. 21
(6H,m,H-3,2 ~ 6) ,3. 22 (2H, t,J = 8. 0
Hz,H-α) ,3. 02 (2H,t,J = 8. 0 Hz,H-β)。13C-
NMR (300 MHz,CDCl3) δ:39. 6 (C-α) ,30. 3
(C-β) ,140. 7 (C-1) ,128. 3 (C-2) ,128. 5 (C-
3) ,126. 3 (C-4) ,128. 5 (C-5) ,128. 3 (C-6) ,
113. 7 (C-1) ,162. 8 (C-2) ,103. 5 (C-3) ,
165. 0 (C-4) ,107. 8 (C-5) ,132. 2 (C-6) ,
203. 7 (C = O)。以上数据与文献 [15-16]基本一
致,故鉴定该化合物为 2,4-二羟基双氢查耳酮。
化合物 10:淡黄色粉末,mp 185 ~ 186 ℃,盐
酸-镁粉反应呈阳性。EI-MS m/z:633[M + Na]+,
611[M + H]+。1H-NMR (300 MHz,DMSO-d6)δ:
7. 51 (1H,dd,J = 8. 1 Hz,H-6) ,7. 52 (1H,brs,
H-2) ,6. 81 (1H,d,J = 8. 1 Hz,H-5) ,6. 37
(1H,d,J = 1. 8 Hz,H-8) ,6. 21 (1H,d,J = 1. 8
Hz,H-6) ,5. 32 (1H,d,J = 7. 5 Hz,Glu H-1) ,
4. 38 (1H,brs,Rha H-1) ,3. 07 ~ 3. 69 (10H,m,
糖上其他氢) ,0. 98 (3H,d,J = 6. 0 Hz,Rha H-
6)。13 C-NMR (300 MHz,DMSO-d6) δ:156. 0 (C-
2) ,132. 8 (C-3) ,176. 7 (C-4) ,160. 4 (C-5) ,
97. 4 (C-6) ,163. 9 (C-7) ,93. 4 (C-8) ,155. 8 (C-
9) ,104. 1 (C-10) ,120. 4 (C-1) ,114. 8 (C-2) ,
144. 2 (C-3) ,147. 7 (C-4) ,115. 6 (C-5) ,120. 4
(C-6) ,101. 2 (Glu C-1) ,75. 0 (Glu C-2) ,76. 2
(Glu C-3) ,69. 4 (Glu C-4) ,75. 9 (Glu C-5) ,67. 1
(Glu C-6) ,69. 9 (Rha C-1) ,101. 1 (Rha C-2) ,
71. 2 (Rha C-3) ,71. 8 (Rha C-4) ,67. 5 (Rha C-
5) ,18. 1 (Rha C-6)。以上数据与文献 [17]基本
一致,与芦丁对照品在 TLC 上的 R f值相当,故鉴
定该化合物为芦丁。
化合物 11:无色针晶 (丙酮) ,mp 134 ~
136 ℃,TLC展开后用 10%硫酸乙醇溶液显色,呈
紫红色斑点,Libermann-Burechard 反应呈阳性。其
与 β-谷甾醇对照品在 TLC 上以环己烷-丙酮
(4 ∶ 1)、石油醚-丙酮 (5 ∶ 1)、石油醚-乙酸乙酯
(4 ∶ 1)分别展开,发现 R f值均一致,故鉴定该化
合物为 β-谷甾醇。
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2016 年 11 月
第 38 卷 第 11 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
November 2016
Vol. 38 No. 11