全 文 ：第 32卷　第 8期 西北农林科技大学学报 (自然科学版 ) Vol. 32 No. 8
2004年 8月 Jour. of No rthw est Sci-Tech Univ . o f Ag ri. a nd Fo r. ( Na t. Sci. Ed. ) Aug. 2004
6-BA和 NAA对袋鼠花组织培养特性的影响
乔保建 1, 2 ,刘宏敏 1 ,陈耀锋 2 ,张　明1 ,曹秀敏 1 ,李彦龙 1
( 1平顶山市农科所 ,河南平顶山 467001;
2西北农林科技大学 农学院 ,陕西杨凌 712100)
　　 [摘　要 ]　研究了不同质量浓度的 6-BA和 N AA对袋鼠花侧芽组织培养特性的影响。 结果表明 , 6-BA与
N AA配合使用能有效促进袋鼠花侧芽愈伤组织的形成和愈伤组织不定芽的发生。 促进愈伤组织形成的最佳激素
配比为 M S+ 6-BA 1. 0 mg / L+ NAA 0. 5 mg /L; 6-BA对袋鼠花侧芽愈伤组织不定芽的发生有显著的促进作用 ,在
低质量浓度 NAA条件下 ,随着培养基中 6-BA质量浓度的增加 ,促进效应更加明显 ,适合袋鼠花侧芽愈伤组织不
定芽形成的最佳激素处理为 MS+ NAA 0. 2 mg /L+ 6-BA 2. 0 mg /L;附加一定质量浓度 N AA的 1 /2 M S培养基 ,
能显著促进袋鼠花不定芽根的形成 ,其最佳培养基为 1 /2 MS+ 0. 1 mg /L N AA。
[关键词 ]　植物生长调节剂 ;袋鼠花 ;组织培养
[中图分类号 ]　 Q813. 1+ 2　　　　 [文献标识码 ]　 A [文章编号 ]　 1671-9387( 2004) 08-0057-03
　　袋鼠花 ( Anigozangthos ) ,又称河豚花 ,属苦苣
苔科丝花苣苔属 ,为多年生草本 ,株高 20～ 100 cm ,
茎枝红褐色 ,向下弯曲生长 ,叶椭圆形 ,花橘黄色 ,总
状花序 ,花冠中部膨大 ,两端缩小尖细 ,形似口袋 ,故
名袋鼠花 ,花形奇特而有趣 ,有极大的市场开发价
值。自然条件下 ,袋鼠花种子萌发率非常低 ,且萌发
时间长 ,生产上多采用扦插繁殖 ,繁殖系数很低 ,不
利于商品化生产 ,而且长期扦插无性繁殖易引起袋
鼠花种性退化。利用组织培养技术繁殖袋鼠花种苗 ,
可以有效克服以上不利因素 ,促进袋鼠花商业化生
产。目前 ,国内外对袋鼠花离体快繁方面的报道较
少 ,刘春等 [1 ]对袋鼠花花梗离体培养成苗进行了研
究。本试验研究了 6-BA和 NAA对袋鼠花离体侧芽
愈伤组织形成、不定芽诱导及试管苗生根的影响 ,旨
在探讨适合袋鼠花离体繁殖的最适激素质量浓度 ,
建立袋鼠花组织培养快繁技术体系。
1　材料与方法
1. 1　供试材料
　　试验材料为河南省郑州市陈砦花卉市场引进的
袋鼠花种苗 ,打顶催芽备用。
1. 2　试验方法
除去袋鼠花种苗叶片 ,经流水冲洗 20 min后 ,
剥离侧芽 ,用体积分数 0. 1%的升汞溶液消毒 6～ 8
min,再用无菌水冲洗 4次后 ,接入含有质量浓度配
比为 0. 5, 1. 0, 2. 0 mg /L 6-BA和 0. 5, 0. 1, 0. 2
mg /L N AA的 MS培养基中 ,每处理加入 1%活性
炭 ,以吸附培养过程中切割伤口分泌的褐色物质 ,每
瓶接种 1个侧芽 ,置于 3 000 lx光照 , 25～ 28℃条
件下诱导培养 20 d。待愈伤组织形成并生长一段时
间后 ,统计分析不同激素条件下袋鼠花愈伤组织诱
导率 ,愈伤组织诱导率= (形成愈伤组织的侧芽数 /
转入侧芽总数 )× 100%。袋鼠花愈伤组织形成后 ,将
其及时转入含相同激素配比处理的愈伤组织不定芽
分化培养基中 ,分化培养基中活性炭浓度降低为
0. 3% 。不定芽分化 20 d后 ,统计袋鼠花不定芽数 ,
计算每块愈伤组织分化芽数。 不定芽发育成带有
1～ 2个叶片的幼苗时 ,及时转入到质量浓度分别为
0, 0. 1 mg /L的 6-BA和 NAA配比的生根培养基中
进行生根培养 ,各培养基中分别加入 1%活性炭 ,生
长一定时间后 ,统计分析生根芽数及平均每芽生根
苗数。
2　结果与分析
2. 1　 NAA和 6-BA对袋鼠花愈伤组织形成的影响
　　将袋鼠花侧芽接种在含有不同 NAA和 6-BA
配比的 M S培养基上 ,诱导培养 20 d后 ,愈伤组织
的诱导结果 (表 1)表明 ,在相同 NAA质量浓度下 ,
[收稿日期 ]　 2003-11-17
[基金项目 ]　河南省星火计划项目 ( 02330340200)
[作者简介 ]　乔保建 ( 1972- ) ,男 ,河南平顶山人 ,在读硕士 ,主要从事农业生物技术研究。
DOI : 10. 13207 /j . cnki . jnwaf u. 2004. 08. 012
袋鼠花侧芽愈伤组织诱导率随 6-BA质量浓度的增
加呈先增加后降低的趋势 ,效应比较显著 , 6-BA与
NAA配合使用时 6-BA的最佳质量浓度为 1. 0
mg /L; 6-BA在 0. 5～ 1. 0 mg /L时 ,与较高质量浓
度的 NAA配合使用 ,有利于袋鼠花愈伤组织的形
成。在本试验中 ,促进袋鼠花愈伤组织形成的最适激
素配比为 MS+ NAA 0. 5 mg /L+ 6-BA 1. 0 mg /L。
表 1　 6-BA和 NAA对袋鼠花愈伤组织诱导率的影响
Table 1　 Effect of N AA and 6-BA on the induction frequency o f ca llus
培养基代号
Number
N AA /
( mg· L- 1) 6-BA/( mg· L- 1 )
接种瓶数
No. of
explan ts
愈伤组织数
Calli
f ormed
诱导率 /%
Induction
f requency
1 0. 5 0. 5 22 10 45. 4
2 0. 1 0. 5 24 8 33. 3
3 0. 5 1. 0 23 19 82. 6
4 0. 1 1. 0 24 15 62. 5
5 0. 5 2. 0 23 14 60. 8
6 0. 2 2. 0 24 15 62. 5
2. 2　 NAA和 6-BA对袋鼠花愈伤组织不定芽分化
的影响
在袋鼠花愈伤组织形成过程中 ,可以明显观察
到大量不定芽形成 ,转入到相同激素质量浓度配比
的培养基中 ,结果 (表 2)表明 ,在 6种不同配比的培
养基上分化不定芽的愈伤组织均达到 100% ,但对
不定芽的诱导量差异很大 ,在 6-BA保持不变的情
况下 ,降低 NAA质量浓度可显著提高袋鼠花愈伤
组织不定芽诱导率。随着 6-BA质量浓度增加 ,这种
效应更加明显 ,当 NAA和 6-BA质量浓度比达到
1∶ 10时 ,对愈伤组织花芽分化的诱导效应最明显。
综合分析表明 ,在供试的 6个处理中 , M S+ 0. 2
mg /L N AA+ 2. 0 mg /L 6-BA是袋鼠花愈伤组织
不定芽分化的最佳激素配比。
表 2　 6-BA和 NAA对袋鼠花不定芽分化的影响
Table 2　 Effect of differ ent concent ration of 6-BA and NAA on the Anigoz angthos adventitio us shoo t production
培养基代号
Number
NAA /
( mg· L- 1 ) 6-BA /( mg· L- 1)
接种愈伤组织数
No. of
cal lus
分化愈伤组织数
No. of
production
分化率 /%
Frequency of
prod uct ion
分化总芽数
No. of
buds
平均每块愈伤组织分化芽数
Av erage
bud per
calli
1 0. 5 0. 5 8 8 100 40 5. 0
2 0. 1 0. 5 9 9 100 54 6. 0
3 0. 5 1. 0 10 10 100 59 5. 9
4 0. 1 1. 0 10 10 100 102 10. 2
5 0. 5 2. 0 10 10 100 65 6. 5
6 0. 2 2. 0 9 9 100 121 13. 4
2. 3　无机盐及激素对袋鼠花生根的影响
不定芽形成后 ,转入含有不同激素质量浓度处
理的 MS和 1 /2M S培养基中进行生根培养 ,结果见
表 3。
表 3　无机盐浓度和激素对袋鼠花生根的影响
Table 3　 Effec t of the concentra tion o f ino rganic salt and plant hormone on roo ting
培养基代号
Number
培养基
Medium
6-BA /
( mg· L- 1) N AA
/
( mg· L- 1 )
接种芽数
No. of
buds
生根芽数
No. of
rooting
平均生根数
Av erage
rooting
1 M S 0 0 20 12 2. 5
2 M S 0 0. 1 20 15 4. 0
3 M S 0. 1 0. 1 20 0 0
4 1 /2 M S 0 0 20 18 6. 0
5 1 /2 M S 0 0. 1 20 20 7. 5
　　由表 3可以看出 ,生根培养基中附加 6-BA完
全抑制了袋鼠花不定芽根的形成 ,含或者不含 NAA
的 MS培养基和 1 /2 M S培养基均能促进袋鼠花不
定芽根的形成 ,在 MS和 1 /2 M S培养基中附加 0. 1
mg /L的 NAA,生根效率均明显高于不附加 NAA
的 MS培养基和 1 /2 M S培养基 ; 1 /2 M S培养基的
生根效率显著高于相同条件下的 M S培养基。促进
袋鼠花不定芽生根的最佳培养基为 1 /2 M S+ N AA
58 西北农林科技大学学报 (自然科学版 ) 第 32卷
0. 1 mg /L。
3　结论与讨论
有关植物生长调节剂对植物组织培养特性的研
究已有大量报道 [1～ 8 ]。 本研究结果表明 , 6-BA与
NAA配合使用能显著促进袋鼠花侧芽脱分化形成
愈伤组织。 Skoog等 [7, 8 ]研究证实 ,愈伤组织产生根
和芽取决于细胞分裂素和生长素的比值 ,比值高时
有利于芽的分化 ,比值低时有利于根的分化。本研究
结果表明 ,适合袋鼠花侧芽愈伤组织不定芽分化的
最佳激素配比为 MS+ NAA 0. 2 mg /L+ 6-BA 2
mg /L。 NAA对不定芽根的诱导已在大多数植物中
研究证实 [1, 3, 6 ] ,本研究结果表明 , 1 /2 M S+ 0. 1
mg /L N AA能有效诱导袋鼠花不定芽根的形成。
刘春等 [1 ]用袋鼠花花梗为外植体进行离体培
养 ,得出了袋鼠花组织培养各个诱导阶段的激素附
加量。本研究采用的外植体为袋鼠花侧芽 ,所得出的
结论与刘春等 [1 ]有差异 ,这可能是由于取材部位不
同 ,侧芽在离体培养前比花梗积累了更多的 6-BA,
在愈伤组织诱导时添加的 6-BA相对减少。另外 ,本
研究仅就 6-BA和 NAA两种植物生长调节剂对袋
鼠花组织培养的影响进行了试验 ,有关其他植物生
长调节剂对袋鼠花组织培养过程中各阶段的影响还
有待进一步深入研究。
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Effect of 6-BA and N AA on th e tissue culture of Anigozangthos
QIAO Bao- jian
1, 2 , LIU Hong-min
1 , CHEN Yao-feng
2 ,
ZHANGMing
1 , CAO Xiu-min
1 , LI Yan-long
1
( 1 Pingdingshan Agricul tural Scienti fi c Inst itute ,Pingdingshan, Henan 467001,China;
2 College of Agronomy ,N orthwest Sci-Tech University of Agriculture and Forestry , Yangling, Shaanx i 712100,China )
Abstract: The cultural characteristic of Anigozangthos bud in vit ro was studied using madia containing
6-BA and N AA. The resul ts show ed tha t the optimum concentration combination o f 6-BA with N AA in the
media could signi ficiant ly promote dedif ferentia tion o f Anigozangthos bud tissue and redi fferentiation of
Anigozangthos calli. The best medium for cal lus fo rmation of Anigozangthos bud tissue w as M S medium
w ith 6-BA 1. 0 mg /L, N AA 0. 5 mg /L. It w as found tha t 6-BA could promote redi fferentia tion of
Anigozangthos callus significiantly , th e f requency of Anigozangthos callus adventi tio us shoot production
w as increased wi th increasing concentration o f 6-BA in medium containing low concentration N AA. The
best medium fo r Anigozangthos callus adventitio us shoo t production w as M S medium with 6-BA 2. 0
mg /L, N AA 0. 2 mg /L. The results also show ed that N AA could promote adventi tio us roo t forma tion of
Anigozangthos adventi tious shoo t, the best medium fo r ro ot fo rmation of Anig ozang thos adventitio us shoo t
w as 1 /2 M S medium with 0. 1 mg /L N AA.
Key words: plant ho rmone; Anigozangthos; tissue culture
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