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茶藨子叶状层菌研究概况及开发利用



全 文 :91
第 1 5 卷 第 1 期
2013 年 1 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 15 No. 1
Jan .,2013
茶藨子叶状层菌研究概况及开发利用
范轶欧1,陈敏1,周雯1,徐凌川2,卢连华1
(1.山东省疾病预防控制中心毒理所,山东 济南 250014 ;2.山东中医药大学药学院,山东 济南 250014)
摘 要:目的:探讨茶藨子叶状层菌(Phylloporia ribis)食用的可行性。方法:通过对茶藨子叶状层菌化学成分、
药理作用、安全性评价及社会人群中的食用状况的分析,探讨其食用的可行性。结果:①茶藨子叶状层菌的主要化
学成分为三萜类、甾醇类、多糖类和苯乙烯基吡喃酮类等,符合食品应当有的营养要求。②茶藨子叶状层菌具有抗
炎、抗病毒、治疗肿瘤和糖尿病等药理学作用。③安全性评估的资料很少,应进一步开展动物和临床实验。④社会
人群茶藨子叶状层菌的认知度较高,作为养生食用普遍;单独食用口味不佳,可作为食品的配方食用。结论:茶藨子
叶状层菌作为食用开发是可行的,但应实行安全性评估。
关键词:茶藨子叶状层菌;化学;药理;食用
中图分类号:R282 文献标志码:A 文章编号:1673-842X (2013) 01- 0091- 04
收稿日期:2012-07-22
基金项目:山东省中医药科技发展计划项目(2011-196)
作者简介:范轶欧(1978-),女,辽宁大连人,主管医师,博士,研究方向 :营养与食品安全。
通讯作者:卢连华(1972-),男,山东临沂人,副主任医师,研究方向 :中药新药开发及新剂型研究。E-mail :sdcdc@tom.com。
Current Research Situation of Phylloporia ribis and Its Prospects of Application and Exploitation
FAN Yiou1,CHEN Min1,ZHOU Wen1,XU Lingchuan2,LU Lianhua1
(1.Center for Disease Control and Prevention of Shandong,Jinan 250014,Shandong,China ;2.School
of Pharmacy,Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan 250014,Shandong,China)
Abstract :Objective :To investigate the food and medicine feasibility of Phylloporia ribis and provide a
theoretical basis for the development of this new resources food. Methods :In search of the phytochemincal
constituents,pharmacological activities,toxicity and social groups in the food situation of this kind of
学平台的基础上,建立《温病学》研究性教学网站,
并通过网络平台,发布信息及教学文件,建立题库及
在线考试系统,加强、促进师生间的互动交流,为更
好地开展研究性教学服务。
2.5 考核方法建设
基于研究性教学的特点及目的,应建立灵活的
考核方法。为了相对准确评判学生的学习效果,促
进学生积极、主动的学习,对学生的课程考核要改变
传统的以考试成绩为准的方法。在《温病学》研究
性教学课程中,采用灵活的考核形式,最终学生成绩
的评判包括如下几个方面的综合 :提交作业情况、
课堂讨论情况、小组讨论参与情况以及最后卷面考
试成绩。在最后的卷面考试中,要偏重对学生实践
能力的考察,如增加病案分析等题型的比重,以考察
学生实际解决问题能力。
2.6 课程教学评价方法建设
为了评价《温病学》课程研究性教学的教学效
果,采取多种形式的评价方法。首先在教学中通过
班级对照的方法,对比研究性教学与传统教学方法
对于学生知识的学习及技能的培养的不同效果 ;其
次,设计合理的调查问卷,通过问卷调查了解学生的
学习效果以及对不同教学方法的意见。
3 小 结
专业课程的教学改革是一个渐进的过程,在
这个过程中,除了教师的主动参与外,在中医学课
程研究性教学课程体系的构建过程中,还要注意
以下几方面问题 :①改变教师为学习主体的传统
思想,坚持以学生为学习主体的理念。学习是一
个知识构建的过程,而构建过程的主体应该是学
生而非教师,教师在此过程中要充当引导者和协
调者的角色 ;②要充分调动学习生学习的主动性、
参与性。研究性教学方法强调学生是学习的主体,
因此在学习的过程中要调动每一个学习主体的主
动性、参与性,学生只有积极主动的参与到学习的
过程中,才能顺利的构建自己的知识体系 ;③完善
保障机制。新的教学方法的顺利开展,还要有良
好的外部环境支持。首先是学校教务部门能为课
程教学改革提供灵活的政策支持,让教师能够专
心开展教学改革工作 ;其次,图书馆等单位能提供
方便的专业知识信息的获取途径,为学生开展自
主学习提供有力保障。
以上内容探讨了中医《温病学》研究性教学课
程体系构建,在不断探索的基础上,逐步完善、优化
教学方法,建立合理的考核、评价机制,为寻求符合
中医学学科特点的教学方法及课程体系服务,为培
养既具备扎实专业基础知识,又有较高临床动手能
力的合格的中医药人才服务。◆
参考文献
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辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 5 卷
茶藨子叶状层菌[Phylloporia ribis(Schumach. :
Fr.)Ryvarden]是一种常见真菌,民间广泛用于清热
解毒、消肿利咽、降血糖和抗肿瘤等[1]。目前国内外
已经对该菌进行了初步的药理学研究,从中发现了
白桦脂酸、麦角甾醇、β-D-葡聚糖、Hispidin及其衍
生物和叶绿酸-C等生理活性物质,具有抗氧化、增
强免疫力和诱导肿瘤细胞凋亡等广泛的药理作用。
本文就近年来对茶藨子叶状层菌的化学成分、药理
作用、安全性评价及人群食用情况等方面的研究作
一概述,并为该菌进一步开发利用提供科学依据。
1 茶藨子叶状层菌概述
茶 藨 子 叶 状 层 菌 为 锈 革 孔 菌 科
(Hymenochaetaceae) 叶 状 层 菌 属(Phylloporia)
真 菌,属 于 担 子 菌 门(Basidiomycota),同 担
子 菌 纲(Homobasidiomycetes),锈 革 孔 菌 目
(Hymenochaetales)[2]。 该 菌 主 要 生 长 在 茶藨子
属(Ribesa)、忍冬属(Lonicera Linn.)和毛核木属
(Symphoricarpos)等的树干基部,能引起白腐病
(white rot)和髓腐病(heartrot)[3]。担子果通常多
年生,平伏或反卷生长,软木栓质,初期呈白色或黄
白色,有被绒毛,成熟后形成黄褐色带有凹面和小
结节的皮壳 ;菌盖表面相糙,硬而韧,覆瓦状或玫
瑰花状排列,橄榄黄色至黄褐色,无光泽,具同心环
纹及细微绒毛,可达15 cm×20 cm×4 cm,厚度可
达3 cm ;菌肉呈纤维质,颜色比菌盖稍浅,菌孔通体
单色,表面赭褐色,菌管长1~2 mm ;菌丝系统为单
系的(monomitic,仅由生殖菌丝组成)或介于单系
和双系(dimitic,由生殖菌丝+骨架或联络菌丝组
成)之间,透明、壁厚、分枝状并有简单隔膜,直径
1.5~2.3 μm[1]。担孢子球形,淡褐色,光滑,梅尔泽
试剂(Melzers reagent)检测为阴性,直径(3.5~4)×
(2.5~3)μm[4-6]。文献记载茶藨子叶状层菌有12
种异名,最早可追溯到1803年,异名为Agaricus
ribis(Schumach.)Dubois 1803 [LEG ;MB468097],
出现频率较多的异名是Phellinus ribis(Quél. 1886
[LEG ;MB302820])和Fomes ribis(Gillet 1878 [LEG ;
MB152903]),1978年 被Ryvarden更 名 为Phylloporia
ribis[1],但Larsen、Cobb-Poulle [7]和Larsen等[8]并 未
接受这种观点。因此,茶藨子叶状层菌的分类学一
直悬而未决。近年来,分子生物学技术广泛应用于
植物系统发生学研究,植物细胞核核糖体内转录间
隔区(nrDNA ITS)序列由于可以提供较丰富的信息
位点,已被广泛用于研究被子植物近缘属间、种间等
分类阶元的系统发育关系[9]。从ITS 序列(见NCBI
GenBank :U27065.1)系统进化树分析,茶藨子叶状
层菌属于刺革菌科叶状层菌属真菌[2,10]。茶藨子叶
状层菌分布较广泛,世界上大部分地区均有记载,主
要见于欧洲、亚洲及北美洲的不同地区[4,11-12]。近
年来,我国真菌工作者对茶藨子叶状层菌资源进行
了调查,发现全国各地几乎都有分布,主产于东北地
区[13]。
2 茶藨子叶状层菌化学成分及其药理活性
茶藨子叶状层菌在民间有着悠久的药用历史,
用于主要治疗癌症、糖尿病、细菌与病毒感染和溃疡
等。由于我国对药用真菌化学成分的研究起步较晚,
因此对其化学结构,尤其是小分子化学组分的研究
并不多。近年来,随着分离纯化方法的改进以及结
构测定方法的更新,使药用真菌化学研究更加深入,
目前已从该菌中分离并鉴定出多种活性成分,例如
多糖类、甾体类、萜类和多元酚类色素等,各类成分
均表现有一定的生物活性。
2.1 多糖类化合物
药用真菌多糖是由十个以上单糖通过苷键连
接而成的大分子物质,广泛存在于高等真菌的细胞
壁中,其中单糖间以β-(1→3)(1→6)糖苷键连
接或以β-(1→4)(1→6)糖苷键连接的β-葡
聚糖(Polysaccharides)是具有免疫调节和抗肿瘤活
性的多糖[14]。目前已从茶藨子叶状层菌子实体中
分离出一种新型的水溶性多糖(PRP),占总糖量的
97.3%,平均分子质量约为8.59 kDa,主链是β-D-
葡聚糖,以(1→4)和(1→6)相连接,C-3位置有
分支(1→6)链接的糖苷残基[15]。
研究证实,药用真菌含有的β-D-葡聚糖具有
抗炎、抗病毒、抗氧化、抗辐射、降血糖、降血脂、保
肝、免疫调节和抗肿瘤作用[16-17]。Yuan等人的研究
表明,茶藨子叶状层菌葡聚糖(PRP)能够清除自由
基、降低氧化应激,从而对小鼠免疫损伤起保护效
应 ;PRP显著促进脾淋巴细胞增殖、提高NK细胞活
性并使CD8 T细胞数量和CD4+/CD8+增加[18]。另外,
研究表明,PRP在体外并无直接抑制肿瘤细胞增殖
的作用,但可通过化学修饰从而提高它的药理活性。
例如,其硫酸化的衍生物能促进体外免疫反应、诱导
肿瘤细胞凋亡、抗氧化、治疗糖尿病及其并发症[19]。
然而,PRP免疫调节和抗肿瘤作用机制还不十分清
楚,还有待于进一步研究。
2.2 三萜类(Triterpenoids)
1995年,Moon D等用甲醇提取茶藨子叶状
层菌子实体,从己烷萃取部分中分离得到了羽扇
豆醇型三萜类成分——白桦脂酸[betulinic acid,
3β-Hydroxy -20(29)-lupaene -28-oic acid,分子式 :
C30H48O3,分子量 :456.71][20]。研究显示,白桦脂酸是
一种具有高药理价值和保健功能的五环三萜类化合
medicinal plant,its edible feasibility was discussed. The advanced studies on chemical constituents and
pharmacological effects of this fungus in recent years were reviewed in this paper to provide a clue for the
modern research work. Results :① Phylloporia ribis contains chemical constituents of triterpenoids,steols,
polysaccharides,styrylpyrones,and so on. They accorded with nutritive requirements of food. ②Its extract
or active constituents could be used for antimicrobial,antivirus,antitumor and antidiabetic.③There was so
little information about its safty that addressed our concerns.④Community groups had a high consumption
awareness on this fungus. Conclusion :Phylloporia ribis as a new resource of food development is feasible,
but still need the safety evaluation.
Key words :Phylloporia ribis ;chemistry ;pharmacology ;edible
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1 5 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
物,具有抗肿瘤、抗艾滋病病毒、抗炎和体外抗疟病
作用等多种生物活性,且对正常细胞毒性低[21]。
2.3 甾醇类(Sterols)
真菌甾醇为一种植物甾醇类化合物,是真菌细
胞膜的重要结构组成成分,具有多种生物学活性,常
见的甾醇为胆甾醇、麦角甾醇(ergosterol)和豆甾醇
(stigmasterol)等。麦角甾醇是维生素D2的前体,后
者对于人体骨路的形成和调节生命代谢上起重要作
用[22]。麦角甾醇可通过抑制血管新生降低肿瘤细
胞增殖[23],还可与β-D-葡聚糖结合治疗很多种疾
病,例如抗肿瘤和免疫调节等[24]。过氧化麦角固醇
(5α,8α-epidioxy-22E-ergosta-6,22-dien-3β-ol)
能促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞增殖,可作为
治疗结肠癌和前列腺癌的药物[25-26]。1995年,Moon
D 等从茶藨子叶状层菌子实体己烷萃取分离出过氧
化麦角甾醇[20]。刘玉红等用石油醚、氯仿和95%乙
醇依次回流提,从茶藨子叶状层菌子实体分离得到
(22E,24S)-啤 酒 甾 醇[(22E,24S)-cerevisterol]、
麦角甾醇和麦角甾醇-5,8-过氧化物(ergosterol-5,
8-peroxide)[22]。李聪等用石油醚、乙酸乙酯和正丁
醇萃取忍冬茶藨子叶状层菌子实体得到了豆甾醇、
β-谷甾醇(β-sterol)、麦角甾醇(ergosterol)和麦角
甾醇-5,8-过氧化物(ergosterol-5,8-peroxide)[27]。
秦培国等从茶藨子叶状层菌发酵液和菌丝体的乙酸
乙酯提取物中分离出麦角甾醇[28]。鉴于茶藨子叶状
层菌含有多种有药用价值的甾体类化合物,因此进
行甾体化合物的提取和活性筛选将成为今后的一个
重要发展方向。
2.4 苯乙烯基吡喃酮(Styrylpyrones)类似物
刺革菌科真菌菌丝培养能产生多种具苯乙
烯基吡喃酮(Styrylpyrones)结构的黄色多元酚类
(Polyphenols)抗氧化色素,主要由Hispidin及其二
聚体和Phellinins系列化合物等构成。多孔菌目
(Aphyllophorales)中仅有刺革菌科真菌能产生苯乙
烯基吡喃酮类色素[29-30],现已知茶藨子叶状层菌能
产生大量的苯乙烯基吡喃酮类色素,呈现多种生物
活性,包括抗氧化、抗炎、抗细胞毒性、抗血小板凝
集、抗糖尿病、抗痴呆和抗病毒等,其作用机理与植
物中黄酮类物质类似[31]。
2.4.1 Hispidin及其二聚体
1889年,Zopf首 次 从 粗 毛 纤 孔 菌(Inonotus
hispidus)子实体中分离出一种黄色不旋光的晶
体,命 名 为Hispidin[32],但 直 至1961年 才 确 定 其
结 构 为6-(3,4-dihydroxystyryl)-4-hydroxy-2-
pyrone,分子式为C13H10O5[33]。Hispidin是一种选择
性PKCβ(蛋白激酶C)抑制剂(IC=2μm)[34],可
抑制肿瘤血管再生[35]。理论上,两分子hispidin单
体在解木素(ligninolytic)酶、虫漆酶(laccase)和过
氧化物酶(peroxidase)等的作用下可以氧化耦合
而成二聚体hypholomine B、3,14-bihispidinyl和1,
1-distyrylpyrylethan,但其自然合成的具体机制还不
清楚[36]。3,14-bihispidinyl和1,1-distyrylpyrylethan
是层孔菌属和纤孔菌属的重要组分,常用于二者
生化分类学研究[29]。Hispidin及其衍生物有较强
自由基清除能力,例如能清除超氧阴离子、羟自由
基、ABTS+·[2,20-azinobis(3-ethylbenzthiazoline-
6- su l f o n a t e)] 和 DPPH(1,1-d i ph en y l -1-
picrylhydrazyl)[37-38],从而有效的治疗氧化应激引起
的疾病,包括肿瘤、高血压、血管再生性疾病和自身
免疫性疾病[39]。
2.4.2 Phellinins系列化合物
Lee等人分别在2009年和2010年从茶藨子叶
状层菌分离出几种新型苯乙烯基吡喃酮类似物,包
括Phellinins A1、A2、B 和C,这些化合物能清除自由
基ABTS+·、DPPH和过氧化物等[30,40-41]。
2.5 多氯化合物
2008年,Lee等 人 在 茶藨子 叶 状 层 菌 子 实
体甲醇萃取物中发现几种多氯化合物,包括
叶 绿 酸(chlorophellins,CHL)和 对 甲 氧 四 氯 酚
(Drosophilin A,DA)。研究发现,CHL-C有很强大
的PPAR-γ拮抗效应,比II型糖尿病治疗药物格列
酮(rosiglitazone)的疗效还显著[42]。
2.6 其他成分
醛 类 成 分 主 要 有3-甲 基 丁 醛(Butanal,
3-methyl-)、2-甲基丁醛(Butanal,2-methyl-)和己
醛(Hexanal)等[27] ;酸性成分主要有原儿茶酸、壬二
酸(azelaic acid)、烟酸(niacin)、榈酸、正十六酸、亚
油酸和油酸等[22,27,43] ;含酮基化合物,如1-庚烯-3-
酮(1-Hepten-3-one)[27]。
3 安全性评价
研究显示,大多数情况下,浓度较高的真菌提
取液才具有抗氧化能力[44]。然而,真菌提取液浓度
的改变是否会产生额外的副作用,至今鲜有报道。
本研究小组对茶藨子叶状层菌进行了初步的安全
性评价,结果显示该菌急性经口毒性试验未见明显
症状,也无死亡,小鼠经口LD50>10 g/kg,属实际无毒
级。Ames 试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及
小鼠精子畸形试验未见茶藨子叶状层菌具有遗传毒
性作用[45]。
最近,韩国报道了两位患者饮用煮沸的茶藨子
叶状层菌后出现咽喉痛伴有寒战、急性扁桃体炎,血
液学检测发现白细胞和血小板减少[46]。
4 人群食用情况
为了收集茶藨子叶状层菌在社会人群中的食用
状况,探讨其食用的可行性,本研究小组于2011年5
月在临沂市平邑县6个乡镇进行了该菌食用状况的
问卷调查。在抽查的2681人中,茶藨子叶状层菌食
用的认知度为100%,食用者为全人群,没有特殊食
用对象 ;69.03%的人经常食用 ;70.60%的人每次食
用10~50 g ;78.89%的人用于治疗咽炎、喉炎和扁桃
体炎等口腔炎症,半数人群用于日常保健 ;食用方式
主要是晒干后泡水喝,占86.39% ;多数人认为该菌
在食用过程中最大的缺点是味道一般 ;调查结果显
示,没有因食用茶藨子叶状层菌而不适者。可见当
地居民日常生活中食用茶藨子叶状层菌相当普遍。
5 结 语
藨子叶状层菌具有多种活性成分,民间食用历
史悠久,具有极大的应用价值 ;另外,该菌在社会人
群中食用极为普遍,可以应用到新型保健品的开发
中。因此,经过上述对茶藨子叶状层菌主要成分和
药理活性的分析及人群食用等基础层面的初步论
证,为该真菌的深入研究与开发提供了依据。同时,
94
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报 1 5 卷
为了更好地开发和利用该真菌,还需在药理学和临
床等方面进行更深入的研究,其安全性也有待进一
步的评估论证。◆
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