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大岩桐腋芽丛生的诱导及植株再生



全 文 :·生物技术· 北方园艺 2008(7):222~ 223
第一作者简介:刘雪莲(1978-),女 ,硕士 ,讲师 ,研究方向为资源植
物学。E-mail:liuxuelian1023@163.com。
基金项目:通化师范学院自然科学科研资助项目(200601)。
收稿日期:2008-02-18
大岩桐腋芽丛生的诱导及植株再生
刘雪莲 , 顾 地州 , 高艳蕊 , 戴 广忠
(通化师范学院生物系 ,吉林通化 134002)
  摘 要:用大岩桐茎段为外植体 ,以MS为基本培养基 ,对添加不同浓度和比例的外源激素对
大岩桐腋芽丛生的诱导 、增殖及植株再生的影响进行探讨。结果表明:腋芽丛生诱导培养基以
MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L 效果最佳;腋芽增殖培养基以 MS+6-BA 3.0 mg/L+
NAA 0.2 mg/ L效果最佳;生根培养基以1/2 MS+NAA 0.2mg/L效果最佳。
关键词:大岩桐;丛生芽;植株再生
中图分类号:S 682.2+9;S 603.6 文献标识码:A 文章编号:1001-0009(2008)07-0222-02
  大岩桐(Sinningia specioca)又名落雪泥 ,是苦苣苔
科 ,苦苣苔属多年生肉质草本植物 ,是著名的观赏花
卉[ 1-4] 。目前有性繁殖需温室人工授粉采种 ,采种量极
少 ,成本高。生产上多采用扦插 、分球等方式进行繁殖 ,
但扦插繁殖系数低 ,分球繁殖有株型不整齐的特点[ 5-8] ,
不能满足大批量生产的要求。而通过组织培养诱导腋
芽丛生 ,从芽到芽的方式进行增殖 ,具有遗传性状稳定 ,
繁殖速度快等特点 ,是短期内大量繁殖大岩桐种苗的良
好途径。
1 材料与方法
1.1 试验材料及处理
取盆栽大岩桐幼嫩茎段作为外植体 ,用自来水洗
净 ,在超净工作台上用 75%乙醇处理30 s ,再用0.1%升
汞消毒 3 ~ 5 min ,最后用无菌水清洗 4 ~ 5次 ,切成 1 ~
1.5 cm的带腋芽的小段接种在各种培养基上进行培养。
1.2 培养基
诱导培养基配方:MS+6-BA 0.5 mg/L;MS+6-BA
0.3mg/L;MS+6-BA 0.1 mg/ L;MS+6-BA 0.3mg/L+
NAA 0.2 mg/L;MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.2 mg/
L;MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.2mg/L;MS+6-BA 2.
0mg/L+NAA 0.5 mg/ L。
继代增殖培养基配方:MS+6-BA 2.0 mg/ L+NAA
0.2mg/L;MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L;MS+
6-BA 4.0mg/L+NAA 0.2 mg/ L。
生根培养基配方:1/2 MS +NAA 0.1 mg/L;1/2
MS+NAA 0.2mg/ L;1/2 MS+NAA 0.5 mg/ L。
以上培养基均添加0.7%琼脂 ,3%蔗糖 ,pH 5.8。
1.3 培养条件
培养温度控制在 23 ~ 25℃,光照强度为 1 200 ~
1 500 lx ,光照时间为 11 ~ 12 h/d。
2 结果与分析
2.1 培养基配方对茎段腋芽丛生诱导的影响
  表 1 培养基配方对茎段腋芽丛生诱导的影响
培养基 激素/mg·L-1
6-BA NAA
接种数
/个
萌发丛生芽的
外植体数/个
诱导率
/ %
MS 0.5 — 36 15 41.7
MS 0.3 — 30 15 50.0
MS 0.1 — 36 19 58.8
MS 0.3 0.2 36 21 58.3
MS 0.5 0.2 33 21 63.6
MS 1.0 0.2 30 29 96.7
MS 2.0 0.5 33 24 72.7
  将灭菌后的大岩桐茎段接种到诱导培养基上 ,8 ~
10 d后观察 ,各培养基上的外植体均有不同程度的变
化 ,外植体叶腋处腋芽开始萌发 ,随着培养时间的延长 ,
腋芽丛生的效果较好 ,但有生长快慢 ,长势优劣之分。
不同的培养基配方对外植体腋芽丛生诱导的效果不同
(见表1),只添加细胞分裂素6-BA的培养基诱导率低且
丛生芽长势弱 ,丛生芽数量少。而添加了细胞分裂素和
生长素的培养基上腋芽丛生效果较好 ,诱导率高 ,丛生
芽多而壮。培养基 MS+6-BA 1.0 mg/ L+NAA 0.2
mg/L 最适合大岩桐外植体丛生芽的诱导(见图1),诱导
率达 96.7%。
2.2 培养基配方对大岩桐腋芽增殖的影响
  将诱导培养基上培养 45 d的大岩桐小苗单个切下 ,
再将其切成几小段后接种到继代增殖培养基中 ,培养2
周后观察。如表 2所示 ,随着 6-BA 浓度的增加大岩桐
腋芽增殖率有所提高 ,但增殖芽的长势不一;6-BA浓度
为 2.0 mg/L 时腋芽粗壮(见图 2),但增殖系数较低
(1.6);而 6-BA浓度为4.0mg/ L时增殖系数最高(3.6),
但不定芽生长细弱 ,有些丛生芽出现玻璃化现象。综合
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北方园艺 2008(7):222 ~ 223 ·生物技术 ·
增殖系数和丛生芽长势来考虑 ,较适合腋芽增殖的培养
基为 MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L。
  表 2  培养基配方对大岩桐腋芽增殖的影响
培养基 激素/ mg·L-1
6-BA NAA
接种数
/个
增殖芽数
/个 增殖系数
MS 2.0 0.2 36 57 1.6
MS 3.0 0.2 32 87 2.7
MS 4.0 0.2 30 108 3.6
2.3 不同培养基配方对大岩桐生根的影响
  表 3  不同培养基配方对大岩桐生根的影响
培养基 激素/ mg·L-1
6-BA NAA
接种数
/个
生根外植体数
/个 生根率/ %
1/2MS - 0.1 38 12 31.6
1/2MS - 0.2 38 35 92.1
1/2MS - 0.5 40 16 40.0
  将继代增殖培养基中生长良好 ,苗高 2 ~ 5 cm的小
苗单个切下 ,接种到生根培养基上 , 10 d后观察结果。
如表 3所示 ,3组生根培养基中第二组培养基生根效果
最好(见图 3 、4),生根率可达 92.1%。因此 1/2 MS+
NAA 0.2 mg/ L培养基是大岩桐组培苗生根最好的培
养基。
3 结论与讨论
通过试验可以得出 ,初代培养期间添加了 2种激素
的培养基上腋芽丛生诱导效果普遍好于只添加 1种激
素的培养基 ,且6-BA的比例增大有提高诱导率的趋势。
其中较适宜大岩桐腋芽诱导的培养基为 MS+6-BA 1.0
mg/ L+NAA 0.2 mg/L。在继代增殖培养期间 ,增殖率
随6-BA浓度的提高而逐渐增大 ,但腋芽的长势在增殖率
较低时较好。综合考虑该试验条件下较适宜大岩桐增殖
的培养基为MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2mg/ L ,较适
宜大岩桐生根的培养基为1/2 MS+NAA 0.2mg/ L。
试验中发现 ,在诱导培养过程中 ,生长素 NAA的浓
度为 0.5 mg/ L时 ,外植体切口处有少量愈伤组织出现 ,
继续培养可在愈伤组织表面产生大量不定芽。愈伤组
织繁殖途径具有繁殖系数大的特点 ,但不定芽的变异率
图 1 大岩桐在诱导培养基上萌生腋芽
图 2 大岩桐腋芽在继代培养基上的增殖效果
图 3、4 大岩桐无菌苗在生根培养基上生根
较高。因此 ,在实际生产过程中 ,若通过腋芽丛生途径
快繁大岩桐则需在诱导和增殖过程中使用较低浓度的
生长素。
参考文献
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Multiple Shoot Induction and Plantlet Regeneration in Sinningia speciosa
LIU Xue-lian ,GU Di-zhou , GAO Yan-rui , DAI Guang-zhong
(Department of Biolog y , Tonghua No rmal University , Tonghua , Jilin 134002 , China)
Abstract:With the stems of Sinningia speciosa being explants and the basic medium consists of Murashige and Skoog
(MS).Experiments were established in order to study the effect of addition different concentration and proportional of
exogenous hormones to the medium on derivation and multiplication of multiple shoot.Main achievements were as fol-
low s:the optimum medium for multiple shoot derivation was MS+6-BA 1.0mg/L +NAA 0.2mg/ L , the optimum me-
dium for proliferation was MS+6-BA 3.0 mg/L +NAA 0.2 mg/L , the optimum medium for rooting was 1/2 MS +
NAA 0.2 mg/ L.
Keywords:Sinningia speciosa;Multiple shoot;Plant let regeneration
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