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番油’幼叶愈伤组织诱导与再生植株
终翁萍( , ;` : 弓一 , 蔬菜研究所 , 石河子 8 : 2 0 。 )
C a l l u s I n d u e t i o n a n d P la n t l e t R e g e n e r a 爱i o n f r o ,n 丫一 ,。 : ; n g l ` e a v e s o f T o : , , a t ( )
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l 植物名称 番茄 ( vcL 。洲、 朋 叹 “执白。 ’ ·
2 材料类别 幼嫩叶片 。
3 培养条件 基本培养基为 M S 。 ( 1) 诱导愈
伤组织培养基附加 B A 2 0 9 / L (单位下同 ) 、
执人 ! ; 、 2 ) 分化培养基附加 B A 4 ; ( 3) 生根培
养基附加 lA 八 2 培养温度 2 5 〔 ’ ,每天补充光
照 工o h , 光照度 2 0 0 0 l x 。
4 生长与分化情况 外植体经清水洗涤 ,在
无菌条件下 , 用 0 . 1%升汞液浸泡 J m泊 . 再用
无 菌 水 冲 洗 3 ~ 4 次 , 然 后 切 成 0 . s c 。 只
0
. 不 c m 小块 . 接种干诱导培养基中 。 6 d 后叶
片开始膨大 , 边缘 有小突起产生 , 并向外反
卷 ; 16 d 后长出大量愈伤组织 , 呈浅绿或淡 白
色 , 质地较紧密 . 但无芽产生 。 当其增至 O ` 8
一 1 c m 时 、 挑选新鲜 、 上部稍带淡绿色点的
愈伤组织转入分化培养基中一星期后均有小牙产生 ; J S “ 后 · 将较大的芽转接到生根培
养基中 . 6 d 左右下部产生白色小点 , 并逐渐
形成曰 色恨 , ; t d 后邱形成完整植株 。 将培养
有棍试管苗的敏 产瓶口 打开 , 锻炼 3 d 后取
出 ,洗去棍 _ {_ 带有的培养基残渣 ,移找到营养
土中 , 浇透水 , 牛翠上薄膜 , 以保温湿 , 4一 s d
后去掉薄膜 .新叶长出时即定植田间 。
5 意义与进展 利用植物组织培养法使番
茄叶片再生植株 、 并成功地移栽于田间 , 目前
尚未见有详细完整的报告 。 本文结果对研究
番茄的杂交育种及杂交种的大量繁殖和保持
优 良品种性状有一定的参考意义 。
收稿 1 , 92一 l 卜 3n
盾叶毒的组织培养及植株再生
金 炜 郑生智、江苏省植物研究所 , 南京 : ,。。 、、 )
T i s s u e C u l t u r e a n d P i a n t i e t R e g e n e r a t i o n o f R “ 6 u s P 口 l t a t“ s
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Z 卜王E N S h e n g 一 Z ,飞j ( J I段 z一g s u In凡 t一 t u t e o f B o t a n y , N 之t n j xn g 2 10 0 14 )
l 植物名称 :
2 材料类别 :
3 培养条件 :
在无菌条件 一}万 一犷
用 0 . 1少一 H g洲 : 会
盾叶苟 ( 左痴绍 州 at 如 )
腋芽及叶 片-
腋芬剪 一F后 , 流水冲注千净 .
次 , 接 种到 ( l) M s 十 N A A O . 1 m g L/ ( 单位下 `
同 ) 一十 GB A Z千 G 八 :; 0 . 2月一 v c 5 0 培养莎 少 、 蔗
糖 3环 ,琼脂 O ` 5 5% , p H 5 . 8 。 培养室睡天光
7 0% 乙醇溶液中浸 3 0 5 ,再
泛泡 。 i n , 无菌 水冲洗 5 一 6 收稿 二与9 2 J 2 叮
·
t 9 0
·
DOI : 10. 13592 /j . cnki . ppj . 1993. 03. 012
照 x 6 h ,光照度 2 0 0 0 一x ,室温 2 5士 x丫二、 。
4 生长与分化情况 : _外植体培养 15 d 后 ,
腋 芽膨大什长 , 随之主茎延长 , 侧芽不断萌
发 ,形成节间较短的丛生芽 ,每个外植体最多
达 7 个丛生芽 。 以无菌苗的嫩叶为外植体 , 接
种到 ( 2 ) M S + N A A O . z 一于z T Z + V e 5 0 培养基
上 , 7 d 后叶片开始变得肿胀 ; 18 d 后 , 在叶片
顶部和基部靠近 中脉处表面突起 ; 2 4d 后发
现产生不定芽 ,将不定芽切下转移至培养基
(1 )上 , 不定芽伸长并增殖 。待 芽长至 0 . 5一
一 。 m 时 , 切下 , 在 5 0 0 m g / L xB A 溶液中浸一
下 ,转移到珍珠岩墓质中 , 在室温 25 ( 、 ,相对
湿度较高的环境下诱导生根 ; 竹 d 后即从芽
基 部 长 出 新根 获 得完 整 植 株 , 生根 率 为
87 %
。
2 5 d 后将生根小苗移植到泥炭土中 , 用
玻璃覆盖 , 保持湿度 ; 2 周后揭去玻璃 , 试管
苗成活率为 90 % 。
5 意义与进展 : 盾叶蓦为蔷薇科 , 悬钩子
属 ,属小果类果树 。 其组织培养 , 尚未见报道 。
本文结果对保护和利用该种植物的野生资源
具有一定意义 。
桃原生质体培养再生愈伤组织
甘 霖 邓秀新 章文才(华中农业大学园艺系 ,武汉 峨30 70 )
C a l lu s F o r m a t i o n f r o m P r o ot P la s st o f eP
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G A N L i n
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l 植物名称 桃 (斤创砚哪 尸~ ) “ 砂子早生 ” 进离析 , 将培养皿置于 30 一 S O r / m in 摇床上 ,
品种 。 8 一 10 h 后经 通5 扛m 不锈钢 网筛过滤 , 离心
2 材料类别 胚性愈伤组织的原生质体 。 ( 1 0 x g )5 m in , 洗涤后的原生质体用 25 %
3 培养条件 基本培养基采用 M T圈 ,根据 蔗糖一 13 %甘露醇界面梯度离心纯化 ,纯化
需要 附加 K SP 周 、 C H (椰乳 ) 、 M E (麦 芽提取 后的原生质体悬浮于 cP 一 1培养基 (M T + K SP
物 ) 、 LM P ( 低熔 点琼脂糖 )及活性炭等分 。 + 3% c H + 0 . 05 %M E + 0 . 5 m of / L 蔗糖 + .0
PH 5
.
7
,培养温度 26 士 I C ,光照 12 h/ d , 光 Z m ol L/ 甘露醇 ) 中 ,并调整密度至 4 x l0 5 /
照度 15 0 0一 ZO0 lx 。 m l ,用 0 . 2%荧光素双醋酸酷 (DF A )检测原生
3
.
1 胚性愈伤组织的获得与继代 取花后 质体的活力 。
8 周果实中的败育胚培养在 M T 固体培养基 3 . 3 原生质体培养及愈伤组织形成 培养
上 . 5 0 d 后部分败育胚产生白色的胚性愈伤 方 式有两种 : ( 1) 液体 浅层培养 。 将密度为
组织 ,将其继代保持在 M T + 0 . 05 %活性炭固 2只 1 0丫ml 的 Z ml 原生质体悬浮液培养在直
体培养基上 , 每 2 周继代 1 次 , 最终得到生长 径为 6 c m 的塑料培养皿 中成 一浅层 。 (2 )
旺盛的 “ 适应型 ”胚性愈伤组织 。 L M P 包埋培养 。 将密度为 4 x 10 5 /叫 的原生
3
.
2 原生质体的分离与纯化 取继代后 2 质悬浮液与用 1 . 2% L M P 固化的 P c 一 1 培养
周的新鲜愈伤组织进行酶解 。 酶液组成 为 : 基 (保持在 4 0 ℃水浴中 ) 等量混 合后 ,在培养
0
.
5%纤维素酶 ( on oz uk a R 一 10) 十 .0 75 %果 皿底部铺一簿层 (约 2 m l ) , 凝固后用吸管插
胶酶 ( s e r v a ) + 0 . 7 m o l / L甘露醇 + 1 2 · om m o l / L 入皿底 , 加 1 . 5 叫 P e 一 l 培养基 , 使含原生质
C a C I
: 十 0 . 7 m m o l / L K H ZP O ; 十 3 . 0 m m o l / L —M SE 。 酶解在 26 士 I C 黑暗条件下进行 。 为促 收稿 1。。 3一 02 一 2。 · 1 9 1 ·