全 文 :多叶棘豆提取总黄酮的微型实验
董银山1 ,赖乌云2 ,李增春1
(1.内蒙古民族大学 化学学院 ,内蒙古 通辽 028043;2.通辽市科尔沁区蒙古族中学 ,内蒙古通辽 028000)
〔摘 要〕采用微型实验方法从多叶棘豆中提取总黄酮 , 用分光光度法测定含量 , 总黄酮含量为 1.912%、回收
率为 100.1%.通过微型法与常规法比较 , 微型实验具有试剂用量少 ,时间短 , 效率高等优点 , 是一种值得推广
的实验方法.
〔关键词〕微型实验;多叶棘豆;总黄酮
〔中图分类号〕TQ028 〔文献标识码〕A 〔文章编号〕1671-0185(2008)01-0028-02
Experiment of Microscale Extraction Method of Total
Flavones fromOxytropis Myriophylla(pcll)DC
DONG Yin-shan1 , LAI Wu-yun2 , LI Zeng-chun1
(1.College of Chemistry , Inner Mongolia University for Nationalities , Tongliao 028043 , China;
2.Tongliao City Kerchin District Mongolian National M inority High Schoo l , Tongliao 028000 , China)
Abstract:Tries to microscale laboratory method ex traction of total f lavones in Oxy tropis my rio-
phylla(pcll)DC UV spectrophometry method was developed to determine the content of to tal
flavones.The average content of total flavones w as 1.91%.The average recovery of total flavones
was 100.1%.Experiment of mieroscale have the characters of shorter time and higher ef fiency
and so on.
Key words:Microscale laboratory;Oxytropis myriophylla(pcll)DC;To tal flavones
多叶棘豆是豆科植物 ,狐尾藻棘豆的干燥地上部分.有杀粘 、清热 、燥黄水 、愈伤 、生肌 、止血 、消肿 、软便之功效.黄酮类
化合物是植物中广泛存在的有效活性成分 ,具有活血化瘀 、保肝 、抗炎 、抗菌抗病毒及泻下 、解痉的多种药理作用.黄酮能与
多种元素形成配合物其配合物有抗菌消炎作用.另外黄酮类化合物还具有抗癌 、抗氧化作用.多叶棘豆中黄酮含量高 , 提取
总黄酮的报道很多 ,但是微型法提取总黄酮尚未报道过.
1 仪器和试剂
1.1 仪器 25 mL 烧瓶 ,恒压漏斗 , 直型冷凝管(微型),容量瓶 , 减压漏斗 , 玻璃棒 , 电热套 , 减压真空泵 , 1 mL 移液管 , 10
m L移液管 , 洗耳球 , 10 mL 比色管 ,比色皿 , 721 可见分光光度计(上海第三分析仪器厂),分析天平 HANGPING FA2004(上
海天平仪器厂).
1.2 试剂 80%乙醇 , 5% NaNO2 溶液 , 10% AI(NO3)3 溶液 , 4.3% NaOH 溶液 ,二次蒸馏水 ,芦丁(中国药品生物制品鉴
定所).
1.3 样品 多叶棘豆(扎旗罕山地上部分).
2 提取和结果
2.1 标准品溶液的制备 准确称取芦丁标准品 12.5 mg 于小烧杯中 ,加少量 80%乙醇溶解后定容至 50 mL 容量瓶中 ,摇
匀得芦丁标准溶液 ,浓度为 0.25 mg/ mL.
收稿日期:2007-08-20
基金项目:内蒙古自然科学基金项目(200607010209)
作者简介:董银山(1976-),男(蒙古族),内蒙古通辽市科左中旗人,在读硕士研究生 ,主要从事天然产物化学研究.
第 23 卷 第 1 期 内蒙古民族大学学报(自然科学版) Vol.23 No.1
2008年 1 月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Jan.2008
DOI :10.14045/j.cnki.15-1220.2008.01.031
2.2 提取 取 1g粉碎的多叶棘豆用滤纸包成柱型放入恒压分液漏斗(上端接直型冷凝管(微型)下端接 25 mL 烧瓶)内用
13 m L80%乙醇浸泡 1 h , 加热 1.5 h , 抽滤 ,再用 10 m L80%乙醇提取 0.5 h ,抽滤 , 合并两次滤液定容至 50 mL ,待测.
2.3 波长的选择 将提取液和标准品在 700 nm ~ 200 nm 内进行光谱扫描分析 , 发现在 500 nm 处有最大吸收峰 , 因此用
500 nm 作为检测波长.
2.4 标准曲线的绘制 取 0.00、0.40 、0.80 、1.20、1.60、2.00 mL 芦丁标准溶液于 10 mL 比色管中 ,按测定方法测定 , 得
出线性回归方程:C=9.584A+0.152 , R=0.9998.
2.5 样品测定 准确移取 0.60 mL的样品液于10 mL的比色管中 ,加水稀释至2.40 mL ,然后加入5%亚硝酸钠溶液 0.40 mL混
匀,放置6 min ,加入10%硝酸铝0.40 mL混匀,放置6 min ,再加入4.3%氢氧化钠溶液 4.0 mL用水稀释至刻度,摇匀 ,放置15 min ,
以样品做空白参比 ,用 721型分光光度计测定其吸光度.
2.6 测定结果 根据回归方程计算总黄酮含量和回收率见表 1 和 2.
表 1 样品测试结果
Table 1 The sample test result
序号 吸光度(A) 总黄酮含量(%) 平均含量(%) RSD(%)
1 0.227 1.93
2 0.222 1.89
3 0.225 1.92 1.91 0.492
4 0.223 1.90
5 0.224 1.92
表 2 回收率实验结果
Table 2 The recovery rate experiment result
样品量(mg) 加入量(mg) 测得值(mg) 回收率(%) 平均回收率(%) RSD(%)
19.395 0.05 23.468 97.8
18.995 0.05 23.045 97.8
19.225 0.05 23.555 103.5 100.1 1.98
19.083 0.05 23.215 99.7
19.158 0.05 23.135 101.6
2.7 稳定性实验 精密量取 0.5 m L芦丁贮备液 10份 , 按 2.5项中方法操作 ,每隔 10 min 测定1 次吸光度 , 测定后 90 min
内基本稳定.结果见表 3.
表 3 放置时间对吸收度的影响
Table 3 The effects of stored time on rate of absorption
放置时间(min) 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90
吸光度(A) 0.124 0.125 0.124 0.125 0.125 0.124 0.125 0.125 0.125 0.124
3 讨论
从实验结果来看 ,微型实验有以下几个优点:(1)消耗时间短 , (2)试剂用量少 , (3)安全性高等.文献报道过常规法提
取多叶棘豆总黄酮的含量为 2.14%.所以微型实验可以给提取方法和药理药效的进一步研究以及资源的开发提供了科学
依据.
参 考 文 献
〔1〕王群立 , 张力 ,包玉敏.超声波提取扁蓄中总黄酮〔J〕.内蒙古民族大学学报 , 2007 , 22(1):33-35.
〔2〕许良,苏日塔拉图 ,席海山,等.野生多叶棘豆中芦丁的动态积累规律〔J〕.内蒙古民族大学学报, 2006 , 21(3):53-55.
〔3〕徐宁.微波协助萃取法提取黄芩中总黄酮的工艺研究〔J〕.内蒙古民族大学学报 , 2005 , 20(1):41-42.
〔4〕乔俊缠.蒙药多叶棘豆总黄酮的测定〔J〕.中国民族医药 , 1998 , 4(2):47.
〔5〕刘湘.天然产物化学〔M〕.北京:化学工业出版社 , 2005.
〔6〕敖力布.蒙药多叶棘豆和硬毛棘豆总黄酮含量的比较研究〔J〕.中国民族医药 , 1998(4):66-67.
〔7〕巴根那.正交设计研究蒙药多叶棘豆总黄酮提取工艺〔J〕.内蒙古民族大学学报 , 2001(1):77-80.
〔责任编辑 郑 瑛〕
29第 1期 董银山等:多叶棘豆提取总黄酮的微型实验