全 文 ：蒙药材多叶棘豆中总黄酮的提取及含量测定
刘　妍 ,张　力 ,包玉敏 ,李　睿
(内蒙古民族大学化学学院 ,内蒙古 通辽　028043)
〔摘　要〕本实验采用超声波乙醇浸提法从多叶棘豆中提取总黄酮 , 并用分光光度法测定其含量.实验结果表
明 ,用 80%的乙醇浸泡 24 h , 超声 50 min ,可得到较多含量的黄酮 , 且测得总黄酮含量为 2.506 mg/g , 回收率
为 99.6%.
〔关键词〕多叶棘豆;总黄酮;分光光度法;含量测定
〔中图分类号〕TQ028　　〔文献标识码〕A　　〔文章编号〕1671-0185(2008)05-0514-03
Mongolian Medicine Duoyejidou Oxytropis Total
Flavonoids and Determination of the Extraction
LIU Yan ,ZHANG Li ,BAO Yu-min , LI Rui
(College of Chemistry , Inner Mongolia University for Nationalities , Tongliao 028043 , China)
Abstract:This experiment used ult rasound etharol ext raction f rom the duoyejidou to ext ract
oxyt ropis to tal f lavonids and used spectrophotometric determination of the content.The result
show s that w ith 80%ethanol fo r 24 hours immersion ultrasmic 50 minutes , can ext ract more
flavonids , and the content is 2.506 mg/g , the recovery is 99.6%.
Key words:Duoyejidou;Total f lavonone;Spectrophotometry ;Determination
多叶棘豆 ,为豆科棘豆属多年生草本植物 ,蒙古名为那布其日哈嘎-奥日都扎.生于草原地带和草甸
草原群落中 ,砾石质和沙质土壤上多见.分布于我国东北 、华北 ,蒙古 、东西伯利亚也有分布.在蒙医中 ,多
叶棘豆具有杀“粘”消热 ,愈伤生肌 ,消肿止血等功效.主治流感 、喉咙肿痛 、痈疮肿毒 、瘀血肿胀等〔1〕.
黄酮类化合物存在于植物体中 ,而且生理作用多种多样 ,这一认识在国内外引起各界人士的广泛重
视.黄酮类化合物具有增强免疫力 、活血化瘀 、抗炎抗菌 、抑制肿瘤 、扩张血管和降低血脂等药理保健作
用〔2〕.常用的提取方法有水煮 、超临界 CO2流体提取和有机溶剂浸提等〔3〕.本实验以乙醇为提取剂 ,采用
超声波法对多叶棘豆中黄酮类化合物进行提取 ,然后选用硝酸铝显色法 ,以芦丁为标准 ,对其含量进行测
定 ,并通过单因素实验确定了超声波提取法的最佳实验条件 ,从而对多叶棘豆的开发和利用提供了理论依
据.
1　实验部分
1.1　仪器 、试剂与实验材料
KQ3200V 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);T6新世纪紫外可见分光光度计(北京普析通
用仪器有限公司);FA2104N电子天平(上海民桥精密科学仪器有限公司);芦丁(中国药品生物制品检定
所.批号:100080-200306);多叶棘豆(采于通辽本地);乙醇 ,亚硝酸钠 ,硝酸铝 ,氢氧化钠 ,以上试剂均为
收稿日期:2008-01-06
基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(200607010209)
作者简介:刘妍(1983-),女 ,内蒙古扎兰屯市人 ,在读硕士研究生 ,主要从事天然产物化学方面研究.
第 23 卷　第 5 期 内蒙古民族大学学报(自然科学版) Vol.23　No.5
2008年 9 月 Journal of Inner Mongolia University for Nationalities Sep.2008
DOI :10.14045/j.cnki.15-1220.2008.05.005
分析纯.实验用水为二次蒸馏水.
1.2　标准曲线的绘制
准确称取芦丁标准品 25.00 mg与小烧杯 ,加入少量无水乙醇溶解 ,定容至 100 mL 容量瓶中 ,得芦丁标
准液 ,浓度为 0.25 mg/mL ,移取芦丁标准液 0.00、0.40 、0.80 、1.20 、1.60 、2.00 、2.40 mL分别置于10 mL 比色
管中 ,用水稀释至2.4 mL ,各加 5%亚硝酸钠 0.4 mL ,混匀 ,放置 6 min ,加 10%硝酸铝 0.4 mL ,混匀 ,放置 6
min ,加10%氢氧化钠4 mL ,用水定容至刻度 ,混匀 ,放置15 min.以蒸馏水为参比 ,在506 nm处测定吸光度值
(A),以 A为纵坐标 ,浓度 C为横坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程:A=-0.01587+10.434C , R=0.9993.
1.3　总黄酮的提取
准确称取多叶棘豆粉末 1.0000 g 于 100 mL 锥形瓶中 ,加入一定浓度乙醇 30 mL 浸泡 ,超声提取.过
滤 ,洗涤 ,滤液用该浓度乙醇定容于 100 mL 容量瓶 ,待测.
1.4　含量测定方法
准确量取 1.00 mL 提取液于 10 mL 比色管中 ,加水至 2.4 mL ,按 1.2步骤操作.以蒸馏水为参比 ,在
506 nm 处测定吸光度值(A),代入回归方程 ,计算其黄酮含量.
1.5　回收率的测定方法
精确量取 1.00 mL 提取液两份 ,分别置于 10 mL比色管中 ,其中一份加芦丁标液 1.00 mL ,按 1.2步
骤操作 ,测得吸光度 ,由下式计算其回收率.
回收率 =加标样测得总黄酮含量-样品中总黄酮含量芦丁标液的加入量 ×100%
2　结果与讨论
2.1　提取条件的选择(单因素实验)
2.1.1　乙醇浓度对黄酮提取率的影响
称取 1.0000 g 药材粉末 4份 ,分别用 20%、40%、60%、80%的乙醇浸泡 12 h ,超声 50 min ,在 506 nm
处测其吸光度值(A),计算总黄酮含量 ,结果见表 1.
表 1　乙醇浓度对黄酮提取率的影响
Table 1　 Ethanol concentration of flavonoids on the extraction rate
乙醇浓度% 20% 40 % 60% 80%
含量/ mg 1.67 2.13 2.41 2.57
提出率/ % 0.167 0.213 0.241 0.257
2.1.2　乙醇浸泡时间对黄酮提取率的影响
称取 1.0000 g 药材粉末 4份 ,用 80%乙醇分别浸泡 12 h 、24 h 、36 h 、48 h ,超声 50 min ,测其吸光度
值 ,计算总黄酮含量 ,结果见表 2.
表 2　乙醇浸泡时间对黄酮提取率的影响
Table 2　Soaking time on ethanol extraction rate of flavonoids
浸泡时间/ h 12 24 36 48P
含量/ mg 2.35 2.53 2.52 2.49
提出率/ % 0.235 0.253 0.252 0.249
2.1.3　超声提取时间对黄酮提取率的影响
称取 1.0000 g 药材粉末 4份 ,用 80%乙醇分别浸泡 24 h ,分别超声 30 min 、40 min 、50 min 、60 min ,
测其吸光度值 ,计算总黄酮含量 ,结果见表 3.
515第 5期 刘妍等:蒙药材多叶棘豆中总黄酮的提取及含量测定
表 3　超声提取时间对黄酮提取率的影响
Table 3　Ultrasonic extraction time on the extraction rate of flavonoids
提取时间/min 30 40 50 60
含量/ mg 1.89 2.31 2.52 2.51
提出率/ % 0.189 0.231 0.252 0.251
由表 1 、表 2 、表 3可知 ,用 80%乙醇浸泡 24 h ,超声 50 min ,可从多叶棘豆中提取到含量较高的总黄
酮.
2.2　实验结果
2.2.1　总黄酮含量的测定
表 4　含量测定结果
Table 4　 Results of content
编号 样品加入量/m L 黄酮含量/ mg/ g 平均值 mg/g RSD/ %
1 2.51
2 2.54
3 1.00 2.49 2.506 1.1%
4 2.52
5 2.47
2.2.2　样品回收率的测定
表 5　回收率测定结果
Table 5　Results of recovery
编号 样品黄酮含量/mg 芦丁加入量/ mL 加芦丁后测得值/ mg 回收率/ % 平均回收率/ %
1 2.51 3.48 97
2 2.54 3.58 99
3 2.49 1.00 3.50 101 99.6
4 2.52 3.51 99
5 2.47 3.50 103
2.3　讨论
用超声波法提取蒙药材多叶棘豆中的总黄酮 ,测定其含量为 2.506 mg/g ,回收率为 99.6% .实验结
果表明 ,该方法操作简单 ,省时经济 ,且结果稳定 ,重现性好 ,是一条理想的提取黄酮类化合物的途径.
参　考　文　献
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〔责任编辑　郑　瑛〕
516 内　蒙　古　民　族　大　学　学　报 2008年