全 文 ：收稿日期:2006-07-08
作者简介:黄玉伟(1982-), 男(汉族),湖南长沙人 , 硕士研究生 , Tel.024-23986296 , E-mail bikaishun@yahoo.com;毕
开顺(1956-), 男(汉族),河北唐山人 , 教授 ,主要从事药质量标准化 、中药药效物质基础 、药物代谢动力学等方面的
研究 , Tel.024-23986016 , E-mail ksbi@mail.sy.ln.cn。
文章编号:1006-2858(2008)03-0215-04
白芷提取物欧前胡素在大鼠体内的药物动力学
黄玉伟 , 陈晓辉 , 霍艳双 , 毕开顺
(沈阳药科大学 药学院 ,辽宁 沈阳 110016)
摘要:目的 通过给予大鼠白芷提取物 , 探讨其中主要活性成分欧前胡素的药物动力学特征。 方法
利用RP-HPLC 法测定大鼠灌胃白芷提取物后血浆中欧前胡素的血药浓度 ,用 DAS2.0 药动学程序
求算其药物动力学参数。结果 欧前胡素在大鼠体内呈二室模型分布 , 主要药物动力学参数为:
t max=0.75 h , ρmax =(2.165 ±0.289)mg·L-1 , t 1/ 2 =(5.449±2.040)h , AUC0→t =(7.204 ±
3.966)mg·h·L-1 , AUC0→∞=(7.512±4.190)mg·h·L-1 。结论 该法可作为大鼠血浆中欧前胡素
的检测及其体内药物动力学研究。
关键词:药物动力学;欧前胡素;高效液相色谱法
中图分类号:R 94　　　文献标志码:A
　　白芷为伞形科植物白芷[ Angel ica dahurica
(Fisch.ex Hoffm .)Benth.et Hook.f.] 或杭白芷
[ Angel ica dahurica(Fisch.ex Hoffm.)Benth.et
Hook.f.var.formosana(Boiss.)Shan et Yuan]的
干燥根 。白芷始载于《神农本草经》 ,具有驱风散
寒 、燥湿排脓 、止痛之功效 ,用于风寒感冒 、鼻渊头
痛 、风湿痹痛等症。在传统中药中 ,白芷是很多处
方中的组分之一 , 《中华人民共和国药典》(1963 、
1977 、1985 、1990 、1995 、2000 、2005版)均有收载。
目前对白芷的研究已有很多文献报道 ,发现其中
香豆素类化合物为白芷的主要有效成分[ 1-3] ,欧
前胡素为其中主要的活性成分之一 。
文献[ 4]记载 ,以欧前胡素和异欧前胡素为指
标 ,对白芷乳剂大鼠鼻腔给药的体内过程进行了
研究 ,但是未见有文献报道大鼠血浆中欧前胡素
的含量测定方法 。本文作者以布洛芬为内标建立
了测定大鼠血浆中欧前胡素含量的反相高效液相
色谱分析方法 ,并对其在大鼠体内的药物动力学
行为进行了研究 。
1　仪器与材料
LC 10A 高效液相色谱仪(日本 Shimaozu株
式会社), SPD 10A 紫外可见检测器(日本 Shi-
maozu株式会社), N2000 色谱工作站(浙江大学
智达公司), BP210S 型电子天平(德国 Sartorius
公司), ZFQ 85A 旋转蒸发仪(上海玻璃仪器二
厂), 80 2型离心沉淀机(上海手术器械厂),HH
2数字显示恒温水浴锅(常州国华仪器有限公
司),金利牌超声波清洗器(浙江象山县石浦海天
电子仪器厂)。
　　白芷饮片(购于沈阳市天益堂药材公司 ,经沈
阳药科大学中药学院孙启时教授鉴定为正品),对
照品欧前胡素 、内标布洛芬(纯度质量分数为
99.9%,中国药品生物制品检定所),无水乙醇(分
析纯 ,山东禹王化学试剂厂),磷酸(分析纯 ,天津
市大茂化学试剂厂),甲醇 、乙腈(色谱纯 ,山东禹
王化学试剂厂),重蒸馏水自制 。
Wistar 雄性大鼠 6只 ,体质量(200±20)g ,
沈阳药科大学实验动物中心 ,合格证号:辽实动质
字 2003-008。
2　方法与结果
2.1　色谱条件选择
色谱条件为:C18 柱色谱柱(150 mm ×
4.6 mm , 5 μm , 大连中汇达科学仪器公司),
YMG C18(10 mm×4 mm ,5 μm)预柱 ,流动相为
甲醇 水(体积比为 72∶28 ,磷酸调 pH 至 4.0),流
速1.0 mL·min-1 ,检测波长 254 nm ,柱温 30 ℃,
进样量 20 μL。
2.2　标准溶液及内标溶液的配制
第 25 卷 第 3 期
2 0 0 8 年 3 月
沈　阳　药　科　大　学　学　报
Journal of Shenyang Pharmaceutical University
Vol.25 　No.3　
Mar.2008 p.215　
DOI :10.14066/j.cnki.cn21-1349/r.2008.03.002
精密称取欧前胡素对照品适量 ,用甲醇溶解
配制成 100 mg·L-1的标准储备液。内标布洛芬
用甲醇溶解配成 100 mg·L-1内标储备液 ,稀释内
标储备液得 20 mg·L-1的内标工作液 , 冰箱
(4 ℃)中保存 。
2.3　血浆样品预处理
取大鼠空白血浆 200 μL 置 5.0 mL 离心管
中 ,加入内标工作液 50 μL ,乙腈 450 μL 沉淀蛋
白 ,涡旋 5 min ,离心(3 000 r·min-1)10 min ,取上
清液转移至另一 5 mL 试管中 ,于 40 ℃水浴中氮
气吹干 ,加 50 μL 流动相充分溶解试管中的残留
物 ,涡旋 3 min ,离心(3 000 r·min-1)10 min ,取上
清液 20 μL 进样 。
2.4　供试品溶液的制备
取白芷药材饮片 100 g , 加入体积分数为
95%的乙醇溶液 500 mL 于 100 ℃回流提取2次 ,
每次 1.5 h ,过滤 、合并滤液 、于旋转蒸发仪上减压
回收乙醇 、得浸膏 ,称质量 ,取部分浸膏溶于水中 ,
制成相当于 1 kg·L-1药材的供试品溶液[ 5] 。
2.5　给药方法
Wistar 雄性大鼠 6只 ,体质量(200±20)g ,
禁食 12 h ,自由饮水 ,口服给予白芷提取物 2.0 g·
kg
-1 ,分别于给药 0.083 、0.167 、0.250 、0.500 、
0.750 、 1.000 、 2.000 、 3.000 、 6.000 、 9.000 、
12.000 、24.000 h后 ,于眼眶取血0.5 mL ,所有血
液样品立即离心(3 000 r·min-1)10 min ,分离得
到血浆转移至干净塑料 EP 管 , -20 ℃保存。
2.6　专属性考察
按“2.3”条方法操作 ,在相同实验条件下 ,血
浆中杂质不干扰样品及内标物的测定 ,欧前胡素
与内标布洛芬的保留时间分别为 4.5 min 和
10 min ,色谱图见图 1。
A —Blank plasma;B—P lasma spiked with imperato rin;C—A plasma sample 2 h after oral administration of Extractum Angeli-
cae Dahuricae Siccum;D —Plasma spiked with brufen;1— Imperatorin;2—Brufen
Fig.1　HPLC chromatograms of imperatorin and internal standard(brufen)in rat plasma
2.7　标准曲线的制备及其线性关系
取肝素抗凝的空白血浆 6份 ,每份 0.2 mL ,分
别加入不同质量浓度的欧前胡素溶液 100μL ,混合
均匀 ,配成质量浓度为 0.025 、0.050 、0.250 、0.500 、
1.000 、2.500 mg·L-1的血浆样品。按“2.3”条操作 ,
以欧前胡素与内标物布洛芬峰面积的比值 Y(Ai/
As)为纵坐标 ,欧前胡素的质量浓度 X(ρ)为横坐标
绘制标准曲线 ,用加权(1/ρ2)最小二乘法进行回归
运算 ,求得的直线平均回归方程即为标准曲线 Y =
1.629X-4.190×10-3 , r=0.997 2(n =6),血浆样
216 　　　沈　阳　药　科　大　学　学　报 第 25卷
品在 0.025～ 2.500 mg·L-1内线性关系良好 ,最低定
量限为 0.025 mg·L-1。
2.8　准确度和精密度
取空白大鼠血浆 200 μL ,按“2.3”条方法配
制低 、中 、高 3 种不同质量浓度(分别为 0.025 、
0.250 、1.000 mg·L -1)的欧前胡素样品 ,每个质
量浓度进行 6个样品分析 ,连续测定 3 d ,用当日
标准曲线计算欧前胡素样品的质量浓度 ,从而考
察方法的精密度与准确度 ,结果见表 1。
Table 1　Accuracy and precision of the HPLC assay imperatorin in the rat plasma(n=6)
ρ/(mg·L-1)
Added Found
Accuracy/ %
RE
RSD/ %
I ntra-day Inter-day
0.025 0.023 -8.7 12.7 11.1
0.250 0.270 7.4 3.9 2.6
1.000 1.030 2.9 6.0 5
2.9　回收率试验
取空白大鼠血浆 200 μL ,加入按“2.7”条方
法配制的低 、中 、高 3 种不同质量浓度(分别为
0.025 、0.250 、1.000 mg·L-1)的欧前胡素样品 ,
每个质量浓度进行 6个样品分析 ,另取空白血浆
200 μL ,按“2.3”条操作 ,获得的上清液中加入相
应质量浓度的标准溶液 50 μL ,涡旋 3 min ,离心
(3 000 r·min-1)10 min ,取上清液 20μL 进样 ,获
得相应峰面积比(3次测定的平均值)。以每一质
量浓度 2种处理方法的峰面积比值计算提取回收
率。经测定 ,本法在低 、中 、高 3个质量浓度的提
取回收率分别为 97.0%、98.7%、99.3%。
3　结果与讨论
口服白芷提取物后 ,大鼠体内欧前胡素平均
血药浓度-时间曲线见图 2 。用 DAS2.0 药物动
Fig.2　The mean plasma concentration-time profiles of im-
peratorin in the plasma of rats after oral administration of
Extractum Angelicae Dahuricae Siccum
力学程序处理大鼠体内欧前胡素的血药数据 ,结
果表明其药物动力学符合双隔室模型 ,主要药物
动力学参数见表 2。
　　测定不同时间采集的血浆样品 ,用 DAS2.0
药物动力学程序对血药浓度-时间数据进行拟
合 ,处理结果表明欧前胡素在大鼠体内呈二室开
放模型 , 其中 tmax为 (0.750 ±0.000)h , ρmax为
(2.165±0.289)mg·L-1 , t 1/2为(5.449±2.040)
h ,说明欧前胡素口服给药后吸收迅速 ,消除较快 。
Table 2　Pharmacokinetic parameters of imperator in rats
after oral administration of Extractum Angelicae Dahuricae
Siccum(n=6)
Parameter Value(imperatorin)
t max/h 0.750±0.000
ρmax/(mg·L-1) 2.165±0.289
t 1/ 2/ h 5.449±2.040
AUC0→t/(mg·h·L-1) 7.204±3.966
AUC0→∞/(mg·h·L-1) 7.512±4.190
参考文献:
[ 1] 周继铭 ,余朝菁 , 杭宜卿.白芷的研究 V.化学成分的
研究[ J] .中草药 , 1987 , 18(5):242-246.
[ 2] 郑虎占 ,董泽宏 , 余靖.中药现代研究与应用[ M] .北
京:学苑出版杜 , l997:15l1-1522.
[ 3] 张涵庆 , 袁昌齐 ,陈桂英 , 等.杭白芷化学成分的研究
[ J] .药学通报 , 1980 , 15(9):386-388.
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给药的体内研究[ J] .中国临床药学杂志 , 2001 , 10
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[ 5] 梁明金 , 杨广德 , 贺浪冲.白芷中欧前胡素的提取方
法研究[ J] .中药材 , 2000 , 22(12):829-831.
217第 3 期 黄玉伟等:白芷提取物对大鼠体内药物动力学的影响　　　
Pharmacokinetic study of imperatorin in rat after
oral administration of Extractum Angelicae Dahuri-
cae Siccum
HUANG Yu-wei , CHEN Xiao-hui ,HUO Yan-shuang , BI Kai-shun
(School of Pharmacy , Shenyang Pharmaceut ical Universi ty , Shenyang 110016 , China)
Abstract:Objective To study pharmacokinetic characteristic of imperatorin in rat after the admiaist ration of
Ex tractum Angelicae Dahuricae Siccum.Methods The reversed-phase high-performance liquid chromato-
g raphy w as applied to monitor the plasma concentrations of imperatorin in rats af ter the o ral administrat ion
of ext ract.The pharmacokinetic parameters were estimated by the DAS2.0 computer prog ram.Results The
concentration-time profiles were fit ted wi th an open tw o compartment model system.The main pharma-
cokinetic parameters were tmax(h)0.75±0.000 , ρmax(mg·L-1)2.165±0.289 , t1/2(h)5.449±2.040 ,
AUC0→t(mg·h·L-1)7.204 ±3.966 , AUC0→∞(mg·h·L -1)7.512 ±4.190.Conclusions The HPLC
method is appropriate for the determination and pharmacokinet ic study of imperatorin in rat plasma af ter the
administ rat ion of Extractum Angelicae Dahuricae Siccum .
Key words:pharmacokinetic;imperato rin;HPLC
(上接第 190页)
Guaiane sesquiterpenes of Curcuma wenyujin
HU Dan , MA Ning , LOU Yan , QU Ge-xia , Q IU Feng
(School of Traditional Chinese Materia Medica ,Shenyang Pharmaceutical University ,Shenyang 110016 , China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of the rhizome of Curcuma wenyujin Y.H.Chen et
C.Ling.Methods The chemical constituents w ere isolated by a combination of silica gel , sephadex LH -20 ,
ODS chromatography and HPLC.The st ructures of these compounds w ere identified by the physico-chemi-
cal evidences and NMR spect roscopic data.Results Seven guaiane sesquiterpenes w ere isolated f rom the rhi-
zome of C.wenyuj in and identified as zedoarondiol(1), isozedoarondiol(2), aerugidiol(3), zedoalactone A
(4), zedoalactone B(5), zedoalactone C(6)and zedoarolide B(7), respectively.Conclusions Compounds 1-7
are obtained from this plant for the f irst time.
Key words:Curcuma wenyujin;chemical consti tuents;guaiane;sesquiterpenes
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