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安国道地药材祁白芷不同播种时间和不同采收时间指标成分含量变化



全 文 :表3 18批野生山莨菪根样品的含量测定结果
样品编号 樟柳碱 /% 东莨菪碱 /% 阿托品 /% 总生物碱 /% 样品编号 樟柳碱 /% 东莨菪碱 /% 阿托品 /% 总生物碱/%
1 0. 323 0. 003 0. 033 2. 02 10 0. 186 0. 078 0. 162 4. 73
2 0. 254 0. 019 0. 107 1. 58 11 0. 268 0. 116 0. 184 4. 74
3 0. 218 0. 043 0. 129 3. 98 12 0. 133 0. 145 0. 453 2. 70
4 0. 208 0. 037 0. 054 2. 17 13 0. 384 0. 030 0. 071 3. 66
5 0. 083 0. 033 0. 014 2. 09 14 0. 496 0. 068 0. 214 3. 63
6 0. 113 0. 024 0. 095 2. 01 15 0. 068 0. 080 0. 743 3. 86
7 0. 130 0. 071 0. 256 3. 58 16 0. 052 0. 042 0. 057 3. 90
8 0. 188 0. 077 0. 165 5. 16 17 0. 328 0. 092 0. 208 4. 76
9 0. 152 0. 079 0. 217 3. 03 18 0. 341 0. 378 0. 326 4. 41
n =3
通过对 18批野生山莨菪根样品的测定,结果表明,三种生物碱
和总生物碱含量差异较大。分析原因,可能与产地生态环境(如海拔
高度、光照、土壤因子和伴生植物等)及生长周期等因素有关。故应
加强野生药材生态因子、生长周期等与品质的相关性研究,以保障野
生药材质量的稳定可控,使用的安全有效。
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收稿日期:2014-08-11; 修订日期:2014-12-01
基金项目:河北省中医药管理局科研项目(No. 2014005);
河北省现代农业产业技术体系中药材创新团队建设任务
(No. 2014553962)
作者简介:宋军娜(1982-),女(汉族),河北石家庄人,河北中医学院讲师,硕士
学位,主要从事中药资源与中药鉴定研究工作.
* 通讯作者简介:郑玉光(1973-),男(汉族),河北石家庄人,河北中医学院教
授,硕士学位,主要从事中药材鉴定及活性成分研究工作.
安国道地药材祁白芷不同播种时间
和不同采收时间指标成分含量变化
宋军娜1,牛立云2,侯芳洁1,王晓娜3,郑玉光1*
(1.河北中医学院 药学院,河北 石家庄 050200; 2.河北医科大学 中医学院,河北 石家庄 050091;
3.河北中医学院 实验中心,河北 石家庄 050200)
摘要:目的 研究不同播种时间和不同采收时间的安国道地药材祁白芷药材质量差异,确定适宜种植生长周期和采收时间。方
法 采用高效液相色谱法对不同播种时间和不同采收时间的安国道地药材祁白芷的指标成分欧前胡素进行分析测定,并采用
SPSS法对其进行差异分析。结果 不同播种时间,不同采收时间,祁白芷指标成分含量有明显差异。采收标本前胡素质量分数
为 0. 00226% ~1. 18755%。秋天播种,次年秋天采收祁白芷欧前胡素含量为最高;春天播种,当年秋天采收祁白芷欧前胡素含量
最低。结论 秋天播种,次年秋天打籽之前采收,祁白芷药材欧前胡素含量最高,为最佳采收期。为祁白芷的全程质量监控和科
学合理采收利用提供了理论支撑。
关键词:祁白芷; 高效液相色谱法; 欧前胡素; 成分含量; 药材质量
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2015. 05. 088
中图分类号:R284. 2;S567 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2015)05-1245-02
中药材白芷为伞形科植物白芷 Angelica dahurica(Fisch. ex
Hoffm)Benth. et Hook. f或杭白芷 Angelica dahurica(Fisch. ex. Hoffm)
Benth. et Hook. f. Var. formosana (Boiss)Shan et Yuan的干燥根。全
国商品白芷[1]主要有祁白芷、禹白芷、杭白芷、川白芷。祁白芷主产
于河北安国,味辛、性温,其具有散风除湿、通窍止痛、排脓消肿之功
效,主治感冒头痛、眉棱骨痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带、疮疡肿痛等。
祁白芷所含香豆素类成分中欧前胡素[2]是其质量的标定检测成分,
也是白芷镇痛[3]的活性成分之一,有明显的解痉作用。
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 5 时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 5 期
祁白芷分春播和秋播两种。春播在谷雨节前播种,秋播在处暑
至白露节前后下种,均为处暑节至白露节采挖,祁白芷年产量约占白
芷总量的 10%,多为自产自销,地方使用,很少运往外地。
本实验对不同播种和采收时间的安国产祁白芷药材进行有指
标成分欧前胡素含量测定,为祁白芷全程质量监控和科学合理采收
利用提供理论支撑,为祁白芷的质量评价提供一定的依据。
1 材料
6份不同播种时间和采收时间的祁白芷采自河北省安国市祁白
芷示范田(见表 1),采收时间依次为 2012 - 08 - 15,2012 - 09 - 15,
2012 -10 -15,2013 - 08 -01,2013 - 09 -01,2013 - 10 - 01 前三种为
2012年春播,同年采收,后三种为 2012年秋播,次年采收。药材均由
河北省药检所孙宝惠老师鉴定为祁白芷。药材烘干,粉碎,过 3 号
筛。
2 方法
2. 1 色谱条件 色谱柱填充剂十八烷基硅烷键和硅胶 Diamonsil C18
(200mm ×4. 6mm,5μm),流动相甲醇 -水(70∶ 30),流速:1. 0ml·
min -1,柱温:25℃,紫外检测波长:300nm。
2. 2 对照品溶液制备 取欧前胡素对照品适量,精密称定,加甲醇制
成每毫升含 13μg的溶液,即得。
2. 3 祁白芷欧前胡素样品溶液制备 取祁白芷样品粉末约 0. 4g,精
密称定,置 50ml具塞锥形瓶中,加甲醇 45ml,超声处理(功率 300W,
频率 50KHz)1h,取出,放冷,再称定质量,加甲醇补足减失的质量,摇
匀,滤过,取续滤液,即得。
2. 4 测定法 对照品与供试品溶液各进样 20 μl进行液相色谱分析,
按外标峰面积法计算欧前胡素的含量。
2. 5 线性关系 精密吸取上述对照品溶液 0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5ml,
置 5ml分别配制成一系列浓度不同的溶液,按上述色谱条件,注入液
相色谱仪,进样量为 10μl,测定峰面积积分值。以欧前胡素对照品质
量浓度为横坐标(μg·ml -1),欧前胡素峰面积为纵坐标,进行线性
回归,绘制标准曲线,得线性回归方程为 Y = 23158. 1654X -
21434.9014,(r =0.9998,n =5)。欧前胡素的质量浓度在 0. 13 ~102. 4
(μg·ml -1)的范围内具有良好的线性关系。
2. 6 精密度试验 精密吸取同一对照品溶液,按含量测定方法及以
上色谱条件进行测定,进样量为 10μl,重复进样 5次,测定欧前胡素
峰面积。RSD值为 1. 7509%。表明仪器精密度良好。
2. 7 稳定性试验 取对照品溶液及供试品溶液,于室温分别放置 0,
2,4,8,10,16,20,24h,按上述色谱条件进样 10μl,测定欧前胡素峰面
对照品及供试品的RSD分别为1. 75%,0. 93%,结果表明对照品溶液
及供试品溶液在 24h内稳定。
2. 8 重复性试验 精密称取同一批祁白芷样品 5份,按含量测定方
法进行测定,样品欧前胡素平均质量分数为 0. 7680%,RSD 值为
2. 1265%。表明本实验方法重复性良好。
2. 9 数据处理 试验数据采用Excel和 SPSS统计分析软件进行计算
和分析,以珋x ± s来表示结果。
3 结果
见表 1。
表1 样品祁白芷不同播种时间
和不同采收时间指标成分欧前胡素含量差异(珋x ± s)
播种时间 采收时间 欧前胡素质量分数/%
春播 同年采收2012 -08 -15 0. 2386 ±0. 8487
春播 同年采收2012 -09 -15 0. 7917 ±1. 6109
春播 同年采收2012 -10 -15 0. 0023 ±1. 1903
秋播 次年采收2013 -08 -01 1. 1876 ±1. 1635
秋播 次年采收2013 -09 -01 1. 0085 ±0. 8920
秋播 次年采收2013 -10 -01 0. 4058 ±0. 2837
n =5
由表 1可知,祁白芷播种分为春播和秋播,春播样品采收分别在
打籽前 1个月,打籽时和打籽后 1个月;秋播样品采收分别在打籽前
1个月,打籽时和打籽后 1个月。
欧前胡素的质量分数为 0. 2386% ~1. 1876%,秋播打籽前采收
欧前胡素含量最高,春播当年秋季打籽后采收欧前胡素含量最低,存
在极显著差异,因此从指标性成分欧前胡素含量来看,秋播次年打籽
前采收祁白芷药材质量最好。
4 讨论
本实验结果表明秋播欧前胡素含量高于春播含量,次年采收药
材欧前胡素含量高于当年采收的含量,打籽之前的欧前胡素的含量
高于打籽之后的含量。药材质量取决于次生代谢产物的合成和积
累,春播当年采收的次生代谢产物积累时间短,欧前胡素含量积累不
足;祁白芷打籽之后,根部成分转移到植株地上部分,使根部次生代
谢产物积累减少,因此从指标性成分欧前胡素考虑,祁白芷药材在秋
天播种,次年打籽之前,即白露节前后采收最佳。
药材的指标性成分不能作为药材质量的唯一标准,还要综合药
材的性状特征和显微特征,所以较全面评价药材的质量,指标性成分
含量还需结合药材性状和显微特征的进一步研究。
本研究为安国道地药材祁白芷的质量监控和合理利用提供了
理论依据,也为深入研究中药材次生代谢产物及道地药材形成机制、
创造和控制有利于次生代谢产物合成和积累的条件、培育和生产优
质药材提供了理论支撑。
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时珍国医国药 2015 年第 26 卷第 5 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 26 NO. 5