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紫叶醉浆草组培快繁技术研究
孟 月娥 , 周子发 , 李艳敏 ,赵秀山
(河南省农科院园艺所 , 郑州 4 50 002)
摘 要 :研究 了紫叶醉浆草地下鳞茎初代培养 、 继代培养和生根培养 3 个技术环节的激素配 比 以及生
根苗移栽试验 。 结 果表 明 : 以 M s 为 基本培养基 , 初代培养激素配比 以 6一B A.O s m梦L + N A Ao . 5 m gL/ 十
2, 4一 OD
.
1 m g L/ 为 宜 ,诱 导率达 83 % ,增殖 系数为 .2 ;6 在继代培养中 , 以 6一 B A .O 5 m gL/ + N AA O. l m L/
为 宜 , 增 殖系数达 3 以上 ; 以 1 2/ M S 为基 本培 养基 , 生根激 素以 N AA o . 1 m g几 为 宜 , 可使生 根率达
92 % ; 生根苗移栽基质为蛙石 与 细 沙按 1 : 1 时移栽成活率达 90 % 。
关键词 : 紫叶醉装草 ;组培 ;快繁 ;激素配比 ; 生根 ; 移栽
S t u d ie s o n T e e h n iq u e o f T is s u e C u lt u r e a n d R a Pid P or P a g at io n o f 6比a ils 沉 a gn u 勿ir s P u甲 u er a
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o n e e o m b i n a t i o n s o f 3 ki n d s o f e u l t u er i n e l u d i n g p r i m a巧 e u l t u r e , s u b e u l t u er
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t o p r o l i fe ar t i o n o n M S m e d i u m s u PPl e m e n t e d w i th 6一 B A 0
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.
5 m g /L a n d Z
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t h e i n d u e ti o n ar t e w a s 8 3%
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K e y w o rd s : Ox 以15 t ir 山 l邵£l~ 尸呷 u er 马 T i s s u e e u l t u er , R a p id P or p a g a t i o n , H o r m o n e e o m b i n a ri o n ,
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,
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紫叶醉浆草为醉浆草科 、 醉浆草属多年生球茎草
本植物 , 原产于美洲 , 为中国近年引入的新品种 。 紫
叶醉浆草为醉浆草的一个珍稀变种 , 植株整齐 、 叶形
奇特 、 叶色紫红 , 小花浅紫 , 花期 4一 n 月 , 覆盖地面
迅速 , 可在花镜 、 花带以及树下作地被植物 , 同时还
可 以作为盆栽观赏 , 在室内养植常年开花 , 为庭院 、
阳台 、 居家增添几分妩媚 , 是既可观花又可观叶的优
良品种 。
紫叶醉浆草主要繁殖方法为分株繁殖 , 繁殖速度
较慢 , 国内也有关于紫叶醉浆草组培的文章 ;1[] , 但多
以植株叶片为外植体进行研究 , 为了在短期内获得
大量植株 , 笔者以其地下鳞茎为外植体开展了组培
快繁技术研究 。 试验于 2 004 年 1 月至 10 月进行 , 该
项研究在河南省农作物新品种重点实验室完成 。
1 材料与方法
1
.
1 植 物 名 称 紫叶醉浆草 o( x以15 tr i山 l召u liasr p ur -
尹u er a) 。
1
.
2 取材部位及方 法 地下鳞茎 。 将紫叶醉浆草整株
挖出 , 用 自来水冲洗干净 , 栽入 己灭过菌的蛙石中 ,
用 10 0 0 倍的多菌灵灌根 , 处理 or d , 然后将鳞片取
下 , 用 自来水冲洗干净 。 再用洗洁精仔细刷洗 , 自来
水淋洗 3 om in , 7 0 o’ 的酒精处理 3 0 5 , 0 . 1% 的 H g C 12 处
理 12 m in , 无菌水冲洗 4 次 , 切去药液接触的伤口部
分 , 转入诱导培养基中 , 诱导不定芽产生 。 当诱导成
功后 , 将不定芽切下 , 切成带 1一2 芽的小块 , 转入继
代培养基中使其增殖 , 经过多次继代 , 达到所需苗
基金项 目 : 河南省发展和改革委员会高新技术项 目资助 (0 3 3 19 9 0 0 1) 。 第一作者简介 : 孟月娥 , 女 , 19 5 6年出生 , 硕士研究生学历 , 研究员 。 通信地址 :
45 00 2 河南省郑州市农业路 l 号 河南省农科院园艺所 。 eT l : 0 37 1一6 5 72 9 4 89 , E一如一二m in yan l i@ 12 6 . co m 。 收稿日期 : 20 0 5一0 5一 2 4 ,修回日期 : 2 0 05 一09 一0 1 。
中围农学通报 第 21 卷 第 12 期 20 5 年 12 月
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量 , 将无根苗转入生根培养基中培养 , 获得完整的植 培养 。 6一B A 的用量对诱导鳞片产生不定芽有明显影
株 。 经过炼苗后移入栽培基质中 。 响 (见表 l) , 在 2, 4一 D O . l m叭 、 N A A .O s m叭 条件下 ,
1
.
3 培养条件 以 M S 为基本培养基 , 根据不 同培养 调整 6 一B A 的含量在 .0 5一.2 0 m g L/ 之 间 , 试验结果可
阶段的需要加入 6 一B A 、 2 , 4一D 、 N A A 等成分 , 蔗糖 30 以看出 : 鳞片的诱导块数及每块鳞片不定芽的诱导
泌 (生根培养为 20 吵 ) , 琼脂粉 5 叭 , pH 值 .5 8 , 培 数随着 6 一B A 量 的增加而 下 降 , 可 能是高浓度的
养 温 度 (25 土 1) ℃ , 每 天 连 续 光 照 1h2 , 光 强 6一 A 抑制了不定芽的形成 。 其结果表明 , M s +N A A O.
15 0小 2 0 0 0以 [ , ]。 5 m gL/ + 2 , 4一D o . l m gL/ + 6 一B A O. 5 m gL/ 诱导不 定芽
2 结果与分析 效果理想 , 诱导率达 83 % , 平均每个外植体产生不定
2
.
1 初代培养试验 灭过菌的鳞片接种到诱导培养 芽 .2 6 个 。 不定芽产生之后 , 要及时转入继代培养基
基上 , 经过 2d0 , 不定芽开始形成 。 继续培养 3 0~ 4 0d , 中 ,否则不定芽的增殖将受到抑制 。
当大量的不定芽形成后 , 将不定芽切下进行下一步 .2 2 继代培养试验 将诱导出的不 定芽切成带 1一 3
表 1 6一B A 、 2, 4一 O 、 N从 对紫叶醉浆草不定芽诱导的影响
_
垫羞基 -6 B A (tU叭 ) N A A伽 gIL ) 2, 今以 m创 L ) 接种骊 i瑛 ) 一 诱导蔽飞系 5 一丽百奉 i丽一一下履豪旷环下一
M S 0 0 0 3 0 5 17 10
M S O万 0` 5 0 . 1 3 0 2 5 8 3 6 5
M S 1
.
0 0万 0 . 1 3 0 2 0 6 7 3 4
~— 2 些 _ _ _ 2卫 住 5 住 1 30 4 13 9芽的小块 , 转入继代培养基上 , 经过 2d0 的培养 , 可 KT 的含量都为 .0 5 m g/ L , 试管苗在含 KT 的培养基
形成大量的丛生芽 (见表 2) 。 将丛生芽切成小块 , 转 中增殖系数只有 1 . 3 , 而在含 6一B A 的培养基中增殖
入成分相同的新鲜继代培养基上不断切分继代 , 芽 系数达到 3 . 0 , 说明 6一B A 比 K T 更有利于提高紫叶
的数量可得到大量增殖 。 试验结果可 以看 出 : 在 醉浆草的增值系数 。 因此 6 一B A .O s m叭 + N从 0 . 1
M S+N从o . l m吵 培养基中 , 当 6一p A 含量从 0~ 0 . 5 m叭 为适宜的增殖培养基 。 试验还表明 , 继代周期对
m叭 , 增殖数随着 6一B A 用量的升高而增加 , 在 6一B A 不定芽的增殖也有一定的影响 , 在培养 2d0 以前 , 不
含量达 .0 5 m叭 时 , 不定芽增殖量均达 3 倍以上 ; 但 定芽形成及生长迅速 , 2d0 后不定芽形成及生长速度
是当 6一 A 的量从 .0 5 m叭 增加到 l m泌 时 , 形成 放慢 , 且叶片过多 , 叶柄过长 , 不利于操作 。 随着继代
的芽生长不正常 , 生长势差 , 叶片不能正常展开 , 易 培养次数的增加 , 应适当降低 6一B A 用量 , 否则会形
出现玻璃化 。 成密集的丛生芽 , 且丛芽较细弱 , 可能是 6一B A 的积
从表 2 还可以看出 , 在 N A A o . l m叭 时 , 6一B A 和 累效应造成的 。
表 2 6一日A 、 KT 、 N A A 对紫叶醉 浆草增殖的影响
培养基 -6 B A (m廖)L K联m岁L ) N A A (m岁L ) 接种数 (块 ) 增殖数 (块 ) 增殖系数 芽长势
M S 0 0 0 3 0 35 1 2 十+ 十十十
M S 0 2 0 0
.
1 3 0 5 8 1
.
9 + 月日斗
M S 0
.
5 0 0
.
1 3 0 9 1 3 十十十十
M S 0 0
.
5 0
.
1 3 0 4 0 1 3 日刁
.十 }斗
M S 1
.
0 0 0
.
1 3 0 9 0 3 十十
注 : + : 较好 ,料 4 : 好 , 料十 : 很好 , + + + + : 极好
表 3 不同 N A A 含 t 对紫叶醉浆草生根的影响
培养基 N入A (m创毛 ) 试管苗数 (株 ) 生根株数 (株 ) 生根率 (% ) 平均生根条数 (条 ) 试管苗长势
00135.D1几 M S
1瓜 M S
12/ M S
l几M S
l几 M S
注 : + : 较好 ,料 : 好 ,州斗 : 很好 , 州曰十 : 极好
.2 3 生根培养试验 将试管苗切成带 1一2 芽 (2 一3 片
叶 )的小块 , 转入生根培养基 , 7 d 开始生根 。 生根试验
基本培养基采用 12/ M S , 试验设置 5 个处理 (见表
3)
。 试验结果表明 , 不同含量的 N A A 对紫叶醉浆草
生根有较大影响 , 0 . l m叭 N A A 促进生根效果明
显 , 生根率达 92 % , 比对照生根率高 16% ;随着 N A A
含量从 0 . l m叭 增加到 1 . 0 m昨 , 生根率逐渐降低 ,
达到 1 . m叭 时 , 生根率比对照低 12 % , 因此 , 生根适
宜的培养基应为 l/ ZM S+N A A O
.
l m叭 , 并且在该培
养基上 , 根系形成早 , 根的数量多 , 粗壮 , 有侧根 , 叶
片生长健壮 。
.2 4 生根苗的移栽与管理 试管苗生根培养 15一2d0 ,
根系长至 1一cZ m , 叶片形成 3~4 片时可以进行移栽 。
(下转第 29 8 页 )
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20l
23
物质积累多而快 , 参根的加粗增重明显 , 8一 9 年以后
党参进入衰老期 , 参苗老化 , 参根木质化 , 糖分积 累
变少 , 质量变差 Ie20p ]。 还有研究表明 , 党参在 4 月初直
接移栽 , 5 月中上旬出苗 , 8 月上旬开花 , 10 月中下旬
果实成熟 , 1 月上中旬枯萎 27[ ,l28 。 总体上对生 长动态
的报道多以地上营养器官的外部形态特征为主 , 对
地下经济器官的综合研究报道不多见 。
5 建议
综上所述 , 笔者认为就 目前党参的栽培进展 , 益在
如下几方面有所突破 , 则将会大力提高党参的产量
和质量 : 结合生产实际 , 探索科学合理的栽植密度和
施肥方式 、种类 、 配比 、 用量间的组合 , 以科学的栽植
方式获取较高的产量和稳定的药效 ; 从党生长动态
方面进行细致全面的研究 , 为 田间栽植 、 施肥 、 中耕 、
灌水以及追肥提供理论依据 , 保证最佳的投入产出
比 , 获得好的边际报酬 : 严格依据中药材 G A P 要求 ,
建立合乎中药材 SO P 规范的生产基地 , 对党参生产
源头进行严格把关 , 保证药材的道地性和非伪性 ,保
证和提高药效和产量的稳定 ; 明确党参品种 , 对党参
的植物学名称 、 商品名 、 地方习称等进行归纳总结 ,
为育种工作打好基础 ; 结合栽培加强党参育种工作 ,
打破传统品种混 、 杂 、 乱的局面 , 以新品种代替老品
种 , 提高党参产量和商品性 , 为党参进入国际市场提
供强有力的依据 。
245
6é7
八吕,一气`2
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(上接第 2 9 1 页 )
将达到移栽标准的生根苗转移到培养室外闭瓶炼苗
3一s d , 松口炼苗 l~2 d 。 移栽基质为沙 、 蛙石按 1: 1 混
合 。 栽后浇透水 , 盖膜保湿 , 遮荫降温 。 移栽成活率可
达 90 % 以上 。
移栽后 1~0 1 5 d , 每天喷水 2一 3 次 , 这一阶段为生
根试管苗移栽后管理的关键时期 , 空气相对湿度应
保持在 75 % 一85 % 。 另外要搭遮荫网 , 避免阳光直射 ,
移栽 15 d 以后 , 根系发育良好 , 植株长出新叶 , 可除
去遮荫网 , 进行正常管理 。
3 结论
试验对紫叶醉浆草地下块茎组培快繁过程中分化
和生根培养的激素配比进行了试验 , 找到适宜的初代
培养 、 继代培养和生根培养的激素组合 。 试验表明 , 初
代培养的培养基以 M s 十 6一B A .O s m叭 十N A A O. s m留L
+2 ,4
一
D O
.
l m留 L为宜 , 诱导率可达 83 % ; 继代培养以
M +s -6 B A .O s m叭 十N A A O. l m叭 为宜 , 增殖系数达
3
.
0 ;适宜的生根培养基为 12/ M S + N A A O. l m叭 , 可使
生根率达 92 % ; 生根苗移栽基质为蛙石与沙各一半 ,
要盖膜保湿 , 适当遮荫 ,移栽成活率可达 90 %以上 。 采
用紫叶醉浆草地下块茎为外植体进行组培快繁 , 己在
生产上推广应用 。
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