全 文 ：食品研究与开发2007.Vol.28.NO.03
得了亮叶杨桐叶中主要类黄酮——山茶苷A（分子量
为620.5）的结晶，测得其在甲醇溶液中的紫外特征吸
收峰为263nm，329nm[5]，这些特征与色谱图中的化合
物2（保留时间14.789min）相吻合，因此化合物2被鉴
定为山茶苷A(camelianinA)。化合物 1(保留时间为
8.272min)和山茶苷 A具有相同的紫外图谱，这表明
化合物1与山茶苷具有相同羟基分布及取代模式，且
其 m/z为 577.5，结合参考文献[6]判断其为山茶苷 B
(camelianinB)。化合物3(保留时间为48.114min)具有
与芹菜素相同的紫外图谱，且其m/z为269.2，与芹菜
素的标准分子量(270.24)一致，因此判断化合物3为芹
菜素(apigenin)。
3 讨论
类黄酮化合物是一类分布十分广泛的植物次生代
谢产物，是中草药提取物中的一类具有重要药理活性
的天然产物，这类物质的分离精制十分困难，前人在研
究亮叶杨桐中的类黄酮时多采用多步柱层析法将各黄
酮单体分离出来，再进行结构鉴定[6~7]。本文的研究结果
表明，采用HPLC-PDA-ESI/MS联用分析技术，可不经
分离或其它样品处理，直接分离并鉴定亮叶杨桐提取
物中的类黄酮成分，方法简单、准确。
参考文献：
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p53基因表达活性的影响 [J].天然产物研究与开发.1998,10(3):
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[3]盛龙生,王颖,马仁玲,等.液相色谱/光电二极阵列检测/质谱联用技
术在中药分析中的应用[J].色谱.2003,21(6):549~553.
[4]黄量,于德泉.紫外光谱在有机化学中的应用[M].北京:科学出
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学学报,2003,34(5):407~409.
收稿日期：2006-09-16
白红进 1，2，赵小亮 1，蒋卉 2
（1.新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室，新疆阿拉尔843300；
2.塔里木大学文理学院，新疆阿拉尔843300）
新疆刺山柑多糖的提取及含量测定
摘 要：采用常规水浴法提取新疆刺山柑多糖，并用苯酚-硫酸比色法测定多糖的含量。结果表明新疆刺山柑多糖的
含量为23.73%，葡萄糖浓度在8.0μg/mL～32.0μg/mL范围内浓度与吸光值呈良好的线性关系，平均回收率为
100.3%，RSD1.05%（n=5）。
关键词：刺山柑；多糖；苯酚-硫酸比色法
EXTRACTIONANDCONTENTMEASUREMENTOFPOLYSACCHARIDEFROM
CAPPARISSPINOSAL.OFXINJIANG
BAIHong-jin1，2,ZHAOXiao-liang1,JIANGHui2
（1.XinjiangProduction&ConstructionCorps,KeyLaboratoryofProtectionandUtilizationofBiologicalResourcesinTarim
Basin,Alar843300,Xinjiang,China；2.ColegeofArtsandScience，TarimUniversity，Alar843300,Xinjiang,China）
Abstract：WaterbathextractionwasemployedtoextractthepolysaccharidefromtheCapparisspinosaL.and
phenol-sulphuricacidcolorimetrywasusedtodetermineitscontent.Thepolysaccharidecontentis23.73%.The
linearrangewas8.0μg/mL~32.0μg/mLforglucose.Theaveragerecoveryrates100.3%(RSD1.05%,n=5).
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基金项目：新疆生产建设兵团科技局成果转化与推广计划项目（No.2006YD29）；新疆维吾尔自治区高等学校科学研究计划资助项
目（No.XJEDU2005G07）；新疆生产建设兵团塔里木盆地生物资源保护利用重点实验室开放课题(No.BR0609)
作者简介：白红进（1967-），男（汉），硕士，副教授，硕士生导师，研究方向：植物化学。
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刺山柑（CapparisspinosaL.）又称老鼠瓜、野西瓜，
维语称“波里克果”或“卡盘”，为山柑科山柑属藤本植
物，是荒漠、半荒漠、干旱、半干旱地区极有栽培价值的
抗旱植物。主要分布于欧洲、北美、大洋洲、亚洲西部，
我国新疆、甘肃、内蒙古、西藏等省区。我国沙区仅产1
属1种，新疆各沙区有分布，以吐鲁番盆地沙漠最多[1]。
国外对于刺山柑的化学成分及其药理活性研究较
多，我国对刺山柑的基础研究（营养成分，活性物质，药
理活性）和开发利用研究报道极少。关于其多糖的提取
及含量测定方面的研究未见相关的报道，为使刺山柑
资源得到充分的利用，发挥其独特的药理活性，本研究
对其多糖进行了提取，并测定了多糖的含量，为进一步
研究奠定基础。
1 材料、仪器及药品
1.1 实验材料
刺山柑果实于2006年8月采自新疆库车县，经塔
里木大学植物科技学院李志军教授鉴定为山柑科山柑
属植物刺山柑（CapparisspinosaL.）。
1.2 实验仪器与试药
SartoriusBS210S电子天平：北京塞多利斯天平有
限公司；T6—紫外可见分光光度计：北京普析通用有限
公司；DZF-6021型真空干燥箱：上海精宏实验仪器设
备有限公司；RE52-99型旋转蒸发仪：上海亚荣生化仪
器厂；1-15K型高速冷冻离心机：德国 Sigma公司；
HH-S型恒温水浴锅：江苏省金坛市医疗仪器厂；其他
常规玻璃仪器。
所用试剂葡萄糖、苯酚，95%乙醇、无水乙醇、丙
酮、乙醚、浓硫酸等均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 多糖的提取与精制
称取一定量新鲜刺山柑果实，打浆后加入 4倍
95%乙醇，室温下浸泡 24h，过滤后滤渣再重复浸
泡 2次，去除色素及脂溶性物质，残渣室温挥干溶
剂，完全干燥后研细。精确称取10g，3份，加入蒸馏
水 250mL，在 80℃水浴中提取 2h，滤过，滤渣采用
同法再提取一次，合并两次滤液及洗涤液，定容至
500mL容量瓶中。所得提取液，一部分作为供试样品，
用于含量测定，其余减压浓缩到约100mL，冷却后搅
拌下加入4倍体积的95%乙醇，静置过夜，4000r/min
条件下离心20min，收集沉淀，沉淀经无水乙醇、丙酮
及乙醚多次洗涤，后在60℃真空干燥箱中干燥，得精
制刺山柑果实多糖。
2.2 多糖含量的测定
2.2.1 苯酚溶液的配制
取苯酚100g，加入0.1g铝片和0.05g碳酸氢钠，
加热蒸馏，收集182℃馏份。精密称取该馏份苯酚6g，
置于100mL棕色容量瓶中，加水定容，摇匀，冰箱密封
保存备用。
2.2.2 最大吸收波长的选择
精密吸取一定浓度的样品溶液2mL加入具塞试
管，加入1.0mL6%苯酚，摇匀后加入浓硫酸5.0mL，摇
匀，静止约5min后在沸水浴中放置15min，拿出后在
冰水浴中冷却，放置室温后于280nm～650nm波长范
围内测定吸光度[2]，确定了其最大吸收波长为490nm。
2.2.3 标准曲线的制备
精密称取 105℃下干燥至恒重的葡萄糖对照品
40mg，溶解后转移至 1000mL容量瓶中定容，得
40μg/mL的葡萄糖标准溶液。分别吸取此标准溶液
0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL、1.4mL和 1.6mL
于具塞试管中，加水补足2.0mL，然后加入6%苯酚
1.0mL，摇匀后加入浓硫酸5.0mL，摇匀，静置约5min后
在沸水浴中放置15min，拿出后在冰水浴中冷却，放置室
温后于490nm处测定吸光度，以2.0mL蒸馏水按同样方
法显色作空白，以葡萄糖浓度（C）对其吸光度（A）作回归
处理[3]，得回归方程：A=0.0165C-0.0039，r=0.9991（n=7）。
葡萄糖浓度在8.0μg/mL～32.0μg/mL范围内与吸光度呈
良好的线性关系。
2.2.4 显色时间的考察
取40μg/mL葡萄糖标准溶液及样品溶液按标准
曲线制备项下的方法测定其吸光度，每隔20min测定
1次，结果表明，标准溶液及样品溶液显色时间一致，
且在60min内稳定。
2.2.5 换算因子的测定
精密称取干燥至恒重的刺山柑多糖精制品
20.1mg、11.7mg两份，置于100mL容量瓶中，加蒸
馏水溶解定容，摇匀。精密量取1mL，照标准曲线的制
备项下的方法操作，测定在490nm处的吸光度，根据
线性回归曲线方程求出质量浓度，代入下式计算换算因
子[4]，求得f分别为1.0238，1.0800，取其平均值1.0519。
f=W/（C·D）
式中：W为多糖质量（mg），C为多糖质量浓度
（mg/mL），D为多糖稀释因素
Keywords：CapparisspinosaL.；polysaccharide；phenol-sulfuricacidandcolorimetricmethod
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2.2.6 回收率试验
精密称取处理过的刺山柑粉末10g，加入适量刺
山柑多糖精制品及250mL蒸馏水，80℃下水浴提取
两次，每次 2h，合并提取液、滤液及洗涤液，定容到
500mL，从中量取1mL照2.2.3项下方法操作，显色，
测定，计算回收率[5]。结果平均回收率为100.3%，RSD
为1.05%（n=5）。
2.2.7 多糖含量的测定
精密量取2.1项下多糖提取液1mL，3份，照2.2.3
项下方法操作，显色，测定。按下式计算多糖含量。显色
后的吸光值及多糖的质量分数见表1。
多糖含量（%）=C·D·f/W×100
式中：C为多糖质量浓度（mg/mL），D为多糖稀释
因素，f为换算因子，W为样品质量（mg）
从表 1可以看出，新疆刺山柑多糖含量达到了
23.73%。
3 讨论
3.1 苯酚-硫酸比色法是测定多糖含量的常用方法
之一，色素含量高的材料对于测定结果有一定影响。本
实验先用乙醇提取，除去其中醇溶性色素，而后采用水
提取其中的可溶性多糖[6]。多糖在硫酸的作用下，先水
解为单糖，单糖迅速脱水形成糖醛衍生物，然后与苯酚
结合为有色化合物，在490nm处有最大吸收。本法简
单，显色稳定，灵敏度高，重现性好。
3.2 通过刺山柑多糖的含量测定，结果表明刺山柑多
糖含量丰富，这与刺山柑生长当地的日照时间长，昼夜
温差大，有利于糖类等化合物的积累有很大的关系。多
糖调节机体免疫功能、抗氧化、降血脂等独特的生理活
性受到人们的关注，关于多糖的研究已经成为天然产物
研究的热点，因此，以刺山柑为原料开发以其多糖为主
要成分的药物、食品、保健品等具有很好的应用前景。
参考文献：
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收稿日期：2006-10-27
表1新疆刺山柑多糖的含量
Table1 ThepolysaccharidecontentfromCapparisspinosaL.
ofXinjiang
测定次数
Measurementtimes
1
2
3
吸光值
ABS
0.459
0.461
0.464
多糖含量（%）
Polysaccharidecontent
23.60
23.71
23.87
平均含量（%）
Averagecontent
23.73
RSD(%)
0.5722
王华 1，2，熊汉国 2，张丁联 1，潘家荣 1，*
（1.中国农业科学院农产品加工研究所，农业部农业核技术与农产品加工重点实验室，北京100094；
2.华中农业大学食品学院，湖北武汉430070）
甲胺磷残留检测直接竞争ELISA
试剂盒的研制
摘 要：研制了一种用于检测蔬菜中甲胺磷残留量的直接竞争酶联免疫测定（ELISA）试剂盒，结果表明，该试剂盒的
最低检测限为0.01μg/mL，线性检测范围为0.01μg/mL~100μg/mL，标准曲线的平均板内变异系数为4.05%，板间
平均变异系数为13.66%，回收率的范围在93.12%~102%。试剂盒在4℃下至少可以保存6个月以上。
关键词：甲胺磷；直接竞争ELISA；试剂盒
基金项目：“十五”国家科技重大专项“食品安全关键技术”信息共享平台建设（2001BA804A42）
作者简介：王华（1981-），女（汉），硕士研究生，主要从事食品安全检测关键技术的研究。
.*通讯作者：潘家荣，研究员，从事食品加工与食品安全方面的研究。
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