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第 1 4卷 第 9 期
2012 年 9 月
辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
JOURNAL OF LIAONING UNIVERSITY OF TCM
Vol. 14 No. 9
Sep .，2012
1 材料及方法
1.1 药材及制备
400％、200％、100％白花前胡合剂由湖北中医学
院附属医院药剂科提供，中药白花前胡系全根干品，
产地浙江，川芎产地四川，黄芪产地山西，将生药500g
（白花前胡150g，川芎150g，黄芪200g）切片煎煮，合
并煎液、过滤、浓缩，加无水乙醇提取后浓缩成400%、
200%、100%白花前胡合剂（每毫升含生药4、2、1g），
pH=4.9，置4℃保存；批号为090514、090515、090516。
1.2 实验动物分组及造模方法
动物随机分为5组：假手术组、模型对照组和
复方白花前胡合剂大、中、小剂量组，每组12只。造
模方法：择直径为0.2mm单股尼龙线50mm，加热使
一端成光滑球面，直径约0.25mm，酒精清洁处理后
置于多聚赖氨酸中备用。大鼠均于术前6h开始禁
食，用20%乌拉坦（5mL/kg体重）麻醉并背位固定；
颈正中切开，分离左侧颈总动脉（CCA），沿CCA分
离迷走神经，于CCA上穿4~0缝线备用；在甲状腺
上侧分离左侧颈外动脉（ECA）、颈内动脉（ICA），
在ECA近心端穿4-0缝线备用；结扎ECA近心端及
CCA，在CCA近动脉分叉处约0.5~1mm处剪一小口，
插入栓线，缓慢向ICA插入（向内上方的角度插入，
以免误入翼腭动脉；若插入约5mm即有阻力，表明
误入翼腭动脉，则调整角度重新插入），直到有阻力
不能再插入时，回抽少许，共插入约（19±5）mm，此
时可发现大鼠左眼虹膜颜色变浅，将此作为缺血的
起始时间，固定尼龙线，纱布覆盖伤口；缺血2h后，
将尼龙线轻轻拔出，缝合皮肤。假手术组除将尼龙
线送入ICA内长度小于5mm外，其余步骤与上述相
同。术中及术后3h用白炽灯加热，维持大鼠肛温
37℃左右，术后用40000U青霉素腹腔注射3天，伤
口皮肤用红霉素眼膏外擦，每天2次。笼中喂养，自
由饮食。
大鼠清醒后参考Bederson[1]的5级分级法，于术
后24h进行神经功能的行为学评分：0级：无功能缺
损；1级：不能完全伸展右前肢；2级：右前肢屈曲，
向右侧推动时阻力下降；3级：爬行时向右侧转圈；
4级：意识水平受抑制，无自主活动，包括术后24h内
死亡。神经功能评分在1~3分的大鼠被认为左侧大
脑中动脉缺血再灌注的动物模型造模成功。各给药
组于动物苏醒后立即灌服相应浓度复方白花前胡合
剂1mL/100g，每天2次，连服3天。
1.3 指标检测及方法
1.3.1 标本采集 再灌注72h后，大鼠以腹腔注射
过量乌拉坦深度麻醉，迅速开胸暴露心脏，经升主
动脉，用200mL含有肝素的生理盐水快速灌洗，然
白花前胡合剂对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织形态学变化的影响
周小莉，董梦久
（湖北中医药大学临床医学院，湖北 武汉 430061）
摘 要：目的：探讨白花前胡合剂对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织形态学的影响。方法：采用线栓法制作大
鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型，设立假手术组、模型组、白花前胡合剂液大、中、小剂量治疗组，造模动物清醒后即
刻给药，于第3日处死，固定包埋HE染色观察组织形态学改变。结果：白花前胡合剂组缺血侧神经细胞亦呈缺血改
变，但只有部分细胞固缩，且深染程度较轻，细胞的密集程度较缺血对照组明显增加。结论：白花前胡合剂能够改善
局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织形态学的变化。
关键词：白花前胡合剂；脑缺血再灌注；组织形态学
中图分类号：R743 文献标识码：A 文章编号：1673-842X (2012) 09- 0068- 02
收稿日期：2012-03-10
基金项目：湖北省教育厅资助项目（2004D005）
作者简介：周小莉（1974-），女，湖北武汉人，讲师、主治医师，博士研究生，研究方向：中医脑病。
通讯作者：董梦久（1957-），女，湖北武汉人，教授，博士研究生导师，研究方向：中医脑病。
Effect of Pd Mixture on Pathophysiological Changes of Focal Cerebral Ischemia/Reperfusion Rats
ZHOU Xiao-li，DONG Meng-jiu
（Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430061，Hubei，China）
Abstract ：Objective ：To investigate the effect of Pd mixture on the pathophysiological changes. Methods ：
The model of focal cerebral ischemia/reperfusion in rats was established with the suture-occuluded method.
The effect of Pd mixture on the behavior obstacle of MCAO rats was observed and the pathological changes
were observed by HE dyeing. Results ：The result showed that Pd mixture can reduce the extent of infarct
bound obviously. Conclusion ：Pd mixture can effectively reduce the excitable neural virulence and the
depolarization around the infarct spot after cerebral ischemia.
Key words ：Pd mixture ；cerebral ischemia/reperfusion ；pathophysiology
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1 4 卷 辽 宁 中 医 药 大 学 学 报
后以4%多聚甲醛磷酸缓冲液（4℃，pH=7.4）灌注
约40min。灌注完成后迅速断头、取脑，以视交叉为
中线将脑组织切成厚度约4mm的组织块，浸入上
述固定液中过夜。常规石蜡包埋，作连续冠状切片
（5μm），将切片贴附于预先涂有APES防脱液的载
玻片上，置60℃烤箱中过夜，4℃保存备用。
1.3.2 HE染色 用二甲苯脱蜡，经逐级乙醇至
水：二甲苯5min×2次；100%乙醇2min ；95%的乙
醇2min ；80%乙醇1min ；75%乙醇1min ；蒸馏水洗
1min ；苏木素染色5min ；自来水洗1min ；盐酸乙醇
分化30s ；自来水浸泡15min ；伊红染色2min ；常规
脱水，透明，中性树胶封片。光学显微镜观察。
2 结 果
2.1 MCAO/R大鼠脑形态的大体观察
除假手术组外，其余各组大鼠均见脑组织标本
左顶叶外侧面苍白，肿胀明显，左侧半球水肿明显，
体积较右侧增大，部分中线偏向右侧。但白花前胡
合剂治疗组上述情况较轻，无中线偏移的情况。
2.2 HE染色检测结果
正常组脑组织无水肿，神经细胞结构完整，胞
核形态正常，边界及核仁清晰，尼氏小体均匀分布。
模型组缺血区大量神经元变性坏死，神经细胞明显
减少，出现空泡，残存神经细胞胞体缩小，呈三角形
或长条形，核固缩深染，核仁消失，胞浆浓缩呈深伊
红染色，组织间水肿显著，细胞与周围间隙增宽。白
花前胡合剂组缺血侧神经细胞亦呈缺血改变，但只
有部分细胞固缩，且深染程度较轻，细胞的密集程度
较缺血对照组明显增加。（详见图1）
A假手术组 B模型组
C小剂量组 D中剂量组
E大剂量组
图1 白花前胡合剂对局灶性脑缺血再
灌注大鼠海马区HE染色（×200）
3 讨 论
造模后情况显示，大鼠造模后，出现一些明显
的变化，如体温下降，怕冷，与“阳虚”的表现相似；
喉中痰鸣有声，为痰液外显之象；鼻尖颜色偏红，双
眼球结膜充血，舌黯淡为瘀血内停之象。因此，本实
验动物模型与中风病中“虚”、“痰”、“瘀”等病理机
制有吻合之处。
前胡为多年生草本植物，为伞形科植物白花
前胡合剂和紫花前胡的根。清代汪昂在《本草备
药》称：“肝胆经风痰非前胡不能除”，同时近些年
研究发现[2]，白花前胡提取物可以增加冠脉流量
及心肌营养性血流量、降压、扩血管、减少心肌耗
氧量和心肌收缩力以及抗心律失常等作用，是一
来源于植物的新型钙内流阻断剂。我们在前期实
验中也证明，白花前胡合剂液能够有效改善脑缺
血后神经功能缺损[3-4]和冠心病动脉粥样硬化。
川芎是活血化瘀类中药，具有活血祛瘀、行气开
郁、祛风止痛的功效。其有效成分之一为川芎嗪。
化学结构为四甲基吡嗪，现代药理研究表明，川
芎嗪[5]不仅具有直接清除OFR、抗氧化、减轻脂质
过氧化的作用，而且还具有抑制血小板聚集，减
少细胞内游离钙浓度、抗炎及类似内皮素（ET）-1
拮抗剂和谷胱苷肽S-转移酶抑制剂等多方面的
作用，对肝、肾毒性损害和心、脑缺血性损伤均有
较好的保护作用。黄芪属于益气升阳类药物，具
有益气升阳、固表止汗、利水消肿、托毒生肌的功
效。现代药理研究，黄芪[6]有抗自由基，降低血液
黏度，拮抗Ca2+，抗血小板聚集，改善微循环等作
用，对脑缺血后再灌注损伤具有保护作用。此三
药配伍成方具有化痰活血、益气通络之功效。本
次实验结果显示，白花前胡合剂能够在一定程度
上改善脑缺血再灌注后大鼠脑组织，对脑损伤有
一定的保护作用。◆
参考文献
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