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不同产地桃叶鸦葱多糖的含量测定



全 文 :第 31卷第 5期 河南工业大学学报(自然科学版) Vol.31, No.5
2010年 10月 JournalofHenanUniversityofTechnology(NaturalScienceEdition) Oct.2010
收稿日期:2010-07-22
作者简介:杨辉(1972-),男 ,河北赤城人 ,硕士 , 讲师 ,主要从事药
物化学教学与科研.
文章编号:1673-2383(2010)05-0059-03
不同产地桃叶鸦葱多糖的含量测定
杨 辉 1 ,李秀荣 2
(1.河北北方学院 药学系 ,河北 张家口 075000;2.北京石景山医院药剂科 , 北京 100043)
摘要:采用水提醇析的方法提取桃叶鸦葱中多糖 ,用苯酚 -硫酸法测定多糖的含量.结果表明:
不同产地桃叶鸦葱多糖的含量有一定的差异 ,多糖含量范围在 12.75% ~ 18.69%之间.
关键词:桃叶鸦葱;多糖;含量测定;苯酚 -硫酸法;分光光度法
中图分类号:TS201.2    文献标志码:B
0 前言
桃叶鸦葱是菊科植物桃叶鸦葱 (Scorzonera
sinensisLipsch)的干燥全草 ,广泛分布于河北 、内
蒙古 、山东等地.民间有蜥蜴喂食烟袋油(主要成
分为烟碱)后 ,用桃叶鸦葱的乳汁可瞬间解毒的
报道.近来证实鸦葱属植物有保肝 [ 1]及抗肿瘤[ 2]
的作用.文献报道其化学成分主要为苯丙素 、木脂
素及其苷 、倍半萜及其苷 、三萜及其苷和黄酮类化
合物 [ 3-6] .作者在前期研究发现 ,桃叶鸦葱中含有
大量多糖类成分.
植物多糖具有多种生物活性 , 能促进 T细
胞 、B细胞 、NK细胞 、M细胞等免疫细胞的功能 ,
并能促进白介素 、干扰素 、肿瘤坏死因子等细胞因
子的产生[ 7] ,是理想的免疫增强剂.植物多糖的
含量可以在很大程度上体现该药材免疫作用的强
弱.目前有关桃叶鸦葱多糖的研究尚未见报道.作
者采用水提醇析的方法提取桃叶鸦葱中多糖 ,采
用苯酚 -浓硫酸法 [ 8]对不同产地的桃叶鸦葱进行
多糖的含量测定 ,为桃叶鸦葱的开发应用及其药
理作用的进一步研究提供了理论依据.
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
桃叶鸦葱分别采自河北赤城 、辽宁建平 、内蒙
古商都 、山东陵县.
葡萄糖对照品:中国药品生物制品检定所;其
他试剂均为国产分析纯.
1.2 仪器与设备
UV— 2100紫外可见分光光度计:北京莱伯
泰科仪器有限公司;TG— 322A微量分析天平:上
海天平仪器厂;RE— 52AA旋转蒸发仪:上海亚荣
仪器厂.
1.3 方法
1.3.1 桃叶鸦葱多糖的提取与精制
称取不同产地桃叶鸦葱粉末各 60 g, 经 95%
乙醇浸提 3次 ,药渣置室温干燥后置索氏提取器
中 ,加水 600mL提取 ,虹吸 3次 ,提取液减压浓缩
至约 200 mL.分别加入 4倍体积的无水乙醇 ,搅
匀 ,冰箱中静置过夜 ,抽滤得粗多糖.将粗多糖溶
于水 , Sevage法脱蛋白[ 9] ,加 1%活性炭脱色 ,抽
滤 ,滤液加入 4倍体积的无水乙醇 ,搅匀 ,静置过
夜 ,抽滤 ,所得沉淀用无水乙醇 、丙酮 、乙醚数次洗
涤 ,置 60℃真空干燥箱中干燥 ,即得多糖精制品.
1.3.2 标准曲线的制备
精确称取 105 ℃干燥至恒重的葡萄糖 100
mg,置 100 mL的容量瓶中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,
精确吸取葡萄糖对照品溶液适量 ,分别加水稀释
制成 0.03 mg/mL、 0.04 mg/mL、 0.05 mg/mL、
0.06mg/mL、0.07 mg/mL、0.08 mg/mL的溶液 ,
摇匀.分别精确吸取上述不同浓度溶液 1.0 mL,
置锥形瓶中 ,均加 10%苯酚溶液 1 mL,摇匀 ,迅速
加入浓硫酸 5.0mL,立即摇匀 ,室温放置 30 min,
平行空白 ,在 490 nm波长处测定吸光度 ,以吸光
度(A)和浓度(C)进行线性回归 ,得回归方程:A
=9.957 1C+0.069 1, r=0.999 2.
60  河南工业大学学报(自然科学版) 第 31卷
1.3.3 多糖换算因子的测定
精确称取干燥至恒质量的精制多糖 6 mg,置
于 100 mL容量瓶中 ,加蒸馏水定容至刻度 ,摇匀.
精确量取 1.00mL,照标准曲线的制备方法操作 ,
测定吸光度值 ,根据线性回归方程求出质量浓度 ,
再代入下式计算换算因子 ,求得 f=1.320, (n=
6).
f=W/(C×D),
式中:W为多糖质量;C为多糖质量浓度;D为多
糖稀释因数.
1.3.4 精密度试验
精确称取桃叶鸦葱多糖样品 6.0 mg,置 100
mL容量瓶中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,按 1.3.2操
作 ,平行 5份 ,测定吸光度 A, RSD=0.07%.
1.3.5 稳定性试验
精确称取桃叶鸦葱多糖样品 6.0 mg,置 100
mL容量瓶中 ,加水溶解定容 ,摇匀 ,按 1.3.2操
作 ,分别于 20、 40、60、80、 100、120、140、 160 min
测定吸光度 , RSD=0.28%.
1.3.6 重现性试验
取同一批药材粉末 5份 ,分别按上述方法制
备供试液 ,按 1.3.2操作并测定吸光度 A, RSD=
0.24%.
1.3.7 回收率试验
精确称取已知浓度的桃叶鸦葱多糖样品 5份
各 6.0 mg,加水溶解后 ,定容至 100 mL容量瓶
中 ,摇匀 ,精确吸取 1mL,分别加入葡萄糖标准品
0.2mg,按 1.3.2操作 ,测定吸光度 ,得平均加样
回收率为 101.7%, RSD=0.61%.
1.3.8 样品多糖的含量分析
取各供试品溶液 ,按 1.3.2方法操作 ,测定吸
收值 ,从回归方程中求出供试液中葡萄糖的含量 ,
按下式计算样品中多糖含量:多糖含量(%)=C
×D×F×100/W.
2 结果与讨论
在桃叶鸦葱多糖的含量测定中 ,因较难得到
相应多糖对照品 ,采用葡萄糖代替对照品 ,测定样
品中多糖的相对含量.作者以比色法测定样品中
的单糖 ,通过单糖和多糖的换算因子计算药材中
多糖 ,结果见表 1.
从表 1可知 ,不同产地桃叶鸦葱多糖含量有
一定的差异 ,其中内蒙古产的桃叶鸦葱多糖含量
最高 ,山东产的桃叶鸦葱多糖含量最低.可能与所
处生长环境纬度及气候有关.
表 1 不同产地桃叶鸦葱多糖的含量 %
产地 含量 平均含量 RSD
12.84
山东陵县 12.27 12.75 3.47
13.14
13.44
辽宁建平 12.95 13.13 2.04
13.01
18.15
内蒙古商都 19.22 18.69 2.86
18.69
14.12
河北赤城 14.55 14.62 3.72
15.20
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DETERMINATIONOFPOLYSACCHARIDESOFSCORZONERA
SINENSISOFDIFFERENTPLACES
YANGHui1 , LIXiu-rong2
(1.PharmacyDepartment, HebeiNorthUniversity, Zhangjiakou075000 , China;
2.PharmacyDepartmentofShijingshanHospital, Beijing100043 , China)
Abstract:ThearticleextractedpolysaccharidesfromScorzonerasinensisofdiferentplacesbywaterextraction
andalcoholprecipitation, anddeterminedthecontentofthepolysaccharidesbyphenol-sulphuricacidmeth-
od.TheresultsshowedthattheScorzonerasinensisofdiferentplaceshaddiferentcontentsofpolysaccharides,
andthecontentofpolysaccharidesrangedfrom12.75% to18.69%.
Keywords:Scorzonerasinensis;polysaccharide;contentdetermination;phenol-sulfuricacidmethod;spectro-
photometry
(上接第 4页)
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STUDYONDEMULSIFICATIONOFEMULSIONFORMEDDURING
AQUEOUSEXTRACTIONOFPEANUTOIL
ZHANGShao-bing, LVYan-hong, HUYue, WANGQiao
(SchoolofFoodScienceandTechnology, HenanUniversityofTechnology, Zhengzhou450052, China)
Abstract:Westudiedthedemulsificationofanemulsionformedduringaqueousextractionofpeanutoilbyen-
zymaticandchemicalmethods, respectively.Theresultsindicatedthatalkalineprotease2709andNaClcould
efectivelydemulsifytheformedemulsion.Theoptimaldemulsificationconditionsofthealkalineprotease2709
wereasfolows:temperature55 ℃, pH8.5, enzymeconcentration1 120 IU/gandhydrolysistime1 hour.
TheoptimaldemulsificationconditionsofNaClwereasfolows:temperature55 ℃, NaClconcentration5%
(W/W), andtime1hour.Undertheseconditions, thedemulsificationratiooftheemulsionreachedorexcee-
ded95%.
Keywords:aqueousextraction;peanut;demulsification;protease