全 文 ： JTCVM
2010年第 1期
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实验技术
刺山柑提取物降血脂作用动物试验研究
喻建军1 ,戴 畅 2 ,李建军 1
(1.塔里木大学动物科学院 ,新疆阿拉尔 843300;2.新疆农一师阿拉尔市人民医院影像科)
中图分类号:S853.74 文献标识码:A 文章编号:1000-6354(2010)01-0030-02
刺山柑(Capparisspinosa)又称野西瓜 、瓜儿菜或抗旱草
等 ,为白花菜科山柑属植物 , 在我国主要分布于新疆天山南
北坡地 , 喜生于荒漠和低海拔的石质山坡 , 味辛苦 , 性温 ,
其叶 、果实和根皮均能入药 , 功能祛风除湿 、止痛 、消肿 、
利尿 、抗高血压等 。但 M.Eddouks等研究发现刺山柑水
提物对糖尿病大鼠具有降血脂活性 [ 1] 。刺山柑在新疆境
内有较广泛的应用 , 国内研究主要在其对风湿和痛风等
疾病的疗效上 , 未见有降血脂方面的报道。 笔者等对刺
山柑提取物(Capparisspinosaextract)降血脂作用进行了
初步研究 。
1 材料与方法
1.1 药物
刺山柑提取物:塔里木大学生物研发中心提供;血清总
胆固醇临床诊断试剂盒 、甘油三酯临床诊断试剂盒:均购自
长春汇力生物技术有限公司;胆固醇 、胆酸盐:上海蓝季科技
发展有限公司;饲料:天康 616肉杂鸡配合饲料;猪脂:购自
塔里木大学农贸市场。
1.2 试验仪器
723-可见分光光度计:上海精密科学有限公司;电热恒
温水浴锅(DK-S26型):上海精宏仪器有限公司;台式高速
冷冻离心机(TGLL-18B型):江苏太仓县医疗器械厂。
1.3 试验动物
昆明鼠(30日龄)60只 , 雌雄各半 ,由塔里木大学动物科
技学院实验站提供。
1.4 实验方法
1.4.1 高血脂动物模型的建立 取小鼠 60只 , 按体重相近
随机分为对照组 、高脂组 、试验组。对照组饲喂天康肉杂鸡饲
料 ,高脂组喂以高脂饲料(2%胆固醇 +0.3%胆酸盐 +7.5%
猪脂 +90.2%天康肉杂鸡粒饲料 ,拌匀 ,加适量水制成块 , 烘
干);试验组在饲喂高脂饲料的同时以刺山柑提取物 100mg/kg
灌胃给药 , 1次 /d,连续 15 d。试验结束后禁食 16 h, 取血样
测血清胆固醇及甘油二酯含量。
1.4.2 实验期的饲养管理 实验在舍饲条件下进行 , 分笼
饲养 , 由专人负责饲养管理;每天饲喂早 、中两次 , 试验组一
次灌胃给药 50 mg/kg,每组饲料按试验设计给以不同配方饲
料自由采食 ,自由饮水 , 每 2 d清洁一次鼠笼。
收稿日期:2009-10-10
基金项目:新疆生产建设兵团科技局(2006YD029)
作者简介:喻建军(1968-),男 , 硕士 ,副教授 , 主要从事动物传染病
学教学与研究。
1.4.3 样本采集与处理 试验 15 d后禁食 16 h从眼眶处
采集血液 ,采血过程中要避免震荡 ,以免引起溶血。每份血
样置一只离心管中 ,并做标记。后室温静置 , 37 ℃恒温水浴
30min, 3 000 r/min离心 15 min, 用 100 μL微量移液器移出
血清 ,置于 1 mL试管中待测。
1.4.4 样本的测定方法 按照试剂盒的测定方法测定小鼠
血清中的总胆固醇和甘油三酯。
1.4.5 统计方法 所有数据均以 x±s表示 , 采用 spss11.5
软件 ,多组间比较采用单因素方差分析 , 有显著差异时用
LSD(方差齐时)或 DunnettT2(方差不齐时)进一步做组间比
较。
2 结果
刺山柑提取物对小鼠 TC、TG含量的影响 , 结果见表 1。
由表 1可见 , 高脂组与对照组相比 , 高脂组血清总胆固醇
(TC)和甘油三酯(TG)含量显著升高 , 表明模型建立成功 ,
试验系统可靠。对照组 、高脂组和给药组的总胆固醇含量
差异显著;对照组与给药组甘油三酯的含量差异不显著 ,但
与高脂组的甘油三酯含量差异显著。试验结果表明 , 刺山
柑提取物对小白鼠血清总胆固醇和甘油三酯具有明显降低
作用 , 刺山柑提取物可显著降低高血脂小鼠的血脂水平。
另外 , 在实验过程中发现小鼠喜食高脂饲料 , 食欲旺盛 , 生
长均较好 。
表 1 刺山柑提取物对小白鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯
(TG)含量的影响
组别 TC TG
对照组 3.782±0.548a 1.202±0.237a
高脂组 7.130±0.801b 1.798±0.120b
试验组 5.168±0.492c 1.204±0.250a
注:与高脂组相比较 , aP<0.05、bP<0.05、cP<0.05。
3 讨论
肥胖和高脂血症除了遗传因素外 , 主要是由于脂肪摄入
过多 ,活动不足 , 长期能量过剩所致。研究表明 , 摄入富含脂
肪的食物 ,动物饱腹感差 , 且仅需不到 2%的能量就能转化成
机体脂肪 ,因此 , 人们常利用高脂饲料来制作高脂血症动物
模型以进行科学研究。现已证实心脑血管疾病的病理基础
主要是动脉血管发生粥样硬化性改变 , 它是脑中风 、冠心病
的主要病因 ,而高血脂是引发动脉粥样硬化(AS)的主要原
因之一 [ 2] ,特别是血清 TC和 TG水平异常增高是导致 AS形
成的危险信号。本研究表明 ,刺山柑提取物能够明显降低血
DOI :10.13823/j.cnki.j tcvm.2010.01.036
JTCVM
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实验技术
清 TC、TG含量 ,此作用与其含有丰富植物甾醇 、类黄酮等有
关 [ 3] 。植物甾醇和黄酮可以抑制肠道内胆固醇的吸收 ,黄酮
还可以降低血液粘度 , 强化毛细血管 , 改善心脏 、肝脏功
能 [ 4] 。刺山柑的利尿作用可以排除细胞中多余水分 ,同时可
清除血液中过剩的中性脂肪和胆固醇 , 当血液里中性脂肪减
少时 ,储存的脂肪即释放出来 , 因此刺山柑提取物对调节脂
类代谢 、清除血管壁胆固醇 、防治动脉粥样硬化和降低冠心
病发病率具有积极意义。
参考文献:
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哈尔滨商业大学学报(自然科学版), 2006, 22(1):5 -
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[ 2] AliyuZY, YousifSB, PIntholtK, etal.Assessingcompli-
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[ 4] 陈茂彬 ,黄 琴.植物甾醇对饮食性高脂血症治疗作用
研究 [ J] .食品研究与开发 , 2005, 26(2):44-48.
甘草中甘草酸的提取工艺研究
张小江 1 ,刘永录2 ,马新蕾 1 ,马庆春 1 ,张国祖2
(1.河南省康星药业有限公司 , 河南中牟 451464;2.郑州牧业工程高等专科学校)
中图分类号:S853.74 文献标识码:A 文章编号:1000-6354(2010)01-0031-03
甘草(Glycyrrhiza)为双子叶植物豆科甘草(Glycyrhiza
uralensisFisch.)、胀果甘草(GlycyrrhizainflataBat.)或光果甘
草(GlycyrrhizaglabraL.)的根及根茎。甘草主要含有甘草
酸 、甘草次酸 、黄酮 、生物碱 、氨基酸等化学成分 , 具有广泛的
生理活性 [ 1] 。目前 ,甘草及其复方制剂广泛用于治疗畜禽疾
病 ,且效果明显 [ 2, 3] 。 《中国兽药典》 2005版第二部中收载甘
草颗粒制剂具有祛痰止咳的功能 , 并应用于治疗猪 、禽咳嗽
等疾病 [ 4] 。甘草酸是甘草中最为重要的化学成分 , 具有抗病
毒 、抗癌和增强免疫力等功能 [ 5] 。甘草酸的提取方法有多
种 ,主要有水提法 、溶剂提取法 、超声波提取法 、微波萃取法
等 ,以上各种方法均有其优缺点 [ 6 , 7] 。水提法是最古老最常
用的一种提取方法 , 操作简单 ,溶剂成本低廉 , 但得率较低。
溶剂提取法提取率比水提法高 , 但易造成污染。与常规提取
方法相比 ,超声波提取法和微波提取法具有提取时间短 、产
品提取率高等优点 , 但并不能显著提高提取率 , 且使产品成
本增加 ,难以用于工业化生产。因此 , 本试验采用溶剂提取
法 ,优化提取方法及其最佳工艺条件 , 以期达到提高甘草酸
提取率 、节约原料 、减小污染的目的 , 从而适应工业化生产的
需要。
1 材料与方法
1.1 材料与仪器
甘草酸单铵盐对照品(批号:110731 -200615, 中国药品
生物制品检定所), 甘草购自甘肃省陇西县通源药业有限责
任公司 ,经鉴定符合《中国兽药典》 2005年版第二部规定 [ 4] ,
收稿日期:2009-09-08
基金项目:企业资助
作者简介:张小江(1980-),男 , 硕士 ,主要从事药物新产品开发研
究 , E-mail:xiaojiangzhang008@ 163.com。通讯作者:张
国祖, E-mail:zhangguozu@ 126.com
氨水 、活性炭和乙醇等试剂均为分析纯。 DZF-2型减压真
空干燥箱(北京市永光明医疗仪器厂), AUW-220D型电子
天平(岛津国际贸易上海有限公司), UV-2102C型分光光
度计(尤尼柯上海仪器有限公司), DZKW-4型电热恒温水
浴锅(北京中兴伟业仪器有限公司), PHS-3C型 pH计(上
海理达仪器厂)。
1.2 甘草酸粗品的提取方法
1.2.1 水提法 取甘草 50 g,切片 ,加蒸馏水 500 mL, 100 ℃
加热 120 min, 过滤 , 滤渣重复浸提 1次 , 合并滤液 , 浓缩至
200 mL, 呈膏状 ,减压真空干燥 , 得甘草酸粗品 ,称重 , 计算甘
草酸粗品得率。
1.2.2 稀氨水提取法 取甘草 50 g, 切片 , 加 0.5%稀氨水
500 mL, 100 ℃加热 120 min, 过滤 , 滤渣重复浸提 1次 ,合并
滤液 ,浓缩至 200 mL,呈膏状 , 加浓硫酸调 pH值至 2-3, 充
分搅拌 ,静置过滤 , 沉淀减压真空干燥 , 得甘草酸粗品 , 称重 ,
计算甘草酸粗品得率。
1.2.3 氨醇提取法 取甘草 50g, 切片 , 加 0.5%稀氨水和
10%乙醇混合溶液 500 mL, 100 ℃加热 120 min, 过滤 , 滤渣
重复浸提 1次 , 合并滤液 , 浓缩至 200 mL, 呈膏状 , 加浓硫酸
调 pH值至 2-3, 充分搅拌 , 静置过滤 , 沉淀减压真空干燥 ,
得甘草酸粗品 ,称重 , 计算甘草酸粗品得率。
1.3 甘草酸的定量测定方法 [ 8]
取甘草酸单铵盐 0.25 g, 溶解于 50 mL70%乙醇中 , 取
上述甘草酸标准液 1、 2、 3、 4、5 mL, 分别用 70%乙醇溶液稀
释至 250 mL,在 265nm处测其吸光值 A, 空白对照为 70%乙
醇溶液。
取样品甘草酸 0.25 g,溶解于 50 mL70%乙醇中 , 取该
溶液 5mL,用 70%乙醇溶液稀释至 250 mL, 在 265 nm处测