全 文 ：中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy
薄层层析-紫外光谱法测定刺山柑果中腺苷的含量
田树革 1 刘 杰 2 郭玉东 1
1.新疆医科大学中医学院,新疆 乌鲁木齐 830011;2.新疆医科大学附属中医医院,新疆 乌鲁木齐,830000
【摘 要】目的:建立刺山柑果中腺苷含量的测定方法。方法:刺山柑果经超声提取,硅胶薄层层析分离,用紫外分
光光度法于 260nm处测定腺苷的吸光度。结果:在 1.0-6.0μg/mL的范围内腺苷的浓度与吸光度呈现良好的线性关系 (r=
0.9995 n=6),平均回收率为 96.1% (RSD=1.48% n=3),腺苷的含量为 14.19mg/Kg(RSD=2.8 n=5)。结论:本法简捷、
准确,适用于刺山柑果中腺苷的含量测定。
【关键词】:刺山柑 腺苷 薄层层析-紫外分光光度法
【中图分类号】R92; 【文献标识码】B 【文章编号】1007-8517(2008)4-0014-03
DeterminationofadenosineinfruitofCapparisspinosaL.withThinLayer
ChromatographandUltravioletSpectrophotometry
TIANShu-ge1 JINZhi2 GUOYu-dong
(1.ColegeofTCM,XinjiangMedicalUniversity,XinJiang,Urumqi,830054;2.InstituteofQualityTestingof
Xinjiang,XinjiangUrumqi,830002)
Abstract:ObjectiveToestablishaTLC-UVmethodofdeterminationofadenosineinfruitofCapparisspinosaL.MethodsAdenosine
wasextractedwithultrasonicandseparatedbyTLCsilicagel,theabsorbancewasdetectedat260nmwithUVspectrophotometry.
ResultThecabibrationcurveforadenosinewaslinearwithintherangeof1.0-6.0μg/mL,r=0.9995(n=6),theaveragerecoverywas
96.1% (RSD=1.48%n=3),thecontentofadenosinewas14.19mg/Kg(RSD=2.8,n=5).ConclusionThemethodwassimple,conve-
nientandaccuratefordeterminationofadenosineinfruitofCapparisspinosaL.
Keywords:CapparisspinosaLf adenosinef TLC-UVf
刺山柑 (CapparisspinosaL.)为白花菜科山柑
属植物,又称野西瓜、老鼠瓜、瓜儿菜、槌果藤、
菠里克果和伯格-塔乌孜等。维吾尔语称刺山柑果
为开派,喜生于荒漠戈壁和低山坡石质沙土地处,
新疆、西藏等地有分布。国外阿富汗、巴基斯坦、
前苏联中亚及北非和地中海沿岸均有分布。刺山柑
果性温,主要功能有祛风、散寒、除湿、消肿、止
痛,维吾尔医主要用于治疗风寒湿痹,脾胃寒痛,
浮肿等疾病 [1]。在地中海地区刺山柑果是一种常见
的用于烹饪的芳香食品,当地居民将刺山柑果醋制
和盐制后进行食用。刺山柑在西班牙、意大利、土
耳其等国家已经成为一种重要的经济作物 [2]。国内
学者姜薇等对刺山柑果的化学成分研究表明其含有
6-Hydroxy-12-caboxy-blumenolA-β-D-glucopyra-
noside(I),1H-吲哚-3-乙腈-4-O-β-葡萄糖苷
(Ⅱ), (6S)-Hydroxy-3-oxo-α-ionol(Ⅲ),3-醛
基吲哚 (Ⅳ),腺苷 (Ⅴ),次黄嘌呤核苷 (Ⅵ),对
苯甲酸鼠李糖苷 (Ⅶ),蔗糖 (Ⅷ),β-谷甾醇
(Ⅸ),胡萝卜苷 (Ⅹ)[3]。M.k zcan1f C.Aydin 对
新鲜刺山柑果的分析得出其含水 81.61%、粗蛋白
17.4%、灰分5.17%、粗油3.27%、粗纤维12.72%,还
含 Na57.17mg/kg、K14.33mg/kg、P6784mg/kg[4]。
1999年Ihsan Calis等从刺山柑分离出了两种葡萄
糖配基:1H-吲哚-3-乙腈-4-O-β-吡喃型葡萄糖
苷和 1H-吲哚-3-乙腈-4-O-β(6-O-β-吡喃葡萄
糖基)-吡喃型葡萄糖苷[5]。2002年Ihsan Calis从
刺山柑果中分离出 3种 (6S)-Hydroxy-3-oxo-α-
ionol glucosides和一种 prenyl glucosides[6]。季
宇彬等采用苯酚-硫酸法及毛细管电泳法对刺山柑
果多糖测定发现,刺山柑果粗多糖及除蛋白后多糖
含量分别为39.95%,66.42%,主要多糖组分比为:
鼠李糖∶木糖∶葡萄糖∶阿拉伯糖∶半乳糖=3∶5∶48∶100∶
21∶19[7]。腺苷是一种存在人体内的所有细胞中的内
源性核苷,是一种很强的心血管活性物质,它使体
循环血管扩张,引起血压下降 [8];腺苷有镇静、催
眠、抗癫痫、作用 [9];内源性腺苷对脂肪组织就有
药物研究
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生理调节作用,可抑制交感神经刺激引起的脂解。
在心血管方面,腺苷是一种可靠的生理调节剂。在
临床上,腺苷可被有效的作为一种血管舒张剂,亦可
作为一种抗心律不齐的药物。在诊断学上,腺苷可以
被用来区分室上性心动过速于室性心动过速,以暴
露心房扑动与心房纤维性颤动[10]。国内外有关刺山
柑果中腺苷的研究未见报道,笔者采用薄层层析分
离,紫外分光光度法测定刺山柑中腺苷的含量,为
刺山柑的药用开发提供质量控制依据,现报道如
下。
1 仪器与试药
1.1 试药:腺苷标准品 (中国药品生物制品鉴定
所 879-200001),乙酸乙酯 (AR),异丙醇 (AR),
氯仿 (AR),无水乙醇 (AR),刺山柑果实干品
(2007年4月购于新疆二道桥药材市场,经新疆医
科大学中医学院李永和主任药师鉴定)。
1.2 仪器:Spectrumlab 54紫外分光光度计
(上海棱光技术有限公司)、RE52CS-2旋转薄膜蒸
发仪 (上海亚荣仪器厂)、YOKO-SY紫外分析摄影
仪 (武汉药科新技术有限公司)、KQ-400DBC超声
清洗仪 (昆山市超生仪器有限公司)、BS110S分析
天平 (北京,赛多利斯)、TGL-16B台式离心机
(上海安亭科学仪器厂)、薄层层析硅胶板 GF254
(青岛海洋化工厂)、DZF-6021型真空干燥箱 (上
海精宏实验设备厂)、CS101型电热鼓风干燥箱
(重庆实验设备厂)。
2 方法与结果
2.1 标准样品的制备:精密称取腺苷标准品
8.2mg,加入70%得乙醇溶解,定溶到50ml容量瓶
中即得。
2.2 测试样品的制备:将刺山柑果实捣碎并过 40
目和 60目的药典筛,取中间粉末放在真空干燥箱
内(50℃,24h)烘干至恒重,精密称取刺山柑粉末
5g,置250ml的容量瓶中,并用8倍量的70%的乙
醇超声三次,每次20min,过滤并合并滤液,浓缩
至1g/ml备用。
2.3 定性鉴别:用定量点样器吸取 15μL样品液,
点于 10x20cm薄层板上,以氯仿-乙酸乙酯-异丙
醇-水 (8:2:6:0.5)为展开剂,以腺苷标准品
为对照,直立上行展开。在紫外灯 254nm下检测
后,发现在相同的位置有相同颜色的斑点 (见图
1),刮取与标准品 Rf值一致的斑点,置于 10mL
的带盖试管中,精密加入4mL70%的乙醇,剧烈震
荡2min后,以 10000r/min离心 10min小心吸取上
清液,得测试样品液,以同样的方法制的标准品
液。测试样品液和标准品液在 200-600nm范围内
进行紫外扫描的紫外图谱 (见图 2),由图 2可知
样品紫外吸收图和标准品重合良好,确定最大吸收
波长为260nm。
2.4 标准曲线的制定:精密量取标准品溶液,配
制成浓度分别为 1.0,2.0,3.0,4.0,5.0,6.0μg/
mL的腺苷溶液,以 70%的乙醇为参比,于 260nm
处测定吸光度,以浓度 (μg/mL)为Y,吸光度为
X,回归后得浓度-吸光度的回归方程为:Y=
0.1030X+0.0371 r=0.9995显示在1.0～6.0μg/mL的
范围内,腺苷的浓度和吸光度呈现良好的线性关
系。
2.5 精密度与稳定性实验:取腺苷标准品溶液,
加70%乙醇配制成浓度为 5μg/mL,以 70%的乙醇
为参比,于260nm处测定吸光度。重复平行测定5
次,得吸光度值的 RSD为 0.64%。另取该腺苷标
图1 1.样品 (Sample) 2.腺苷 (Adenosine)
图2 1.样品 (Sample) 2.腺苷 (Adenosine)
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准品溶液,以 70%乙醇为参比,每隔 1h测定吸光
度,平行测定 9次,得吸光度的 RSD为 0.62%。
结果显示本实验方法精密度良好,标准品溶液在
8h内有较好的稳定性。
2.6 样品测定:按定性鉴别中样品溶液的制备方
法制备 5批样品,以 70%乙醇为参比,在 260nm
处测定吸光度,并将其代入标准曲线回归方程分别
计算出测试样品中腺苷的浓度,经换算刺山柑中腺
苷的含量为14.19μg/g,含量的RSD%为2.8(见表
1)。
2.7 加样回收率:精密量取已知腺苷浓度的测试
样品溶液3份,分别加入标准品,按定性鉴别中样
品的制备法制备试液,按样品测定方法测定吸光度
并求得腺苷含量,计算加样回收率,平均回收率为
96.1%,RSD为1.5%。结果见表2。
3 讨论
本文采用硅胶薄层层析结合紫外分光光度法测
定了刺山柑果中腺苷的含量。刺山柑果经超声提
取,薄层层析分离得到的测试样品溶液和标准品溶
液的紫外吸收图谱完全一致,表明测试样品中含有
腺苷,并从文献中获得支持,同时利用薄层分离可
以排除其它成份干扰。本法灵敏度高,设备简单,
操作简便易行,可用于刺山柑果的质量控制。刺山
柑的药理研究表明有降血糖血脂,抗菌,杀虫,保
肝,抗炎,抗氧化等作用 [11]。维吾尔医主要用刺
山柑治疗痛风、风湿性关节炎等疾病,有较好的疗
效 [12～14]。从国外的相关研究报道可知,刺山柑有较
广泛的药学用途和经济价值,有待于我们进行深入
研究。
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(收稿日期:2008.01.15)
表1 样品含量测定
表2 回收率实验结果
药 物研究
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