全 文 ：中国民族民间医药
Chinesejournalofethnomedicineandethnopharmacy
反相高效液相法测定刺山柑果中腺苷的含量
周晓英 1 陈 强 2 孙 芸 3
1.新疆医科大学药学院,新疆 乌鲁木齐 830054;2.新疆医科大学教学科研服务中心,新疆 乌鲁木齐 830054;
3.新疆医科大学中医学院中药系,新疆 乌鲁木齐 830054
【摘 要】:目的:建立刺山柑果中腺苷含量的测定方法。方法:色谱柱:Polaris(C18-A 250mm×4.6mm,5μm,AB17),
流动相:甲醇:水 (15∶85),检测波长:260nm,流速 1.0mL/min,柱温:30℃。结果:回归方程为 Y=206997300X+
113157.8(r=0.9991 n=5),平均回收率为104.6%,RSD=4.51%,腺苷的含量为36.61mg/Kg(RSD=2.89%,n=5)。结论:本
法简捷、准确,适用于刺山柑果中腺苷的含量测定。
【关键词】:刺山柑 腺苷 反相高效液相法
【中图分类号】R282.71;R284.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517(2008)08-0047-03
DeterminationofadenosineinfruitofCapparisspinosaL.withRP-HPLC
ZHOUXiao-ying1 CHENQiang2 SUNYun3
1.ColegeofPharmacy,XinjiangMedicalUniversity,XinJiang,Urumqi,830054;2.SerivecenterforTeachingandResearch,Xinjiang
MedicalUniversity,XinJiang,Urumqi,830054;3.ColegeofTCM,XinjiangMedicalUniversity,XinJiang,Urumqi,830054
Abstract:ObjectiveToestablishaRP-HPLCmethodofdeterminationofadenosineinfruitofCapparisspinosaL.Methods:ODS
columnwasPolaris(C18-A 250mm×4.6mm,5μm,AB17),andthemobilephaseconsisstedofmethanol-water(15∶85).The
detectingwavelengthwas260nmandTheflowratewas1.0mL/min.Thecolumntemperaturewas30℃.Result:Theregressionequation
wasY=206997300X+113157.8(r=0.9991n=5), theaveragerecoverywas104.6%,RSD=4.51%,thecontentofadenosinewas
36.61mg/Kg(RSD=2.89%, n=5).Conclusion:Themethodwassimple,convenientandaccuratefordeterminationofadenosinein
fruitofCapparisspinosaL.
Keyword:FruitofCapparisspinosaL, adenosinee RP-HPLCe
刺山柑 (Capparis spinosa L.)为白花菜科
山柑属植物,维吾尔语称刺山柑果为开派,又称
野西瓜、老鼠瓜、瓜儿菜、槌果藤、菠里克果和
伯格-塔乌孜等,喜生于荒漠戈壁和低山坡石质沙
土地处,在新疆、西藏等地以及阿富汗、巴基斯
坦、前苏联中亚及北非和地中海沿岸均有分布。
刺山柑果性温,具有祛风、散寒、除湿、消肿、
止痛的作用,维吾尔医主要用于治疗风寒湿痹,
脾胃寒痛,浮肿等疾病 [1]。国内学者姜薇等对刺
山柑果的化学成分研究表明其含有腺苷 (Ⅴ)等
活性成分 [2]。腺苷是一种存在人体内的所有细胞
中的内源性核苷,是一种很强的心血管活性物质,
它使体循环血管扩张,引起血压下降,有镇静、
催眠、抗癫痫作用 [3]。国内外有关刺山柑果中腺
苷的研究未见报道,本文首次采用反相高效液相
法测定刺山柑果中腺苷的含量,为刺山柑果的药
用开发提供一定的质量控制依据。
1 仪器与试药
高效液相仪 (Varian 美国)、Prostar 50C工
作站,325紫外检测器。RE52CS-2旋转蒸发仪
(上海亚荣仪器厂)、BS110S分析天平 (北京,赛
多利斯)。
腺苷标准品 (中国药品生物制品鉴定所 879-
200001),甲醇 (色谱纯,天津市光复精细化工研
究所),刺山柑果实干品 (2007年6月采于新疆乌
鲁木齐市南山,经新疆医科大学中医学院李永和
主任药师鉴定)。
2 方法与结果
2.1 标准品溶液的制备 精密称取腺苷标准品
6.0mg,加入色谱纯甲醇溶解,定溶到50ml容量瓶
药 物 研 究
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图1 腺苷
表1 样品含量测定
中即得储备液,取50μL加200μL色谱纯甲醇稀释
为0.024mg/mL浓度备用。
2.2 供试品溶液的制备 将刺山柑果实捣碎并过
40目和60目的药典筛,取中间粉末放在真空干燥
箱内 (50℃,24h)烘干至恒重,精密称取刺山柑
粉末 2.5g,用 8倍量的甲醇超声三次,每次
20min,过滤并合并滤液,浓缩至0.1g/mL备用。
2.3 定性鉴别 用定量点样器吸取15μL样品液,
点于 10×20cm薄层板上,以氯仿-乙酸乙酯-异丙
醇-水 (8∶2∶6∶0.5)为展开剂,以腺苷标准品为对
照,直立上行展开。在紫外灯 254nm下检测后,
发现在相同的位置有相同颜色的斑点,刮取与标
准品Rf值一致的斑点,置于10mL的带盖试管中,
精密加入 4mL70%的乙醇,剧烈震荡 2min后,以
10000r/min离心 10min小心吸取上清液,得测试
样品液,以同样的方法制的标准品液。测试样品
液和标准品液在 200～600nm范围内进行紫外扫描
的紫外图谱,可知样品紫外吸收图和标准品重合
良好,确定最大吸收波长为260nm。
2.4 色谱条件 色谱柱:Polaris(C18-A 250mm×
4.6mm,5μm,AB17);流动相:甲醇:水 (15∶85);
检测波长为:260mm;流速:1.0mL/min;柱温:
30℃;进样量:5μL。取腺苷对照品溶液和样品溶
液,在上述色谱条件下测定。 (结果见图1)由图
谱可知,样品在腺苷出峰时间区域没有干扰峰出
现,故对腺苷的测定无干扰作用。精密吸取腺苷
对照品 2.5、5、7.5、10、12.5μL,按上述色谱条
件,分别进样,测定峰面积,以峰面积积分值 (y)
为纵坐标、腺苷量 (x)为横坐标绘制标准曲线,
得回归方程 Y=206997300X+113157.8,r=0.9991。
线性范围6μg～36μg。
2.5 精密度试验 取腺苷对照品溶液,在同一色
谱条件下,重复进样 5次,腺苷峰面积积分值的
RSD=1.59%。
2.6 重现性试验 按供试品溶液制备的方法分别
制备3份供试样品,平行测定,RSD=4.2% (n=3)。
2.7 稳定性试验 取同一批次供试品溶液 5份,
在常温下放置 12h,每间隔 2h测定 1次,连续共
测定6次,RSD=3.1%。
2.8 回收率试验 精密量取已知浓度的测试样品
溶液3份,分别精密加入一定量腺苷标准品溶液,
按供试品溶液的制备方法制备,测定,计算回收
率。平均回收率为104.6%,RSD=4.5%。
2.9 样品测定 吸取腺苷供试品溶液5μL,分别进
样,测定,并将其代入标准曲线回归方程分别计算出
测试样品中腺苷的浓度,经换算刺山柑果中腺苷的含
量为36.61mg/Kg,RSD%=2.89%。 (结果见表1)
3 讨论
本文采用反相高效液相色谱测定刺山柑果中腺
苷的含量,操作简便易行,可用于刺山柑果的质量
控制。刺山柑果经超声提取,得到的供试品溶液和
标准品溶液的反相HPLC图谱完全一致,表明测试
样品中含有腺苷,并从文献中获得支持,其它成份
无干扰。刺山柑的药理研究表明有降血糖血脂,抗
菌,杀虫,保肝,抗炎,抗氧化等作用 [4]。维吾尔
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医 疗 论 坛
Medicaltreatmentforum
医主要用刺山柑治疗痛风、风湿性关节炎等疾病,
有较好的疗效 [5,6]。刺山柑有较广泛的药学用途和
经济价值,有待于我们进行深入研究。
参考文献
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EthnomedicineandEthnopharmacy.(中国民族医药杂志), 1999,5
(2):3(inChinese).
(收稿日期:2008.6.30)
淫羊藿防治骨质疏松症的研究现状
谭清武
中国人民解放军白求恩国际和平医院,河北 石家庄 050082
【关键词】:骨质疏松症 淫羊藿 综述
【中图分类号】R282.71;R681 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517(2008)08-0049-03
骨质疏松症 (Osteoporosis,OP)是一种以骨
量减少、骨微结构破坏,导致骨脆性增加、容易
发生骨折为特征的全身代谢性骨病。骨质疏松症
是老年人的一种常见病,随着人类寿命的延长,
社会老龄化进程的加快,骨质疏松症的发生率呈
逐渐上升趋势,已严重危害着老年人的身体健康。
近年来中医药在防治骨质疏松症方面取得较大进
展,在中医药防治骨质疏松症的研究中,中药淫
羊藿的应用研究受到高度重视。现将近年来淫羊
藿防治骨质疏松症的研究现状作一综述。
1 淫羊藿的传统功效及其有效成分药理作用
淫羊藿为小蘖科多年生草本植物淫羊藿或箭
叶淫羊藿的全草,性温,味辛、甘,归肝、肾经,
有补肾壮阳、祛风除湿之功效 [1]。 《本草求真》
中记述: “盖因气味甘温,则能补火助阳,兼有
辛香则冷可除而风可散耳。” 《本草备要》中称淫
羊藿能 “补命门,益精气,坚筋骨,利小便”。现
代药理研究表明,淫羊藿的主要有效成分为黄酮
类化合物,此外尚含有多糖类化合物、生物碱、
木脂素、亚麻酸、维生素 E、挥发油、微量元素
等。淫羊藿能改善心肌缺血、降血压、抑制血栓
形成、促进造血功能、调节免疫、抗骨质疏松、
抗衰老、抗肿瘤等作用 [2]。
2 淫羊藿用于防治骨质疏松症的理论依据
中医文献中虽无骨质疏松症的病名,但 《黄
帝内经》中早就有 “骨枯”、 “骨痿”等类似本病
的记载,且认为骨枯、骨痿与肾虚有关。如 《灵
枢·经脉篇》云: “足少阴气绝则骨枯。” 《素问·
痿论篇》云: “肾主身之骨髓⋯⋯肾气热,则腰
脊不举,骨枯而髓减,发为骨痿。”又云: “肾者
水脏也,今水不胜火,则骨枯而髓虚,故足不任
身,发为骨痿。”近年来,许多学者对肾虚与骨密
度或骨矿含量的关系进行了研究,阐明肾虚与骨
密度或骨矿含量的降低显著相关 [3,4]。这些研究结
果与中医 “肾主骨”理论是相吻合的,证实了肾
虚是骨质疏松症的主要病机,因此近年来中医药
防治骨质疏松症多从补肾入手。而淫羊藿甘温助
阳,有补肾壮阳之功效,《本草纲目》称其有 “益
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
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