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鸦葱总黄酮保肝作用的体内外研究



全 文 :鸦葱总黄酮保肝作用的体内外研究
张天文,谢扬,张志,王广树Δ
(吉林大学 药学院,吉林 长春 130021)
资助项目:国家科技重大专项重大新药创制(2013ZX09103002 - 007)
作者简介:张天文,男,硕士,研究方向:中草药有效成分的研究,E-mail:UFOzhangtianwen@ 163. com;王广树,通讯作者,男,博士,教授,博士生导师,研究方
向:中草药有效成分的研究,E-mail:wgs@ jlu. edu. cn。
[摘要] 目的 探索鸦葱总黄酮在体内、体外的保肝作用。方法 体内实验:ICR小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组、鸦葱
总黄酮低、中、高剂量组,采用四氯化碳(CCl4)诱导急性化学性肝损伤模型和卡介苗 +脂多糖诱导急性免疫性肝损伤模型,检测各组
血清中天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、乳酸脱氢酶(lactate
dehydrogenase,LDH)含量,光镜下观察肝脏结构变化。体外实验:原位胶原酶消化法提取分离 Wistar大鼠肝细胞,采用四氯化碳诱导
肝脏细胞损伤,鸦葱黄酮溶液干预培养细胞 4 h 后检测上清培养液中 AST、ALT、LDH、一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶
(superoxide dismutase,SOD)和肝细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果 在四氯化碳诱导急性化学性肝损伤和卡介苗 +脂
多糖诱导急性免疫性肝损伤 2 组模型中,HE肝脏病理切片显示鸦葱总黄酮组的肝损伤明显轻于模型组,模型组 AST、ALT、LDH活性
均显著高于空白组(P < 0. 01);阳性药组上述指标活性均显著低于模型组(P < 0. 01,P < 0. 05);鸦葱总黄酮低、中、高剂量组上述指标
活性均显著低于模型组(P < 0. 01,P < 0. 05)。在四氯化碳诱导大鼠肝细胞损伤体外实验中,模型组 AST、ALT、LDH、MDA、NO活性均
显著高于空白组(P < 0. 01),SOD 活性显著低于空白组(P < 0. 01);阳性药组 AST、ALT、LDH、MDA、NO 活性均显著低于模型组
(P < 0. 05,P < 0. 01),SOD活性均显著高于模型组(P < 0. 01);鸦葱总黄酮低、中、高剂量组 AST、ALT、LDH、MDA、NO 活性均显著低
于模型组 (P < 0. 05,P < 0. 01),SOD活性均显著高于模型组(P < 0. 05,P < 0. 01)。结论 鸦葱总黄酮对四氯化碳诱导的小鼠化学性
肝损伤、卡介苗 +脂多糖诱导的小鼠免疫性肝损伤和大鼠肝细胞损伤有显著的保护作用,为开发和利用鸦葱资源、研制保肝新药提供
了实验依据。
[关键词] 鸦葱;黄酮;肝损伤
[中图分类号] R944. 9 [文献标识码] A [文章编号] 1005 - 1678(2015)05 - 0006 - 05
Study on hepatoprotective effects of total flavonoids in Scorzonera
austriaca Wild in vivo and in vitro
ZHANG Tian-wen,XIE Yang,ZHANG Zhi,WANG Guang-shuΔ
(School of Pharmaceutical Sciences,Jilin University,Changchun 130021,China)
[Abstract] Objective To investigate the hepatoprotective effects of total flavonoids in Scorzonera austriaca Wild (TFSA)in vivo and in vitro.
Methods In vivo,ICR mice were randomly divided into negative,model,positive,TFSAs low-dose,medium-dose and high-dose groups,and acute
chemical liver injury models were constructed with CCl4 and acute autoimmune liver injury models with Bacillus Calmette-Guerin vaccine (BCG )and
lipopolysaccharide (LPS). The activity of serum aspartate aminotransferase (AST),alanine aminotransferase (ALT) ,lactate dehydrogenase (LDH)was
detected and liver tissue was used as biopsy. In vitro,liver cells of Wistar rat were extracted and isolated by orthotopic collagenase digestion method,and
liver cell damage was induced with CCl4. Then the liver cells were cultured with TFSA solution and the contents of AST,ALT,LDH,nitric oxide (NO),
superoxide dismutase (SOD)in the supernatant and malondialdehyde (MDA)in rat hepatocyte were detected. Results The results of CCl4-and BCG +
LPS-induced acute chemical liver injury models in mice showed that there were less microstructures damage of liver tissue in TFSA groups compared with
model group in liver pathological sections (HE),AST,ALT and LDH levels in model group were significantly higher than those in negative group
(P < 0. 01) ,the above indexes in positive drug group were significantly lower than those in negative group (P < 0. 01,P < 0. 05) ,and the above indexes
in TFSA’s low-dose,medium-dose and high-dose groups were significantly lower than those in model group(P < 0. 01,P < 0. 05). The results of CCl4-
induced rat hepatocyte injury in vitro showed that AST,ALT,LDH,MDA and NO levels were significantly higher and SOD level was lower in model
group than those in negative group (P < 0. 01),AST,ALT,LDH,MDA and NO levels were significantly lower and SOD level was higher in positive
drug group than those in model group (P < 0. 01,P < 0. 05) ,and AST,ALT,LDH,MDA and NO levels were significantly lower and SOD level was
higher in TFSA’s low-dose,medium-dose and high-dose groups were significantly lower than those in model group(P < 0. 01,P < 0. 05)
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基础研究 中国生化药物杂志 2015 年第 5 期 总第 35 卷
. Conclusion TFSA have hepatoprotective effects on CCl4-induced chemical liver injury and BCG + LPS-induced immune liver injury in mice,and rat
hepatocyte damage. This study provides experimental data for the development and utilization of Scorzonera austriaca Wild resources and new
hepatoprotective medicines.
[Keywords] Scorzonera austriaca Wild;flavonoids;liver damage
鸦葱 Scorzonera austriaca Wild,菊科多年生草本植物,分布于
中国的西北,东北地区。全草入药,具有清热解毒,活血消肿的
功效。外用治疔疮,痈疽,毒蛇咬伤,蚊虫叮咬,乳腺炎等[1]。鸦
葱中的主要化学成分有:黄酮、倍半萜、三萜、香豆素类化合
物[2-8]。现代药理学研究表明鸦葱具有抗腹泻、抗炎、治疗由带
状疱疹病毒引起的带状疱疹系水痘,治疗妊娠恶阻等作用[9-11]。
民间鸦葱用来治疗肝炎,具有良好的效果。为开发和利用鸦葱
药用资源,本课题组就鸦葱总黄酮的肝脏保护作用进行了探讨。
1 材料与方法
1. 1 材料
1. 1. 1 实验动物:ICR小鼠 144只,清洁级,28 ~30 日龄,18 ~
22 g,雌雄各半,由吉林大学白求恩医学院动物实验中心提供,合
格证号:SCXK(吉)-2007-0003。雌性 Wistar 大鼠 2 只,清洁级,
6 ~ 8 周龄,150 ~ 180 g,由吉林大学白求恩医学院动物实验中心
提供,合格证号:SCXK(吉)-2007-0003。本实验遵循《实验动物
保护条例》。
1. 1. 2 药材:鸦葱药材采自于吉林省四平地区,经吉林大
学药学院生药教研室张静敏教授鉴定为鸦葱 Scorzonera austriaca
Wild。
1. 1. 3 主要药品及试剂:D-101 型大孔树脂、D-4020 型大
孔树脂(天津农药股份有限公司树脂分公司);ALT、AST、SOD、
MAD、SOD、NO 试剂盒、HE 染色试剂盒(南京建成生物工程研
究所);脂多糖、IV型胶原酶、台盼蓝(Sigma公司);卡介苗(长春
生物制品所);联苯双酯(北京协和制药厂);1640 培养液
(hyclone公司);PBS(gibco公司);四季青胎牛血清(杭州天杭生
物科技有限公司)。
1. 1. 4 实验仪器:TGL-16C离心机(上海安亭科学仪器厂;
DNM-9602 酶标仪(北京普朗有限公司);二氧化碳培养箱、无菌
超净台(上海新苗医疗器械制造有限公司);BX51 光学显微镜
(日本 OLYMPUS)。
1. 2 方法
1. 2. 1 鸦葱总黄酮(total flavonoids in Scorzonera austriaca
Wild,TFSA)的制备[2-3]:鸦葱全草 5. 4 kg,用 70%的乙醇浸泡,共
3 次,每次 7 d,收集鸦葱浸泡提取液,减压回收乙醇,然后上
D-101大孔树脂色谱柱,先用水洗脱,除去色素、水溶性蛋白、糖
类等杂质,用 60%的乙醇溶液洗脱,收集洗脱液,减压回收乙醇,
干燥,得鸦葱粗制黄酮提取物 145 g。将粗制总黄酮上样到预先
处理好的 D4020 大孔树脂色谱柱上,逐步用水、5%乙醇洗脱除
去杂质,再用 10%乙醇洗脱收集洗脱液,薄层色谱板监测,至出
现黄酮时在 10% ~30%之间逐步加大乙醇的百分含量洗脱,薄
层色谱板监测,洗脱至无黄酮出现为止,收集洗脱液,减压浓缩,
干燥,得到精制鸦葱总黄酮 71. 5 g。
1. 2. 2 ICR小鼠四氯化碳诱导急性化学性肝损伤模型[12]:
取 ICR小鼠 60 只,随机分组空白组、模型组、阳性药组、鸦葱总
黄酮低剂量组、中剂量组和高剂量组。鸦葱总黄酮低中高 3 组
的灌胃剂量分别为:60、100、140 mg /kg,用 0. 5%的羧甲基纤维素
钠水溶液配制。联苯双酯灌胃剂量为 100 mg /kg。空白组和模
型组用 0. 5%的羧甲基纤维素钠水溶液 5 mL /kg灌胃,其余各组
按给定剂量灌胃,每天 1 次,连续 7 d。除空白组外,各组末次灌
胃给药 2 h后按照 10 ml /kg腹腔注射 0. 1% CCl4橄榄油溶液,空
白组腹腔注射橄榄油,复制急性四氯化碳小鼠肝损伤模型。以
小鼠血清中 AST、ALT的活性为评价指标,与空白组相比模型组
显著升高,与模型组相比阳性药组显著降低为造模成功标准,差
异性愈显著造模效果愈好,本实验造模成功率 91%。
腹腔注射造模后禁食不禁水,待 16 h 后摘除眼球取血,于
1. 5 mL离心管中 37 ℃ 水浴锅水浴 30 min,5000 r /min 离心
10 min,吸取血清至无菌的 1. 5 mL离心管,根据试剂盒说明书检
测小鼠血清中的 AST、ALT、LDH的活性。
处死小鼠解剖分离其肝脏,将其放入预先配制好的 10%的
福尔马林溶液中固定,经梯度脱水、浸透、包埋、切片、染色、脱水
透明等处理后在光学显微镜下观察并拍照。
1. 2. 3 ICR小鼠卡介苗 +脂多糖诱导急性免疫性肝损伤模
型[13-14]:实验分组同 1. 2. 2。鸦葱总黄酮低、中、高 3 组的灌胃剂
量分别为:80、160、240 mg /kg,用 0. 5%的羧甲基纤维素钠水溶液
配制。阳性药组联苯双酯灌胃剂量为 150 mg /kg。除空白组外,
其余各组于首次灌胃给药前 3 h 尾静脉注射卡介苗 2. 5 mg /只
(含 5 × 106 个菌),空白组尾静脉注射等同体积的生理盐水。空
白组和模型组用 0. 5%的羧甲基纤维素钠水溶液 5 mL /kg 灌胃,
其余各组按给定剂量灌胃,每天 1 次,连续 12 d。除空白组外,其
余各组末次灌胃给药 2 h 后按照 10 μg /只的剂量尾静脉注射脂
多糖,空白组尾静脉注射生理盐水,复制卡介苗 +脂多糖诱导的
小鼠免疫性肝损伤模型。
AST、ALT、LDH检查方法及 HE染色切片同上。
1. 2. 4 四氯化碳诱导的体外大鼠肝细胞损伤模型:采用原
位胶原酶消化法[15-17]分离肝细胞。Wistar大鼠禁食不禁水 24 h,
用 2%的戊巴比妥钠溶液按照 40 mg /kg 的剂量腹腔注射麻醉,
同时腹腔注射肝素钠溶液 200 U /kg,消毒,仰卧位固定大鼠于固
定板上,打开腹腔,游离出门静脉,用一次性输液器针头(1. 2 ×
19TWLB)插入门静脉,固定插入针头,连接无菌 37 ℃预热的 PBS
溶液,剪断下腔静脉,以 30 mL /min的速度灌流 10 min至肝脏呈
米黄色,以 20 mL /min 0. 05%的 IV 型胶原酶(PBS 配制,浓度
0. 5 mg /mL)灌流 10 min 至肝脏松软无弹性,剪切肝脏周围的血
管韧带分离出完整的肝脏于无菌平皿中,用 PBS 清洗肝脏表面
3 次,撕去肝包膜,轻轻震荡肝脏和平皿,肝细胞散落到 4 ℃预冷
的 PBS溶液中,100 目筛网过滤,得到肝细胞悬液,600 r /min 离
心肝细胞悬液 1 次,500 r /min离心肝细胞悬液 2 次,以洗去残余
的红细胞,用培养液重悬肝细胞,台盼蓝排斥法测分离的肝细胞
活力,最后用含 10%胎牛血清和 1%双抗(100000 U /L 青霉素、
100 mg /L链霉素)的 1640 完全培养液在平皿中培养。
肝细胞培养 4 h后,换液,调整肝细胞密度为 8 × 106 个 /mL,
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中国生化药物杂志 2015 年第 5 期 总第 35 卷 基础研究
100 μL /孔接种到 48 孔板中,同时鸦葱总黄酮低、中、高 3 组和阳
性药组分别加入药液 100 μL,使鸦葱总黄酮低、中、高 3 组的终
浓度分别为 0. 1、0. 05、0. 01 mg /mL,阳性药物联苯双酯的终浓度
为 0. 01 mg /mL,空白组和模型组加入含 10%胎牛血清的 1640 完
全培养液 100 μL,培养 2 h。除空白组外各孔加入含 CCl4
90 mmol /L的培养液 100 μL使其终浓度为 30 mmol /L,空白组加
入 100 μL 1640 完全培养液,继续培养 4 h。
收集各孔上清细胞培养液,4000 r /min离心 5 min,取上清液
按各自试剂盒说明书测定 AST、ALT、LDH、NO、SOD的活性。
弃去细胞培养上清液,用细胞刮将细胞刮下,将细胞转移到
无菌离心管,加提取液 0. 5 mL,混匀 2 min,把细胞破碎制成悬
液,按试剂盒说明书测定肝细胞中 MDA含量。
1. 3 统计学方法 用 SPSS 20. 0 统计学软件分析,正态计
量实验数据均以“x ± s”表示,组间差异采用方差分析 t 检验,
P < 0. 05 为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 ICR小鼠四氯化碳诱导急性化学性肝损伤和卡介苗 +
脂多糖诱导急性免疫性肝损伤中 AST、ALT、LDH 活性的测定结
果 在 2 组模型中,与空白组相比,模型组 AST、ALT、LDH 活
性均显著升高(P < 0. 01);与模型组相比阳性药组 AST、
ALT、LDH 活性均显著降低(P < 0. 01,P < 0. 05),表明模型
复制成功。与模型组相比,鸦葱总黄酮低、中、高剂量组
AST、ALT、LDH 活性均显著降低(P < 0. 01,P < 0. 05),说明
鸦葱总黄酮对 ICR 小鼠四氯化碳诱导急性化学性肝损伤和
卡介苗 +脂多糖诱导急性免疫性肝损伤均有保护作用。见
表 1。
表 1 鸦葱总黄酮对 CCl4 诱导及卡介苗 +脂多糖诱导急性化学性肝损伤小鼠血清肝功能酶活性的影响(n = 10,x ± s,U /L)
Tab. 1 Effect of total flavonoids in Scorzonera austriaca Wild on serum ALT,AST and LDH after CCl4 -and
BCG + LPS-induced acute chemical liver injury in mice(n = 10,x ± s,U /L)
组别
CCl4 诱导
AST ALT LDH
卡介苗 +脂多糖诱导
AST ALT LDH
空白组 74. 0 ± 31. 4 38. 2 ± 52. 1 153. 3 ± 95. 2 73. 3 ± 29. 6 16. 6 ± 8. 9 1033. 0 ± 128. 1
模型组 545. 1 ± 370. 4* 351. 1 ± 158. 2* 757. 7 ± 175. 8* 258. 4 ± 111. 3* 109. 9 ± 14. 1* 1522. 5 ± 288. 2*
阳性药组 235. 0 ± 173. 6## 177. 9 ± 79. 2# 582. 5 ± 98. 0# 108. 2 ± 56. 1## 74. 0 ± 24. 8## 1246. 3 ± 247. 4#
鸦葱总黄酮低剂量组 495. 4 ± 292. 8# 221. 8 ± 120. 5# 382. 1 ± 95. 8## 131. 2 ± 41. 4# 77. 9 ± 21. 3## 1287. 9 ± 213. 6#
鸦葱总黄酮中剂量组 258. 8 ± 180. 7# 121. 7 ± 38. 9## 220. 1 ± 101. 7## 121. 9 ± 22. 9# 67. 4 ± 22. 8## 1241. 4 ± 100. 3##
鸦葱总黄酮高剂量组 200. 3 ± 137. 9## 101. 7 ± 106. 8## 208. 5 ± 104. 1## 101. 0 ± 35. 7## 57. 1 ± 21. 3## 1219. 4 ± 132. 3##
* P < 0. 01,与空白组比较,compared with control group;#P < 0. 05,##P < 0. 01,与模型组比较,compared with
2. 2 光镜下鸦葱总黄酮对 ICR 小鼠四氯化碳诱导急性化
学性肝损伤和卡介苗 +脂多糖诱导急性免疫性肝损伤的影响
空白组 ICR小鼠肝小叶组织结构清晰,肝窦和肝细胞索排列整
齐有序,肝细胞胞浆红染,核呈圆形居中,汇管区三管结构清晰
可见,呈正常肝组织结构。
在 ICR小鼠四氯化碳诱导急性化学性肝损伤模型中,模型
组 ICR小鼠个别肝细胞浊肿,大部分肝细胞呈坏死改变,细胞结
构模糊不清,着色深浅不一,细胞核浓缩碎裂。阳性药组中央静
脉周围的部分肝细胞浊肿,表现为细胞肿胀呈圆形,胞质着色
浅,浊肿的肝细胞内可见大小数量不等的圆形空泡,应为脂肪变
性所致。鸦葱总黄酮低剂量组中央静脉周围的肝细胞浊肿,表
现为细胞肿胀呈圆形,胞质着色浅。鸦葱总黄酮中剂量组中央
静脉周围的部分肝细胞浊肿,表现为细胞肿胀呈圆形,胞质着色
浅,肝组织内单核细胞浸润多见。鸦葱总黄酮高剂量组中央静
脉周围的部分肝细胞轻度浊肿,表现为细胞肿胀呈圆形,胞质着
色浅,肝组织内单核细胞浸润多见。见图 1。
在卡介苗 +脂多糖诱导急性免疫性肝损伤模型中,模型组
个别肝细胞肿大,细胞内有不规则无色区,为轻度水肿所致。阳
性药组个别肝细胞肿大,细胞内有不规则无色区,为轻度水肿所
致。鸦葱总黄酮低、中、高剂量组均与空白组一致。见图 1
图 1 鸦葱总黄酮对 CCl4 及卡介苗 +脂多糖诱导急性化学性肝损伤小鼠肝脏组织结构的影响(HE染色,× 200)
Fig. 1 The morphological changes of CCl4 -and BCG + LPS - induced acute chemical hepatic injury (HE staining,× 200)
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基础研究 中国生化药物杂志 2015 年第 5 期 总第 35 卷
2. 3 鸦葱总黄酮对四氯化碳诱导的体外大鼠肝细胞损伤
的保护作用 与空白组相比,模型组 AST、ALT、LDH、MDA、NO
活性均显著升高(P < 0. 01),SOD 活性均显著降低(P < 0. 01) ;
与模型组相比,阳性药组 AST、ALT、LDH、MDA、NO活性均显著
降低(P < 0. 05,P < 0. 01),SOD活性均显著升高(P < 0. 01) ,表
明模型复制成功。与模型组相比,鸦葱总黄酮低、中、高剂量组
AST、ALT、LDH、MDA、NO 活 性 均 显 著 降 低 (P < 0. 05,
P < 0. 01),SOD活性均显著升高(P < 0. 05,P < 0. 01),说明鸦
葱总黄酮对四氯化碳诱导的体外大鼠肝细胞损伤有保护作用。
见表 2。
表 2 鸦葱总黄酮对 CCl4诱导大鼠肝细胞中 AST、ALT、LDH、MDA、NO、SOD的影响 (n = 8,x ± s)
Tab. 2 Effect of total flavonoids in Scorzonera austriaca Wild on ALT,AST,LDH,MDA,NO,SOD in CCl4 -induced rat hepatocyte injury (n = 8,x ± s)
组别 AST(U /L) ALT(U /L) LDH(U /L) MDA(nmol /mg·prot) NO(μmol /L) SOD(U /mL)
空白组 63. 0 ± 13. 4 12. 6 ± 11. 6 503. 2 ± 58. 9 23. 9 ± 14. 8 9. 6 ± 1. 6 87. 8 ± 28. 2
模型组 142. 9 ± 29. 4* 101. 5 ± 60. 0* 830. 6 ± 21. 3* 88. 8 ± 59. 4* 26. 9 ± 5. 8* 28. 1 ± 16. 3*
阳性药组 99. 8 ± 31. 7# 56. 5 ± 29. 8# 801. 9 ± 15. 6# 24. 8 ± 12. 3## 15. 1 ± 4. 1## 63. 9 ± 27. 5##
鸦葱总黄酮低剂量组 106. 2 ± 15. 0# 54. 4 ± 4. 3# 803. 5 ± 22. 3# 41. 1 ± 34. 9# 18. 5 ± 3. 1# 30. 5 ± 12. 9#
鸦葱总黄酮中剂量组 96. 1 ± 24. 0# 52. 5 ± 11. 2## 755. 7 ± 25. 8## 33. 6 ± 23. 3## 15. 9 ± 3. 9## 54. 9 ± 26. 2##
鸦葱总黄酮高剂量组 92. 7 ± 26. 9# 34. 4 ± 5. 6## 694. 3 ± 14. 4## 28. 3 ± 9. 5## 14. 9 ± 3. 6## 82. 3 ± 8. 7##
* P < 0. 01,与空白组比较,compared with control group;#P < 0. 05,##P < 0. 01,与模型组比较,compared with model group
3 讨论
本研究通过 CCl4诱导小鼠化学性急性肝损伤、卡介苗 +脂
多糖诱导小鼠免疫性肝损伤等体内模型和大鼠肝细胞损伤体外
模型,考察鸦葱总黄酮对肝脏的保护作用。在体内实验中,鸦葱
总黄酮低、中、高剂量组小鼠血清中 AST、ALT、LDH 活力明显低
于模型组(P < 0. 05,P < 0. 01),说明鸦葱总黄酮对四氯化碳造成
的 ICR小鼠化学性急性肝损伤和卡介苗 +脂多糖诱导小鼠免疫
性肝损伤均有良好的保护作用。在 CCl4诱导小鼠化学性急性肝
损伤模型中,HE肝脏病理切片显示鸦葱总黄酮组的肝损伤明显
轻于模型组,表明鸦葱总黄酮对小鼠化学性急性肝损伤具有良
好的保护作用;而在介苗 +脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型
中,HE肝脏病理切片显示鸦葱总黄酮组的肝肝已经恢复到同空
白对照一样的状态,表明鸦葱总黄酮对小鼠免疫性肝损伤有显
著的保护作用。本实验成功提取并培养了大鼠原代肝细胞,实
验结果表明鸦葱总黄酮能显著降低 CCl4损伤的肝细胞细胞培养
液中 AST、ALT、LDH、NO、MDA 的含量(P < 0. 05,P < 0. 01),抑
制培养液中 SOD活力的降低(P < 0. 05,P < 0. 01)说明鸦葱总黄
酮对 CCl4诱导的体外大鼠肝细胞损伤有显著的保护作用。
肝损伤多数是由于外界或体内的有毒物质聚集于肝脏,对
肝脏的功能造成一定的损伤,严重的情况下会导致肝纤维化甚
至肝癌的发生。肝损伤可分为化学性损伤机制和免疫性损伤机
制 2 大类。化学性损伤主要由外来的一些有毒物质或者药物导
致机体内的自由基过多,进而造成脂质过氧化,损伤细胞膜结
构;免疫反应在肝损伤发病机制中起着十分重要的作用特别是
乙肝病毒导致的肝功损害和自身免疫性肝细胞损伤[18]。本实
验采用 CCl4诱导小鼠化学性急性肝损伤模型和体外大鼠肝细胞
损伤模型,初步证明了鸦葱总黄酮对肝脏化学性损伤的保护作
用。卡介苗 +脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型与人类慢性肝
炎的病理过程相似,以肉芽肿性炎症侵润、弥漫性肝细胞炎性反
应甚至坏死为病理特征,是一种典型的免疫性肝损伤,与人类免
疫紊乱导致的肝损伤相似,同时在一定程度上还可以反映乙肝
病毒 HBV导致的肝细胞损伤机制[19-21]。实验结果表明鸦葱总
黄酮对免疫性肝损伤有显著的改善作用。本实验从化学性肝损
伤和免疫性肝损伤 2 方面初步证明了鸦葱总黄酮保肝作用,在
研制治疗肝炎的新药方面具有重要意义。
参考文献
[1] 国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草[M].第一版 . 上
海:上海科学技术出版社,1999:4,939.
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菌效果,提高其抗菌谱,本研究以硒元素作为添加剂,研究了富
硒化处理博落回的抑菌效果。研究结果表明:与青霉素钠比对,
富硒化处理的博落回生物碱对大肠杆菌、鼠伤寒杆菌、猪霍乱杆
菌等 9 种细菌的抑菌效果得到显著增强,且其抑菌效果在一定
范围内与亚硒酸钠浓度成正相关,亚硒酸钠浓度为 100 mg /mL
时其平均抑菌圈(Φ15. 33 mm)最小;富硒化博落回生物碱的最
低抑菌浓度均都有大幅的降低,尤其是大肠杆菌的最低抑菌浓
度,从原来 0. 96 mg /mL降低至 0. 24 mg /mL;降幅显著。综上所
述,富硒化有利于改善博落回的抑菌效果,为今后富硒博落回的
开发利用,奠定了理论基础。
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