全 文 ：作者简介:晁真真 ,女 ,正攻读药物分析专业的硕士学位。
＊通讯作者(Correspondent),Tel:028-85501454)
HPLC测定川芎药材中藁本内酯的含量
晁真真 ,晁若冰＊
(四川大学华西药学院 , 四川 成都 610041)
摘要:目的　采用HPLC 法测定川芎药材中藁本内酯的含量。方法　用 Luna 5μSilica(2)色谱柱(150 mm×4.6 mm);流动相为
正己烷-乙酸乙酯-氯仿(92∶3∶5);流速 0.8 ml·min-1;检测波长320 nm。结果　在 0.1～ 2.0μg范围内 ,峰面积与进样量的线
性回归方程为:A =-47.24+2722X(r =1.0000);平均回收率为 100.7%。测得 3 批川芎药材中藁本内酯的含量分别为
1.55%、1.33%和 1.70%。结论　所建方法简便 、准确 、重复性好 ,可用于川芎药材中藁本内酯的含量测定。
关键词:藁本内酯;川芎药材;高效液相色谱法;含量测定
中图分类号:R927.2 文献标识码:A 文章编号:1006-0103(2004)03-0197-02
Determination of ligustilide in Ligusticum chuanxiong Hort.by HPLC
CHAO Zhen-zhen1 ,CHAO Ruo-bing＊
(West China School of Pharmacy , Sichuan University , Chengdu , 610041 , China)
Abstract:OBJECTIVE　To establish an HPLC method to determine ligustilide from Ligusticum chuanxiong Hort.METHODS　The column
were Luna 5μsilica(2)(150 mm×4.6 mm ID);the mobile phase consisted of n-hexane-ethyl acetate-chloroform(92∶3∶5);the flow rate
was 0.8 ml·min-1 and the UV detector was set at 320 nm.RESULTS　The method displayed good linearity within the concentration ranges of
0.1-2.0μg(r=1.0000).The average recovery were 100.7%.The contents of three lots of crude drugs were 1.55%, 1.33% and 1.70%,
respectively.CONCLUSION　This method is simple , accurate , replicate and suitable for the determination of ligustilide in Ligusticum chuanx-
iong Hort.
Key words:Ligustilide;Ligusticum chuanxiong Hort.;HPLC;Assay
CLC number:R927.2 Document code:A Article ID:1006-0103(2004)03-0197-02
　　川芎为伞形科植物川芎 Ligusticum chuanxiong
Hort.的干燥根茎 ,具有活血化淤 、祛风止痛的功效 。
川芎中的内酯类成分有藁本内酯 、丁基酞内酯 ,丁烯
基酞内酯 、川芎酞内酯和新蛇床内酯等。其中以藁
本内酯具有抗胆碱作用 ,可松驰平滑肌[ 1] 。有文献
报道采用 GC -MS 分离及鉴定川芎中的藁本内
酯[ 2] 。现采用吸附HPLC法测定川芎药材中藁本内
酯的含量 ,方法简便 、准确 、重复性好 ,可作为川芎药
材质量控制的方法。
1　实验部分
1.1　仪器 、试药和样品
　　LC-10AT 高效液相色谱仪 , SPD -M10A vp 光
二极管阵列检测器 ,Class-VP 色谱工作站(日本岛
津)。正己烷 、乙酸乙酯 、氯仿 、甲醇均为分析纯;藁
本内酯对照品(成都市永泽药物研究开发有限责任
公司);川芎药材(成都永泽药物研究开发有限责任
公司 ,产于四川省都江堰市)经鉴定 。
1.2　色谱条件和系统适用性试验
1.2.1　色谱条件的选择　Luna 5 μsilica(2)色谱柱
(150 mm×4.6 mm);预柱为 Phenomenex silica guard
cartridge system(4.0 mm×3.0 mm);流动相为正己烷
-乙酸乙酯-氯仿(92∶3∶5);流速 0.8 ml·min-1;检
测波长 320 nm;柱温 25℃。在以上条件下 ,从色谱
图上可以看出 ,藁本内酯和样品中的其他组分可以
完全分离。
1.2.2　色谱系统适用性试验　按藁本内酯峰计算 ,
色谱系统的板数为 9.0×103;藁本内酯与其前和后
的相邻色谱峰分离度分别为 2.9 、6.8 ,藁本内酯与相
邻的色谱峰可以完全分离。藁本内酯峰的拖尾因子
为 1.2 ,峰形基本对称 。
1.3　溶液的制备
　　取藁本内酯对照品适量 ,加甲醇溶解并定量稀
释制成约 0.05 mg·ml-1的溶液 ,即得对照品溶液。
取川芎药材粉末(过 3号筛)约 0.2 g ,精密称定 ,分
别精密加入氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇 50 ml ,放置 1 h
后 ,超声振荡提取 20 min ,放冷 ,滤过;精密量取续滤
华西药学杂志
W C J · P S 　2004 , 19(3):197～ 198　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
DOI :10.13375/j.cnki.wcjps.2004.03.016
液5 ml ,置 25 ml量瓶中 ,加甲醇稀释定容 ,摇匀 ,作
为供试品溶液。在“1.2.1”项下条件下 ,分别取对照
品和供试品溶液 10 μl进样 ,记录色谱图 ,用峰面积
按外标法计算含量 ,用氯仿 、乙酸乙酯 、甲醇提取测得
的含量分别为1.63%、1.52%和 1.66%。甲醇的提取率
最高 ,故选其作溶剂。
分别取对照品和用甲醇制备的供试品溶液 10
μl进样 ,记录色谱图 ,用峰面积按外标法计算含量 ,
放置 1 h和 1 d 测得的含量均为 1.66%。所以将放
置时间定为1 h。
照以上方法考察提取时间。超声振荡提取 10 、
20 、30 min 测得的含量分别为 1.67%、1.66%、1.67%,
无明显差异 ,故将超振荡提取的时间定为10 min。
1.4　方法的考察
1.4.1　线性关系　精取藁本内酯对照品适量 ,加甲
醇溶解并稀释成约 0.2 mg·ml-1的对照品溶液(1)和
约0.02 mg·ml-1的对照品溶液(2)。分别取溶液(1)
2 、4 、6 、8 、10μl和溶液(2)5 、10μl进样 ,记录色谱图 ,
测定峰面积值 ,以峰面积 A对进样量X(μg)回归 ,回
归方程为:A =2.72 ×103X -47.24+2722X(r =
0.9999)。结果:进样量在 0.1 ～ 2.0 μg 范围内 ,藁本
内酯的峰面积与进样量有良好的线性关系。
1.4.2　精密度与重复性实验　精密称取藁本内酯
对照品适量 ,加甲醇溶解并定量成约0.1 mg·ml-1的
溶液 。分别于同一日内 0 、2 、4 、6 、8 h 取 10μl进样 ,
结果平均峰面积为 2.417×106 , RSD =0.8%。在
“1.2.1”项条件下分别于第 0 、1 、2 、3天取 10 μl以上
溶液进样(进样后样品置冰箱内保存),记录色谱图 ,
测定峰面积值 ,平均峰面积为 2.416×106 , RSD =
0.8%。说明溶液在 3 d内稳定 。
1.4.3　加样回收率试验　精密称取藁本内酯对照
品适量 ,加甲醇溶解并定量成 0.0924 mg·ml-1的对
照品贮备溶液;精密称取川芎药材粉末约 0.1 g ,置
50 ml量瓶中 ,分别精密加入对照品贮备液 10 、20 、30
ml ,加甲醇至约 40 ml ,放置 1 h后 ,超声振荡提取 10
min ,放冷 ,加甲醇稀至刻度得试验溶液 ,摇匀 ,滤过 ,
取续滤液备用 。在“1.2.1”项条件下 ,分别取对照品
和试验溶液 10μl进样 ,记录色谱图 ,用峰面积按外
标法计算含量 ,并计算回收率 ,结果见表 1。
表 1　回收试验的测定结果(mg·ml-1 , n=9)
Table 1　Results of revovery test(mg)(mg·ml -1 , n=9)
Added Contents Detected Recovery/ % X/ % RSD/ %
0.924 1.542 0.9551 103.37
0.924 1.542 0.9276 100.39
0.924 1.542 0.9176 99.31
1.848 1.573 1.855 100.38
1.848 1.573 1.866 100.97 100.70 1.10
1.848 1.573 1.845 99.84
2.772 1.569 2.793 100.76
2.772 1.569 2.773 100.04
2.772 1.569 2.795 100.83
1.4　样品的测定
　　取藁本内酯对照品适量 ,精密称定 ,加甲醇溶解
并制成约 0.05 mg·ml-1的对照品溶液。照“1.3.2”
项下方法 ,测得 3批川芎药材中藁本内酯的含量分
别为1.55%、1.33%、1.70%。
2　讨论
　　文中测定了市售当归 、藁本 、蛇床子中的藁本内
酯的含量 ,其中藁本 、蛇床子中未检出藁本内酯 ,用
HPLC 测定当归中的藁本内酯 ,分离良好。测得 1批
市售当归中藁本内酯的含量为 1.32%,所以此法可
同时用于当归中藁本内酯的含量测定 。
参考文献:
[ 1] 　 王普善 ,高宣亮 ,福山爱保.中药川芎的化学成分研究—五种
内酯类化合物[ J] .中草药 , 1985 , 16(8):41
[ 2] 　 李章万 ,张强.中药川芎中内酯类化合物的 GC—MS 分离及
鉴定[ J] .药物分析杂志 , 1993 , 13(3):187
[ 3] 　国家医药管理局中草药情报中心站.植物药有效成分手册
[ M] .北京:人民卫生出版社 , 1986.666
收稿日期:2003-12
作者简介:马成(1976-),男 ,正攻读硕士学位。
HPLC测定新疆大花罗布麻叶中罗布麻甲素的含量
马　成1 ,尹宛新2 ,张　 1 ,堵年生1
(1.新疆医科大学药学院 ,新疆 乌鲁木齐 830054;2.新疆维吾尔自治区第一济困医院 , 新疆 乌鲁木齐 830017)
摘要:目的　采用 HPLC 法测定新疆大花罗布麻叶中罗布麻甲素的含量。方法　SupelcosilTMLC18色谱柱(4.6 mm×250 mm , 5
μm);流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液(40∶60);流速 1 ml·min-1;柱温 35℃;检测波长 358 nm。结果　罗布麻甲素和其他组分
可达基线分离 ,线性范围 0.021～ 0.126μg(r=0.9995),平均回收率为 96.4 %,方法精密度的 RSD=2.8%(n =6)。结论　所
用方法操作简便快速 、准确灵敏 , 分离效果好。
关键词:大花罗布麻;罗布麻甲素;高效液相色谱法
华西药学杂志
W C J · P S 　2004 , 19(3):198～ 199