全 文 ：基金项目:国家海洋局 908专项(908-01-ST12);浙江省自然科学基金(Y2080579);浙江海洋学院重大项目(21135030107)
作者简介:王斌 ,男 ,博士 ,讲师 研究方向:海洋药物 Tel:(0580)2555005 E-mail:binwang4159@hotmail.com
·论 著·
蒙古鸦葱抗肿瘤三萜类成分研究
王斌 1 ,杨立业 1 ,李国强 2 ,管华诗 2 ,童国忠 1(1.浙江海洋学院食品与药学学院, 浙江 舟山 316004;2.中国海洋大学医药学院 ,山
东 青岛 266003)
摘要:目的 系统研究蒙古鸦葱的抗肿瘤活性成分。方法 使用硅胶 H、SephadexLH-20、ODS和 HPLC分离 、纯化 , 根据理
化性质和光谱分析鉴定化合物的结构。采用 MTT法和 SRB法进行活性跟踪和单体化合物的抗肿瘤活性筛选。结果 分离
鉴定了 15个三萜类化合物 ,分别为羽扇豆醇(1)、白桦脂醇(2)、白桦脂酸(3)、乙酰羽扇豆醇(4)、23Z-3β-acetoxyeupha-7, 23-
diene-25-ol(5)、达玛二烯醇乙酸酯 (6)、齐墩果烷乙酸酯(7)、蒲公英甾醇(8)、蒲公英甾醇乙酸酯(9)、伪蒲公英甾醇(10)、伪
蒲公英甾醇乙酸酯(11)、α-乙酰香树脂醇(12)、达玛-24-烯-3β-十四酰氧基-20S-醇(13)、大戟烷-8, 24-二烯-3-醇乙酸酯(14)和
multiflorenylacetate(15)。结论 1～ 15均为首次从蒙古鸦葱中分离得到 ,其中 2, 3, 5 ～ 15为首次从该属中分离得到。药理实
验表明 ,在 50mg· L-1质量浓度下 , 化合物 1 ～ 5对人肺癌细胞 A-549、14对人肝癌细胞株 Bel-7402显示有意义的细胞毒活性。
关键词:蒙古鸦葱;化学成分;抗肿瘤活性
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1001-2494(2010)10-0727-06
AntitumorTriterpenesfromScorzoneramongolicaMaxim.
WANGBin1 , YANGLi-ye1 , LIGuo-qiang2 , GUANHua-shi2 , TONGGuo-zhong1(1.SchoolofFoodandPharmacy,
ZhejiangOceanUniversity, Zhoushan316000, China;2.SchoolofMedicineandPharmacy, OceanUniversityofChina, Qingdao
266003, China)
ABSTRACT:OBJECTIVE Tostudytheanti-tumoractiveconstituentsofScorzoneramongolicaMaxim..METHODS Thechemi-
calcomponentswereisolatedbysilicagelH, SephadexLH-20columnchromatographyandsemi-preparativeHPLC.Structureswere
elucidatedonthebasisofphysicochemicalproperitiesandspectraldata.Theanti-tumorexperimentinvitro, theMTTandSRBmethods
wereusedtoscreenconstituentsofS.mongolicaMaxim..RESULTS 15Triterpeneswereisolatedandidentifiedaslupeol(1), bet-
ulin(2), betulinicacid(3), lupeoacetate(4), 23Z-3β-acetoxyeupha-7, 23-diene-25-ol(5), dammaradienylacetate(6), pul-
cherrylacetate(7), taraxasterol(8), taraxasterylacetate(9), ψ-taraxasterol(10), ψ-taraxasterylacetate(11), α-amyrinacetate
(12), dammar-24-ene-3, 20-diol, 3β-tetradecanoate(13), butyrospermylacetate(14)andmultiflorenylacetate(15), respectively.
CONCLUSION Compound1-15 wereobtainedfromtheplantforthefirsttimeandcompound2, 3, 5-15 wereobtainedfromthe
genusScorzoneraforthefirsttime.Compound1-5 demonstratedsignificantinhibitoryefectsonA-549cancercelsandcompound14
showedalsostrongcytotoxityagainstBel-7402 cancercellsattheconcentrationof50 mg· L-1.
KEYWORDS:Scorzoneramongolicamaxim.;chemicalconstituents;anti-tumoractivity
蒙古鸦葱 [ ScorzoneramongolicaMaxim.]又名羊
角菜 、羊犄角 ,味微苦涩 ,微苦 ,寒。具清热解毒 ,消
肿散结之功效。主治疗疮痛瘟 ,乳痛 ,跌打损伤 ,劳
伤 。 《南京民间药草 》记载其 “治五痨七伤 ”。可敷
治疗疮及妇女乳房肿胀 。 《内蒙古中草药 》记载其
能清热解毒 ,治疗毒恶疮 ,近有试用于治疗胃癌 ,甲
状腺癌 。近年来 ,已从鸦葱属植物中分离得到了倍
半萜 、三萜 、甾醇等活性先导化合物 [ 1-6] ,但未见蒙古
鸦葱化学成分的研究。为了寻找抗肿瘤活性成分 ,
笔者以采自黄河三角洲国家级自然保护区的蒙古鸦
葱为材料 ,采用细胞毒活性跟踪方法 ,对其化学成分
进行系统的研究 ,曾从甲醇粗提物中分离鉴定了 2
个三萜脂肪酸酯类成分 [ 7] ,现又分离得到了 15个三
萜类成分 ,均为首次从蒙古鸦葱中分离得到。体外
抗肿瘤活性实验表明 ,部分化合物显示较强的细胞
毒活性。
·727·中国药学杂志 2010年 5月第 45卷第 10期 ChinPharmJ, 2010May, Vol.45No.10
1 仪器 、试剂与材料
核磁共振谱用日本 JEOLJNM-ECP600型核磁
共振仪测定;SephadexLH-20和色谱用硅胶 H分
别为 Pharmacia公司和青岛海洋化工厂产品 。肿瘤
细胞株 P-388(人白血病细胞株)、A-549(人肺腺癌
细胞株)和 Bel-7402(肝癌细胞株)为中国海洋大学
医药学院药理室所有。 Dulbecco sModifiedEagle
Medium(Gibco公司)。 SRB(SulforhordamineB,黄
基罗丹明 B, Sigma公司)。蒙古鸦葱原植物于 2005
年 5月采于山东省东营市黄河三角洲国家级自然保
护区大汶流管理站 ,种属由山东中医药大学周凤琴
教授鉴定 ,标本存放于中国海洋大学医药学院 。
2 提取分离
样品采集后晒干 ,粉碎称重(1.2 kg),工业甲醇
室温冷浸提取 3次(7 , 3, 3 d),提取液合并 ,真空浓
缩得总浸膏 110 g。甲醇溶解脱盐 , 得粗提物浸膏
100g。将粗提物浸膏 90 g以 100 ～ 200目硅胶拌
样 , 200 ～ 300目硅胶装柱(湿法装柱 ,干法上样),石
油醚-丙酮 20∶1、10∶1、5∶1、2∶1、1∶1、1∶2、丙酮梯度
洗脱 ,茴香醛显色 ,薄层检识 ,分为 5段 Fr.1 ～ 5。
Fr.1经 200 ～ 300目硅胶柱色谱 ,石油醚-丙酮梯度
洗脱 ,分为 A～ E5个极性段 ,其中 A～ C用 TLC检
查呈长链烷烃和长链脂肪酸特征。 D部分 Sephadex
LH-20柱色谱除杂 、半制备高效液相色谱纯化 ,得
化合物 4 (4.6 mg)和 6 (5.4 mg)。 Fr.2经 200 ～
300目硅胶柱色谱 ,石油醚 -丙酮梯度洗脱 ,分为 A～
D4个极性段 , C部分经石油醚 -丙酮反复柱色谱 、
SephadexLH-20柱色谱除杂 、半制备高效液相色
谱纯化 ,得化合物 9 (5.7 mg)、11 (7.9 mg)和 13
(8.3mg)。 D部分经石油醚 -丙酮 (15∶1),经硅胶
柱色谱分离重结晶和半制备高效液相色谱纯化 ,得
到化合物 3 (5.7 mg)、12 (7.9 mg)、14 (8.3 mg)
和 15(4.5mg)。Frac.3经石油醚-丙酮(15∶1)硅
胶 H反复色谱得到 A～ C3个极性段 , B段经反复
硅胶柱色谱 、SephadexLH-20柱色谱 、半制备高效
液相色谱纯化 , 得化合物 1 (29.7 mg)、 2 (42.9
mg)、5 (6.5 mg)、7(8.2 mg)、15(11.5mg)。C段
经反复硅胶柱色谱 、SephadexLH-20柱色谱 、半制
备高效液相色谱纯化 ,得化合物 8 (7.7 mg)和 10
(4.2mg)。
3 结构鉴定
化合物 1:白色针晶(氯仿 -丙酮), mp213 ～ 215
℃, [ α] +26.6 (c0.5, CHC13)。茴香醛-浓硫酸
显色呈红色 , Liebermann-Burchard反应呈阳性 。 EI-
MSm/z426 [ M] +。1 H-NMR(600 MHz, CDCl3 )δ:
4.69 (1H, m, H-29), 4.57 (1H, m, H-29), 3.17
(1H, dd, J=10.8、5.2 Hz, H-3), 2.39(1H, m, H-
19), 1.68 (3H, s, CH3 -30), 1.03 (3H, s, CH3 -26),
0.97 (3H, s, CH3 -23), 0.95 (3H, s, CH3-27), 0.83
(3H, s, CH3-25), 0.79(3H, s, CH3-28), 0.73 (3H,
s, CH3-24)。13C-NMR(150 MHz, CDCl3)δ:38.7 (C-
1), 27.5(C-2), 79.0(C-3), 38.9 (C-4), 55.3 (C-
5), 18.3(C-6), 34.3(C-7), 40.9 (C-8), 50.5 (C-
9), 37.3 (C-10), 21.0 (C-11), 25.2 (C-12), 38.0
(C-13), 42.9 (C-14), 27.5 (C-15), 35.6 (C-16),
43.0 (C-17), 48.0(C-18), 48.3(C-19), 150.9(C-
20), 29.9 (C-21), 40.0 (C-22), 28.2 (C-23), 15.3
(C-24), 16.1 (C-25), 16.0 (C-26), 14.6 (C-27),
18.0 (C-28), 109.3 (C-29), 19.3 (C-30)。以上数
据与文献 [ 8]报告的羽扇豆醇(lupeol)一致 。
化合物 2:白色晶体(甲醇), mp260 ～ 261 ℃;
茴香醛-浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Burchard反
应呈阳性。 EI-MSm/z(%)442 [ M] +。1 H-NMR
(600 MHz, CDC13)δ:0.76 (3H, s, CH3 -23), 0.82
(3H, s, CH3-24), 0.96 (3H, s, CH3 -25), 0.98 (3H,
s, CH3 -26), 1.02 (3H, s, CH3 -27), 1.68 (3H, s,
CH3 -30), 3.82 (1H, d, J=10.7 Hz, H-28), 3.41
(1H, d, J=10.7 Hz, H-28), 3.35 (1H, d, J=10.8
Hz, H-3), 4.60 (1H, brs, H-29), 4.70 (1H, brs, H-
29)。13 C-NMR(150 MHz, CDCl3 )δ:38.7 (C-1),
27.4 (C-2), 79.0 (C-3), 38.8 (C-4), 55.3 (C-5),
18.3 (C-6), 34.2 (C-7), 40.9 (C-8), 50.4(C-9),
37.1 (C-10), 20.8 (C-11), 25.2 (C-12), 37.3 (C-
13), 42.7 (C-14), 27.0 (C-15), 29.2 (C-16), 47.8
(C-17), 47.8 (C-18), 48.7(C-19), 150.4 (C-20),
29.7 (C-21), 33.9 (C-22), 28.0 (C-23), 15.3 (C-
24), 16.0 (C-25), 16.1 (C-26), 14.7 (C-27), 60.5
(C-28), 109.7 (C-29), 19.1(C-30)。以上数据与
文献 [ 8]报告的为白桦脂醇(betulin)一致 。
化合物 3:无色针状结晶(丙酮), mp290 ～ 292
℃;茴香醛 -浓硫酸显色呈红色 , Liberman-Burchard
反应呈阳性 。EI-MSm/z456 [ M] +。1H-NMR(600
MHz, DMSO-d6)δ:0.65 (3H, s, CH3-23), 0.76 (3H,
s, CH3 -24), 0.85 (3H, s, CH3 -25), 0.87 (3H, s,
CH3 -26), 0.92 (3H, s, CH3 -27), 1.64 (3H, s, CH3 -
30), 4.57 , 4.69 (2H, m, 29-H), 12.1 (1H, brs, -
·728· ChinPharmJ, 2010May, Vol.45No.10 中国药学杂志 2010年 5月第 45卷第 10期
COOH), 3.28 (1H, d, J=10.8 Hz, H-3)。13 C-NMR
(150MHz, DMSO-d6)δ:38.3 (C-1), 27.2 (C-2),
79.8(C-3), 38.5(C-4), 55.4 (C-5), 18.0 (C-6),
33.9 (C-7), 40.3 (C-8), 49.9 (C-9), 37.6 (C-
10), 20.5 (C-11), 25.1(C-12), 37.6(C-13), 42.0
(C-14), 30.1 (C-15), 31.7 (C-16), 55.8(C-17),
49.6(C-18 ), 48.5 (C-19 ), 150.3 (C-20), 29.2
(C-21), 36.7 (C-22 ), 28.1 (C-23), 15.7 (C-24),
15.8 (C-25), 16.0 (C-26 ), 14.4 (C-27), 177.3
(C-28), 109.7 (C-29), 18.9 (C-30 )。以上数据与
文献[ 8]报告的白桦脂酸(betulinicacid)一致。
化合物 4:无色针晶(甲醇), mp210 ～ 212 ℃,
茴香醛 -浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Burchard反
应阳性。 EI-MSm/z468 [ M] +。1 H-NMR(600
MHz, CDCl3)δ:0.76(3H, s, CH3 -28), 0.85 (3H, s,
CH3-23), 0.86 (6H, s, CH3-26和 25), 0.98 (3H, s,
CH3-24), 1.02 (3H, s, CH3-27), 1.68 (3H, s, CH3-
30), 2.07 (3H, s, CH3CO), 4.69 (1H, m, H-29),
4.57 (1H, m, H-29), 4.51 (1H, dd, J=10.7, 5.9
Hz, H-3)。13C-NMR(150 MHz, CDCl3)δ:38.4 (C-
1), 23.7 (C-2), 81.0 (C-3), 37.8 (C-4), 55.4
(C-5), 18.2 (C-6), 34.3 (C-7), 40.9 (C-8),
50.4 (C-9), 37.1 (C-10), 21.0 (C-11), 25.2
(C-12), 38.1 (C-13), 42.8 (C-14), 27.1 (C-
15), 29.2 (C-16), 47.8 (C-17), 48.8 (C-18),
47.8 (C-19), 150.6 (C-20), 29.8 (C-21), 34.0
(C-22), 28.1 (C-23), 16.5 (C-24), 16.2 (C-
25), 16.0 (C-26 ), 14.5 (C-27), 60.2 (C-28),
109.6 (C-29), 19.1 (C-30), 21.8 (C-30), 21.3
(CH3 CO), 170.8 (CH3 CO)。以上数据与文
献 [ 9]报告的乙酰羽扇豆醇(lupeolacetate)一致 。
化合物 5:无色针晶(甲醇), mp139 ～ 140 ℃,
茴香醛-浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Burchard反
应阳性。1 H-NMR和13 C-NMR(DEPT)数据见表 1。
其数据与文献 [ 10]报告的 23Z-3β-acetoxyeupha-7, 23-
diene-25-ol一致 。
表 1 化合物 51H-NMR(600 MHz)、13C-NMR(150MHz)的数据
Tab.1 1H-NMR(600 MHz)and13C-NMR(150MHz)Spectroscopicdataofcompound5
No. δC δH DEPT HMBC(H※C)
1 36.8 1.21 (m, H-1), 1.60(m, H-1) CH2 C9, C10
2 24.2 1.67(m, H-1) CH C3, C1 , C10
3 81.1 4.52(1H, dd, J=10.9, 3.2Hz) CH
4 38.0 C
5 50.8 1.42(1H, dd, J=12.2, 5.8Hz) CH C19, C29, C6, C10, C4, C9
6 23.8 1.97(1H, m), 2.13(1H, m) CH
7 117.7 5.25(1H, brd, J=3.2Hz) CH C9
8 145.8 C
9 48.8 2.22(1H, m) CH
10 34.8 C
11 18.1 1.52 (2H, m) CH2 C9, C8 , C12
12 33.7 1.80 (1H, m), 1.64 (1H, m) CH2 C14, C13, C18, C11
13 43.6 C
14 51.3 C
15 33.9 1.53 (1H, m), 1.62 (1H, m) CH2
16 28.3 1.92 (1H, m), 1.69 (1H, m) CH2
17 53.1 1.50(1H, m) CH
18 22.2 0.83(3H, s) CH3 C14, C13, C12
19 13.1 0.77 (3H, s) CH3
20 36.2 1.50 (1H, m) CH
21 18.8 0.81(3H, d, J=5.8Hz) CH3 C17, C20
22 37.8 2.35(1H, m), 1.64(1H, m) CH2 C23, C24, C21, C20
23 126.1 5.58(3H, dd, J=8.0 , 4.5 Hz) CH2 C25, C22
24 139.1 5.57(1H, d, J=8.0Hz) CH
25 70.8 C
26 29.9 1.31(3H, s) CH3
27 29.9 1.31(3H, s) CH3 C24, C25, C26
28 27.6 0.85(3H, s) CH3 C29, C4, C5 , C3
29 15.8 0.93(3H, s) CH3 C4, C28, C5 , C3
30 27.3 0.98(3H, s) CH3 C8, C14, C13 , C15
1′ 21.3 2.05(3H, s) CH3
2′ 171.0 C
·729·中国药学杂志 2010年 5月第 45卷第 10期 ChinPharmJ, 2010May, Vol.45No.10
化合物 6:无色针晶(氯仿 -甲醇), mp266 ～ 268
℃。茴香醛 -浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Burchard
反应阳性。1H-NMR(600MHz, CDCl3)δ:0.84 (6H,
s, H-28, 29), 0.87 (3H, s, CH3), 0.98 (3H, s,
CH3), 1.04 (3H, s, CH3), 1.73, 1.63(3H, s, H-27 ,
26), 2.05 (3H, s, CH3CO), 4.48 (1H, dd, J=13.5
Hz, 3-H), 5.14(1H, m, H-24), 4.71(1H, d, J=0.5
Hz, H-21a), 4.75(1H, d, J=0.5 Hz, H-21b), 4.69
(1H, d, J=0.5 Hz, H-25a), 4.72 (1H, d, J=0.5
Hz, H-25b)。13 C-NMR(150 MHz, CDCl3 )δ:38.8
(C-1), 27.3 (C-2), 80.9 (C-3), 37.7 (C-4), 55.9
(C-5), 18.3(C-6), 35.3 (C-7), 40.5 (C-8), 50.8
(C-9), 37.1 (C-10), 21.3 (C-11), 27.7 (C-12),
47.8(C-13), 49.4 (C-14), 31.3 (C-15), 29.1 (C-
16), 48.3 (C-17), 15.6 (C-18 ), 16.3 (C-19 ),
153.0 (C-20), 106.2 (C-21), 39.1 (C-22), 27.0
(C-23), 124.5 (C-24), 131.4 (C-25), 28.7 (C-
26), 17.1 (C-27), 28.0 (C-28), 15.6 (C-29), 15.9
(C-30), 21.3 (CH3 CO), 171.0 (CH3 CO), 107.4
(C-24)。以上数据与文献 [ 11]报告的达玛二烯醇乙
酸酯(dammaradienylacetate)一致。
化合物 7:无色针晶(氯仿 -甲醇), mp224 ～ 227
℃。茴香醛 -浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Burchard
反应阳性。 EI-MSm/z468 [ M] +。1 H-NMR(600
MHz, CDCl3)δ:0.83 (3H, s, CH3 -26), 0.86(3H, s,
CH3-23), 0.87(3H, s, CH3-24), 0.88(3H, s, CH3-
29), 0.97(3H, s, CH3 -30), 0.97(3H, s, CH3 -25),
1.13(3H, s, CH3-27), 2.05(3H, CH3CO), 4.50(1H,
t, J=8.0 Hz, H-3), 5.18(1H, t, J=3.3Hz, H-12)。13
C-NMR(150 MHz, CDCl3)δ:38.2(C-1), 23.7(C-
2), 80.9(C-3), 37.7(C-4), 55.2(C-5), 18.3(C-6),
32.6(C-7), 39.8(C-8), 47.5(C-9), 36.8(C-
10), 23.5(C-11), 121.6(C-12), 145.2(C-13), 41.7
(C-14), 28.0(C-15), 26.1(C-16), 32.0(C-17),
47.2(C-18 ), 46.8(C-19 ), 31.1(C-20 ), 34.7(C-
21), 37.1(C-22), 28.0(C-23), 16.8(C-24), 15.6
(C-25), 16.7(C-26 ), 25.9(C-27 ), 26.9(C-28),
33.3(C-29), 23.6(C-30), 171.1(CH3 CO), 21.3
(CH3CO)。以上数据与文献 [ 12]报告的齐墩果烷乙
酸酯(pulcherylacetate)一致 。
化合物 8:无色粉末 ,茴香醛-浓硫酸显色呈红
色;mp190 ～ 193 ℃。 Libermann-Burchard反应阳
性 。 EI-MSm/z426 [ M] +。1H-NMR(600 MHz,
CDCl3)δ:0.77(3H, s, CH3 -24), 0.85(3H, s, CH3-
25), 0.85(3H, s, CH3 -28), 0.93(3H, s, CH3-27),
0.97(3H, s, CH3 -23), 1.02(3H, s, CH3-26), 1.02
(3H, s, CH3-29), 3.20(1H, dd, J=2.4, 10.2 Hz, H-
3)。13C-NMR(150MHz, CDCl3)见表 2。以上数据与
文献 [ 13]报告的蒲公英甾醇(taraxasterol)一致 。
化合物 9:白色粒状结晶 (乙酸乙酯 ), mp
213 ～ 215 ℃。易溶于氯仿 。茴香醛 -浓硫酸显色呈
紫色 。 EI-MSm/z468 [ M] +。 H-NMR(600 MHz,
CDCl3)δ:1.03(6H, s, CH3 -26, 29), 0.93(3H, s,
CH3 -27), 0.88(6H, s, CH3 -25), 0.85(6H, s, CH3 -
23, 24), 0.84 (3H, s, CH3 -28), 2.05 (3H, m,
CH3CO), 4.48(1H, m, H-3)。13 C-NMR(150 MHz,
CDCl3)见表 2。以上数据与文献 [ 13]报告的蒲公英
甾醇乙酸酯(taraxasterylacetate)一致 。
化合物 10:白色粒状结晶 (乙酸乙酯 ), mp
199 ～ 201 ℃,易溶于氯仿 ,乙酸乙酯。茴香醛-浓硫
酸显色呈红色 , Libermann-Burchard反应阳性 。 EI-
MSm/z426 [ M] +。1 H-NMR(600 MHz, CDCl3 )δ:
0.73(3H, s, CH3-28 ), 0.78(3H, s, CH3 -24), 0.86
表 2 化合物 8 ～ 11的 13C-NMR(150 MHz)数据
Tab.2 13C-NMR(150 MHz)forcompound8-11
No δC(8) δC(9) δC(10) δC(11)
1 38.7 38.4 38.7 38.4
2 28.0 25.4 27.6 23.7
3 79.0 81.0 79.0 81.0
4 38.8 37.9 38.8 37.8
5 55.3 55.4 55.3 55.4
6 18.3 18.2 18.3 18.2
7 34.5 34.4 34.2 34.4
8 40.9 40.9 41.0 41.1
9 50.4 50.4 50.4 50.3
10 37.1 37.0 37.1 37.0
11 21.4 21.5 21.6 21.6
12 25.5 26.1 28.0 27.9
13 39.1 39.1 39.2 39.2
14 42.0 42.0 42.3 42.3
15 27.6 26.6 27.4 27.0
16 38.3 38.3 36.7 36.7
17 34.0 34.5 34.4 34.4
18 48.6 48.6 48.6 48.7
19 39.3 39.4 36.3 36.3
20 154.6 154.7 139.8 139.9
21 26.6 25.6 118.7 118.9
22 40.7 38.8 42.2 42.3
23 27.4 27.9 28.1 27.9
24 15.4 16.3 28.1 16.5
25 16.3 16.5 16.3 16.3
26 15.9 18.2 18.3 16.0
27 14.8 14.7 16.0 14.7
28 19.5 19.5 17.9 17.7
S29 25.6 25.5 22.5 22.5
30 107.1 107.1 21.6 21.6
1 171.1 171.1
2 21.3 21.4
·730· ChinPharmJ, 2010May, Vol.45No.10 中国药学杂志 2010年 5月第 45卷第 10期
(3H, s, CH3 -25), 0.95(3H, s, CH3-27), 0.98(3H, s,
CH3-23), 0.99(3H, d, J=8 Hz, CH3 -29), 1.04
(3H, s, CH3 -26), 1.64(3H, s, CH3 -30), 5.27(1H,
brd, H-21), 3.21(1H, dd, J=5.0, 11.4 Hz, H-3)。13
C-NMR(150 MHz, CDCl3)见表 2。以上数据与文
献 [ 13]报告的伪蒲公英甾醇(ψ-taraxasterol)一致。
化合物 11:白色粒状结晶 (乙酸乙酯), mp
199 ～ 201 ℃, 易溶于氯仿 ,乙酸乙酯 。茴香醛-浓硫
酸显色呈红色 , Libermann-Burchard反应阳性。 EI-
MSm/z468 [ M] +。1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ:
0.73(3H, s, CH3 -28 ), 0.84(3H, s, CH3-23), 0.85
(3H, s, CH3 -24), 0.87(3H, s, CH3 -25), 0.95(3H, s,
CH3-27), 0.99(3H, d, J=8Hz, CH3 -29), 1.04(3H,
s, CH3 -26 ), 1.64(3H, s, CH3-30), 2.05(3H, m,
CH3CO), 5.27(brd, H-21), 4.49(dd, J=6.0, 10.0
Hz, H-3)。13 C-NMR(150 MHz, CDCl3)见表 2。以
上数据与文献 [ 14] 报告的伪蒲公英甾醇乙酸酯(ψ-
taraxasterylacetate)一致。
化合物 12:无色粉末 , mp215 ～ 220 ℃, [ α]
+75.7(c0.3, CHCl3)。茴香醛 -浓硫酸显色呈红
色;Libermann-Burchard反应阳性。 EI-MSm/z468
[ M] +。1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ:2.05(3H, s,
OCCH3), 1.07(3H, s, CH3-28), 1.02(3H, s, CH3-
23), 0.99(3H, s, CH3-27), 0.92(3H, d, J=6.2
Hz, CH3 -29), 0.88(3H, s, CH3-26), 0.87(3H, s,
CH3-24), 0.81(3H, s, CH3 -25), 0.81(3H, d, CH3-
30), 5.13(1H, t, J=3.3 Hz, H-12), 4.53(1H, dd,
J=9.6, 7.8 Hz, H-3)。13 C-NMR(150 MHz, CDCl3 )
δ:38.4(C-1), 23.6(C-2), 80.9(C-3), 37.7(C-4),
55.2(C-5), 18.2(C-6), 32.8(C-7), 40.0(C-8),
47.6(C-9), 36.8(C-10), 23.3(C-11), 124.3(C-12),
139.6(C-13), 42.0(C-14), 28.7(C-15), 26.6(C-16),
33.7(C-17), 59.0(C-18), 39.6(C-19), 39.6(C-20 ),
31.3(C-21), 41.5(C-22), 28.0(C-23), 16.8(C-24),
15.7(C-25), 16.7(C-26), 23.2(C-27), 28.7(C-28),
17.5(C-29), 21.4(C-30), 171.1(CH3 CO), 21.3(CH3
CO)。以上数据与文献[ 15]报告的 α-乙酰香树脂醇
(α-amyrinacetate)一致 。
化合物 13:无色柱状晶体(氯仿), mp129 ～ 131
℃,茴香醛 -浓硫酸显色呈红色;Libermann-Burchard
反应阳性 。 HR-SIMS(M+-H2 O)636.584 5, 1 H-
NMR(600 MHz, CDC13)δ:1.68(3H, s, CH3 -27),
1.64(3H, s, CH3 -26), 1.14(3H, s, CH3 -21), 0.96
(3H, s, CH3), 0.88(6H, s, CH3 ×2), 0.86(3H, s,
CH3), 0.84 (6H, s, CH3 ×2), 5.08 (1H, t,
J=7.0 Hz, 20-H), 4.51(1H, dd, J=7.0, 7.0Hz, H-
3)。13C-NMR(150MHz, CDC13)δ:38.7(C-1), 23.7
(C-2), 80.6(C-3), 37.9(C-4), 56.1(C-5), 18.3(C-
6), 85.3(C-7 ), 40.5(C-8), 50.3(C-9), 37.0(C-
10), 21.5(C-11), 27.5(C-12), 42.3(C-13), 50.5
(C-14), 31.2(C-15), 24.8(C-16), 49.8(C-17),
16.3(C-18), 15.5(C-19), 75.4(C-20), 25.4(C-
21), 40.5(C-22), 22.5(C-23), 124.7(C-24), 131.6
(C-25), 25.8(C-26 ), 17.7(C-27), 28.0(C-28),
16.4(C-29), 16.6(C-30), 173.7(C-1′), 35.1(C-
2′), 25.2(C-3′), 29.2 ～ 29.7(C4′-11′), 31.9(C-
12′), 22.7(C-13′), 14.1(C-14′)。数据与文献[ 16]
报告的达玛 -24-烯-3β-十四酰氧基 -20S-醇 (dammar-
24-ene-3, 20-diol, 3β-tetradecanoate)一致 。
化合物 14:白色针晶(甲醇), mp147 ～ 149 ℃,
[ α] +18 (c0.25, CHC13),茴香醛 -浓硫酸显色呈
红色。 EI-MSm/z468 [ M] +。1 H-NMR(600 MHz,
CDCl3)δ:0.76(3H, s, CH3 ), 0.80(3H, s, CH3 ),
0.84(3H, s, CH3), 0.85(3H, s, CH3), 0.93(3H, s,
CH3), 0.97(3H, s, CH3), 1.60, 1.68(6H, s, CH3 -
25和 CH3 -26), 2.05(3H, s, CH3CO), 4.52(1H, dd,
J=3.5 , 11.5 Hz, H-3), 5.10(1H, t, H-24)和 5.24
(1H, dd, J=3.0, 6.5 Hz, H-7)。 13C-NMR(150
MHz, CDCl3)δ:36.8(C-1), 24.2(C-2), 81.1(C-
3), 38.0(C-4), 50.7(C-5), 23.7(C-6), 111.7(C-
7), 145.9(C-8), 48.7(C-9), 35.1(C-10), 18.1(C-
11), 33.6(C-12), 43.6(C-13), 51.3(C-14), 33.9
(C-15), 28.4(C-16), 53.2(C-17), 13.1(C-18),
22.0(C-19), 35.8(C-20), 18.7(C-21), 35.1(C-
22), 25.3(C-23), 125.1(C-24), 130.9(C-25), 17.7
(C-26 ), 25.8(C-27), 27.6(C-28), 27.3(C-29),
15.8(C-30), 171.0(CHCO3), 21.3(CH3CO)。数据
与文献[ 17] 报告的大戟烷-8, 24-二烯 -3-醇乙酸酯
(butyrospermylacetate)一致。
化合物 15:无色针晶(氯仿-甲醇), mp224 ～
227 ℃。茴香醛-浓硫酸显色呈红色 , Libermann-Bur-
chard反应阳性 。1H-NMR(600 MHz, CDCl3)δ:0.76
(3H, s, CH3-26), 0.86(3H, s, CH3 -23), 0.94(3H, s,
CH3 -24), 0.97(3H, s, CH3 -29), 0.98(3H, s, CH3 -
30), 1.05(3H, s, CH3 -25), 1.07(3H, s, CH3-25),
1.08(3H, s, CH3 -27), 2.05(3H, CH3CO), 4.52(1H,
t, J=8.0 Hz, H-3), 5.47(1H, t, J=3.3 Hz, H-12)。
·731·中国药学杂志 2010年 5月第 45卷第 10期 ChinPharmJ, 2010May, Vol.45No.10
13C-NMR(150 MHz, CDCl3)δ:36.6(C-1), 24.2(C-
2), 81.2(C-3), 37.7(C-4), 50.2(C-5), 2.39(C-6),
117.5(C-7), 147.6(C-8), 48.7(C-9), 35.0(C-10),
17.1(C-11), 34.6(C-12), 37.0(C-13), 41.6(C-
14), 31.6(C-15), 36.1(C-16), 31.0(C-17), 46.8(C-
18), 36.0(C-19 ), 28.2(C-20 ), 33.9(C-21), 36.8
(C-22), 27.6(C-23), 16.0(C-24), 13.2(C-25), 27.1
(C-26), 26.2(C-27 ), 31.6(C-28), 34.1(C-29), 33.7
(C-30), 171.0(CH3CO), 21.4(CH3CO)。数据与文
献 [ 18]报告的 multiflorenylacetate一致。
4 抗肿瘤活性测定
从蒙古鸦葱中分离得到 15个三萜类化合物 ,采
用 MTT和 SRB法 ,对所选的 3种人体肿瘤细胞株
P-388(人白血病细胞株)、A-549(人肺腺癌细胞株)
和 Bel-7402(人肝癌细胞株)进行体外活性筛选实
验 ,结果见表 3。
体外抗肿瘤活性实验表明 ,在 50 mg· L-1下 ,
化合物 1、2、3、4和 5对人肺癌细胞 A-549, 14对人
肝癌细胞株 Bel-7402显示有意义的细胞毒活性 。
表 3表明 ,化合物对不同的细胞株存在一定的选择
性 。因此 ,在以后的研究中 ,应增加多种细胞株 ,进
一步探讨其细胞毒选择性。另外 ,蒙古鸦葱具清热
解毒 ,消肿散结之功效 ,主治疗疮痛瘟 ,乳痛 ,跌打损
伤 ,劳伤 。因此 ,后续实验将结合植物的药用情况 ,
进行抗炎 、抗氧化等活性研究 ,为开发利用滨海湿地
药用植物提供依据。
表 3 蒙古鸦葱三萜类化合物抗肿瘤活性 .n=3, x±s
Tab.3 EffectsofdiferentfractionofS.mongolicaontumor
cels.n=3, x±s
No. ρ/mg· L-1
Inhibitoryrate/%
Mouseleukemic
cellineP-388
Humanlungcancer
cellineA549
Humanhepatoma
cellineBel-7402
1 50 5.8±0.08 89.1±0.13 3.4±0.10
2 50 27.7±0.12 87.4±0.05 10.6±0.32
3 50 31.5±0.9 89.7±0.14 53.4±0.31
4 50 30.1±0.42 85.5±0.31 42.4±0.18
5 50 14.8±0.37 87.7±0.05 2.3±0.15
6 50 3.1±0.35 5.8±0.22 6.2±0.06
7 50 7.5±0.22 4.98±0.15 9.6±0.13
8 50 9.8±0.08 7.12±0.31 10.8±0.28
9 50 34.6±0.05 14.3±0.19 6.4±0.54
10 50 23.3±0.63 23.5±0.24 5.3±0.36
11 50 27.8±0.14 6.5±0.22 15.4±0.15
12 50 4.9±0.32 15.4±0.19 38.2±0.24
13 50 29.8±0.12 20.0±0.78 9.2±0.16
14 50 37.9±0.35 58.7±0.07 96.3±0.52
15 50 9.4±0.13 15.3±0.26 7.9±0.23
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