全 文 ：第 32 卷第 6 期
2013 年 12 月
中 国 野 生 植 物 资 源
Chinese Wild Plant Ｒesources
Vol． 32 No． 6
Dec． 2013
收稿日期:2013 － 05 － 20
基金项目:贵州省林业厅年度计划项目(2008 － 01);贵州省科技厅“十一五”农业攻关项目(黔科合 NY字［2010］3029 号);贵
州省创新能力平台项目［黔科合院所创新能(2009)4002 号］。
* 通讯作者:王莲辉，E-mail:gzwanglianhui@ 163． com
doi:10． 3969 / j． issn． 1006 － 9690． 2013． 06． 020
足茎毛兰组培快繁技术研究
王莲辉1，姜运力1，李从瑞1，潘德权1，田炼红1，陈 训2
(1．贵州省林业科学研究院，贵州 贵阳 550005;2．贵州省科技厅，贵州 贵阳 550002)
摘 要 在足茎毛兰的组培快繁过程中，有机添加物 10%的椰乳对原球茎的诱导有极显著影响; 激素组合 6 － BA
和 NAA及配比 10∶ 1对芽的诱导和增殖起明显的促进作用;一定浓度的 IBA对足茎毛兰的壮苗生根起关键性作用;
栽培基质的选择极大地影响足茎毛兰的移栽成活率。
关键词 足茎毛兰;组培;快繁
中图分类号:Q943． 1 文献标识码:A 文章编号:1006 － 9690(2013)06 － 0062 － 03
Study on Tissue Culture and Ｒapid Propagation
of Eria coronaria(Lindl．)Ｒchb． f．
Wang Lianhui1，Jiang Yunli1，Li Congrui1，Pan Dequan1，Tian Lianhong1，Chen Xun2
(1． Center of Biological Technology，Guizhou Academy of Forestry，Guiyang 550005，China;2． Science
and Technology Department of Guizhou Province，Guiyang 550005，China)
Abstract In the course of rapid propagation of tissue culture for Eria coronaria，the coconut milk with
10% organic additive has a remarkable influence on the induction of the protocorm． Hormone combina-
tion of 6 － BA and NAA and the ratio of 10:1 can greatly promote the induction and multiplication of the
buds． IBA of certain density plays a key role for the strong seedling of Eria coronaria to take root． The
selection of the culture medium greatly influences the survival rate of transplanting for Eria coronaria．
Key words Eria coronaria(Lindl．)Ｒchb． f;tissue culture;rapid propagation
足茎毛兰［Eria coronaria(Lindl．)Ｒchb． f．］属
兰科毛兰属附生植物，假鳞茎密集，圆柱形。叶长椭
圆形或倒卵状椭圆形。花序顶生，通常上半部外弯，
总状，略短于叶，具数花;花白色，唇瓣侧裂片有褐色
脉，中裂片黄色;中萼片椭圆状披针形，侧萼片三角
状披针形;花瓣矩圆状披针形;唇瓣矩圆形。
足茎毛兰花瓣清秀而唇瓣极富形态变化，可作
盆栽，供室内外装饰或插花材料，在毛兰属中极具重
要的观赏价值，是一个正待开发的兰花种，全世界共
370种，我国 43种;贵州 8种。花期 10 ～11 月。生于
林中树干上或岩石上;海拔 1 300 ～ 2 000 m。分布于
海南、广西、贵州、云南南部至西北部和西藏东南部;
尼泊尔、锡金、印度和泰国也有分布。贵州、广西、云
南是我国乃至世界野生足茎毛兰的自然分布中心［1］。
由于人类对兰花的过度索取及生态环境的不断
恶化，造成其野生种群数量下降，极具观赏开发价值
的兰花几乎濒临灭绝，基于此，兰科植物所有野生种
都在《濒危野生动植物种国际贸易公约》(CITES)附
录Ⅰ和附录Ⅱ的保护范围之内，受到国际保护。
足茎毛兰常用种子或分株法繁殖，其种子在自
然条件下需与真菌共生，极难萌发;分株繁殖法，其
繁殖系数较低，每年只能增殖 1 ～ 3 倍。采用组培快
繁技术通常有利于解决其繁殖困难和种苗的不足，
在短期内可以提供大量的种苗，有利于保存野生种
质资源和野生种群，并为这一珍稀物种的保护及开
发利用提供技术支撑［2］。
1 材料与方法
1． 1 材料
供试材料为足茎毛兰果实。2007 年引种于黔
—26—
第 6 期 王莲辉，等:足茎毛兰组培快繁技术研究
西南州兴义市坡岗保护区，2008 年 11 月温室人工
授粉，2009 年 5 月获得果实。
无菌材料的获得:人工授粉 180 d 的荚果经自
来水洗净后，置于 10% 次氯酸钠溶液中消毒 20
min，用 70%的酒精表面消毒 30 s，再以 0． 1%的升
汞溶液消毒 15 min，最后用无菌水冲洗 5 次。将洗
净的成熟果实置于灭菌滤纸上吸干水分，用解剖刀
切开荚果，将种子接种到培养基上。
1． 2 方法
1 /2MS为基本培养基，培养基均附加活性炭
0． 2%，蔗糖 2． 0%，琼脂 0． 7%，pH 5． 2 ～ 5． 4;添加
不同种类和浓度的植物生长调节物质。培养温度
(25 ± 2)℃，光照度 30 ～ 40 μmol·m －2·s － 1，光照时
间 12 h·d －1。
2 结果与分析
2． 1 不同的有机添加物对原球茎诱导的影响
发育 180 d成熟未开裂果实的种子分别接种到
添加相同浓度(10%)，但不同种类的马铃薯、椰乳、
香蕉和苹果汁的 1 /2MS诱导培养基上(表 1)，每一
种培养基各接种 20 瓶，暗培养 2 周，可见白色原球
体出现，置于光照培养箱中，培养 3 周后原球茎转
绿，有叶原基出现，培养 4 周后绿色原球茎上有芽及
原球茎的混合组织出现［3］。
表 1 不同有机添加物对原球茎诱导的影响
序号 培养基 有机添加物
接种数瓶
(瓶)
原球茎
(瓶)
诱导率
(%)
1 1 /2MS 10%马铃薯 20 9 45
2 1 /2MS 10%椰乳 20 16 80
3 1 /2MS 10%香蕉 20 10 50
4 1 /2MS 10%苹果汁 20 7 35
5 1 /2MS 0 20 0 0
种子接入以上培养基均能萌发原球茎，以添加
10%椰乳的培养基诱导率最高，达 80%，适宜原球
茎的诱导;不添加任何有机添加物，没有原球茎出
现，继而培养一年时有零星的原球茎产生;添加
10%马铃薯及 10% 香蕉的培养基诱导率分别为
45%和 50%;添加 10%苹果汁的培养基诱导率最低
为 35%，可见添加 10%椰乳的培养基对原球茎的诱
导作用明显，表明种子在以上培养基上均有萌发能
力，只是针对不同的有机添加物其萌发率的表现不
同［4］。
2． 2 植物生长调节剂对芽分化的作用
将原球茎萌发小芽转移至以下 7 种诱导芽分化
的培养基上继代增殖培养(表 2)。从表 2 可以看
出，培养基(1)在不添加任何激素的情况下没有植
株的增殖;在添加不同浓度 BA和 NAA的 1 /2MS培
养基上均可分化出植株，其增殖率为 12% ～ 86%，
即在不同的培养基上芽的分化增殖及生长状况有较
大差别，培养基(2)增殖率为 48%，植株高生长缓
慢;培养基(3)、(4)增殖率高，分别为 64%和 86%，
且培养基(4)植株生长健壮;培养基(5)植株没有增
殖，但植株高生长明显好于其它培养基;培养基
(6)、(7)植株增殖率低，分别为 16%和 12%，增殖
效果差，80 ～ 90 d 能继代增殖 1 次，由此可见，不同
配比的细胞分裂素 6 － BA 和生长素 NAA 的组合是
芽分化增殖的主要因素，以 6 － BA 和 NAA 10∶ 1的
效果为最［5］。
表 2 添加不同浓度的 BA和 NAA对芽增殖的影响
序号 培养基
6 － BA
(mL·L －1)
NAA
(mL·L －1)
接种数
(株)
增殖数
(株)
分化率
(%)
1 1 /2MS +10%椰乳 0 0 50 0 0
2 1 /2MS +10%椰乳 0． 2 0 50 24 48
3 1 /2MS +10%椰乳 0． 5 0． 2 50 32 64
4 1 /2MS +10%椰乳 2． 0 0． 2 50 43 86
5 1 /2MS +10%椰乳 0 0． 2 50 0 0
6 1 /2MS +10%椰乳 0． 2 0． 5 50 8 16
7 1 /2MS +10%椰乳 0． 2 2． 0 50 6 12
2． 3 植物生长调节物质对壮苗生根培养的影响
为探索足茎毛兰壮苗生根的合适培养基，设置
了 5 种不同的培养基(表 3)，将较大的无根苗分别
转入以下 5 种生根培养基(1)～(5)上培养，其培养
与诱导、分化培养条件相同，培养 6 周后，测生根情
况，结果表明;添加 IBA 在 0 ～ 0． 2 mL·L －1范围内，
随着 IBA浓度的升高，生根率增加，IBA 0． 2 mL·L －1
时生根率最高，为 84%;当 IBA 浓度高于 0． 2 mL·
L －1时，生根率随着 IBA 浓度的升高反而下降，因此
说低浓度的 IBA有利于根的产生，高浓度 IBA 对根
的诱导有抑制作用，因而研究中采用 IBA 0． 2 mL·
L －1作为生根壮苗培养基为宜。
表 3 不同浓度 IBA对诱导生根的影响
序号
IBA浓度
(mL·L －1) 接种数(株) 生根数(株) 生根率(%)
1 0 100 24 24
2 0． 03 100 56 56
3 0． 2 100 84 84
4 0． 4 100 63 63
5 1． 0 100 46 46
2． 4 不同栽培基质对足茎毛兰移栽成活率的影响
当试管苗长至约 4 ～ 6 cm，3 ～ 4 片叶，2 ～ 3 条
根时将培养瓶置于温室中打开瓶盖炼苗 7 ～ 8 d 后，
从培养瓶中取出生根苗，洗净附着的培养基，分别栽
—36—
中 国 野 生 植 物 资 源 第 32 卷
入已消毒的水苔、碎树皮、碎树皮∶泥炭 = 4∶ 1及碎树
皮∶珍珠岩 = 4∶ 1的 4 种栽培基质中，每一种基质栽
种 200 株，80 d后统计移栽成活情况(表 4)，结果表
明:以碎树皮的移栽成活率最高，为 93%，植株生长
健壮;碎树皮 +珍珠岩 = 4 ∶ 1的移栽成活率最低为
65%;水苔与碎树皮 +泥炭 = 4 ∶ 1的移栽成活率接
近，分别为 79%和 81%，两种基质可替代使用。管
护中保持适度温湿度，置于阴凉通风处，进行正常
水、肥、药管理，有利于新根生长和防止病害发
生［6］。
表 4 不同栽培基质对足茎毛兰成活率的影响
序号 栽培基质
栽植株数
(株)
成活株数
(株)
成活率
(%)
1 水苔 200 158 79
2 碎树皮 200 186 93
3 碎树皮 +泥炭 = 4∶ 1 200 162 81
4 碎树皮 +珍珠岩 = 4∶ 1 200 130 65
3 结 论
在足茎毛兰的组培快繁过程中，不同的有机添
加物对原球茎的诱导均有一定的促进作用，针对不
同的兰科植物种子其选择性也是有区别的，实践中
需要做大量的实验以取得可靠的数据。就足茎毛兰
而言，10%的椰乳对于种子的萌发率有较大;细胞分
裂素 6 － BA和生长素 NAA的组合及配比均可促进
原球茎的增殖分化，且单独使用 6 － BA 对芽的增殖
分化也有明显的促进作用，而单独使用 NAA则不产
生芽增殖，只是在高生长方面起作用;两者适宜的浓
度配比，即:1 /2MS + 6 － BA2． 0 mL·L －1 + NAA0． 2
mL·L －1 + 10%椰乳成为了足茎毛兰小芽分化与增
殖的最适培养基［7］;IBA0． 2 对足茎毛兰的生根有明
显的促进作用，即足茎毛兰的壮苗生根培养基为 1 /
2MS + IBA0． 2。
图 1 足茎毛兰各培养阶段
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第 6 期 王莲辉，等:足茎毛兰组培快繁技术研究
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