全 文 ：RP-HPLC法测定文殊兰不同部位中石蒜碱的含量
赵 斌1，刘 敬2，王 琼1* (1．中山火炬职业技术学院生物医药系，广东中山 528436;2．成都中医药大学药学院，四川成都 610075)
摘要 ［目的］采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)测定文殊兰药材不同部位石蒜碱的含量。［方法］采用 Agilent Eclipse XDB-C18柱(5
μm，250 mm ×4． 6 mm)，甲醇 －磷酸盐缓冲液(pH 3 ～4)－三乙胺(8∶92∶0． 1)为流动相，流速1． 0 ml /min，检测波长为290 nm的色谱条件
测定文殊兰不同部位中石蒜碱的含量。［结果］石蒜碱进样浓度在 0． 081 8 ～ 0． 818 0 μg /ml 范围内与峰面积呈良好线性关系(r =
0． 999 9);石蒜碱平均回收率为 98． 5%，RSD为 1． 4%。［结论］文殊兰鳞茎中的石蒜碱含量最高，所建立的 RP-HPLC简便、准确、重复性
好，可作为文殊兰药材的质量控制方法。
关键词 文殊兰;石蒜碱;反相高效液相色谱法
中图分类号 S567 文献标识码 A 文章编号 0517 －6611(2011)16 －09596 －02
RP-HPLC Determination of Lycorine in Different Medicinal Portions of Crinum asiaticum
ZHAO Bin et al (Department of Biomedicine，Zhongshan Torch Polytechnic，Zhongshan，Guangdong 528436)
Abstract ［Objective］The aim was to develop an RP-HPLC method for the determination of lycorine in different medicinal portions of Crinum
asiaticum． ［Method］Agilent Eclipse XDB-C18 column(5 μm，250 mm × 4． 6 mm)was used with methanol-phosphate buffer (pH3 ～ 4)-TEA
(8∶92∶0． 1)as the mobile phase at a flow rate of 1． 0 ml /min，the detective wavelength was set at 290 nm． ［Result］The linear range of lyco-
rine was 0． 081 8 － 0． 818 0 μg /ml(r = 0． 999 9)． The average recoveries of lycorine were 98． 5% with corresponding RSD 1． 4% ． ［Conclu-
sion］Content of lycorine in bulb of Crinum asiaticum is highest． The method is simple and accurate with good repeatability，which can be used
for the quality control of Crinum asiaticum．
Key words Crinum asiaticum;Lycorine;RP-HPLC
作者简介 赵斌(1979 － ) ，男，湖南株州人，博士，从事中药药效物质基
础及中药新剂型的研究，E-mail:zhaobin3226794@ 163． com。
* 通讯作者，中药师，从事中药新剂型及质量标准研究，
E-mail:hunter_wq@ 126． com。
收稿日期 2011-03-14
文殊兰(Crinum asiaticum L． var． sinicum Bak．)始载于
《本草纲目拾遗》，为石蒜科(Amaryllidaceae)文殊兰属(Cri-
num)多年生草本植物，主要分布于福建、台湾、湖南、广东等
地。文殊兰以叶(罗裙带)、鳞茎(罗裙带根)、果实(文殊兰
果)入药，味辛，性凉，有小毒，具有行血散瘀，消肿止痛的功
效，可用于咽喉炎，跌打损伤，痈疖肿毒，蛇咬伤［1］。文殊兰
主要含有以石蒜碱为主的生物碱类成分［2］。石蒜碱为吡咯
并菲啶类生物碱，具有抑制乙酰胆碱酯酶、抗肿瘤、降压、抗
病毒、抗寄生虫、抗疟疾、抗炎等多种药理活性［3］，为文殊兰
主要药效成分之一，但文殊兰各药用部位中石蒜碱的含量测
定研究尚未见报道。为此，笔者采用 RP － HPLC法测定其鳞
茎、叶、果实 3个药用部位的石蒜碱含量，为控制文殊兰的质
量以及今后的开发应用提供试验依据。
1 材料与方法
1． 1 材料
1． 1． 1 原药材。文殊兰采自广东中山、福建厦门等地。
1． 1． 2 主要试剂。乙腈、甲醇为色谱纯，由美国 Merck公司
生产;水为重蒸水，自制;石蒜碱对照品由上海华壹生物科技
有限公司提供，含量为 99． 1%。
1． 1． 3 主要仪器。Alltech 426 型高效液相色谱仪(美国奥
泰公司) ;KQ-50DB超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公
司) ;Sartorius BT25S电子天平(德国赛多利斯公司)。
1． 2 方法
1． 2． 1 原药材的鉴定与前处理。采集兰药材经本系中药鉴
定教研室张娜博士鉴定为文殊兰，分别取其鳞茎、叶、果，切
片，60 ℃烘干，粉碎成细粉，备用。
1． 2． 2 供试品溶液的制备。分别精密称取文殊兰鳞茎、叶、
果实粉末各 1． 0 g，加入乙醇 50 ml，加热回流提取 1 h，冷却，
滤过，滤液蒸干，残渣加 0． 1 mol /L盐酸 25 ml，超声溶解，滤
过，滤液加氨水调 pH 至 10 ～ 12，用三氯甲烷提取 3 次(20、
20、10 ml) ，合并三氯甲烷液，水浴蒸干，残渣加甲醇溶解并定
容至 10 ml量瓶中，摇匀，以 0． 45 μm微孔滤膜滤过，取续滤
液，即得供试品溶液。
1． 2． 3 对照品溶液的制备。取石蒜碱对照品适量，精密称
定，加甲醇制成 40 μg /ml溶液，即得对照品溶液。
1． 2． 4 测定波长的选择。将石蒜碱对照品甲醇溶液于 200
～400 nm进行紫外扫描，选择最大吸收波长为测定波长。
1． 2． 5 色谱条件及系统适应性试验。色谱柱为 Agilent E-
clipse XDB-C18柱(5 μm，250 mm ×4． 6 mm) ;流动相为甲醇∶
磷酸盐缓冲液(pH3 ～4)∶三乙胺 = 8∶92∶0． 1;检测波长为 290
nm;流速为 1． 0 ml /min;柱温为 30 ℃;进样量为 10 μl。
1． 2． 6 线性关系考察。分别精密吸取对照品溶液(0． 040 9
mg /ml)2、5、10、15、20 μl注入液相色谱仪，测定峰面积，进行
回归分析。
1． 2． 7 精密度试验。精密吸取 0． 040 9 mg /ml 对照品溶液
10 μl，连续进样 6次，测定峰面积，计算 RSD值。
1． 2． 8 重复性试验。精密称取同一部位(鳞茎)粉末 6 份，
每份 1． 0 g，按“1． 2． 2”项制备供试品溶液，在上述色谱条件
进行测定，计算石蒜碱含量及 RSD值。
1． 2． 9 稳定性试验。精密称取同一部位(鳞茎)粉末 1． 0 g，
按“1． 2． 2”项制备供试品溶液。分别于 0、2、4、6、8、10 h精密
吸取 10 μl注入液相色谱仪，测定峰面积，计算 RSD值。
1． 2． 10 加样回收率试验。精密称取已知含量(0． 513
mg /g)的鳞茎药材粉末 9份，每份 0． 5 g，每 3份为一组，分别
精密加入 0． 470 7 mg /ml 对照品溶液 0． 5、0． 6、0． 8 ml，再按
“1． 2． 2”项制备加样回收供试液，在上述色谱条件下进行测
定，计算回收率。
1． 2． 11 样品测定。取“1． 2． 2”项制备的供试品溶液 10 μl
责任编辑 宋平 责任校对 卢瑶安徽农业科学，Journal of Anhui Agri． Sci． 2011，39(16):9596 － 9597，9599
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2011.16.201
进样，测定峰面积，采用外标一点法计算石蒜碱的含量。
2 结果与分析
2． 1 测定波长的选择结果 由图 1 可知，石蒜碱在 241 和
290 nm处有最大吸收，且 290 nm处的吸收强于 241 nm，故选
择 290 nm作为最大测定波长。
2． 2 色谱条件及系统适应性试验结果 由图 2 可知，在
“1． 2． 5”项色谱条件下，文殊兰各药用部位色谱图中的石蒜
碱色谱峰峰形较对称，与其他成分达到基线分离，理论板数
按石蒜碱峰计算不低于 5 000。
2． 3 线性关系考察结果 以进样浓度 X(μg /ml)为横坐
标，峰面积 Y为纵坐标作图，绘制标准曲线，得回归方程为
Y = 864 521X － 3 692． 3，r = 0． 999 9。结果表明，石蒜碱进样
浓度在 0． 081 8 ～ 0． 818 0 μg /ml范围内与峰面积有良好的
线性关系。
图 1 石蒜碱对照品 200 ～ 400 nm紫外扫描图
Fig． 1 UV spectrum of lycorine reference substance at 200 －400
nm
注:1．石蒜碱;A．石蒜碱对照品;B．文殊兰叶;C．文殊兰鳞茎;D．文殊兰果实。
Note:1． Lycorine;A． Lycorine reference substance;B． Crinum asiaticum leaf;C． Crinum asiaticum bulb;D． Crinum asiaticum fruit．
图 2 石蒜碱对照品及文殊兰不同部位 HPLC色谱图
Fig． 2 HPLC chromatograms of reference substances and different medicinal portions of Crinum asiaticum
2． 4 精密度试验结果 RSD为 0． 31%，表明仪器精密度良好。
2． 5 重复性试验结果 石蒜碱平均含量为 0． 513 mg /g，RSD
为 1． 3%，表明该方法重复性良好。
2． 6 稳定性试验结果 RSD为0． 6%，供试品溶液至少在10
h内基本稳定。
2． 7 加样回收率试验结果 9份试验加样回收率均为 95%
～105%，平均回收率为 98． 5%，RSD为 1． 4%，表明该测定方
法准确度高。
2． 8 样品含量测定结果 由表 1可知，2个产地的文殊兰中
鳞茎部位的石蒜碱含量最高。
3 结论与讨论
(1)文殊兰在我国分布较广，其形态优美，除作为观赏植
物外，在民间还常用于跌打损伤，虫蛇咬伤等的治疗，是一味
具有开发前景的中草药。文殊兰研究基础较为薄弱，质量控
表 1 不同来源文殊兰中不同部位石蒜碱的含量
Table 1 Content of lycorine in different medicinal portions of Crinum
asiaticum from different sources
产地
Source
药用部位
Medicinal
portions
石蒜碱含量
Content∥%
广东中山 Zhong- 叶 0． 038 9
shan Guangdong 鳞茎 0． 051 3
果实 0． 017 6
福建厦门 Xian- 叶 0． 043 1
men Fujia 鳞茎 0． 058 9
果实 0． 013 7
制标准水平较低，影响了其进一步开发利用。试验首次以石
蒜碱作为文殊兰药材含量测定指标，所建立的高效液相色谱
(下转第 9599页)
795939 卷 16 期 赵 斌等 RP-HPLC法测定文殊兰不同部位中石蒜碱的含量
母草全草治脓包疮，刺齿泥花草(一枝箭，L． ciliata Pennell)
全草可治毒蛇咬伤［19］。
4． 3 治疗跌打肿痛与产后淤血脐下痛 江苏新医学院用
鲜齿叶母草 150 ～ 200 g，绞汁冲酒服，渣敷伤处，疗效很
好［20］。产后淤血脐下痛:鲜齿叶母草 50 ～ 100 g，同鸡肉 100
g煎汤食用甚效。
4． 4 风湿及关节疼痛 谭经福报道齿叶母草可以治疗关节痛
及下肢瘫痪［21］。广西壮族自治区中医药研究所报导，齿叶母
草 30 g、每天 1剂水煎，冲少许酒，分 2次服，能治疗风湿痛［22］。
4． 5 杀虫 梁广贞等报导，旱田草全草入药，具有清热解
毒、杀虫、止咳、治牙痛及蛇咬伤的功效;长蒴母草全草入药，
可清热利水及杀虫［23］。
4． 6 治疗老年人尿道结石 何洪辉等报导，排石冲剂(公母
草 50 g、大金钱草 30 g、石韦 30 g、海金沙 30 g、柳叶 30 g，加
水 600 g，煎至 200 ml，稍冷加入 5 g NaHCO3)对采用传统方
法治疗中老年泌尿道结石症无效的患者具有良效［24］。
4． 7 其他临床价值 临床上将含有陌上菜的方剂用于治疗
中晚期肿瘤患者，可明显改善患者生活质量、延长生命周
期［11］。史修礼等证实，牛、猪在饥饿状况下或因采食陌上菜
而中毒［25］。关于陌上菜对牛、猪造成中毒的文献报道极少。
临床病例表现为采食后 3 ～ 4 h出现不安，口内滴水，腹围增
大，继而呈水样峻泄，排泄物内无气泡，呼吸、心跳减慢，体温
正常，瘤胃蠕动减弱或停止，肠音亢进。目前尚无特效解毒
方法。泥花草(L． antipoda Alston)是浙江乐清市历年出售香
港、新加坡、台湾地区的药材，亦为当地沿海渔民喜用的药
材，常整箱带到海上。其功效显著，用途广泛，能清热利湿、
祛瘀消肿，常用于急性喉炎、扁桃体炎、热症咳嗽、急性肠炎、
跌打损伤、破伤风抽搐、无名肿毒、疯狗毒蛇咬伤等［26］。李
保真等报导，长蒴母草全草可治脓包疮［19］。
5 小结与展望
母草属植物的开发利用尚处于起步阶段，对其成分、药
理作用的研究报道都较少，今后要进一步深入研究，以造福
更多患者。
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524．
(上接第 9597 页)
法具有操作简单、重复性好、准确性高等优点，可为其质量控
制提供一定的科学依据。并对文殊兰鳞茎、叶、果实等药用
部位中石蒜碱含量进行了比较，结果表明，鳞茎中石蒜碱含
量最高。由于样本采集量较少，石蒜碱在文殊兰药材中的分
布规律还有待进一步研究。
(2)流动相选择试验中比较了乙腈 － 0． 1% 三氟乙
酸［4］，甲醇 －冰醋酸 －水，甲醇 －磷酸盐缓冲液(pH3 ～ 4) ，
0． 1%磷酸 －甲醇等系统的试验效果。结果表明，石蒜碱峰
型或拖尾，或分离度不够。试验所确定的流动相为甲醇 －
磷酸盐缓冲液(8∶92) ，再加入 0． 1%三乙胺作为扫尾剂，石
蒜碱保留时间适中，峰型较好，基线较平，且主峰与杂质达
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