全 文 ：收稿日期:2011-10-20; 修订日期:2012-01-06
基金项目:国家自然科学基金(No． 1101301)
作者简介:蒋雯雯(1985-) ，女(汉族) ，新疆人，现为石河子大学生命科学
学院硕士研究生，主要从事植物化学的研究工作．
* 通讯作者简介:马 淼(1970-) ，男(回族) ，新疆人，现任石河子大学生
命科学学院教授，博士学位，主要从事植物学研究工作．
北疆地区刺山柑多酚类物质消长规律
及其抗氧化活性的研究
蒋雯雯，马 淼* ，郭 艳，左 伟
(石河子大学 生命科学学院，新疆 石河子 832003)
摘要:目的 研究北疆地区刺山柑中多酚类物质消长规律并对其抗氧化活性进行比较。方法 采用 Folin － Ciocalteu 法，
测定北疆地区刺山柑多酚类物质含量，用 DPPH法对其抗氧化活性进行比较。结果 北疆地区刺山柑多酚类物质含量 6
月花蕾中达到 25． 72 mg /g，自由基清除率最高。结论 刺山柑不同部位不同时期多酚含量存在显著性差异，抗氧化活性
也存在不同，石河子地区刺山柑 6 月份花中多酚类物质含量最高，抗氧化活性最强。
关键词:刺山柑; 多酚类物质; 抗氧化活性
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 05． 007
中图分类号:R284． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)05-1067-02
Total Polyphenols and Its Antioxidant Activity of Capparis spinosa L． in North Part of
Xinjiang
JIANG Wen － wen，MA Miao* ，GUO Yan，ZUO Wei
(College of Life Science，Shihezi University，832003，China)
Abstract:Objective To determine the variation of ployphenols in Capparis spinosa L． in north part of Xinjiang and to study its
antioxidant activity．Methods The content of polyphenols Capparis spinosa L． was determined by Folin － Ciocaileu Method． Then
the antioxidant activity of Capparis spinosa L were measured with DPPH (1，1 － dipheny l － 2 － picrylhydrazyl)method． Results
The content of polyphenols in June Capparis spinosa L． flower was 25． 72 mg /g，and the flowers had the highest scavenging activity
against free radical． Conclusion The content of polyphenols and its antioxidant activity are different in Capparis spinosa L in dif-
ferent times and organs capers in the north part of Xinjiang． Flowers in June has the highest polyphenols content and the strongest
antioxidant activity．
Key words:Capparis spinosa L．; Polyphenols; Antioxidant activity
刺山柑 Capparis spinosa L．为白花菜科山柑属植物，又称野西
瓜、老鼠瓜等［1］，在我国主要分布于新疆天山南北石质低山，丘
陵坡地，山麓冲沟或戈壁滩［2］。刺山柑作为一种传统的草药，具
有镇痛、消炎、抑菌、抗氧化、改善记忆力等药理作用，应用前景非
常广泛［3］。
多酚类化合物是多羟基酚类化合物的总称，具有抗病毒、抗
氧化、抗癌、抗辐射，以及保护心血管系统等重要的生物活
性［4 ～ 8］。植物体内多酚类物质是受生物和非生物胁迫如紫外线
辐照、高光、低温、创伤、营养不良、病原体侵袭等诱导产生的，用
以适应外界逆境环境［9］。抗氧化性是植物体内多酚类物质的一
个重要性质，多酚类物质的含量与抗氧化活性有关［10］。多酚类
物质通过提供质子，消除自由基，自身形成稳定的共振结构而阻
断氧化产生抗氧化作用，是医药、食品、化妆品中很有前景的一类
天然抗氧化剂［11］。目前，国内外对刺山柑的研究主要集中在其
化学成分和药理作用上，对刺山柑的多酚类物质含量及抗氧化活
性的研究很少。本实验用 Folin － Ciocaileu 比色法测定了刺山柑
中多酚类物质的含量，并对其抗氧化活性进行了评价，为开发利
用北疆地区刺山柑提供了科学依据。
1 材料与仪器
1． 1 试剂 没食子酸、无水乙醇、无水碳酸钠均为分析纯;DPPH
(2，2 － diphenyl － 1 － picrylhydrazyl)Folin － Ciocaileu 试剂由美国
Sigma公司提供。
1． 2 仪器与设备 紫外可见分光光度计(上海棱光技术有限公
司，Spectrumlab22) ;BS423s 分析天平(Sartorious，精确度:0． 01
g) ;超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司，KQ －300E型)。
1． 3 材料 2011 年 5 月至 2011 年 8 月在新疆石河子戈壁荒漠采
集刺山柑果实、花、叶等材料，经石河子大学闫平教授鉴定为刺山
柑，将采集后的材料立即带回实验室阴干粉碎备用。
2 方法
2． 1 标准贮备液的配制 精密称取干燥的没食子酸标准品 0． 1
g，蒸馏水溶解并定容至 100 ml，浓度为 1 mg /ml。
2． 2 样品溶液的制备 精密称取石河子地区刺山柑 5 月的叶片、
花蕾、果实、根和茎以及不同时期的粉末 0． 125 g 放入 10 ml具塞
试管中，加入 10 ml50% 乙醇，置于超声波清洗机中超声 30 min
后过滤。滤渣在同样的条件下再重复提取 1 次，合并滤液，定容
于 25 ml容量瓶中。
2． 3 标准曲线的建立 精密吸取 0，0． 5，1． 0，2． 0，3． 0，4． 0，5． 0
ml 1 mg /ml 没食子酸标准贮备溶液，分别定容于 10 ml 量瓶内。
然后从各溶液中吸取 1 ml 加入 10 ml 量瓶内，先加 5 ml 蒸馏水
摇匀，再加 0． 5 ml Folin － Ciocaileu 试剂，充分摇匀 30 s 后，加入
10 % 碳酸钠溶液 1． 5 ml，混匀，加水定容，再混匀，然后 30 ℃ 下
避光放置反应 2 h，在 765 nm 处测吸光度。以吸光度为纵坐标，
标准溶液浓度为横坐标，绘制标准曲线。刺山柑样品中的多酚含
量以没食子酸标准品计。回归方程:Y = 0． 0407X + 0． 015 (r =
0． 991)。
2． 4 分析方法的评价
2． 4． 1 稳定性实验 取一刺山柑样品粉末按上述样品制备及测
定，将同一份供试品溶液分别置冰箱冷藏柜中保存 1，4，8，16，24
h，精密吸取 1 ml，按标准曲线项下方法测定含量，RSD为 0． 68%
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL ． 23 NO． 5 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 5 期
(n = 5) ，样品溶液在 24 h内稳定。
2． 4． 2 精密度实验 精密吸取对照品溶液 6 份，每份 1 ml，并按
标准曲线项下方法测定含量，采用本法测定刺山柑中多酚类物质
含量，精密度良好，RSD为 0． 62%。
2． 4． 3 重复性实验 称取一刺山柑样品粉末按上述样品制备方
法及测定方法，重复测定 5 次吸光度，RSD 为 0． 51 ﹪，表明重复
性良好。
2． 4． 4 回收率实验 将已知多酚含量的样品 9 份样品分成三组，
各加入对照品 80，90，100 μg，按上述提取方法与测定方法检测多
酚类物质含量，并计算回收率，结果见表 1。
表 1 回收率实验结果
序
号
样品含量
m /mg
对照品加入量
m /mg
测得量
m /mg
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0． 077 2 0． 080 0 0． 1594 102． 80
2 0． 077 2 0． 080 0 0． 159 9 103． 43
3 0． 077 2 0． 080 0 0． 158 9 102． 18
4 0． 077 2 0． 090 0 0． 168 6 101． 60
5 0． 077 2 0． 090 0 0． 169 6 102． 71 101． 84 0． 98
6 0． 077 2 0． 090 0 0． 168 3 101． 27
7 0． 077 2 0． 100 0 0． 178 3 101． 14
8 0． 077 2 0． 100 0 0． 178 3 101． 14
9 0． 077 2 0． 100 0 0． 177 5 100． 34
2． 5 样品的测定 用移液枪精确量取样品溶液 1 ml 置入 10 ml
量瓶中，先加 5 ml 蒸馏水，摇匀，再加 Folin － Ciocaileu 试剂 0． 5
ml，充分摇匀 30 s 后，加入 10 % 碳酸钠溶液 1． 5 ml，混匀，加水
定容，继续摇匀，然后 30 ℃ 下避光放置反应 2 h，在 765 nm 波长
处测吸光度，代入回归方程，得多酚含量。
2． 6 抗氧化活性试验 取样品提取液各 2 ml，加入 0． 2 mmol·
L －1DPPH溶液 2 ml，快速混匀，30 min 后测定在 516 nm 处的吸
光度，计算 DPPH清除率。清除率(%)=［1 －(Ai － Aj) /Ac］×
100%。
式中:Ac 为未加抗氧化剂时 DPPH 溶液的吸光度;
Ai为加抗氧化剂后 DPPH溶液的吸光度;
Aj为提取液在测定波长的吸光度。
2． 7 数据处理 在方差分析的基础上，利用多重比较的方法
(LSD) ，检验刺山柑不同器官及不同时期花蕾多酚类物质含量平
均值及抗氧化活性的差异。
3 结果
3． 1 刺山柑不同器官多酚类物质含量测定及抗氧化活性比较
结果见图 1 ～ 2。
相同字母表示差异不显著(P ＞ 0． 05 ) ，
不同字母表示差异显著(P ＜ 0． 05，LSD检验)
图 1 不同器官多酚类物质含量比较
由图 1 ～ 2 可以看出，多酚类物质在刺山柑的各器官中都有
分布并具有一定的抗氧化活性，多酚类物质含量最高的器官为花
蕾，多酚含量为 25． 72 mg /g，茎和根中多酚含量最少，分别为
3． 69 mg /g和 3． 64 mg /g． 抗氧化活性最强的器官为花蕾，DPPH
清除率为 97． 90 %，根的 DPPH清除率最弱为 34． 36 %。单因素
方差分析表明不同器官间多酚类物质含量及抗氧化活性均有显
著性差异(P ＜ 0． 05)。
3． 2 刺山柑不同时期多酚类物质含量测定及抗氧化活性比较
结果见图 3 ～ 4。
相同字母表示差异不显著(P ＞ 0． 05 ) ，
不同字母表示差异显著(P ＜ 0． 05，LSD检验)
图 2 不同器官抗氧化活性比较
不同字母表示差异显著(P ＜ 0． 05，LSD检验)
图 3 不同时期花蕾多酚类物质含量
不同字母表示差异显著(P ＜ 0． 05，LSD检验)
图 4 不同时期花蕾抗氧化活性比较
由图 3 ～ 4 可以看出多酚类物质在刺山柑花蕾的不同的生长
时期的分布及抗氧化活性存在差异，多酚类物质含量最高的时期
为 6 月份，多酚含量为 25． 72 mg /g，7 月份花蕾中多酚类物质含
量最少，为 16． 5 mg /g。刺山柑花蕾抗氧化活性最强的时期为 6
月份，DPPH清除率为 97． 90 %，7 月份花蕾的 DPPH清除率最弱
为 95． 26 %。单因素方差分析表明不同时期刺山柑花蕾多酚类
物质含量及抗氧化活性均有显著性差异(P ＜ 0． 05)。
4 讨论
人会逐渐衰老原因之一是机体在进行一系列氧化代谢的同
时，不断地产生自由基，造成细胞活力下降，组织器官功能衰退，
机体就会进入衰老状态。机体产生的抗氧化作用，可保持体内自
由基的产生与消除的平衡，对预防疾病与抗衰老等有重要意义。
为了加强自身的防预系统，提高抗氧化能力，有必要从体外补充
各种具有抗氧化活性的物质，包括各种抗氧化剂。因此对于寻找
一些天然的、安全的抗氧化物添加于食品、药品和化妆品中是非
常必要的。
作为天然的抗氧化剂，多酚类物质其抗氧化作用和医药功效
正备受人们的关注。植物多酚类物质是许多植物的固有成分，当
植株在高温干旱和强烈辐射等逆境条件下，植物体产生大量活性
氧物质和自由基，多酚类物质一方面通过还原反应降低植物内环
境中的氧含量，另一方面释放出氢与植物体内的自由基结合，阻
止氧化过程的继续进行，以保护自身免受活性氧的伤害［12］。
在本研究中，刺山柑中多酚类物质含量及抗氧化活性具有明
显的器官差异性，结果显示花蕾和幼叶中多酚类物质的含量最
高，抗氧化能力最强，这种器官上多酚类物质含量及抗氧化活性
的差异性与万寿菊(Tagetes erecta L)、糠椴(Tilia mandshurica )与
石榴(Punica granatum L)等植物上的研究结果基本一致［13 ～ 15］。
并且研究发现植物刺山柑幼叶比老叶中的多酚类物质含量高，抗
氧化活性强，这可能与植物对嫩器官的强自我保护作用有关［16］。
通过对不同时期刺山柑花蕾研究表明多酚类物质含量及抗氧化
活性也具有明显的生长期差异性，结果显示 5 月份的花蕾中多酚
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类物质含量显著高于其他时期，多酚含量达到 23． 38 mg·g －1。
并且由结果可以看出刺山柑各时期的花蕾均有很强的抗氧化活
性，其清除率都在 95% 以上，有研究者对红薯［17］、黄芪和党
参［18］等植物提取物的抗氧化活性进行了研究，结果表明其清除
自由基率都小于 95%，说明各刺山柑各时期的花蕾都具有很高
的抗氧化活性，可作为天然抗氧化剂开发利用。如果以提取多酚
类化合物为目的，刺山柑最适宜的采集的器官为花蕾，采收期为
6 月份，此时多酚类物质的含量最高，抗氧化活性最强，但是 就
刺山柑的利用而言笔者认为最好是利用其叶或果实，虽然花蕾中
多酚类物质含量及抗氧化活性最高，但花蕾的生物量较低;而幼
叶及果实的多酚类物质含量及抗氧化活性亦较高，且叶片及果实
的生物量较大。故最佳的采集方式是采集叶片或是果实，既可保
证较高的多酚类物质含量及较强的抗氧化活性又利于其生活史
的继续进行，从而达到该资源可持续利用的目的。本实验为进一
步开发和更好地利用北疆地区刺山柑提供了理论依据。
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收稿日期:2011-08-15; 修订日期:2011-12-21
基金项目:国家自然科学基金(No． 30772790)
作者简介:吴 琼(1988-) ，女(汉族) ，安徽铜陵人，现为广州中医药大学硕士研究生，主要从事药物载体及其新型给药系统研究工作．
* 通讯作者简介:程 怡(1955-) ，女(汉族) ，河北人，现任广州中医药大学教授，博士研究生导师，主要从事药物载体及其新型给药系统研究工作．
多西他赛长循环脂质体包封率的测定方法的研究
吴 琼，程 怡* ，聂 华
(广州中医药大学中药学院，广东 广州 510006)
摘要:目的 建立多西他赛长循环脂质体包封率的测定方法。方法 以高效液相色谱法测定，考察透析介质的种类、浓度、
透析袋内外体积比、温度等对脂质体与游离药物分离效果的影响。结果 透析介质为 0． 5%聚山梨醇酯，透析袋内外体积
比为 1∶ 150，在 0℃下透析 8 h达到平衡。结论 透析法准确可行，适于多西他赛长循环脂质体的包封率测定。
关键词:多西他赛; 长循环脂质体; 包封率; 透析法
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2012． 05． 008
中图分类号:R284． 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2012)05-1069-03
Determination Method of Entrapment Efficiency of Long － circulating Liposomes En-
trapped with Docetaxel
WU Qiong，CHENG Yi* ，NIE Hua
(Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006，China)
Abstract:Objective To establish a method for determination of the entrapment efficiency of long － ciculating liposomes en-
trapped with docetaxel(DOC － PEG2000 － DSPE － Liposomes，DPL)． Methods HPLC was used to determine and investigate the
entrapment efficiency of DPL the sort of the release media，concentration，and the volume ratio between internal and external． Re-
sults The release media was 0． 5% polysorbate，the volume ratio between internal and external was 1:150，the equilibrium time
was 8 h． Conclusion Dialysis method is accurate． It is suitable for determination of entrapment effiency of DPL．
Key words:Docetaxol; Long － circulating liposomes; Entrapment efficiency; Dialysis
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2012 VOL ． 23 NO． 5 时珍国医国药 2012 年第 23 卷第 5 期