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明日叶保健茶的毒性及致突变和致畸性



全 文 :明日叶保健茶的毒性及致突变和致畸性
邓良利 , 丁汉平 , 刘斌
[摘要 ] 目的: 评估明日叶保健茶的毒性及致突变性和致畸性。方法: 采用急性毒性试验、 Ames试验、 微核试验、 小
鼠精子畸形试验、 骨髓细胞染色体畸变试验、 30d喂养试验和传统致畸试验等。 结果: 急性毒性试验为实际无毒级 ; 致突变
试验为阴性 ; 在 30d喂养试验中 , 未见引起大鼠的整体健康状况、 生理生化功能和器官组织形态学各重要指标的异常变化 ;
在传统致畸试验中未见发育毒性。 结论: “明日叶保健茶” 在推荐剂量 [3g / ( d· 人 ) ]下 , 食用是安全的。
[关键词 ]  明日叶 ; 致突变性 ; 致畸性
[中图分类号 ] R151. 2    [文献标识码 ] A    [文章编号 ] 1003-8507 ( 2003) 01-0026-03
THE TOXICITY、 MUTAGENICITY AND TERATOGENICITY OF ANGELICA KEISKEI KOIDZUMI
TEA. DENG Liang -l i , DING Han-ping , LIU Bin. Center for Disease Con trol an d Prevent ion of Chengdu, S ichuan Province,
610021.
Abstract: Objective: To evaluate the tox icity、 mutagenicity and te ratog enicity of angelica keiskei ko idzumi tea. Methods:
Acute to xicity test、 Ames test、 mic ronucles test、 sperma tozoon abe rra tion test、 bone mar row cells chr omosome aber ra tion
test、 30d feed test and traditional terato genicity test w ere conducted. Result s: The acute to xicity w asnt effect lev el; Th e fr e-
quency o f mutagenicity、 ter atog enicity and 30d feed test in each do se g roup we re no t significantly differ ent compa red with con-
tr ol g roup, th eAng lica keiskei koidzumi tea had no mutagenicity、 ter atog enicity and g row th to xicity . Conclusions: It is safe
under the do se o f 3g in one day.
Key words: Angelica keiskei koidzumi; M utagenicity; Te rato genicity
   “明日叶” 学名叫 Angelica Keiskei Ko idzumi。 原产地
在日本八丈岛 , 岛民多食用明日叶 , 均很长寿 , 因此又名长
寿草。明日叶具有提高机体免疫力、润肠通便、改善睡眠、延
缓衰老等多重功效 , 具有广泛的开发和应用价值。因此 , 某
研究所开展了长寿草的引种工作 ,并开发出保健茶等。为确
保食用人群的健康 , 本文按 《食品安全性毒理学评价程序和
方法》 [1 ]的相关要求 ,对 “明日叶保健茶”的毒性进行了系统
的研究。
1 材料与方法
1. 1 受试物 明日叶保健茶由四川佳寿康复工程研究所提
供 , 样品呈绿色粉状 , 试验时用蒸馏水配制成所需浓度的混
悬液。
1. 2 试验动物 昆明种小鼠 , SD大鼠由四川省抗菌素工业
研究所提供。 整个实验 , 动物自由摄食和饮水 , 室温 20~
25℃ , 相对温度 60~ 75%。
1. 3 急性毒性试验 均按霍恩氏 ( Ho rn) 法设计剂量。
1. 3. 1 小鼠急性毒性试验 选用昆明种小鼠 , 设 1000、
2150、 4640和 10000mg / ( kg· bw ) 4个剂量组。
1. 3. 2 大鼠急性毒性试验 选用 SD大鼠 , 设 2150、 4640、
10000和 21500mg / ( kg· bw ) 4个剂量组。
1. 4 遗传毒性试验
[作者单位 ] 成都市卫生防疫站 , 610021
[作者简介 ] 邓良利 ( 1970~ ) , 男 , 本科 , 主管技师 .
[收稿日期 ] 2002— 03— 04
1. 4. 1  Ames试验 菌株为 TA97、 T A98、 T A100和
T A102, 由四川省卫生防疫站提供 , 鉴定符合要求后进行试
验。 Sg、 2- AF及 MM C等均由华西医科大学提供 , 所有试
剂皆为分析纯。
1. 4. 2 骨髓微核试验 选用昆明种小鼠 , 雌雄分开 , 设
625、 1250和 2500mg / ( kg· bw ) 3个剂量组。另设阴性对
照组 ( 0. 85% NaCl) 和阳性对照组环磷酰胺 ( 30mg / ( kg·
bw ) CP)。
1. 4. 3 小鼠精子畸形试验 设 625、 1250和 2500mg /( kg·
bw ) 3个剂量组 , 另设 0. 85% NaCl和环磷酰胺分别作阴性
对照和阳性对照组。
1. 4. 4 骨髓细胞染色体畸变试验 选用昆明种小鼠 , 设
500、 1000和 2000mg / ( kg· bw ) 3个剂量组 , 另设 0. 85%
NaCl (阴性对照 ) 和阳性对照组 ( 30mg / ( kg· bw ) CP)。
1. 5  30天喂养试验 选用 SD大鼠 ,体重 130~ 160g ,将动
物随机分为 4组。设 300、 1200和 5000mg / ( kg· bw ) 3个
剂量组 (分别相当于成人推荐剂量 3g /d· 人的 6、 24和 100
倍 ) 以及蒸馏水对照组。
1. 6 传统致畸试验 健康成熟的未交配 SD大鼠 , 夜间按
雄雌 1∶ 2合笼 , 次日检查是否交配。将查出的 “孕鼠” 随机
分为 4组。设 300、 1200和 5000mg / ( kg· bw ) 3个剂量组
和蒸馏水阴性对照组。
2 结果
2. 1 急性毒性试验
26 现代预防医学 2003年第 30卷第 1期  Modern Prev en tive Medicin e, 2003, Vol. 30, No. 1
2. 1. 1 小鼠急性毒性试验 按前述方法进行实验 , 观察期
14d内 , 雌鼠、 雄鼠均无死亡 , 其对雌雄鼠的 LD50均大于
10000mg /kg体重。
2. 1. 2 大鼠急性毒性试验 按前述方法进行实验 , 观察期
14d内 , 雌、 雄鼠动物死亡情况为 0、 0、 3和 5只 , 死亡时
间为 2~ 5d, 尸解胃内充满受试物 , 未见其它脏器异常。 查
表得 LD50为 9260mg / ( kg· bw ) , 95%可信区间为 6360~
13500mg / ( kg· bw)。
按急性毒性 ( LD50) 分级标准属实际无毒级。
2. 2 遗传毒性试验
2. 2. 1  Ames试验 由表 1可知 , 各剂量组在加与不加 Sg
的条件下每皿回变菌落数均未超过对照组的两倍 ,也不存在
剂量关系。 故按 Ames试验评价标准 , 明日叶保健茶 Ames
试验结果为阴性。
2. 2. 2 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 在所设剂量
2500、 1250和 625mg / ( kg· bw )范围内 , 雄鼠 PCE微核率
为 2. 80‰、 2. 80‰、 2. 40‰与阴性对照 ( 2. 20‰ ) 比较 (i2
检验 ) , 差异无显著性 ( P> 0. 05)。 雌性 PCE微核率为
3. 00‰、 2. 20‰和 2. 60‰ , 与阴性对照 ( 2. 40‰ ) 比较 (i2
检验 ) , 差异无显著性 (P> 0. 05)。 微核试验结果为阴性。
2. 2. 3 小鼠精子畸形试验 在所设剂量 625、 1250和
2500mg / ( kg· bw )范围内 ,所得精子畸形率分别为 2. 35% 、
2. 90% 和 2. 70%与阴性对照 ( 2. 65% )比较 (i2 ) , 差异无显
著性 (P> 0. 05)。
表 1 明日叶保健茶 Ames试验结果 ( x-± s)
剂量组
(μg /皿 )
TA97 T A98 T A100 TA102
- Sg + Sg - Sg + Sg - Sg + Sg - Sg + Sg
0 200± 11 190± 20 33± 8 29± 5 220± 30 235± 40 250± 15 290± 12
10 215± 20 230± 30 27± 5 32± 7 205± 15 250± 30 277± 25 313± 30
50 217± 30 220± 34 29± 8 35± 9 213± 20 218± 27 235± 20 269± 24
250 195± 19 175± 21 25± 5 32± 6 218± 35 254± 33 265± 37 278± 16
1250 209± 31 218± 36 29± 6 27± 7 226± 32 236± 29 242± 24 299± 31
5000 150± 10 170± 30 26± 8 32± 5 219± 14 206± 35 246± 40 278± 46
阳性对照 890± 120 935± 220 420± 230 1580± 180 1080± 120 1350± 300 1430± 150 1750± 210
* 阳性物: - Sg、 TA97、 T A98、 T A100为 4-硝基喹啉氧 ( 0. 5μg /皿 ) , TA102为 M MC ( 0. 5μg /皿 ) , + Sg、 TA97、 TA98、 T A100均为 2-
AF ( 10μg /皿 ) , TA102为顺铂 ( 20μg /皿 )。
2. 2. 4 小鼠骨髓细胞染色体畸变试验 在所设剂量 625、
1250和 2500mg / ( kg· bw )范围内 ,雄性组的骨髓细胞染色
体 畸变 发生 率为 3. 40% 、 4. 00%和 3. 80%与 阴性 组
( 3. 60% ) 比较 (i2 ) , 差异无显著性 (P> 0. 05)。 雌性组为
3. 20% 、 3. 60%和 3. 80%与阴性组 ( 3. 80% ) 比较 (i2 ) , 差
异无显著性 (P> 0. 05)。
2. 3  30d喂养试验
2. 3. 1 动物生长状况及血液学指标的检测 溶剂对照组与
3个剂量组动物在 30d染毒期间 , 摄食、 饮水、 大小便正常 ,
平均增重和平均食物利用率差异无显著性。 对照组和 300、
1200、 5000mg / ( kg· bw ) 3个剂量组平均血红蛋白含量
( g /L) 分别为 128. 0、 129. 5、 129. 2、 127. 4; 白细胞计数
(× 109 /L) 分别为 11. 2、 12. 1、 12. 5、 11. 8; 红细胞计数分
别为 (× 1012 / L) 6. 2、 6. 1、 6. 2、 6. 0。经统计学处理 (t检
验 ) ,各组动物血红蛋白含量 ,白细胞计数及红细胞计数差异
无显著性 (P> 0. 05)。
2. 3. 2 生物化学指标的影响
喂养结束后 , 各组动物的谷丙转氨酶 ( ALT )、 谷草转
氨酶 ( AST )、 白蛋白 /球蛋白比 ( A /G) 及甘油三酯 ( TG)、
总蛋白 ( TP)、 总胆固醇 ( TC)、 血浆葡萄糖 ( GLU ) 等指
标中 ,仅高剂量组的总蛋白 ( TP)与溶剂对照组比较有显著
增加 (F检验 , P < 0. 01) , 肝 TP合成量增加是有益的生物
反应 , 其它各项指标与阴性对照组比较差异无显著性 (P>
0. 05)。 见表 2。
表 2 明日叶茶对大鼠血清生化指标的影响 ( x-± s)
剂量组
( mg. kg - 1· bw )
ALT
( u)
AST
( u)
TG
( mmol /L)
TC
( mmol /L)
GLU
(mmol /L)
A /G
T P
( g /L)
0 70. 1± 12. 1 206± 45. 2 0. 85± 0. 32 2. 05± 0. 20 4. 79± 0. 43 1. 02 63. 2± 3. 1
300 72. 3± 12. 3 215± 38. 8 0. 82± 0. 28 2. 30± 0. 35 4. 78± 0. 33 0. 96 64. 1± 5. 2
1200 74. 4± 11. 5 205± 20. 3 0. 95± 0. 48 2. 22± 0. 26 4. 90± 0. 20 1. 04 62. 8± 3. 8
5000 73. 2± 8. 5 196± 29. 2 0. 83± 0. 36 2. 35± 0. 30 4. 95± 0. 50 1. 05 71. 2± 5. 2*
2. 3. 3 病理学检查
大鼠各剂量组主要脏器系数 (肝、 肾、 胸腺、 心 、 脾
脏 )与溶剂对照组比较差异均无显著性 (P> 0. 05)。在对肝、
肾、 肺、 胃、 肠、 脾脏和腺的组织病理学检查中 , 各剂量组
脏器均未见异常改变。
2. 4 传统致畸试验
各剂量组孕母鼠平均体重和平均增重与阴性组比较差
异均无显著性 (P> 0. 05) ; 各剂量组的平均晚死胎数、 平均
活胎数和平均体重、 平均身长以及外观、 内脏及骨髓畸形率
与阴性组比较差异无显著性 (P> 0. 05) , 见表 3。
3 讨论
按照 《食品安全性毒性学评价程序和方法》的要求 , 我
们对明日叶保健茶的毒性进行了第一、 二阶段的检测和研
27现代预防医学 2003年第 30卷第 1期  Modern Prev en tive M edicine, 2003, Vol. 30, No. 1
表 3 明日叶茶对母鼠胎仔生长发育的影响 ( x-± s)
检查项目 阴性对照组
剂量组 ( mg· kg- 1· bw)
300 1200 5000
已交配鼠 (只 ) 14 13 15 15
受孕母鼠 (只 ) 12 12 12 12
受孕率 (% ) 85. 7 92. 3 80. 0 80. 0
孕鼠平均体重 ( g ) 337. 9± 34. 2 338. 7± 45. 6 348. 7± 29. 5 336. 8± 45. 0
孕鼠平均增重 ( g ) 30. 1± 20. 2 29. 2± 24. 1 32. 1± 22. 5 33. 6± 20. 8
平均晚死胎数 (只 ) 0 0 0 0
平均活胎数 (只 ) 10. 8± 2. 5 11. 5± 4. 3 12. 3± 3. 6 10. 5± 3. 2
平均体重 ( g ) 3. 6± 0. 1 3. 5± 0. 2 3. 6± 0. 1 3. 7± 0. 3
平均身长 ( cm ) 3. 7± 0. 2 3. 6± 0. 1 3. 7± 0. 1 3. 6± 0. 2
外观畸形率 (% ) 0 0 0 0
内脏畸形率 (% ) 0 0 0 0
骨骼畸形率 (% ) 4. 5 4. 8 6. 3 5. 2
究 , 结果表明 , 在本试验条件下 , 对大 、 小鼠的急性毒性为
实际无毒级 ; Ames试验、 微核试验、 小鼠精子畸形试验及
骨髓细胞染色体畸变试验等试验结果均为阴性 ,据此可以认
为其潜在的遗传毒性作用较小 , 在 30d喂养试验中 , 未见引
起大鼠的整体健康状况、生理生化功能和器官组织形态学各
重要指标的异常变化 ;在传统致畸试验中未见发育毒性和致
畸性。
综上所述 , 可以认为 “明日叶保健茶” 在推荐剂量 3g /
( d· 人 )下 , 食用是安全的。为了人群的健康 , 笔者认为 ,可
在保健功能 [2 ]的检测及流行病学调查的基础上早日进行研
制和开发。
[参考文献 ]
[ 1] 中华人民共和国卫生部 .中华人民共和国国家标准 GB15193-
94 [S ] .食品安全性毒理学评价程序和方法 [ A] , 1994.
[ 2 ]严卫星 . 《保健食品功能评价程序和检验方法》的有关技术问题
[ J] .中国食品卫生杂志 , 1999, 11 ( 2): 17-21.
一起由肠炎沙门氏菌引起的食物中毒
王禹国 , 吴才仰 , 潘群慧
[关键词 ]  肠炎 ; 沙门氏菌 ; 食物中毒
[中图分类号 ] R155. 3+ 1    [文献标识码 ] C    [文章编号 ] 1003-8507 ( 2003) 01-0028-01
   2001年 5月 12日 21时柳州市长虹职工医院肠道门诊 ,
接诊市郊石碑坪乡某自然屯一批急性腹泻、 发热病人 , 经我
站及时进行流行病学调查分析 ,证实是一起肠炎沙门氏菌引
起的食物中毒 , 现报告如下。
1 一般情况
2001年 5月 11日 16时 ,村民韦某某为儿子周岁生日举
办宴席三桌 , 当天 16时先吃两桌 , 18时 30分再开一桌 , 主
要食谱为烧鸭、 白切鸡、 扣肉、 焖鱼块、 凉拌粉丝、 凉拌黄
瓜、 米饭 , 就餐人数 41人 , 饭后 2h陆续有人发病 , 直到 13
日 14时发病 29例 , 罹患率 70. 73%。
2 临床表现
潜伏期: 潜伏期最短 2h , 最长为 26h, 平均 13h。 发病
29人。
临床症状: 主要表现为腹泻占 72. 41% , 一般 10次左
右 , 黄色水样便 , 无血色。腹痛占 68. 97% , 腹泻前腹痛加
剧。多有发烧 ( 38~ 41℃ )。头晕占 62. 07% ,头痛占 65. 52%。
部分病人伴畏寒、 恶心、 呕吐 , 29人中 23人住院治疗 , 无
死亡。
3 检验结果
3. 1 血象变化 白细胞总数在 4. 83× 109 /L至 11. 52×
109 /L, 中性占 79. 8% ~ 91. 6% , 淋巴占 7. 9% ~ 19. 2%。
3. 2 细菌培养 对 7例病人粪便培养 , 5例检出肠炎沙门
氏菌 , 检出率 71. 43%。取 19例病人血进行沙门氏菌培养 ,
[作者单位 ] 柳州市卫生防疫站 , 545001
[收稿日期 ] 2001— 12— 29
全为阴性。
3. 3 药敏试验 对粪便培养检出的 5株病原 , 进行药敏试
验: 敏感: 庆大霉素、 氟哌酸、 环丙氟哌酸、 头孢哌酮、 左
氟沙星、 先锋Ⅴ 、 丁胺卡那霉素、 菌必治 ; 中敏: 痢特灵、 氨
苄青霉素 ; 耐药: 氟哌秦、 阿莫西林。
3. 4 对宴席剩余的可疑食物烧鸭、 葱花酱碟、酸黄瓜、凉拌
粉丝进行沙门氏菌培养 ,结果除凉拌粉丝外全部检出肠炎沙
门氏菌。
4 讨论
近年来 , 肠炎沙门氏菌引起聚餐所致的食物中毒 , 全国
各地不断有报道 , 由于经济发展不平衡 , 贫困落后地区受传
统习俗和生活方式影响 ,农村居民点和食品卫生不良的地方
仍然是该病爆发的高危地区。通过调查 , 首次证实广西柳州
市爆发一次因食用被肠炎沙门氏菌污染的烧鸭引起的食物
中毒 , 根据是: 1)从聚餐剩余可疑食物、 病人粪便都检出肠
炎沙门氏菌。 2) 5月 11日 16时烧鸭被先开的两桌 29人基
本吃完 , 结果吃烧鸭的 29人全部发病 , 18时 30分开第三
桌 , 最后 12人因未有烧鸭这道菜吃都未发病。 3) 发病与性
别无关 , 男性 20人发病 13例 , 罹患率 65% , 女性 21人发
病 16例 , 罹患率 76. 19%。i2= 0. 6237, P> 0. 05。 4) 本次
肠炎沙门氏菌食物中毒的急性胃肠炎临床表现 , 畏寒及发
热、 伴头晕、 头痛、 腹痛、 腹泻、 恶心、 呕吐非常典型。病
人用氨苄青霉素、 氟哌酸等全部治愈。 5) 实验室检测特点 ,
有白细胞数升高者 , 19例病人血液沙门氏菌培养全部阴性 ,
与有关报告的血培养大多数为阴性一致。
28 现代预防医学 2003年第 30卷第 1期  Modern Prev en tive Medicin e, 2003, Vol. 30, No. 1