全 文 ：癌变·畸变·突变　　1999年第 11卷第 5期　　　　　　　　　　　　　Carcinogenesi s Teratogenesis and Mutagenesis Vol 11 No 5 1999
野八角致突变作用的研究
阮海星　王子坚　俞　红　吴克枫
贵州省食品卫生研究所　贵阳　550004
摘要　野八角(Illicium Simonsii Maxim)系八角科(Illicium)同属植物。主要分布于贵州西北部地区 ,分布广 , 藏量大。当地
群众用果作腌卤 ,烹调食品的调料。为鉴定这种野生植物的安全性和合理开发的前景 , 我们用野八角果实的全粉对大 、小白
鼠进行了第一阶段的急性毒性试验和蓄积毒性试验 , 其 LD50>5500mg/kgbw 属实际无毒范围和 K>5.3 为弱蓄积。在致突
变试验中 ,我们将野入角水提液和提出的挥发油部分进行了 Ames test , 其中挥发油部分采用了改良的予培养法。同时 ,用野
八角全粉进行了小鼠 PCE 微核试验和小鼠精子畸形试验。表明在该试验中既兼顾了体细胞和生殖细胞 ,体外原核和体内真
核试验 ,结果均为阴性。故认为野八角在目前所测试的条件下 ,无致突变作用。为进一步试验和安全性评价提供了科学的依
据。
关键词　野八角;致突变性;安全性
　　野八角(Illicium Simonsi i Maxim)系八角科
(Ill icium)同属植物 。主要分布于贵州西北部地区 、
分布广 ,藏量大 。全株均有香气 ,当地群众以其果作
烹调食品的调料 。经查阅国内外资料 ,未见该品种食
用和其它有关资料。因此 ,为确保人的食用安全性 ,
我们将提取的挥发油和水提液 ,进行了一系列毒性试
验。根据大 、小白鼠急毒性试验 LD50 >5500mg/
kgbw(1),属实际无毒范围(2),蓄积毒性试验 K >5.3
属弱蓄积 。为合理安全应用该植物资源 ,我们特进行
Ames试验 ,小鼠 PCE微核试验和小鼠精子畸形等试
验。现就致突变试验分述如下:
1　Ames试验
1.1　材料与方法:按改良的 Ames法(3),选用 TA97 、
TA98 、TA100 、及 TA102四菌株 ,分别对野八角水提取
液和挥发油进行加与不加 S9 活化系统进行平板掺入
法试验 ,其中挥发油采用温育(37℃),恒温振荡 20分
钟后的予培养进行掺入法试验。
1.2　样品处理
1.2.1　野八角水提液(1∶2浓缩),试验时用无菌蒸
馏水稀释至所需浓度。
1.2.2　野八角挥发油临用时用二甲基亚砜(DMSO)
稀释至所需浓度。
1.2.3　98%甲基甲烷磺酸酯(MMS),美国产。用
DMSO稀释至所需浓度 ,作不加 S9 活化系统的阳性
诊断剂。2—乙酰氨基芴(2—AAF),用 DMSO 稀释
至所需浓度 ,作加 S9活化系统的阳性诊断剂。
1.3　结果
野八角水提液和挥发油在加与不加 S9 活化系统
后均以空白自发回变菌落数相比 Rt/Rc比值均<2 ,
故未有致突变活性 。结果见表 1。
表 1　野八角水提液和挥发油 Ames test检测结果(Rt/Rc)
测试物 μg/皿 TA97-S 9 +S9 +S9＊
TA98
-S9 +S 9 +S 9＊
TA100
-S9 +S9 +S9＊
TA102
-S9 +S 9 +S 9＊
挥发油
0.2
2.0
20
500
1.25
1.10
1.24
1.35
0.70
0.94
0.90
1.10
0.82
1.22
1.20
1.72
1.20
1.10
1.10
0.90
0.90
1.10
1.10
0.76
1.60
1.45
1.55
0.90
0.85
1.0
0.95
0.95
0.80
0.90
1.0
1.10
1.25
1.45
1.60
1.35
0.88
0.93
0.80
0.78
0.10
0.92
0.88
0.74
1.20
1.05
0.93
0.85
水提液
0.2
2.0
20
500
1.21
1.46
1.13
1.26
1.32
1.35
1.20
1.24
1.25
1.05
1.40
1.60
0.80
1.10
1.30
0.95
1.0
0.85
0.90
0.90
1.15
1.05
1.50
1.25
1.10
1.04
1.08
0.87
1.01
1.02
0.92
0.82
DMSO
2-AAF
MMS
10
40
2
0.96
　
3.41
2.50
0.95
　
1.20
4.30
1.13
　
5.30
1.95
1.21
　
11.10
0.94
注:＊表明+S9 后进行予培养 ,每一剂量均做二次的结果 ,每次 2—3个平皿。Rt/Rc为诱发回变菌落数/自发回变菌落数的比值。
—267—
2　PCE微核试验
2.1　材料与方法:按卫生部《食品毒理安全评价程
序》规定方法进行该试验 。
样品处理:将野八角干果 60℃烘干粉碎 ,150目过筛 ,
用蒸馏水配制成试验所需剂量的混悬液 。
2.2　动物及剂量分组:选用昆明小鼠 ,体重 21—26
克 , 雌雄各半。设 1100mg/kgbw 、2200mg/kgbw 、
4400mg/kgbw ,阴性对照和阳性(环磷酰胺 CP50mg/
kgbw)5个剂量组 。每组 10只 。各剂量组经口给予
受试物 1 次/日 ,连续二日。于第二次给受试物后 6
小时 ,处死动物 ,取骨髓 、制片。每只动物镜检 1000
个嗜多染红细胞 ,并计算微核率。
2.3　结果
所得结果 ,经泊松分布的概率统计 ,除阴性组与
阳性组间有极显著性差异(P <0.01)外 ,其余各剂量
组与阴性组无显著性差异(P >0.05)。故未有染色
体畸变作用。结果见表 2。
表 2　野八角全粉混悬液小鼠 PCE微核检出率(‰)
组　别 动物数(只)
多染红
细胞数
有核
细胞数
微核率
(‰x)
阴 10 10 000 　　 16 　　1.6
阳 10 10 000 241 24.1
1100mg/kgbw 10 10 000 14 1.4
2200mg/kgbw 10 10 000 16 1.6
4400mg/kgbw 10 10 000 11 1.1
3　小鼠精子畸形
3.1　材料与方法:按文献方法(3)进行 。
样品处理:同小鼠 PCE微核试验 。
3.2　动物及剂量分组:选用昆明雄性小鼠 ,体重 26
-30 克 。设 3970/kg.bw , 7940/kg .bw , 15880/kg.
bw ,阴性组和阳性(CP50mg/kg .bw)5个剂量组。每
组 5只 ,各剂量组经口给予受试物 ,每日给其量的 1/
5 ,连续 5日。于第一次给药后的第 35天 ,处死动物 ,
取两侧附睾 ,制片 、镜检。每只小鼠镜检 1000个完整
精子 ,并计算精子畸形率 。
3.3　结果
所得结果 ,经卡方(χ2)分析 ,阴性组与阳性组测
试结果间均有极显著性差异(P <0.01),而与各剂量
组无显著性差异(P >0.05)。故对小鼠精子畸形无
影响作用 。结果见表 3。
表 3　野八角全粉小鼠精子畸形检出率(‰X)
组　　别 动物数(只)
检查
精子数
精子
畸形数
畸形率
(‰)
阴性
阳性
3970mg/ kg.bw
7940mg/ kg.bw
15880mg/ kg.bw
5
5
5
5
5
5 000
5 000
5 000
5 000
5 000
60
180
72
48
70
12
36
14.4
9.6
14
4　讨论
4.1　根据野八角挥发油化学成分分析表明 ,(4)其主
要成分左旋(L)柠檬烯(74%)和月桂烯(9%)。二者
均属单萜类化合物 ,具有较强的挥发性但对此未见相
关资料报道。故在 Ames test 中 ,我们考虑到野八角
挥发油易挥发的特点 ,特采用改良的予培养法进行。
目的是提高某些不稳定化学物质和挥发性物质的灵
敏度 。为野八角的评价提供了较可靠的依据。
4.2　在小鼠 PCE微核和小鼠精子畸形试验中 ,尽可
能考虑到人群的食用习惯 ,故在测试中 ,采用野八角
全粉作受试物 ,给予动物 ,才能较全面反应该植物的
可靠性。本文所选择的致突变试验 ,兼顾了体细胞和
生殖细胞 ,体内真核和体外原核试验 ,其检测结果均
为阴性。但要全面评价其安全性和确定 ADI 等 ,应
进一步实验和寻找有关人群资料 ,才能对此作出较科
学的评价 。
参考文献
1　王子坚等.四川师范大学学报 , 1987;(3):137
2　上海第一医学院主编.食品毒理.北京:人民卫生出版社 , 1978:7
3　黄幸纾等.环境化学物致突变 、致畸 、致癌试验方法.杭州:浙江
科学技术出版社 , 1985;13-30 , 220 , 264
4　阮海星等.中草药 , 1988;19(12):9
(1999-05-18收稿;1999-08-02接受)
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