全 文 ：中图分类号:R996. 2 文献标识码:B 文章编号:1002 － 3127(2012)02 － 0150 － 03 ·安全性评价·
白前和合欢皮提取物小鼠急性经口毒性研究
陈小青，马中春，孙运，虞维娜，龙再浩
(宁波出入境检验检疫局，浙江 宁波 315012)
关键词: 白前;合欢皮;半数致死量
基金项目:浙江省课题(2009F70028)
作者简介:陈小青，硕士，主管医师，研究方向:化学物质毒性。
我国是一个中药提取物的生产大国。中药提取物
已被广泛用于药品、保健品、化妆品等多个领域。但
是，对于中药提取物的毒理研究并不多，很多中药提取
物的 LD50数据无法获得，从而导致毒理学安全性评价
的困难。本文对近期完成的白前(Rhizoma Cynanchi
Stauntonii)和合欢皮(Cortex Albiziae)提取物急性毒性
试验研究进行了汇总，旨为深入研究提供初步的安全
性评价资料。
1 材料与方法
1. 1 实验动物 健康 ICR 小鼠，体重 18 ～ 22 g。每种
中药提取物均使用 40 只 ICR 小鼠，雌雄各半。所有动
物购自浙江省实验动物中心，使用许可证号:SCXK
(浙)2011-0158。SPF 环境饲养，给予全价营养颗粒饲
料。动物自由摄食和饮水。
1. 2 材料 白前和合欢皮提取物均由宁波立华制药
有限公司提供，为水提取物，呈粉末状。主要仪器:
Sartorius—CP8201 电子天平(d = 0. 1 g) ，梅特勒托利
多 AB104 － S(d = 0. 1 mg)
1. 3 实验方法 根据《保健食品毒理学安全性评价
规范》［1］并参照《食品安全性毒理学评价程序和方
法》［2］，采用霍恩氏法进行试验。
1. 3. 1 染毒途径、剂量和灌胃体积:采用经口染毒
途径以 0. 3 ml /10 g 进行灌胃。共设 46. 40、21. 50、
10. 00、4. 64 g / kg 4 个剂量组和 1 个空白对照组，其
中 46. 40 g / kg 剂量组的动物需分 3 次染毒(间隔
4 h) ，21. 50 g / kg 剂量组的动物需分 2 次染毒(间隔
4 h)。
1. 3. 2 染毒程序:染毒前将小鼠禁食 16 h，不限制饮
水。染毒后连续观察 14 d 并记录中毒体征的出现和
消失时间。记录实验动物死亡情况并对其进行解剖观
察。在染毒当天、第 7 天、第 14 天分别称量体重并计算
14 d 增重。第 14 天处死存活动物并进行解剖观察。
1. 4 统计学方法 各组数据以 珋x ± s 表示，各组均数
间差异采用单因素方差分析，剂量-效应关系采用
probit 程序进行分析，剂量与效应之间的相关性采用
spearman 相关性程序进行分析。
2 结果
2. 1 对小鼠一般体征的影响 在给予白前或合欢皮
提取物灌胃后，部分小鼠表现为精神状态不佳，活动减
少。随后，小鼠活动正常。白前提取物染毒后，
46. 4 g / kg组动物中有 20% 出现了腹泻体征。合欢皮
各剂量组中动物在染毒后陆续出现了不同程度的腹泻
和呕吐体征且以 46. 4 g / kg 剂量组最为严重。此外，
46. 4 和 21. 5 g / kg 组动物中有大部分处于嗜睡状态。
连续观察 14 d，所有存活小鼠毛色光洁，未出现其它不
良体征。
2. 2 染毒后动物死亡情况和染毒前后的体重变化情
况 由表 1 可见，染毒后，白前和合欢皮提取物均可导
致数量不等的动物死亡。此外，合欢皮 10. 00 g / kg 剂
量组的雄性动物 14 d 增重与 4. 64 g / kg 剂量组和对照
组比较，差异有统计学意义(P ＜ 0. 01)。其他各组间
差异无统计学意义(P ＞ 0. 05)。
2. 3 对心、肝、胃、脾、肺和肾等脏器的影响 白前给
予后死亡实验动物解剖所见:大部分动物胃和结肠内
有大量内容物，胃内有大量气泡，小肠充盈，肠壁变薄，
肝有充血。其他器官未见异常。合欢皮给予后死亡实
验动物解剖所见:大部分动物胃及小肠高度充盈并有
大量气泡，肠壁变薄，腹腔有少许积液。其他器官未见
异常。试验结束后，处死所有存活动物并解剖，两种提
取物的小鼠心、肝、胃、脾、肺、肾等主要脏器均未见
异常。
2. 4 各中药提取物的 LD50情况 根据各中药提取物
各剂量组的小鼠死亡情况，查表可获知各中药提取物
的雄性和雌性小鼠经口 LD50值(表 2)。
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表 1 各中药提取物染毒后动物死亡及染毒前后的体重变化情况表(珋x ± s)
样品名称 性别 动物数(只)剂量(g / kg) 初始体重(g) 7 d 体重(g) 14 d 体重(g) 14 d 增重(g) 动物死亡数(只)
白前 雄性 5 46. 40 20. 2 ± 1. 2 － － － 5
5 21. 50 20. 3 ± 0. 5 32. 1 ± 1. 5 36. 7 ± 1. 3 16. 7 ± 1. 0 3
5 10. 00 19. 4 ± 1. 0 31. 9 ± 1. 6 34. 9 ± 1. 9 15. 5 ± 1. 8 0
5 4. 64 19. 6 ± 0. 7 32. 3 ± 0. 6 35. 1 ± 1. 6 15. 7 ± 1. 9 0
雌性 5 46. 40 19. 1 ± 0. 7 28. 8 ± 2. 8 31. 3 ± 2. 9 12. 2 ± 2. 5 3
5 21. 50 18. 8 ± 0. 6 28. 4 ± 2. 0 30. 6 ± 1. 7 11. 7 ± 1. 1 1
5 10. 00 19. 2 ± 0. 8 28. 4 ± 1. 7 31. 2 ± 2. 5 12. 1 ± 2. 7 0
5 4. 64 18. 9 ± 0. 6 29. 3 ± 0. 7 31. 2 ± 1. 0 12. 3 ± 1. 4 0
合欢皮 雄性 5 46. 40 19. 3 ± 0. 8 － － － 5
5 21. 50 19. 4 ± 0. 8 31. 3 35. 8 16. 8 4
5 10. 00 21. 8 ± 0. 2 32. 1 ± 2. 7 30. 7 ± 2. 1 8. 9 ± 2. 0＊＊ 0
5 4. 64 20. 0 ± 1. 0 32. 8 ± 1. 9 35. 5 ± 2. 3 15. 5 ± 2. 3 0
雌性 5 46. 40 19. 5 ± 0. 7 － － － 5
5 21. 50 19. 5 ± 0. 6 28. 5 ± 0. 2 32. 3 ± 0. 5 12. 3 ± 1. 1 3
5 10. 00 21. 5 ± 0. 6 28. 1 ± 1. 4 30. 6 ± 2. 3 9. 1 ± 2. 5 1
5 4. 64 20. 2 ± 0. 9 28. 4 ± 0. 5 30. 2 ± 0. 6 10. 0 ± 1. 3 0
对照组 雄性 5 － 19. 6 ± 1. 5 32. 4 ± 2. 1 36. 9 ± 2. 6 17. 4 ± 2. 4 0
雌性 5 － 19. 7 ± 0. 5 28. 8 ± 2. 7 30. 5 ± 2. 1 10. 8 ± 2. 0 0
注:与对照组比较，＊＊P ＜ 0. 01。
表 2 中药提取物 LD50和毒性分级表
样品名称 性别 LD50(mg /kg) (95% CI) 毒性分级
白前 雄性 20000(13700 ～ 29100) 无毒级
雌性 ＞ 21500 无毒级
合欢皮 雄性 17100(12600 ～ 23300) 无毒级
雌性 17100(10500 ～ 27800) 无毒级
2. 5 各中药提取物的剂量-效应分析
2. 5. 1 剂量与效应间的相关性分析:经 spearman 相
关性分析，结果显示，白前的相关系数为 0. 983，合欢
皮的相关系数为 0. 948，白前和合欢皮的剂量和效应
均存在高度正相关(P ＜ 0. 05)。
2. 5. 2 剂量与效应间的回归分析:经 Probit 回归分
析，结果显示，白前和合欢皮均存在明显的剂量-效应
关系(P ＜ 0. 01)。其 Probit 回归方程分别如下:白前:
Probit(P)= － 6. 275 + 4. 355 × lg 剂量;合欢皮:Probit
(P)= － 7. 144 + 5. 801 × lg 剂量。Pearson 拟合度检验
结果显示，上述两模型对数据的拟合均较好(P ＞ 0. 1)。
3 讨论
实验观察发现，在给予白前和合欢皮提取物后，部
分小鼠表现为精神状态不佳，活动减少。随后，小鼠活
动正常。初步考虑为灌胃影响所致。白前提取物在染
毒后，最高剂量组有少数动物出现腹泻体征。在给予
合欢皮提取物后，各剂量组中动物均陆续地出现了腹
泻和呕吐体征且以最高剂量组最为严重。本研究发
现，在大剂量给予白前或合欢皮后，动物大部分死亡，
提示，白前和合欢皮可能有一定的毒性。在给予合欢
皮提取物后，46. 4 和 21. 5 g / kg 组动物中有大部分处
于嗜睡状态，充分表明合欢皮具有镇静安神与催眠作
用，这与相关报道一致［3-4］。但有报道称，合欢皮与许
多中药一样，具有双向调节作用，高剂量 80. 00 g / kg
则显示明显的兴奋作用［3］，不过，这种双向调节作用
在本研究中未能得到体现。
本研究发现，合欢皮提取物 46. 4 g / kg 剂量组动
物全部死亡，21. 5 g / kg 剂量组动物也大部分死亡，这
可能与合欢皮中的合欢素 II 会诱发心律失常有关。
有报道称，从合欢新鲜茎皮中获得的合欢素 II
(JulibrineⅡ)在蛙心脏的 Straub-Fuhner 试验中，即使
很低剂量(＜ 0. 01 μg /ml)也能诱发心率失常［4］。白
前提取物在染毒后，除最高剂量组有少数动物出现轻
微的腹泻体征外，其他各剂量组均未观察到明显的腹
泻体征，这可能与白前具有抗腹泻作用有关，与相关报
道一致［5-6］。本研究结果显示白前对雄性小鼠经口的
LD50为 20000 mg /kg(95% CI 13700 ～ 29100) ，对雌性
小鼠的经口 LD50 ＞ 21500 mg /kg，这与相关报道中的
LD50值比较接近
［6］。
从解剖结果来看，白前和合欢皮提取物主要对消化
系统脏器有所影响。白前所致死亡的动物肝脏有明显
充血体征，提示大剂量给予白前经摄入后，可能会分布
于动物肝脏内从而对动物肝脏造成损伤，同时还提示白
·151·毒理学杂志 2012 年 4 月第 26 卷第 2 期 J Toxicol April 2012 Vol. 26 No. 2
前可能有一定的血管扩张作用。此外，解剖发现，合欢
皮所致死亡的动物中大部分动物胃内和小肠内均有大
量气泡，提示大剂量给予合欢皮后，在体内会大量产气，
这可能与干扰了肠道内的菌群代谢有关。但上述作用
机制还有待于进一步探讨。本研究还对剂量-效应关系
进行了分析，结果发现，白前和合欢皮的剂量和效应均
存在高度正相关且存在明显的剂量-效应关系。
参考文献
［1］ 中华人民共和国卫生部 ．保健食品安全性毒理学评价规
范［M］． 北京:中国标准出版社，2003:17-19．
［2］ 中华人民共和国卫生部，中国国家标准化管理委员会 ．
GB15193. 3 － 2003 急性毒性试验［S］．北京:中国标准出
版社，2003．
［3］ 霍长虹，郝存书，李作平，等 ． 合欢皮水煎剂催眠作用的
药理实验研究［J］． 河北医科大学学报，2002，23(4) :
216-217．
［4］ 蔚冬红，乔善义，赵毅民 ．中药合欢皮研究概况［J］ ． 中
国中药杂志，2004，29(7) :619-624．
［5］ 沈雅琴，张明发，朱自平，等 ． 白前的消化系统药理研究
［J］．中药药理与临床，1996，12(6) :18-21．
［6］ 梁爱华，薛宝云，杨庆，等 ． 白前与白薇的部分药理作用
比较研究［J］．中国中药杂志，1996，21(10) :622-625．
(收稿日期:2011 － 05 － 25)
中图分类号:R994. 1 文献标识码:B 文章编号:1002 － 3127(2012)02 － 0152 － 03 ·安全性评价·
布洛芬注射液单次给药毒性和局部毒性研究
岳鹏，蔡鸣，刘晶，沈姣
(南京工业大学，江苏省药物研究所，江苏省药物安全性评价中心，江苏 南京 210009)
关键词: 布洛芬注射液;单次给药毒性;LD50;局部毒性
作者简介:岳鹏，助理研究员，研究方向:药物安全性评价。
通讯作者:刘晶，副研究员，研究方向:药物安全性评价。
布洛芬(Ibuprofen)是一个较强的前列腺素合成抑
制剂，以其抗炎、解热和镇痛效果确切、不良反应小等
优点被广泛应用，成为全球最畅销的非处方药物之
一［1-3］。在我国第一批非处方西药目录中，布洛芬赫然
位列第一［4］。布洛芬注射液(Caldolor)应用于临床是
从 2009 开始，其上市为疼痛和发热、同时又不方便口
服的患者带来了方便。但国内对 Caldolor 的相关毒理
研究报道较少，本试验对 Caldolor 进行了小鼠单次给
药毒性试验和局部毒性试验，观察其出现的毒性反应，
为 Caldolor 长期毒性试验剂量的设计和其Ⅰ期临床起
始剂量的选择提供参考［5-6］。
1 材料与方法
1. 1 受试药物 Caldolor 由浙江尖峰药业有限公司
提供，批号 101101，为无色澄明液体，布洛芬(C13 H18
O2)含 量 为 102. 0%。溶 媒 对 照 采 用 氯 化 钠 注
射液，由南京小营药业集团有限公司提供，批号
2010070106。
1. 2 动物与分组
1. 2. 1 单次给药毒性实验动物:SPF 级 ICR 小鼠 120
只，雌雄各半。静脉、腹腔每种给药途径各 6 组，每组
10 只动物，雌雄各半，4 ～ 5 周龄，体重 18 ～ 22 g，购于
上海西普尔-必凯实验动物有限公司，动物合格证号为
0041319。
1. 2. 2 局部毒性试验动物:新西兰白兔 4 只，雌雄各
半，体重 2. 1 ～ 2. 5 kg;豚鼠 24 只，雌雄各半，体重
278 ～ 316 g。豚鼠、新西兰白兔均购于南京青龙山动
物繁殖场，动物合格证号分别为 2011567 和 2011573。
SPF 级 BALB / c 小鼠 24 只，雌雄各半，4 ～ 5 周龄，体重
18 ～ 22 g，购于军事医学科学院实验动物中心，动物合
格证号为 0005381;SPF 级 SD 大鼠 24 只，雌雄各半，
6 ～ 8 周龄，182 ～ 217 g，购于上海西普尔-必凯实验动
物有限公司，动物合格证号为 0041322。
1. 3 方法
1. 3. 1 单次给药毒性试验:Caldolor 小鼠静脉、腹腔注
射单次给药预试验设定剂量为 2000、1000、500、250 和
125 mg /kg。两种给药途径 2000、1000 和 500 mg /kg
组的死亡率为 100%，250 和 125 mg /kg 组小鼠未出现
死亡情况。
·251· 毒理学杂志 2012 年 4 月第 26 卷第 2 期 J Toxicol April 2012 Vol. 26 No. 2