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合欢皮与山合欢皮的凝胶蛋白电泳鉴别



全 文 :   中药研究
合欢皮与山合欢皮的凝胶蛋白电泳鉴别
李 洁 ,宋 健
(山东中医药大学 ,山东 济南 250014)
[摘要 ] 目的: 提供合欢皮与山合欢皮的一种新的鉴别方法。方法:采用凝胶蛋白电泳技术对合欢皮与山合欢
皮进行分析。结果: 合欢皮与山合欢皮具有各自的鉴别谱带 ,而且在谱带的级别、分布区域及数量上均有明显的区
别。结论:凝胶蛋白电泳可以作为鉴别合欢皮与山合欢皮的准确可靠的方法。
[关键词 ] 合欢皮 ;山合欢皮 ;凝胶蛋白电泳鉴别
[中图分类号 ] R282. 5    [文献标识码 ] B    [文章编号 ] 1007-659X ( 2003) 01-0070-02
GEL-ELECTROPHORESIS IDENTIFICATION BETWEEN BARK OF SILKTREE ALBIZZIAE AND BARK OF
SILKTREE ALBIZZIAE KALDORA LI Jie , SON G J ian( Shandong Univer sity of TCM , Jinan 250014, China)
[ABSTRACT ] Object ive: T o provide a new identifica tion method between Bark of Silktree Albizziae and Bark of Silk-
tree Albizziae kaldora. Method: The gel-elec tropho resis technique w ere used to analyze. Result: There are differences
on gr ades, reg ions and quantities between patterns of bark of Silkt ree Albizziae and bark of Silktr ee A lbizziae kaldo ra.
Conclusion: The method of gel-electropho resis is an effectiv e method fo r identification of ba rk o f Silktree Albizziae and
ba rk of Silkt ree Albizzia e kaldo ra.
[KEY WORDS ] Ba rk of Silkt ree Albizzia e; ba rk of Silktr ee Albizzia e kaldora; gel-electropho resis identifica tion
[收稿日期 ] 2002-12-09
[作者简介 ] 李洁 ( 1973- ) ,女 ,山东德州人 ,讲师 ,医学硕士 ,主
要从事中药研究。
  中药合欢皮 ( Cortex Albiziae)为豆科 ( legumi-
nosae)植物合欢 Albizia julibrissin Durazz .的干燥树
皮。合欢皮是常用中药 ,具有解郁安神、活血消肿之
功。近代药理学研究表明合欢皮有镇静、催眠、抗早
孕、抗过敏和抗癌等活性。据调查 ,在商品药材中 ,以
同属植物山合欢 A. kalkora ( Roxb. ) Prain树皮代替
合欢皮应用的现象时有发生 ,但 2000年版《中国药
典》只把合欢皮作为正品收载 ,而山合欢皮属于混淆
品。鉴于此 ,本文采用凝胶蛋白电泳技术对合欢皮与
山合欢皮进行凝胶电泳分析 ,提供了鉴别合欢皮与
山合欢皮的依据。
1 实验材料
合欢 Albizia jul ibrissin Dura zz.与山合欢 Albizia
kalkora ( Roxb. ) Prain的树皮采自济南郊区 ,并由
济南市药品检验所鉴定。
2 实验仪器与试剂
DYY-Ⅲ 5型稳流稳压电泳仪 (北京六一仪器
厂 ) , ZYS-100型垂直板电泳槽 , 800型离心沉淀器 ,
微量进样器 ,电热恒温培养箱 ,真空干燥器。
分离胶缓冲液、贮液 ,浓缩胶缓冲液、贮液 ,电极
缓冲液 ,考马斯亮蓝 R250染色液等为实验室自制 ,
所用试剂均为分析纯。
3 实验方法
3. 1 样品的制备 [ 1]
称取合欢皮与山合欢皮各 1g ,加入稀释 4倍的
浓缩胶缓冲液研磨匀浆 ,离心 15min( 2500r /min) ,
取上清液供点样用。
3. 2 电泳
具体操作参见文献 [2, 3]。
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第 27卷 第 1期
2003年 1月
山东中医药大学学报
JOURNAL OF SHANDONG UNIVERSITY OF TCM
Vol. 27, No. 1
Jan. 2003
3. 3 电泳图谱的测绘
根据样品谱带的泳动率、形态、着色度绘制电泳
图谱 ,将图谱分为慢速 ( A)、中速 ( B)、快速 ( C)三个
区 ,分别以涂黑、打点、空白、虚线 4种符号代表电泳
图谱中的一级、二级、三级、四级谱带 ,并按谱带泳动
率的大小编号。样品的电泳图谱和主要鉴别谱带泳
动率参见图 1,表 1~ 2。
图 1 合欢皮与山合欢皮的凝胶电泳图谱
1.合欢皮  2.山合欢皮
表 1 合欢皮与山合欢皮的主要鉴别谱带泳动率
样品 A1 A2 A3 A4 A5 A6 A7 B1 B2
合欢皮 0. 048 0. 080 0. 15 0. 19 0. 25 0. 31 0. 37 0. 42 0
山合欢皮 0 0. 08 0. 13 0 0. 19 0. 25 0 0 0. 42
表 2 合欢皮与山合欢皮的主要鉴别谱带泳动率
样品 B3 B4 B5 B6 B7 C1 C2 C3
合欢皮 0. 46 0. 51 0. 56 0 0. 64 0 0. 72 0
山合欢皮 0. 46 0. 51 0 0. 59 0 0. 67 0 0. 79
4 讨论
电泳图谱显示 ,合欢皮与山合欢皮均来源于豆
科 Albizia属 ,亲缘关系相近 ,因而有着相似的谱带 ,
但仍具有各自的鉴别谱带 ,如合欢皮 B7和山合欢皮
A6、 B4均为各自的特征谱带 ,而且其在谱带的级别、
分布区域及数量上均有明显的区别 ,可以作为鉴别
合欢皮与山合欢皮的准确可靠的方法。
蛋白电泳法鉴别药材 ,是以由基因控制的蛋白
质分子为标准 ,从分子水平上去比较和分析 ,专属性
强 ,分辨率高 ,重现性好 ,尤其为外形相似和亲缘关
系相近的药材的鉴别 ,提供了一种新的有效的鉴别
手段 ,较传统的鉴别方法更先进一步。
[参考文献 ]
[1 ] 石俊英 ,彭艳丽 ,韩宁 ,等 . 16种中药的电泳鉴别研究 [ J ].山东中
医药大学学报 , 1997, 21( 1): 66.
[2 ] 石俊英 ,宋广运 ,刘蕾 ,等 . 12种动物类中药的电泳鉴别研究 [ J].
中草药 , 1993, 24( 4): 201.
[ 3 ] 程金友 ,石俊英 ,吕鹏月 . 穿山甲及其混淆品鉴别与质量研
究 [ J] . 时珍国医国药 , 1999, 10( 10): 758.
信息之窗
胰岛复活理论
美国著名内分泌专家 FA阿罗博士通过临床研究发
现 ,胰岛素分泌不足只是引起糖尿病的表面现象 ,其根本
原因是正常胰岛细胞凋亡所致。胰岛细胞为什么会凋亡?
主要是人体节约性基因变化。意大利医学家特鲁科和斯塔
西在美国匹兹堡大学研究糖尿病时发现:当人体节约性基
因发生变化 ,免疫功能下降时 ,胰岛细胞内会出现一种一
氧化氮 ,这种一氧化氮能触发细胞表面一种分子受体变
异 ,造成胰岛细胞凋亡。实验证明 , 2型糖尿病人在 35岁以
后 ,每 5年胰岛素衰减率上升 10%以上 ,使得正常胰岛细胞
分泌的胰岛素满足不了机体需要。所以治疗糖尿病必须从
增加正常胰岛细胞数量入手 ,才能从根本上治愈糖尿病及
其并发症。FA阿罗博士上世纪首创性地提出治疗糖尿病
的国际最新 “胰岛复活理论” ,认为通过加速胰岛细胞修
复、再生 ,实现胰岛活跃 ,使正常细胞数量增加 ,而达到分
泌出机体需要的足够胰岛素来治疗糖尿病 ,患者自然康
复。这一发现轰动了整个国际医学界 ,突破了过去医学界
治疗糖尿病仅仅从体外补充胰岛素或刺激胰岛分泌胰岛
素从而降低血糖的认识局限。
这一理论与中医治疗糖尿病原理不谋而合。祖国医学
认为 ,糖尿病的发病机制是气阴两虚 ,脾失健运而导致整
体的气滞血瘀 ,这是糖尿病并发症多且重的关键因素。因
此 ,防治糖尿病应从整体入手 ,进行标本兼治 ,使患者在降
糖的同时 ,尽快纠正代谢紊乱 ,提高免疫力 ,增强体质 ,改
善节约性基因 ,促进胰腺各类细胞的再生 ,协调行使功能 ,
使胰岛细胞正常分泌功能重新建立 ,调节胰岛受体数目及
其亲和力 ,使胰岛功能得到修复 (即胰岛复活 ) ,从而达到
使患者解除对药物依赖的目的。
(摘自《健康报》 2002年 11月 12日 4版 ) 
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2003年 1月           李洁等: 合欢皮与山合欢皮的凝胶蛋白电泳鉴别          第 27卷第 1期