全 文 ：收稿日期:2007-11-20;　修订日期:2008-03-28
基金项目:广西科学研究与技术开发计划项目(桂科攻 0630002-1G)
作者简介:陈　路(1979-),男(壮族),广西南宁人 ,现任广西药用植物园
助理讲师 ,主要从事中药化学实验工作.
小叶榕浸膏质量标准研究
陈　路 1 , 蓝鸣生1 , 李永玺 2
(1.广西药用植物园 ,广西 南宁　530023;　2.广西中医学院 ,广西 南宁　530001)
摘要:目的 建立更加科学 、严谨的小叶榕浸膏质量标准。方法 采用薄层色谱法对浸膏的小叶榕药材进行鉴别;采用灰
分测定法测定浸膏的无机盐含量;采用浸出物测定法测定浸膏 80%乙醇浸出物含量;采用分光光度法测定浸膏的总黄酮
含量。结果 建立了小叶榕浸膏更加安全 、科学的薄层色谱鉴别方法;制订了浸膏灰分和 80%乙醇浸出物的控制标准;建
立了浸膏总黄酮含量测定方法 , 该法的总黄酮加样平均回收率为 98.54%, RSD为 0.84%。结论 实验所建立的小叶榕浸
膏质量标准更加安全 、科学 、可靠 。
关键词:小叶榕;　浸膏;　质量标准
中图分类号:R284.1　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2009)01-0078-02
AStudyonQualityStandardfortheExtractsofHerbaFicus
CHENLu1 , LANMing-sheng1 , LIYong-xi2(1.GuangxiBotanicalGardenofMedicinalPlants, Nanning530023, China;2.GuangxiTraditionalChinese
MedicalUniversity, Nanning530001, China)
Abstract:ObjectiveToestablishamorescientificandstrictqualitystandardfortheextractsofHerbaFicus.MethodsThin
layerchromatography(TLC)wasusedtotesttheingredientsofHerbaFicusintheextracts.Ashdeterminationwasusedtodeter-
minetheproportionofsaltsintheextracts.Extractsdeterminationwasusedtodetermine80% ethanolextractsintheextracts.
Spectrophotometrywasusedtodeterminethetotalflavonoidsintheextracts.ResultsAsaferscientificTLCfortheextractswas
established.Thedeterminationsofashand80% ethanolextractswereestablished.Thetotalflavonoidsdeterminationfortheex-
tractsestablished, andtheaveragerecoveryofthemethodwas98.54% , RSDwas0.84%.ConclusionThenewqualitystandard
fortheextractsofHerbaFicusissaferscientificandmorereliable.
Keywords:HerbaFicus;　Extract;　Qualitystandard
　　临床上常将小叶榕浸膏用于咳嗽 、哮喘 、支气管炎等多种疾
病的治疗 [ 1, 2] , 以其为主要原料的产品 -咳特灵片 、咳特灵胶囊 ,
由于疗效确切已被卫生部药品标准所收载 [ 3] , 目前全国生产企
业达 210家以上。
到目前为止 , 小叶榕浸膏仍然执行《卫生部药品标准》(中药
成方制剂)第 14册 [ 3] “咳特灵片”项下的标准内容。 根据作者十
多年小叶榕浸膏产品的生产 、采购经验发现:现行的小叶榕浸膏
标准存在以下严重缺陷:①没有含量控制指标;②对水溶性无机
盐类杂质的控制水平较低;③薄层层析控制指标不够准确。本文
结合以上问题开展研究 ,并提出了更加安全 、严谨的小叶榕浸膏
质量控制指标。
1　材料
1.1　仪器 WFZUV-2102型分光光度计(上海优尼柯仪器有限
公司);1/10万电子分析天平(GR-202, A＆D日本);ZF-I型三
用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)等。
1.2　试剂 芦丁对照品:中国药品生物制品检定所 , 批号:
100080-200306;小叶榕标准对照药材:中国药品生物制品检定
所 , 批号:121280-200503;甲醇 、硝酸铝 、氢氧化钠 、亚硝酸钠等
均为分析纯。
1.3　小叶榕浸膏 由广西药用植物园制药厂用广西 10个不同
产地小叶榕药材按 《卫生部药品标准》(中药成方制剂)第 14
册 [ 3] “咳特灵片”项下的标准生产 , 具体编号如下:1号隆安县;2
号鹿寨县;3号靖西县;4号玉林市;5号蒙山县;6号南宁市;7号
田林县;8号天等县;9号桂林市;10号凤山县。
2　方法与结果
2.1　外观性状研究 对 10个不同产地药材生产的浸膏进行观
察 , 结果为棕褐色稠膏 ,味微苦 ,水分测定平均值为 34.5%。
2.2　薄层层析实验
2.2.1　样品溶液制备 取本品 1.5 g, 加水 30 ml, 加热使溶解 ,
置分液漏斗中 ,用醋酸乙酯提取两次 , 30 ml/次。取醋酸乙酯层 ,
蒸干 , 残渣加乙醇 1 ml使溶解 ,即得。
2.2.2　对照药材溶液的制备 取小叶榕对照药材 20 g, 加水煎
煮两次 , 150 ml/次 ,合并煎液 , 滤过 , 滤液浓缩至 30 ml加乙醇使
含乙醇量达 85%, 静置 ,吸取上清液 ,置水浴上蒸干 , 残渣加水 30
ml溶解 ,置分液漏斗中 , 用醋酸乙酯提取两次 , 30 ml/次 , 取醋酸
乙酯液 ,蒸干 ,残渣加 1 ml乙醇溶解 , 即得。
2.2.3　薄层色谱鉴别 照薄层色谱法 [ 4] , 吸取上述两种溶液各
10 μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以甲苯 -醋酸乙酯(8∶7)
为展开剂 ,展开 , 取出 , 晾干 , 置紫外灯(365 nm)下检视 , 供试品
色谱中 ,与对照药材色谱相应 Rf值位置上有 1个以上相同颜色
的荧光斑点 , 但对照药材展开前沿部分的红色斑点在浸膏色谱中
未见。见图 1。
a:对照药材;b:1号;c:2号;d:3号;e:4号;
f:5号;g:6号;h:7号;i:8号;j:9号;k:10号
图 1　10批小叶榕浸膏薄层层析结果图
2.3　干浸膏浸出物测定 将浸膏在 100℃干燥到恒重后 , 按《中
国药典 》 2005版Ⅰ部附录 XA浸出物测定法的热浸法操作 , 80%
乙醇为溶剂 ,结果 10批干浸膏的 80%乙醇平均浸出物含量为
82.15%(最低为 79.13%)。
2.4　灰分测定 将浸膏在 100℃干燥到恒重后 , 按灰分测定法 [ 4]
操作 , 结果 10 批样品的平均总灰分 为 10.20%(最高值
12.31%),平均酸不溶灰分为 2.80%(最高值 3.61%)。
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 1期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.1　
2.5 　总黄酮含量测定方法
2.5.1　对照品溶液的配制 精密称取 105℃干燥至恒重的芦丁
对照品 0.0187 g,置 10ml量瓶中 ,加甲醇溶解并定容 ,精密量取
5 ml,置 50 ml量瓶中 , 加甲醇定容 、摇匀 , 配成浓度为 0.187 mg/
ml的芦丁对照品溶液。
2.5.2　样品浓配液的配制 精密称取 1号浸膏 0.126 0 g, 加甲
醇 45ml;回流提取 1h, 放冷 、滤纸过滤到 50 ml量瓶中 , 用少量
甲醇洗涤残渣 , 洗涤液过滤并入量瓶中 , 加甲醇定容 , 摇匀 , 作为
样品浓配液。
2.5.3　测定波长的确定 取芦丁对照品溶液 4.0 ml, 置 25 ml
量瓶中 ,加水 6 ml,加 5%亚硝酸钠溶液 1ml,摇匀 , 放置 6 min,加
10%硝酸铝溶液 1 ml,摇匀 , 放置 6 min, 加氢氧化钠试液 10 ml,
加水定容 、摇匀 ,放置 15min后在 200 ～ 700 nm处扫描记录吸收
图谱 , 结果在 510nm处有平滑的吸收峰 , 故采用 510 nm作为测
定波长。
2.5.4　线性范围考察 精密吸取芦丁对照品溶液 1, 2, 3, 4, 5, 6
ml, 分别置 25 ml容量瓶中 , 按 “ 2.5.3”项下显色后 , 以相应试剂
为空白 , 按照分光光度法在 510 nm波长处测定吸收度 ,以吸收度
为纵坐标 , 浓度为横坐标进行线性回归 , 得回归方程为:Y=
11.51X+0.003 8, r=0.999 8。结果见表 1。
表 1　对照品线性范围测定结果
测定序号 对照品浓度 l/mg·ml-1 吸收度
1 0.007 5 0.089
2 0.015 0 0.174
3 0.022 4 0.265
4 0.029 9 0.349
5 0.037 4 0.436
6 0.044 9 0.518
2.5.5　精密度考察 精密量取对照品溶液 6份 , 每份 4 ml置 25
ml量瓶中 ,按 “ 2.5.3”项下方法操作 , 从 “加水 6 ml”起制备样品
并测定吸收度 , 结果见表 2。结果表明测定精密度良好。
表 2　精密度实验结果
序号 A510nm 510nm平均吸收度 RSD510nm(%)
1 0.321
2 0.320
3 0.323 0.322 0.54
4 0.324
5 0.320
6 0.323
2.5.6　稳定性考察 精密量取样品浓配液 5 ml,置 25 ml量瓶
中 , 按 “ 2.5.3”项下方法操作 ,从 “加水 6 ml”起制备样品后 ,分别
于 0, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40min时测定吸收度 ,结果见表 3。
表 3　测定方法稳定性实验结果
序号 放置时间t/min A510nm
510nm平均
吸收度
RSD
(%)
1 0 0.382
2 10 0.380
3 15 0.378
4 20 0.376
5 25 0.373 0.373 1.92
6 30 0.368
7 35 0.366
8 40 0.362
说明本方法在 40min内稳定性良好。
2.5.7　重复性考察 平行精密称取 1号浸膏 6份 , 每份约 0.12
g, 按 “ 2.5.2”项下方法配制样品浓配液 ,精密量样品浓配液 5 ml
置 25 ml量瓶中 , 按 “ 2.5.3”项下方法操作 , 从 “加水 6ml”起制备
样品并测定吸收度 , 结果见表 4。
2.5.8　加样回收率实验 精密称取精密称取 105℃干燥至恒重
的芦丁对照品 0.018 9 g, 按 “ 2.5.1”法配制成浓度为 0.189 mg/
ml的对照品溶液。
取重复性实验制备的样品浓配液 , 各精密量取 2.0 ml, 置 25
ml量瓶中 ,精密加入上述芦丁对照品溶液 2.0 ml, 按 “ 2.5.3”项
下方法操作 ,从 “加水 6 ml”起制备样品并测定吸收度 ,推算总黄
酮含量 。结果见表 5。
表 4　重复性实验结果
序号 取样量m/g
A510nm
值
样品浓度 C
/mg· ml-1
样品含量 C
/mg· g-1
平均样品含
量 C/mg· g-1
RSD
(%)
1 0.263 0 0.387 0.033 3 65.900 2
2 0.125 7 0.373 0.032 1 63.795 7
3 0.125 2 0.369 0.031 7 63.356 5 64.801 1.81
4 0.126 2 0.385 0.033 1 65.608 2
5 0.126 0 0.384 0.033 65.540 0
6 0.126 0 0.383 0.032 9 65.367 6
表 5　加样回收实验结果
序号 溶液总黄酮量 m/mg
加入芦丁
量 m/mg A510nm
测得总黄
酮量m/mg
回收总黄
酮量m/mg
回收率
(%)
平均回收
率(%)
RSD
(%)
1 0.333 0.378 0.326 0.699 8 0.376 8 99.68
2 0.321 0.378 0.323 0.693 3 0.3723 98.49
3 0.317 0.378 0.323 0.693 3 0.376 3 99.55
4 0.331 0.378 0.327 0.702 0 0.371 0 98.15 98.54 0.84
5 0.330 0.378 0.326 0.699 8 0.369 8 97.83
6 0.329 0.378 0.325 0.6977 0.3687 97.53
2.5.9　10批样品总黄酮含量测定 取 10批样品约 0.12 g,精密
称定后按 “ 2.5.7”项下方法测定吸收度 , 推算各样品总黄酮含量
测定结果 ,结果见表 6。
表 6　10批小榕叶浸膏总黄酮含量测定结果
批号 取样量 m/g A510nm 样品浓度C/mg· ml-1 样品含量 C/mg· ml-1
1 0.126 0 0.382 0.032 9 65.195 2
2 0.126 3 0.225 0.019 2 38.040 5
3 0.127 5 0.273 0.023 4 45.859 5
4 0.127 8 0.208 0.017 7 34.704 8
5 0.126 9 0.183 0.015 6 30.671 9
6 0.128 0 0.168 0.014 3 27.863 0
7 0.125 1 0.260 0.022 3 44.482 2
8 0.125 2 0.171 0.014 5 29.006 6
9 0.126 3 0.197 0.016 8 33.225 3
10 0.128 0 0.228 0.019 5 38.044 4
平均值 38.71
　　样品平均总黄酮含量为 38.71mg/g,最低为 27.86mg/g
3　讨论
通过样品观察和水分测定实验 ,浸膏的外观和水分仍然符合
原标准的规定 , 故小叶榕浸膏外观性状的描述仍然执行原有
标准。
通过 TLC实验 , 证明可用甲苯取代苯做展开剂 , 降低了毒
性。结果表明 , TLC鉴别的正确描述应为:在 365 nm紫外灯下 ,
供试品色谱在与对照药材相同 Rf位置上有一个以上相同的荧光
斑点。特别要强调 , 对照药材在紫外灯下出现在前沿的红色斑
点 , 在浸膏中是无法出现的。
通过浸出物实验 , 10批样品的 80%乙醇平均浸出物含量为
82.15%(最低为 79.13%),故初步制订 80%乙醇平均浸出物(按
干浸膏计 ,下同)不得少于 75.0%。
通过灰分实验 , 10批样品的平均总灰分为 10.20%(最高值
12.31%),平均酸不溶灰分为 2.80%(最高值 3.61%), 故初步制
订浸膏总灰分不得过 13.00%,酸不溶灰分不得过 4.50%。
通过总黄酮含量测定实验 , 10批样品的平均总黄酮含量为
38.71mg/g, 最低为 27.86 mg/g,故初步确定 , 浸膏的总黄酮含量
按无水芦丁(C27H30O16)计 ,不得少于 25.00mg/g。
本课题的实验数据 ,可作为现行的小叶榕浸膏质量标准修订
提高的重要依据。
参考文献:
[ 1 ] 　江苏新医学院.中药大辞典(下册)[ M] .上海:上海科技出版社 ,
1988:2529.
[ 2 ] 　国家中医药局《中华本草 》编委会.中华本草 ,第 2册 [ M] .上海:上
海科技出版社 , 1999:495.
[ 3 ] 　中华人民共和国卫生部药政局.中华人民共和国卫生部药品标准 ,
中药成方制剂 ,第 14册[ S] .1997:108, 110.
[ 4 ] 　国家药典委员会.中国药典 ,一部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005:附录 Ⅵ B, Ⅸ K.
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2009VOL.20NO.1 时珍国医国药 2009年第 20卷第 1期