全 文 :文章编号:1004-5422(2010)01-0020-02
不同品种苦荞中黄酮含量的测定
彭镰心1 , 赵 钢1 , 王 姝2 , 马育彪3
(1.成都大学 生物产业学院 , 四川 成都 610106;2.四川农业大学 生命科学与理学院 , 四川 雅安 625014;
3.西华大学 生物工程学院 , 四川 成都 610039)
摘 要:采用分光广度法对不同品种苦荞中黄酮含量进行检测 , 样品通过显色后在 500nm 下直接测定.通过对
17种不同品种苦荞麦的黄酮含量进行测定 , 发现美姑苦荞的黄酮含量最高 , 达 2.40%, 选荞 1 号次之 , 为
2.35%,而川荞 1 号最低 , 仅为 1.54%.此方法操作简单易行 , 结果稳定可靠.
关键词:苦荞麦;黄酮;测定
中图分类号:TS211.2 文献标识码:A
0 引 言
苦荞属蓼科荞麦属的双子叶谷类作物 , 它是食
药作物 , 具有很高的营养和药用价值.苦荞中含有
大量的黄酮类化合物 , 现代医学研究证明荞麦具有
抗氧化 、降血糖 、降血脂 、抗肿瘤等多种药理活
性[ 1] .目前 , 对苦荞黄酮类化合物的研究多集中在
提取方法和含量测定上[ 2-7] .本文利用实验室丰富
的荞麦资源 , 用分光光度法测定了 17种不同品种
苦荞中黄酮的含量 , 为苦荞品种的选择提供了重要
的参考.
1 实验部分
1.1 仪器与试药
1.1.1 仪 器.
实验所用仪器包括:SHZ-82型水浴恒温振荡器
(金城国胜实验仪器厂),KH 3200型超声波清洗器
(昆山干创超声仪器有限公司),WFJ7200型可见分
光光度计(尤尼柯仪器有限公司).
1.1.2 试 药.
实验所用试药包括:芦丁对照品(购自曼思特生
物科技有限公司),其他试剂均为分析纯.苦荞均采
自成都大学苦荞种植基地 ,并经赵钢教授鉴定.
1.2 实验方法与结果
1.2.1 溶液的制备.
称取干燥后的苦荞粉约 1 g(过 60目 , 60 ℃烘 6
h),精密称定 ,置锥形瓶中 ,精密加入 50 mL 75%的
乙醇溶液 ,称定重量 ,中速振荡 3 h ,取出静止 ,放至
室温 ,称定 ,用 75%乙醇补足重量.过滤 ,取续滤液
得供试品溶液.
精密称取芦丁对照品适量 ,加 75%乙醇溶解制
成每 1 mL约含 0.312 mg 的溶液作为对照品.
1.2.2 线性范围确定[ 2] .
分别准确量取 2.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0 mL 对照
品溶液于 25 mL 容量瓶内 , 准确加入 0.7 mL 5%
NaNO2 ,再加入 0.7 mL 10%Al(NO3)3 ,混合 10 min
后 ,加入 5.0 mL 1 mol L NaOH ,用 75%乙醇定容至
25mL ,以相应溶剂作参比 ,在 500 nm处测定吸光度
值 ,得回归方程:y =0.0011x-0.0289(r=0.9997).
结果表明 ,芦丁在 24.96 ~ 124.80μg·mL-1范围内与
吸光度线性关系良好.
1.2.3 黄酮测定方法.
分别称取苦荞粉约 1 g ,精密称定 ,置锥形瓶内 ,
按“1.2.1”项下方法制备供试液 ,精密量取续滤液
4 mL至25 mL 的锥形瓶中 ,按“1.2.2”项下自“加入
0.7 mL 5%NaNO2”起依法操作 ,测定吸光度 ,在标
准曲线上读取并计算黄酮含量.
1.2.4 精密度试验.
称取选荞 1号种子细粉 1 g ,精密称定 ,按“1.2.
1”项下方法制备供试液 ,按“1.2.3”项下方法操作 ,
连续测定吸光度6次 , RSD值为1.09%.表明仪器精
密度良好.
1.2.5 重复性试验.
分别称取选荞 1号种子细粉 1 g ,共 6 份 ,精密
称定 ,按“1.2.1”项下方法制备供试液 ,按“1.2.3”项
下方法操作 ,分别测定吸光度值 ,计算总黄酮含量 ,
收稿日期:2009-12-20.
基金项目:成都大学 2009 年校科技基金资助项目(2009XJZ05).
作者简介:彭镰心(1981 — ), 男 , 硕士 , 从事中药质量标准研究.
RSD值为 1.81%,说明重复性良好.
1.2.6 稳定性试验.
称取选荞 1号种子细粉 1 g ,精密称定 ,按“1.2.
1”项下方法制备供试液 ,按“1.2.3”项下方法显色 ,
分别在 0 、10 、20 、30 、40 、50 min测定吸光度值 ,计算
总黄酮含量 , RSD值为 1.39%,表明样品显色后在
50 min内稳定.
1.2.7 回收率试验.
称取已知含量的选荞 1号细粉 0.5 g ,共 6份 ,
精密称定 ,加入一定量对照品于 25 mL的容量瓶 ,按
“1.2.1”项下方法制备供试液 ,按“1.2.3”项下方法
测定黄酮含量 ,回收率为 96.7%,RSD为1.29%.
1.2.8 样品黄酮含量测定.
分别称取 17种苦荞麦细粉约 1 g ,精密称定 ,置
锥形瓶内 ,按“1.2.3”项下方法操作 ,分别测定并计
算苦荞中黄酮含量 ,结果见表 1.
表 1 不同品种苦荞黄酮含量测定结果
实验序号 苦荞品种 黄酮含量 %
1 九江苦荞 2.08
2 苦 刺 荞 2.21
3 昭苦1号 2.15
4 云南旱苦 2.17
5 川荞1号 1.54
6 选荞1号 2.35
7 威 9 3 -8 2.24
8 额 吉 2.08
9 云南花荞 2.11
10 额 果 2.10
11 老鸦苦荞 2.06
12 西荞1号 2.04
13 西昌1号 2.16
14 额角瓦齿 2.06
15 滇宁1号 2.15
16 额 拉 2.15
17 美菇苦荞 2.40
由表 1可知 ,在所选的苦荞资源中.美姑苦荞的
黄酮含量最高 ,达 2.40%,选荞 1号次之 ,为2.35%,
而川荞 1号最低 ,仅为 1.54%.
2 讨 论
目前黄酮提取方法较多[ 3-7] ,本实验对震荡提
取 、超声提取 、索氏提取进行了比较 ,结果表明采用
震荡浸提方法为最佳.同时 ,对震荡浸提的提取时间
做了进一步考察 ,时间为:2 h 、3 h 、4 h 、5 h ,结果显示
震荡提取 3 h黄酮基本提取完全.选荞 1号是成都
大学赵钢教授培养的新品系 ,从实验结果可知其黄
酮含量较高(2.35%),仅次于美姑苦荞黄酮的含量
(2.40%),故具有进一步推广价值.
参考文献:
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[ J] .华北工学院学报 , 2002 , 23(2):130-132.
Content Determination of Total Flavone
in Different Varietis of Buckwheat
PENG Lianxin
1 , ZHAO Gang1 , WANG Shu2 , MA Yubiao3
(1.School of Bioindustry , Chengdu University , Chengdu 610106 , China;
2.School of Life Sciences and Natural Sciences , Sichuan Agricultural University , Ya an 625014, China;
3.School of Bioengineering , Xihua University , Chengdu 610039 , China)
Abstract:To determine the content of flavanone in different varieties of buckwheat , using spectropho-
tometer , samples were directly determined after coloration at the wavelength of 500 nm.After the determi-
nation of seventeen varieties of buckwheat , the findings show that Meigu buckwheat has the highest fla-
vanone which is 2.40%;the content of flavanone in No.1 Xuan buckwheat is 2.35%;No.1 of Sichuan
buckwheat has the lowest content with a percentage of 1.54%.This method is proved simple and conve-
nient in operation;stable and reliable in findings.
Key words:Buckwheat;flavanone;determination
·21·第 1期 彭镰心 ,等:不同品种苦荞中黄酮含量的测定