全 文 ：理论研究
281BIOTECHWORLD 生物技术世界
生物技术
世界
山竹又称山竹子、凤果,属藤黄科藤黄属杂交异源多倍体果树,
富含多种营养物质,被誉为“果中皇后”,果实部分占29%～45%,其中
柠檬酸占0.63%、维生素C含量12mg/kg、有机酸占0.63%,还富含蛋
白质、脂肪等多种物质[1]。现代中医认为山竹性偏寒凉,可治虚火上
升、声音沙哑,是一种食疗果实,泰国传统医药以山竹治疗腹痛、腹
泻、痢疾、化脓、慢性溃疡等多种疾病,现代药理学证实山竹具有抗
炎、抗肿瘤、抗菌活性[2-3]。本次研究试分析山竹提取物有效成分、多
糖构成,以供借鉴。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
山竹果壳,购自附近市场。仪器:BS自动部分收集器、系列层析
柱、旋转蒸发器、循环水式多用真空泵、全自动光电分析天平、可见
分光光度计、恒温水浴锅、电子天平、4℃冰箱、超声波清洗器、恒流
泵、分散机、核磁共振仪等。试剂:三合水乙酸钠、冰醋酸、盐酸、硫酸、
三氯化铁、硫酸亚铁、卵磷脂、硫酸二氢钠、硫酸氢二钠、三氯乙酸、水
杨酸、TPTZ、DPPH、BHT等分析纯,D1010大孔吸附树脂、硅胶G等。
1.2 方法
精确称取山竹果壳碎末10g各5份,分别以甲醇、95%乙醇、60%
乙醇、丙酮回流提取,料液比1:10,50℃,两次提取,均为2h,又取新
鲜山竹果肉800g干燥至恒重,同法提取。制得芦丁对照品标准液,绘
制芦丁标准曲线为y=1.004x-0.0018,R2=0.9996,以该公式计算萃
取物含量水平。制得没食子酸标准品溶液,绘制标准液浓度和吸光
度回归方程y=98.653x-3.1132,R2=0.9955,配置100μg/ml溶液。
测定山竹果壳、山竹果肉干燥粉末,以95%乙醇溶液热回流浸提5h,
过滤、回收容积,2次,进行多次硅胶柱层析、薄层层析、重结晶、凝胶
柱层析分析,得到单体化合物。最后,测定粗多糖含量,取经105℃干
燥至恒重分析纯葡萄糖20mg,溶于蒸馏水,定容500ml,绘制标准曲
线,样品加入适量水稀释至标准浓度范围,取稀释液1ml测定吸光光
度,计算多糖含量。提取多糖,以乙醇沉淀法分级多糖,进行色谱分
离纯化,并进行多糖均一性鉴定、组成结构分析。
2 结果
2.1 山竹提取物
山竹果壳经反复分离纯化,有一个单体化合物。为黄色粉末,溶
于氯仿、丙酮,紫外灯下见黄色荧光斑点,给出410.35[M＋＋]峰,经
H-NMR谱、C-NMR谱鉴定,确定为C24H26O6。H-NMR(CDC13)
给出5个-CH3信号,高场处存在4个-CH3峰。C-NMR(CDCl3)存
在24个碳信号,低场182.0显示分子中存在羟基,低场化学位移161-
93出现16个信号峰,结构中存在苯环或双键,在62.0出见连氧碳,高
场见6个碳信号。该化合物为α-倒捻子素。
取果品样品10g各5份,测的总黄酮含量分别为6.01%、6.56%、
6.43%、6.21%、6.83%,平均6.43%。山竹果肉总未见在检测范围内总
黄酮。
2.2 山竹多糖
山竹水溶性多糖,经30%、80%、95%乙醇沉淀,经DEAE阴离子交
换分析、凝胶过滤层析后,获得两类样品,含量分别为27.6%、28.0%、
27.1%、26.8%、27.9%,均值为27.48%,经过滤色谱、电泳技术、紫外
线可见光谱检测,为水溶性多糖。气相色谱分析为葡萄糖、葡萄糖醛
酸、果糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖。主要多糖成分见下表1。
3 讨论
山竹主要分为果壳、果肉两个组成部分,本次研究中果壳中有
效成分为总黄酮,果肉中有效成分为多糖。研究显示,果皮中总黄酮
含量为6.13%(干燥物),果肉中多糖含量为27.48%,成分分析显示其
中葡萄糖占比最大,其次为果糖,再次为葡萄糖醛酸,还含有少量的
木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖,因单体含量较少,具体比重尚不清
楚,且这些多糖分离、提纯较困难。山竹综合利用产业发展较慢,果
肉主供食用,其富含的多糖有助于满足机体对多种多糖的需要,果
壳为主要山竹产品主要可利用肥料,果壳中总黄酮具有药学价值尚
不清楚,有报道称山竹壳中总黄酮可用于心血管病防治,但未被临
床研究证实,今后实验应积极研发山竹壳总黄酮提取工艺,为后续
实验奠定基础[3]。
参考文献
[1]刘世彪,彭小列,田儒玉.世界热带五大名果树[J].生物学通报,
2003,3(3):11-13.
[2]沈杰,杨峻山.云南山竹子果实的化学成分[J] .中国新药杂志,
2006,9(4):221-223.
[3]龙云飞,龙丽群,杨克迪.山竹果皮提取物抗氧化活性的研究[J].食
品工业科技,2010,31(6):128,269.
山竹提取物有效成分测定及其多糖组成分析
李娥 董润璁
(海南医学院海南省药物安全性评价研究中心 海南海口 571199)
摘要:目的:测定山竹提取物有效成分,并分析多糖组成。方法:精确称取山竹果壳碎末10g各5份,回流提取,又取新鲜山竹果肉800g干燥至恒重,同法
提取,绘制芦丁标准曲线,绘制没食子酸标准曲线,绘制葡萄糖标准曲线,果壳与果肉进行多次硅胶柱层析、薄层层析、重结晶、凝胶柱层析分析,计算果肉
内多糖含量、果壳中总黄酮含量。结果:果壳中总黄酮含量为6.43%,山竹果肉中含有葡萄糖、葡萄糖醛酸、果糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖。结论:总
黄酮是山竹提取物主要有效成分,果肉中富含多种多糖。
关键词:山竹 有效成分 多糖
中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1674-2060(2015)11-0281-01
表 1 酸溶性与碱溶性多糖成分对比
类型 葡萄糖 果糖 葡萄糖醛酸 木糖 阿拉伯糖 鼠李糖 半乳糖
酸溶性多糖 54.8% 18.4% 11.3% 4.3% - - -
碱溶性多糖 84.3% - 13.5% - - - -
注:-含量不确定或不溶。