全 文 ：第４４卷　第１１期
２０１６年１１月
西北农林科技大学学报（自然科学版）
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔ．Ｓｃｉ．Ｅｄ．）
Ｖｏｌ．４４ Ｎｏ．１１
Ｎｏｖ．２０１６
网络出版时间：２０１６－１０－０９　１０：０８ ＤＯＩ：１０．１３２０７／ｊ．ｃｎｋｉ．ｊｎｗａｆｕ．２０１６．１１．０２０
网络出版地址：ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／６１．１３９０．Ｓ．２０１６１００９．１００８．０４０．ｈｔｍｌ
响应面法优化发芽苦荞富集γ－氨基丁酸的培养条件
　［收稿日期］　２０１５－０５－０６
　［基金项目］　安徽省自然科学基金项目（１３０８０８５ＭＣ３２）
　［作者简介］　朱云辉（１９９１－），男，安徽宿州人，硕士，主要从事食品功能性成分的富集及品质控制研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｙｈ１７２９２６９６６＠１６３．ｃｏｍ
　［通信作者］　郭元新（１９７０－），男，甘肃张掖人，教授，博士，主要从事农产品加工及品质控制研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｇｕｏｙｘ＠ａｈｓｔｕ．ｅｄｕ．ｃｎ
朱云辉，郭元新
（安徽科技学院 食品药品学院，安徽 凤阳２３３１００）
［摘　要］　 【目的】研究发芽苦荞富集γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）的最佳培养条件，为苦荞芽菜的
开发利用提供支持。【方法】在谷氨酸钠（Ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ，ＭＳＧ）质量浓度、钙离子（Ｃａ２＋）浓度、发芽温度和发
芽时间４个单因素试验基础上，采用响应面法对发芽苦荞的培养条件进行优化，建立ＧＡＢＡ富集的二次多项式数学
模型，并分析模型的有效性与因素间的交互作用。【结果】４个因素对ＧＡＢＡ富集的影响大小依次为 ＭＳＧ质量浓
度＞发芽温度＞发芽时间＞Ｃａ２＋浓度；发芽苦荞富集ＧＡＢＡ的最佳培养条件为：ＭＳＧ浓度６．９０ｍｇ／ｍＬ，发芽温度
３２℃，发芽时间３．５ｄ，Ｃａ２＋浓度５．８ｍｍｏｌ／Ｌ，在此条件下发芽苦荞ＧＡＢＡ含量为（２５８．７７±３．９５）μｇ／ｇ，与预测值
２５９．８９μｇ／ｇ相差较小。【结论】建立的回归模型能够较准确地预测发芽苦荞的ＧＡＢＡ富集量。该培养方法稳定性
好，ＧＡＢＡ富集量高。
［关键词］　发芽苦荞；γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）；培养条件；响应面法
［中图分类号］　ＴＳ２０１．１ ［文献标志码］　Ａ ［文章编号］　１６７１－９３８７（２０１６）１１－０１４１－０８
Ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ＧＡＢＡ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ
ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｂａｓｅｄ　ｏｎ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ＺＨＵ　Ｙｕｎｈｕｉ，ＧＵＯ　Ｙｕａｎｘｉｎ
（Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｄｒｕｇ，Ａｎｈｕｉ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｆｅｎｇｙａｎｇ，Ａｎｈｕｉ　２３３１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：【Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ】Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ（ＧＡＢＡ）ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ
ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｔｏ　ｐｒｏｖｉｄｅ　ｓｕｐｐｏｒｔ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔａｒ－
ｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｓｐｒｏｕｔｓ．【Ｍｅｔｈｏｄ】Ｏｎ　ｔｈｅ　ｂａｓｉｓ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｓｉｎｇｌｅ　ｆａｃｔｏｒ　ｔｅｓｔｓ，ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
ｗａｓ　ａｄｏｐｔｅｄ　ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ　ｍｏｎｏｓｏｄｉｕｍ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ（ＭＳＧ）ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎ－
ｔｒａｔｉｏｎ，ｃａｌｃｉｕｍ　ｉｏｎ（Ｃａ２＋）ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，ａｎｄ　ｔｉｍｅ．Ａ　ｓｅｃｏｎｄ　ｏｒｄｅｒ　ｑｕａｄｒａｔｉｃ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｅｓ－
ｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｂｉｌｉｔｙ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ａｎｄ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎｓ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｗｅｒｅ　ａｎａｌｙｚｅｄ．【Ｒｅｓｕｌｔ】Ｔｈｅ
ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｏｕｒ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｎ　ＧＡＢＡ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ｉｎ　ａ　ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ　ｏｒｄｅｒ　ｏｆ　ＭＳＧ　ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ＞
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ＞ｔｉｍｅ＞Ｃａ２＋ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｆｏｒ　ＧＡＢＡ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｗｅｒｅ　ＭＳＧ　ｃｏｎ－
ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　６．９０ｍｇ／ｍＬ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｆ　３２℃，ｔｉｍｅ　ｏｆ　３．５ｄａｎｄ　Ｃａ２＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　５．８ｍｍｏｌ／Ｌ．Ｔｈｅ
ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＧＡＢＡ　ｗａｓ（２５８．７７±３．９５）μｇ／ｇ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ，ｗｈｉｃｈ　ｗａｓ　ｓｉｍｉｌａｒ　ｔｏ　ｔｈｅ
ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ｖａｌｕｅ　ｏｆ　２５９．８９μｇ／ｇ．【Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ】Ｔｈｅ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｍｏｄｅｌ　ｗｅｌ　ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ｔｈｅ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆ
ＧＡＢＡ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ｓｔａｂｌｅ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈ　ＧＡＢＡ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ；γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ（ＧＡＢＡ）；ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ；ｒｅｓｐｏｎｓｅ
ｓｕｒｆａｃｅ　ｍｅｔｈｏｄｏｌｏｇｙ
　　苦荞学名鞑靼荞麦（Ｆａｇｏｐｙｒｕｍ　ｔａｔａｒｉｃｕｍ），
富含其他粮食作物中几乎没有的芦丁及硒元素，同
时还含有１８种氨基酸、９种脂肪酸及丰富的膳食纤
维和叶绿素等，是一种粮药兼用的蓼科荞麦属双子
叶作物。研究表明，苦荞发芽后营养成分更加合理，
荞麦蛋白酶抑制剂及植酸含量降低，若能科学控制
发芽条件，还能富集γ－氨基丁酸（γ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ
ａｃｉｄ，ＧＡＢＡ）等功能成分［１－４］。
ＧＡＢＡ是一种四碳非蛋白质氨基酸，作为一种
天然活性成分，广泛存在于原核和真核生物体中，是
目前研究较为深入的一种重要的抑制性神经递质，
参与多种代谢活动，具有降低血压、改善神经机能、
助精神安定、促进生长激素分泌及酒精代谢等药理
功能［５－６］。随着年龄的增长和精神压力的加大，人脑
中ＧＡＢＡ的积累异常困难，而通过日常饮食补充可
有效改善这种状况［７］。但正常的植物组织中ＧＡＢＡ
含量很低，为０．３～３２．５０μｍｏｌ／ｇ
［８］，无法满足人体
需求［９］。研究发现，在低氧和涝灾、机械刺激、冷害、
热激及盐胁迫等逆境下，植物体内的ＧＡＢＡ含量成
倍增加［１０－１２］。植物中的ＧＡＢＡ合成主要来自ＧＡ－
ＢＡ支路中由谷氨酸脱羧酶（ＧＡＤ，ＥＣ　４．１．１．１５）催
化的不可逆的α－谷氨酸脱羧反应，ＧＡＤ 是一种
Ｃａ２＋／钙调蛋白依赖型酶，具有一个钙调蛋白结合
区［１３］，发芽温度、底物谷氨酸（Ｇｌｕ）及钙离子（Ｃａ２＋）
浓度，均与ＧＡＤ的活性有关。通过胁迫、优化培养
条件富集糙米［１４］、大麦［１５］、粟谷［１６－１７］、豆类［５，１８－２０］等
种子中ＧＡＢＡ的研究已有报道，但对发芽苦荞的研
究主要集中在种子萌发过程中营养成分、黄酮等功
能组分的变化上［２，２１］，而对发芽苦荞富集ＧＡＢＡ的
研究较少。本研究在单因素试验基础上，利用响应
面法优化了发芽苦荞富集ＧＡＢＡ的培养条件，研究
Ｃａ２＋浓度、谷氨酸钠（ＭＳＧ）质量浓度、发芽时间、发
芽温度４个因素对 ＧＡＢＡ富集的影响，建立了可
靠的模型，以期为苦荞芽菜的开发利用提供技术支
持。
１　材料与方法
１．１　材料与试剂
苦荞（榆６－２１）种子，２０１３年秋采自中国内蒙古
自治区乌兰察布市，于－２０℃冰箱中贮藏备用。
ＧＡＢＡ标品（纯度≥９９．９％）和对二甲氨基苯
磺酰氯（ＤＡＢＳ－ＣＩ，９９％），美国Ｓｉｇｍａ公司；乙腈为
色谱纯，氯化钙和 ＭＳＧ等其他化学试剂，均为国产
分析纯。
１．２　仪器与设备
ＬＨＰ－１６０型智能恒温恒湿培养箱，上海三发科
学仪器有限公司；Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００液相色谱仪，安捷伦
公司；ＫＤＣ－１６０ＨＲ高速冷冻离心机，合肥科大创新
股份有限公司；真空冷冻干燥系统，美国Ｌａｂｃｏｎｃｅ
公司。
１．３　方　法
１．３．１　苦荞发芽　取３０ｇ苦荞种子用去离子水清
洗后，用质量分数１％的次氯酸钠消毒１５ｍｉｎ，再用
去离子水冲洗至ｐＨ 中性，３０℃下浸泡４ｈ。然后
置于铺有两层滤纸的培养皿中暗培养，培养箱湿度
控制在８５％～９０％，期间每隔８ｈ左右喷洒设定浓
度的Ｃａ２＋（以ＣａＣｌ２ 溶液代替）和 ＭＳＧ混合溶液，
保持滤纸湿润。
１．３．２　ＧＡＢＡ含量的测定　参考Ｇｕｏ等［５］的方法
测定发芽苦荞中的ＧＡＢＡ含量。样品预处理方法
为：将发芽苦荞冷冻干燥后，粉碎得粒径１８０μｍ的
发芽苦荞粉，称取０．５ｇ苦荞干粉溶于５ｍＬ体积分
数７％的乙酸中，按照Ｂａｉ等［１７］的方法对样品进行
纯化；将纯化后的上清液于０．１ＭＰａ、４５℃条件下
进行真空干燥，残余物溶于２ｍＬ　１ｍｏｌ／Ｌ　ＮａＨＣＯ３
（ｐＨ　９）缓冲溶液中，４　０００×ｇ离心１０ｍｉｎ。ＧＡＢＡ
含量测定采用高压液相色谱 ＨＰＬＣ（Ａｇｉｌｅｎｔ　１２００，
ＵＳＡ），色谱柱为ＺＯＲＢＡＸ　Ｅｃｌｉｐｓｅ　ＡＡＡ　ｒｅｖｅｒｓｅｄ－
ｐｈａｓｅ　ｃｏｌｕｍｎ（３．５μｍ），４．６ｍｍ×１５０ｍｍ，条件设
置参照Ｓｙｕ等［２２］的方法，取１ｍＬ　ｐＨ 为９．０的氨
基酸溶液，加入２ｍｇ／ｍＬ含对二甲氨基苯磺酰氯的
丙酮溶液１ｍＬ，于６７℃保温１０ｍｉｎ后冰浴终止反
应；然后使用ＤＡＤ检测器于４２５ｎｍ处进行紫外检
测，流动相 Ａ 为乙腈，流动相 Ｂ为０．０４５ｍｏｌ／Ｌ
ＣＨ３ＣＯＯＮａ（ｐＨ＝４）缓冲液，分离时间３０ｍｉｎ，温
度３０℃。
１．３．３　单因素试验　按照１．３．１的方法，保持其他
条件不变，分别考察Ｃａ２＋浓度、ＭＳＧ质量浓度、发
芽时间和发芽温度４个因素对发芽苦荞中 ＧＡＢＡ
富集量的影响。
（１）Ｃａ２＋浓度的影响。分别用０，３．０，６．０，９．０，
１２．０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＣａＣｌ２ 溶液及６．０ｍｇ／ｍＬ的 ＭＳＧ
溶液处理发芽苦荞，３０℃下发芽４ｄ。
（２）ＭＳＧ 质量浓度的影响。分别用０，３．０，
６．０，９．０，１２．０ｍｇ／ｍＬ的 ＭＳＧ溶液及６．０ｍｍｏｌ／Ｌ
的ＣａＣｌ２ 溶液处理发芽苦荞，３０℃下发芽４ｄ。
（３）发芽时间的影响。用６．０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＣａＣｌ２
溶液及６．０ｍｇ／ｍＬ的 ＭＳＧ溶液处理发芽苦荞，分
２４１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４４卷
别３０℃下发芽０，２，４，６，８ｄ。
（４）发芽温度的影响。用６．０ｍｍｏｌ／Ｌ的ＣａＣｌ２
溶液及６．０ｍｇ／ｍＬ的 ＭＳＧ溶液处理发芽苦荞，分
别在１５，２０，２５，３０，３５℃下发芽４ｄ。
１．３．４　ＧＡＢＡ富集条件优化的响应面试验　在单
因素试验基础上，采用４因素３水平的 Ｂｏｘ－Ｂｅ－
ｈｎｋｅｎ设计方法，对影响发芽苦荞 ＧＡＢＡ 富集的
Ｃａ２＋浓度、ＭＳＧ质量浓度、发芽时间和发芽温度４
个因素进行响应面试验设计，试验因素水平见表１。
采用响应面分析方法（ＲＳＭ）对苦荞发芽过程中
ＧＡＢＡ 的 富 集 条 件 进 行 优 化。采 用 Ｄｅｓｉｇｎ
Ｅｘｐｅｒｔ　８．０对试验数据进行回归分析，通过微分方
法计算预测的最佳点。
表１　发芽苦荞中ＧＡＢＡ富集条件优化的响应面试验设计方案
Ｔａｂｌｅ　１　Ｄｅｓｉｇｎ　ｏｆ　ＲＳＭ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｆｏｒ　ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ　ＧＡＢＡ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
试验水平
Ｃｏｄｅ　ｌｅｖｅｌ
试验因素Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ　ｆａｃｔｏｒ
Ｃａ２＋浓度／（ｍｍｏｌ·Ｌ－１）
Ｃａ２＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｘ１
ＭＳＧ质量浓度／（ｍｇ·ｍＬ－１）
ＭＳＧ　ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｘ２
发芽时间／ｄ
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ
Ｘ３
发芽温度／℃
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ｘ４
－１　 ３．０　 ３．０　 ２　 ２５
０　 ６．０　 ６．０　 ４　 ３０
１　 ９．０　 ９．０　 ６　 ３５
２　结果与分析
２．１　发芽苦荞富集ＧＡＢＡ的单因素试验结果
２．１．１　Ｃａ２＋浓度的影响　不同浓度Ｃａ２＋对发芽苦
荞ＧＡＢＡ富集量的影响如图１所示。由图１可见，
当Ｃａ２＋浓度达到６．０ｍｍｏｌ／Ｌ时，发芽苦荞中ＧＡ－
ＢＡ含量达到最大值，为２５３．０９μｇ／ｇ，此后随着
Ｃａ２＋浓度增大，ＧＡＢＡ含量呈减小趋势。
２．１．２　ＭＳＧ质量浓度的影响　在６．０ｍｍｏｌ／Ｌ
Ｃａ２＋处理下，不同质量浓度 ＭＳＧ对发芽苦荞 ＧＡ－
ＢＡ富集量的影响如图２所示。由图２可见，随着
ＭＳＧ质量浓度的增高，发芽苦荞中 ＧＡＢＡ含量逐
渐增大，并在６．０ｍｇ／ｍＬ时达到最大值，为２４１．６４
μｇ／ｇ，分别是０，３．０，９．０，１２．０ｍｇ／ｍＬ的１．４９，
１．１９，１．０７和１．１６倍。
图１　Ｃａ２＋浓度对发芽苦荞ＧＡＢＡ富集量的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　Ｃａ２＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ＧＡＢＡ
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
图２　ＭＳＧ质量浓度对发芽苦荞ＧＡＢＡ富集量的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ＭＳＧ　ｍａｓｓ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ＧＡＢＡ
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
２．１．３　发芽时间的影响　如图３所示，随着发芽时
间的延长，发芽苦荞ＧＡＢＡ的富集量逐步增加，并
在４ｄ达到最大值（２３６．９４μｇ／ｇ），是发芽０ｄ的
１．８０倍，发芽４ｄ后，ＧＡＢＡ富集量缓慢下降。
２．１．４　发芽温度的影响　如图４所示，在Ｃａ２＋浓
度为６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ质量浓度为６．０ｍｇ／ｍＬ，
发芽４ｄ的条件下，发芽温度为１５～３０℃时，发芽
苦荞ＧＡＢＡ富集量逐渐上升，且速率较快，于３０℃
达到最大值，为２４９．６３μｇ／ｇ，分别为１５，２０，２５，３５
℃的１．４９，１．３０，１．１５及１．０９倍。
２．２　发芽苦荞富集ＧＡＢＡ最佳培养条件的确定
２．２．１　响应面回归方程的建立及方差分析　在单
因素试验基础上，根据Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ的中心组合设
计原理，以影响发芽苦荞 ＧＡＢＡ富集的Ｃａ２＋ 浓度
（Ｘ１）、ＭＳＧ质量浓度（Ｘ２）、发芽时间（Ｘ３）、发芽温度
（Ｘ４）与ＧＡＢＡ含量（Ｙ）进行响应面试验，通过对结果
（表２和图５）进行回归分析及多元二次回归方程拟合
发现，Ｘ１Ｘ４ 与Ｘ２Ｘ３ 的Ｆ值分别为０．０３６（Ｐ＞０．８５）
３４１第１１期 朱云辉，等：响应面法优化发芽苦荞富集γ－氨基丁酸的培养条件
和０．０３０（Ｐ＞０．８５），对ＧＡＢＡ富集量的影响微小，故
将其归为误差项，重新拟合后得回归方程为：
Ｙ＝－４５６．４５０　６７＋４７．７３５　３３　Ｘ１＋３２．０６７　８３　Ｘ２＋
２６．５１０　９２　Ｘ３＋２６．４３６　２７　Ｘ４－１．０８７　５０　Ｘ１Ｘ２＋
０．２１５　８３　Ｘ１Ｘ３＋０．３６６　６７　Ｘ２Ｘ４－
０．２５３　７５　Ｘ３Ｘ４－３．５５１　０５　Ｘ２１－２．７０９　８０　Ｘ２２－
２．６９２　０４　Ｘ２３－０．４４１　９８　Ｘ２４。
响应面试验结果及根据回归方程得出的预测值
见表２。预测值与实测值的相关关系见图５。
图３　发芽时间对发芽苦荞ＧＡＢＡ富集量的影响
Ｆｉｇ．３　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ＧＡＢＡ
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
图４　发芽温度对发芽苦荞ＧＡＢＡ富集量的影响
Ｆｉｇ．４　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ＧＡＢＡ
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
表２　发芽苦荞ＧＡＢＡ富集条件优化的Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ试验结果和预测值
Ｔａｂｌｅ　２　Ｂｏｘ－Ｂｅｈｎｋｅｎ　ｄｅｓｉｇｎ　ａｎｄ　ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ　ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ　ＧＡＢＡ
ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
试验编号
Ｔｒｉａｌ
Ｃａ２＋浓度
Ｃａ２＋
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｘ１
ＭＳＧ质量浓度
ＭＳＧ　ｍａｓｓ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ
Ｘ２
发芽时间
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｔｉｍｅ
Ｘ３
发芽温度
Ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ
Ｘ４
ＧＡＢＡ含量／（μｇ·ｇ－１）ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ
实测值
Ｏｂｓｅｒｖｅｄ
ｖａｌｕｅ
预测值
Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ
ｖａｌｕｅ
１ －１ －１　 ０　 ０　 １７８．２９±３．４２　 １８０．２４
２　 １ －１　 ０　 ０　 １８６．６４±２．４９　 １９６．５９
３ －１　 １　 ０　 ０　 ２２３．６２±４．２６　 ２２３．９７
４　 １　 １　 ０　 ０　 １９２．８２±４．１８　 ２０１．１６
５　 ０　 ０ －１ －１　 ２２４．９１±６．１８　 ２２９．６６
６　 ０　 ０　 １ －１　 ２２５．１８±４．５１　 ２２９．３６
７　 ０　 ０ －１　 １　 ２３９．６４±８．２７　 ２４５．７６
８　 ０　 ０　 １　 １　 ２２９．７６±７．８０　 ２３５．３１
９ －１　 ０　 ０ －１　 ２１５．２７±５．０９　 ２０９．９３
１０　 １　 ０　 ０ －１　 ２１８．９９±５．９０　 ２０６．７０
１１ －１　 ０　 ０　 １　 ２２１．８２±６．７５　 ２２０．９６
１２　 １　 ０　 ０　 １　 ２２２．４５±６．１８　 ２１７．７３
１３　 ０ －１ －１　 ０　 ２１６．７９±３．２９　 ２１２．２９
１４　 ０　 １ －１　 ０　 ２４６．７０±１０．３１　 ２３６．４４
１５　 ０ －１　 １　 ０　 ２０６．８５±６．１８　 ２０６．９２
１６　 ０　 １　 １　 ０　 ２３９．６０±４．３２　 ２３１．０７
１７ －１　 ０ －１　 ０　 ２１６．４７±２．８７　 ２１９．７１
１８　 １　 ０ －１　 ０　 ２１３．２３±４．０４　 ２１３．８８
１９ －１　 ０　 １　 ０　 ２１１．０９±３．２７　 ２１１．７５
２０　 １　 ０　 １　 ０　 ２１３．０３±３．７０　 ２１１．１０
２１　 ０ －１　 ０ －１　 ２０９．３５±６．３７　 ２０９．３１
２２　 ０　 １　 ０ －１　 ２１３．７２±６．６７　 ２２２．４６
２３　 ０ －１　 ０　 １　 ２１６．７７±６．１６　 ２０９．３４
２４　 ０　 １　 ０　 １　 ２４３．１４±４．４３　 ２４４．４９
２５　 ０　 ０　 ０　 ０　 ２６４．１６±６．９９　 ２５６．８４
２６　 ０　 ０　 ０　 ０　 ２５０．５８±８．２９　 ２５６．８４
２７　 ０　 ０　 ０　 ０　 ２５６．０１±４．４１　 ２５６．８４
２８　 ０　 ０　 ０　 ０　 ２６０．０５±５．９２　 ２５６．８４
２９　 ０　 ０　 ０　 ０　 ２５３．３９±５．９６　 ２５６．８４
４４１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４４卷
图５　发芽苦荞中ＧＡＢＡ含量实测值与预测值之间的关系
Ｆｉｇ．５　Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ　ａｎｄ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　ｖａｌｕｅｓ　ｏｆ
ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
　　从方差分析结果（表３）可以看出，回归模型的
Ｆ＝１６．５０，Ｐ＜０．０００　１，表明回归模型极显著；失拟
项不显著（Ｐ＞０．０５），说明方程拟合较好。在各因
素中，ＭＳＧ质量浓度对 ＧＡＢＡ富集的影响极显著
（Ｐ＜０．０００　１），发芽温度对ＧＡＢＡ富集的影响显著
（Ｐ＜０．０５）。各因素的影响大小顺序为 ＭＳＧ质量
浓度（Ｘ２）＞发芽温度（Ｘ４）＞发芽时间（Ｘ３）＞Ｃａ２＋
浓度（Ｘ１）。在模型其他项中，Ｘ１Ｘ２ 的交互作用及
Ｘ２１、Ｘ２２、Ｘ２３、Ｘ２４ 对苦荞ＧＡＢＡ富集的影响均有显著
性。比较模型的预测值和观察值可见，二者具有极
显著的相关性（图５）。综合所有统计分析特征值表
明，模型具有实践指导意义。
表３　发芽苦荞ＧＡＢＡ富集条件优化回归模型的方差分析
Ｔａｂｌｅ　３　Ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｖａｒｉａｎｃｅ（ＡＮＯＶＡ）ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｏｐｔｉｍａｌ　ＧＡＢＡ
ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
方差来源
Ｓｏｕｒｃｅ
平方和
Ｓｕｍ　ｏｆ
ｓｑｕａｒｅｓ
自由度
Ｄｅｇｒｅｅ　ｏｆ
ｆｒｅｅｄｏｍ
均方
Ｍｅａｎ　ｓｑｕａｒｅｓ
Ｆ值
Ｆ－ｖａｌｕｅ
Ｐ值
Ｐ－ｖａｌｕｅ
模型 Ｍｏｄｅｌ　 １１　７０３．９７　 １２　 ９７５．３３　 １６．５０ ＜０．０００　１
Ｘ１ ３１．３６　 １　 ３１．３６　 ０．５３　 ０．４７６　９
Ｘ２ １　７４９．９１　 １　 １　７４９．９１　 ２９．６１ ＜０．０００　１
Ｘ３ ８６．５６　 １　 ８６．５６　 １．４６　 ０．２４３　８
Ｘ４ ３６４．７６　 １　 ３６４．７６　 ６．１７　 ０．０２４　４
Ｘ１Ｘ２ ３８３．１８　 １　 ３８３．１８　 ６．４８　 ０．０２１　６
Ｘ１Ｘ３ ６．７１　 １　 ６．７１　 ０．１１　 ０．７４０　６
Ｘ２Ｘ４ １２１．００　 １　 １２１．００　 ２．０５　 ０．１７１　７
Ｘ３Ｘ４ ２５．７６　 １　 ２５．７６　 ０．４４　 ０．５１８　６
Ｘ
２
１ ６　６２５．３３　 １　 ６　６２５．３３　 １１２．１０ ＜０．０００　１
Ｘ
２
２ ３　８５８．０５　 １　 ３　８５８．０５　 ６５．２８ ＜０．０００　１
Ｘ
２
３ ７５２．１３　 １　 ７５２．１３　 １２．７３　 ０．００２　６
Ｘ
２
４ ７９１．９３　 １　 ７９１．９３　 １３．４０　 ０．００２　１
残差Ｒｅｓｉｄｕａｌ　 ９４５．６５　 １６　 ５９．１０
失拟项Ｌａｃｋ　ｏｆ　ｆｉｔ　 ８２９．９９　 １２　 ６９．１７　 ２．３９　 ０．２０７　４
纯误差Ｐｕｒｅ　ｅｒｒｏｒ　 １１５．６７　 ４　 ２８．９２
总变异Ｔｏｔａｌ　ｅｒｒｏｒ　 １２　６４９．６２　 ２８
２．２．２　响应面模型交互项的解析　对表２数据进
行二次多元回归拟合，得到二次回归方程的响应曲
面及其等高线见图６～图９。从图６可见，Ｃａ２＋浓度
与 ＭＳＧ质量浓度对发芽苦荞中ＧＡＢＡ富集量的交
互作用显著（Ｐ＜０．０５），Ｃａ２＋ 浓度固定时，随着
ＭＳＧ质量浓度的递增，ＧＡＢＡ富集量呈先上升后
下降的趋势；ＭＳＧ质量浓度不变时，随着Ｃａ２＋浓度
的升高，ＧＡＢＡ富集量也呈先上升后下降的趋势。
当Ｃａ２＋ 浓度为５．７７ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ 质量浓度为
６．９０ｍｇ／ｍＬ时为响应面最高点，ＧＡＢＡ富集量最
大达到２５８．４２μｇ／ｇ。
Ｃａ２＋浓度与发芽时间对发芽苦荞中 ＧＡＢＡ富
集量的交互作用不显著（Ｐ＞０．０５）（图７）。随着
Ｃａ２＋浓度的递增和发芽时间的延长，发芽苦荞中
ＧＡＢＡ 富集量先升高后下降，Ｃａ２＋ 浓度为５．７７
ｍｍｏｌ／Ｌ，发芽３．６６ｄ时，ＧＡＢＡ 富集量达到最高
（２５６．９３μｇ／ｇ）。
由图８可以看出，ＭＳＧ质量浓度与发芽温度对
发芽苦荞中ＧＡＢＡ富集量的交互作用不显著（Ｐ＞
０．０５）。随着 ＭＳＧ质量浓度递增和发芽温度升高，
发芽苦荞中 ＧＡＢＡ富集量先升高后下降，ＭＳＧ质
量浓度为６．９０ｍｇ／ｍＬ、发芽温度为３１．７２℃时，
ＧＡＢＡ富集量最高（２５９．４２μｇ／ｇ）。
发芽时间和发芽温度对发芽苦荞中 ＧＡＢＡ富
集量的交互作用不显著（Ｐ＞０．０５）（图９）。随着发
芽时间延长和温度升高，发芽苦荞中ＧＡＢＡ富集量
先升高后下降，发芽时间为３．６６ｄ，发芽温度为
３１．７２℃ 时，ＧＡＢＡ 富 集 量 达 到 最 高 （２５７．７２
５４１第１１期 朱云辉，等：响应面法优化发芽苦荞富集γ－氨基丁酸的培养条件
μｇ／ｇ）。
图６　Ｃａ２＋浓度和 ＭＳＧ质量浓度对发芽苦荞
ＧＡＢＡ富集量的交互影响
Ｆｉｇ．６　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｃａ２＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ＭＳＧ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ｏｎ　ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ
ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
图７　Ｃａ２＋浓度和发芽时间对发芽苦荞
ＧＡＢＡ富集量的交互影响
Ｆｉｇ．７　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｃａ２＋ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ
ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ｏｎ　ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ
ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
图８　ＭＳＧ质量浓度和发芽温度对发芽苦荞
ＧＡＢＡ富集量的交互影响
Ｆｉｇ．８　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ＭＳＧ　ｍａｓｓ
ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ
ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
图９　发芽时间和发芽温度对发芽苦荞
ＧＡＢＡ富集量的交互影响
Ｆｉｇ．９　Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｔｉｍｅ　ａｎｄ
ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ｏｎ　ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ
ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ
　　根据响应面试验结果，得出回归模型对发芽苦
荞中ＧＡＢＡ富集量的最大预测值为２５９．８９μｇ／ｇ，
对应的发芽条件为：Ｃａ２＋浓度５．７７ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ
质量浓度６．９０ｍｇ／ｍＬ，发芽时间３．６６ｄ，发芽温度
３１．７２℃，考虑到实际操作的可行性，将培养条件改
进为：Ｃａ２＋ 浓度５．８ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ质量浓度６．９
ｍｇ／ｍＬ，发芽时间３．５ｄ，发芽温度３２℃。对此条
件进行验证试验，得到 ＧＡＢＡ 含量为（２５８．７７±
３．９５）μｇ／ｇ，验证值与理论值的相对误差较小，说明
利用响应面法优化的条件对发芽苦荞富集 ＧＡＢＡ
是可行的。
３　讨　论
有研究表明，ＧＡＤ催化Ｇｌｕ在α－位上不可逆的
脱羧反应是合成ＧＡＢＡ的主要途径［２３］，提高ＧＡＤ
活力有助于ＧＡＢＡ的积累［２４］。ＧＡＤ是一种Ｃａ２＋／
钙调蛋白依赖型酶，具有一个钙调蛋白结合区［１３］，
因而通常认为植物细胞受到胁迫时，胞内Ｃａ２＋浓度
６４１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４４卷
会快速提升，促使 ＧＡＤ活力升高，进而富集 ＧＡ－
ＢＡ［１０，２５］。添加Ｇｌｕ可提高发芽粟谷ＧＡＤ活性，进
而促进ＧＡＢＡ的富集，然而当Ｇｌｕ浓度过高时，并
不利于ＧＡＢＡ的大量生成［１７］。本研究通过向发芽
苦荞中添加一定量的Ｃａ２＋和 ＭＳＧ，提高了 ＧＡＢＡ
的富集量，这与前人的研究结果［１７，２０］一致。种子萌
发后，种子中的蛋白质等大分子物质逐渐降解，
ＧＡＤ被激活，Ｌ－Ｇｌｕ进行脱羧反应生成ＧＡＢＡ［２，４］。
研究表明，苦荞在发芽１～３ｄ时，ＧＡＢＡ含量不断
升高［２６］。以质量浓度为０．２ｍｇ／Ｌ的Ｃｕ２＋对苦荞
进行胁迫处理，发现第４天时ＧＡＢＡ含量达到最大
值，随后不断下降［２７］。本研究以一定量的Ｃａ２＋ 和
ＭＳＧ胁迫发芽苦荞，发现发芽苦荞中的 ＧＡＢＡ含
量随着发芽时间延长也呈现出先上升后下降的趋
势。ＧＡＤ受温度影响很大，温度会影响酶蛋白的构
象，酶与激活剂的亲和力及参与酶促反应功能团的
解离等［２８］。Ｓａｔｙａｎａｒａｙａｎ等［２９］研究表明，多数植物
中ＧＡＤ酶活最适温度在３６～４０℃，因种间差异，
粟谷ＧＡＢＡ富集的最高温度为３３℃［２８］，大豆ＧＡ－
ＢＡ富集的最适温度为３０．５～３３．３℃［２５］，而米胚和
米糠分别为４０和４１．３℃［３０－３１］；当温度高于５０℃
时，ＧＡＤ酶活很不稳定，到６０℃时酶失活８７％［３２］。
温度过高或过低都会影响ＧＡＤ的构象及其与底物
的亲和力，从而引起ＧＡＤ活性下降，导致ＧＡＢＡ富
集量过低或下降［３１］。本研究结果表明，温度升高有
助于发芽苦荞富集ＧＡＢＡ，并在３１．７２℃达到最高
值。
４　结　论
用响应面法对发芽苦荞中富集 ＧＡＢＡ的反应
条件进行了优化，建立的二次多项数学模型具有显
著性（Ｐ＜０．０００　１），决定系数为０．９２５　２，ＭＳＧ质量
浓度对ＧＡＢＡ富集量的影响极显著（Ｐ＜０．０００　１），
发芽温度对富集量的影响显著（Ｐ＜０．０５），Ｃａ２＋浓
度与 ＭＳＧ质量浓度对发芽苦荞中ＧＡＢＡ富集量的
交互作用显著（Ｐ＜０．０５）。由回归方程得出，在
Ｃａ２＋ 浓 度 ５．７７ ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ 质 量 浓 度６．９０
ｍｇ／ｍＬ，发芽温度３１．７２℃，发芽时间３．６６ｄ的条
件下，发芽苦荞中 ＧＡＢＡ 富集量最大，预测值为
２５９．８９μｇ／ｇ。考虑到实际操作的可行性，最后优选
的培养条件为，Ｃａ２＋浓度５．８ｍｍｏｌ／Ｌ，ＭＳＧ质量浓
度６．９ｍｇ／ｍＬ，发芽时间３．５ｄ，发芽温度３２℃，在
此条件下 ＧＡＢＡ 的富集量为（２５８．７７±３．９５）
μｇ／ｇ，与理论值基本相符，说明所建模型能够较为
准确地预测发芽苦荞ＧＡＢＡ的富集量。
［参考文献］
［１］　朱云辉，郭元新．我国苦荞资源的开发利用研究进展 ［Ｊ］．食品
工业科技，２０１４，３５（２４）：３６０－３６５．
Ｚｈｕ　Ｙ　Ｈ，Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｕｔｉ－
ｌｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｒｅｓｏｕｒｃｅ　ｉｎ　Ｃｈｉｎａ［Ｊ］．Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ
Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ，２０１４，３５（２４）：３６０－３６５．
［２］　李晓丹．苦荞胁迫萌发及功能性成分的研究 ［Ｄ］．江苏无锡：江
南大学，２０１３．
Ｌｉ　Ｘ　Ｄ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ
ｉｔｓ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ［Ｄ］．Ｗｕｘｉ，Ｊｉａｎｇｓｕ：Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｙａｎ－
ｇｔｚｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３．
［３］　张美莉，张建艳，胡小松．萌发荞麦蛋白酶抑制剂活性变化及与
蛋白消化率相关性研究 ［Ｊ］．中国食品学报，２００６，６（５）：３４－３９．
Ｚｈａｎｇ　Ｍ　Ｌ，Ｚｈａｎｇ　Ｊ　Ｙ，Ｈｕ　Ｘ　Ｓ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｃｈａｎｇｅ　ｏｆ　ｔｒｙｐ－
ｓｉｎ　ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｒｅｌａｔｉｖｉｔｙ　ｗｉｔｈ　ｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｐｒｏ－
ｔｅｉｎ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ
ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００６，６（５）：３４－３９．
［４］　Ｂｏｕｃｈｅ　Ｎ，Ｌａｃｏｍｂｅ　Ｂ，Ｆｒｏｍｍ　Ｈ．ＧＡＢＡ　ｓｉｇｎａｌｉｎｇ：ａ　ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ
ａｎｄ　ｕｂｉｑｕｉｔｏｕｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　Ｃｅｌ　Ｂｉｏｌｏｇｙ，２００３，１３
（１２）：６０７－６１０．
［５］　Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ，Ｙａｎｇ　Ｒ　Ｑ，Ｃｈｅｎ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆγ－ａｍｉ－
ｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｓｏｙｂｅａｎ（Ｇｌｙｃｉｎｅ　ｍａｘ　Ｌ．）ｉｎ　ｒｅ－
ｌａｔｉｏｎ　ｔｏ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ　ａｎｄ　ｄｉａｍｉｎｅ　ｏｘｉｄａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ
ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ａｄｄｉｔｉｖｅｓ　ｕｎｄｅｒ　ｈｙｐｏｘｉａ［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｆｏｏｄ　Ｒｅ－
ｓｅａｒｃｈ　＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１２，２３４（４）：６７９－６８７．
［６］　郭元新，杨润强，顾振新，等．采用生物转化技术富集大豆制品
γ－氨基丁酸研究进展 ［Ｊ］．食品与发酵工业，２０１１，３７（１１）：１５４－
１５８．
Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ，Ｙａｎｇ　Ｒ　Ｑ，Ｇｕ　Ｚ　Ｘ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｂｉｏｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｔｏ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｅγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ
ａｃｉｄ　ｉｎ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｉｎｄｕｓ－
ｔｒｉｅｓ，２０１１，３７（１１）：１５４－１５８．
［７］　江　波．ＧＡＢＡ（γ－氨基丁酸）：一种新型的功能食品因子 ［Ｊ］．
中国食品学报，２００８，８（２）：１－４．
Ｊｉａｎｇ　Ｂ．Ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ：ａ　ｎｏｖｅｌ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｆａｃｔｏｒ　ｆｏｒ
ｎｕｔｒａｃｅｕｔｉｃａｌｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ
ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，８（２）：１－４．
［８］　蒋振晖，顾振新．高等植物体内γ－氨基丁酸合成、代谢及其生理
作用 ［Ｊ］．植物生理学通讯，２００３，３９（３）：２４９－２５４．
Ｊｉａｎｇ　Ｚ　Ｈ，Ｇｕ　Ｚ　Ｘ．Ｂｉｏｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｃａｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｎｄ　ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ
ｒｏｌｅｓ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｈｉｇｈｅｒ　ｐｌａｎｔｓ［Ｊ］．Ｐｌａｎｔ　Ｐｈｙｓｉｏｌ－
ｏｇｙ　Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎｓ，２００３，３９（３）：２４９－２５４．
［９］　顾振新，蒋振晖．食品原料中γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）形成机理及
富集技术 ［Ｊ］．食品与发酵工业，２００２（１０）：６５－６９．
Ｇｕ　Ｚ　Ｘ，Ｊｉａｎｇ　Ｚ　Ｈ．Ｆｏｒｍａｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ
ｔｅｃｈｎｉｑｕｅ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｏｆ　ｆｏｏｄ　ｒａｗ　ｍａｔｅｒｉａｌｓ［Ｊ］．
Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ，２００２（１０）：６５－６９．
［１０］　Ｙａｎｇ　Ｒ　Ｑ，Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ，Ｗａｎｇ　Ｓ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．Ｃａ２＋ａｎｄ　ａｍｉｎｏｇｕａｎｉ－
ｄｉｎｅ　ｏｎγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｎｇ　ｓｏｙ－
ｂｅａｎ　ｕｎｄｅｒ　ｈｙｐｏｘｉａ－ＮａＣｌ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ
７４１第１１期 朱云辉，等：响应面法优化发芽苦荞富集γ－氨基丁酸的培养条件
Ｄｒｕｇ　Ａｎａｌｙｓｉｓ，２０１５，２３（２）：２８７－２９３．
［１１］　郭元新，杨润强，陈　惠，等．盐胁迫富集发芽大豆γ－氨基丁酸
的工艺优化 ［Ｊ］．食品科学，２０１２，３３（１０）：１－５．
Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ，Ｙａｎｇ　Ｒ　Ｑ，Ｃｈｅｎ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＧＡＢＡ　ａｃ－
ｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｕｎｄｅｒ　ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ
［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２０１２，３３（１０）：１－５．
［１２］　吴进贤．玉米籽粒γ－氨基丁酸富集技术及其饮料开发研究
［Ｄ］．南京：南京农业大学，２０１３．
Ｗｕ　Ｊ　Ｘ．Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ
ｍａｉｚｅ　ｓｅｅｄ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｍａｉｚｅ　ｂｅｖｅｒａｇｅ［Ｄ］．Ｎａｎｊｉｎｇ：
Ｎａｎｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１３．
［１３］　Ｂａｕｍ　Ｇ，Ｃｈｅｎ　Ｙ　Ｌ，Ａｒａｚｉ　Ｔ，ｅｔ　ａｌ．Ａ　ｐｌａｎｔ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒ－
ｂｏｘｙｌａｓｅ　ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ　ａ　ｃａｌｍｏｄｕｌｉｎ　ｂｉｎｄｉｎｇ　ｄｏｍａｉｎ－ｃｌｏｎｉｎｇ　ｓｅ－
ｑｕｅｎｃｅ，ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９９３，２６８（２６）：１９６１０－１９６１７．
［１４］　Ｋｏｍａｔｓｕｚａｋｉ　Ｎ，Ｔｓｕｋａｈａｒａ　Ｋ，Ｔｏｙｏｓｈｉｍａ　Ｈ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ
ｓｏａｋｉｎｇ　ａｎｄ　ｇａｓｅｏｕｓ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｎ　ＧＡＢＡ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａ－
ｔｅｄ　ｂｒｏｗｎ　ｒｉｃｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，２００７，７８（２）：
５５６－５６０．
［１５］　Ｃｈｕｎｇ　Ｈ　Ｊ，Ｊａｎｇ　Ｓ　Ｈ，Ｃｈｏ　Ｈ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｔｅｅｐｉｎｇ　ａｎｄ
ａｎａｅｒｏｂｉｃ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｏｎ　ＧＡＢＡ （ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ）
ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｗａｘｙ　ｈｕｌ－ｌｅｓｓ　ｂａｒｌｅｙ［Ｊ］．ＬＷＴ－Ｆｏｏｄ
Ｓｃｉｅｎｃｅ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００９，４２（１０）：１７１２－１７１６．
［１６］　Ｂａｉ　Ｑ　Ｙ，Ｆａｎ　Ｇ　Ｊ，Ｇｕ　Ｚ　Ｘ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
ｏｎ　ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｄｕｒｉｎｇ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ
ｏｆ　ｆｏｘｔａｉｌ　ｍｉｌｅｔ（Ｓｅｔａｒｉａ　ｉｔａｌｉｃａ　Ｌ．）［Ｊ］．Ｅｕｒｏｐｅａｎ　Ｆｏｏｄ　Ｒｅ－
ｓｅａｒｃｈ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２００８，２２８（２）：１６９－１７５．
［１７］　Ｂａｉ　Ｑ　Ｙ，Ｃｈａｉ　Ｍ　Ｑ，Ｇｕ　Ｚ　Ｘ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ　ｉｎ
ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ　ｏｎ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｇａｍ－
ｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｆｏｘｔａｉｌ　ｍｉｌｅｔ（Ｓｅｔａｒｉａ
ｉｔａｌｉｃａ　Ｌ．）ｄｕｒｉｎｇ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００９，
１１６（１）：１５２－１５７．
［１８］　Ｋａｔａｇｉｒｉ　Ｍ，Ｓｈｉｍｉｚｕ　Ｓ．γ－ａｍｉｎｏ　ｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ
ｂｅａｎ　ｓｐｒｏｕｔｓ（ｓｏｙｂｅａｎ，ｂｌａｃｋ　ｇｒａｍ，ｇｒｅｅｎ　ｇｒａｍ）ｔｒｅａｔｅｄ　ｗｉｔｈ
ｃａｒｂｏｎ　ｄｉｏｘｉｄｅ［Ｊ］．Ｎｉｐｐｏｎ　Ｓｈｏｋｕｈｉｎ　Ｋａｇａｋｕ　Ｋｏｕｇａｋｕ　Ｋａｉ－
ｓｈｉ，１９８９，３６（１１）：９１６－９１９．
［１９］　Ｌｉ　Ｙ，Ｂａｉ　Ｑ　Ｙ，Ｊｉｎ　Ｘ　Ｊ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｕｌｔｉｖａｒ　ａｎｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｎ　ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｉｎ　ｇｅｒ－
ｍｉｎａｔｅｄ　ｆａｖａ　ｂｅａｎｓ（Ｖｉｃｉａ　ｆａｂａ　Ｌ．）［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｓｃｉ－
ｅｎｃｅ　ｏｆ　Ｆｏｏｄ　ａｎｄ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ，２０１０，９０（１）：５２－５７．
［２０］　方嘉沁．富γ－氨基丁酸胚芽大豆发芽工艺优化及其豆浆制品
研究 ［Ｄ］．南昌：江西农业大学，２０１２．
Ｆａｎｇ　Ｊ　Ｑ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕ－
ｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｇｅｒｍ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｓｔｕｄｙ　ｓｏｙｂｅａｎ　ｍｉｌｋ
ｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｄ］．Ｎａｎｃｈａｎｇ：Ｊｉａｎｇｘｉ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，
２０１２．
［２１］　李成磊．苦荞黄酮合成相关酶基因的克隆、芽期逆境胁迫中的
应答及重组ＦｔＰＡＬ和ＦｔＦＬＳ的酶学活性研究 ［Ｄ］．四川雅
安：四川农业大学，２０１２．
Ｌｉ　Ｃ　Ｌ．Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　ｃｌｏｎｉｎｇ　ｆｌａｖｏｎｉｏｄ－ｒｅｌａｔｅｄ　ｇｅｎｅｓ　ｆｒｏｍ　ｔａｒｔａｒｙ
ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ａｎｄ　ｔｈｅｉｒ　ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ　ｕｎｄｅｒ　ＵＶＢ，ｃｏｌｄ，ａｎｄ　ｄｒｏｕｇｈｔ
ｓｔｒｅｓｓｅｓ　ｉｎ　ｓｐｒｏｕｔｓ，ａｎｄ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｒｅ－
ｃｏｍｂｉｎａｎｔ　ＦｔＰＡＬ　ａｎｄ　ＦｔＦＬＳ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ［Ｄ］．Ｙａ’ａｎ，Ｓｉｃｈｕａｎ：
Ｓｉｃｈｕａｎ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１２．
［２２］　Ｓｙｕ　Ｋ　Ｙ，Ｌｉｎ　Ｃ　Ｌ，Ｈｕａｎｇ　Ｈ　Ｃ，ｅｔ　ａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅａｎ－
ｉｎｅ，ＧＡＢＡ，ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ａｍｉｎｏ　ａｃｉｄｓ　ｉｎ　ｇｒｅｅｎ，ｏｏｌｏｎｇ，ｂｌａｃｋ，ａｎｄ
Ｐｕ－ｅｒｈ　ｔｅａｓ　ｗｉｔｈ　ｄａｂｓｙｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｉｇｈ－ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｌｉｑｕｉｄ
ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　ａｎｄ　Ｆｏｏｄ　Ｃｈｅｍ－
ｉｓｔｒｙ，２００８，５６（１７）：７６３７－７６４３．
［２３］　Ｂｏｕｃｈｅ　Ｎ，Ｆｒｏｍｍ　Ｈ．ＧＡＢＡ　ｉｎ　ｐｌａｎｔｓ：ｊｕｓｔ　ａ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ［Ｊ］．
Ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，２００４，９（３）：１１０－１１５．
［２４］　Ｓｈｅｌｐ　Ｂ　Ｊ，Ｂｏｗｎ　Ａ　Ｗ，Ｍｃｌｅａｎ　Ｍ　Ｄ．Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ　ａｎｄ　ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ
ｏｆ　ｇａｍｍａ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ ［Ｊ］．Ｔｒｅｎｄｓ　ｉｎ　Ｐｌａｎｔ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，
１９９９，４（１１）：４４６－４５２．
［２５］　郭元新．盐和低氧胁迫下发芽大豆γ－氨基丁酸富集与调控机
理研究 ［Ｄ］．南京：南京农业大学，２０１１．
Ｇｕｏ　Ｙ　Ｘ．Ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｒｅｇｕｌａ－
ｔｉｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ　ｕｎｄｅｒ　ＮａＣｌ　ａｎｄ　ｈｙｐｏｘｉａ　ｓｔｒｅｓｓ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ
ｓｏｙｂｅａｎ［Ｄ］．Ｎａｎｊｉｎｇ：Ｎａｎｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１１．
［２６］　刘本国，陈永生，高海燕，等．苦荞麦萌发过程中活性成分的变
化 ［Ｊ］．粮油加工，２０１０（３）：４８－５０．
Ｌｉｕ　Ｂ　Ｇ，Ｃｈｅｎ　Ｙ　Ｓ，Ｇａｏ　Ｈ　Ｙ，ｅｔ　ａｌ．Ｃｈａｎｇｅｓ　ｉｎ　ａｃｔｉｖｅ　ｉｎｇｒｅｄｉ－
ｅｎｔ　ｏｆ　ｔａｒｔａｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｄｕｒｉｎｇ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｃｅｒｅａｌｓ　ａｎｄ
Ｏｉｌｓ　Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ，２０１０（３）：４８－５０．
［２７］　周一鸣，周小理，崔琳琳，等．铜离子胁迫对苦荞萌发物生态效
应的影响 ［Ｊ］．食品工业，２０１４，３５（５）：２０１－２０４．
Ｚｈｏｕ　Ｙ　Ｍ，Ｚｈｏｕ　Ｘ　Ｌ，Ｃｕｉ　Ｌ　Ｌ，ｅｔ　ａｌ．Ｅｃｏｌｏｇｉｃａｌ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆ　ｔａｒｔａ－
ｒｙ　ｂｕｃｋｗｈｅａｔ　ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ　ｕｎｄｅｒ　Ｃｕ２＋ｓｔｒｅｓｓ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ　Ｉｎｄｕｓ－
ｔｒｙ，２０１４，３５（５）：２０１－２０４．
［２８］　白青云．低氧胁迫和盐胁迫下发芽粟谷γ－氨基丁酸富集机理
及抗氧化性研究 ［Ｄ］．南京：南京农业大学，２００９．
Ｂａｉ　Ｑ　Ｙ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ａｃｃｕ－
ｍｕｌａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　ｇｅｒｍｉｎａｔｅｄ　ｆｏｘｔａｉｌ　ｍｉｌｅｔ
ｕｎｄｅｒ　ｈｙｐｏｘｉａ　ｓｔｒｅｓｓ　ａｎｄ　ｓａｌｔ　ｓｔｒｅｓｓ［Ｄ］．Ｎａｎｊｉｎｇ：Ｎａｎｊｉｎｇ
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００９．
［２９］　Ｓａｔｙａｎａｒａｙａｎ　Ｖ，Ｎａｉｒ　Ｐ　Ｍ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ
ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ　ｆｒｏｍＳｏｌａｎｕｍ　ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ ［Ｊ］．Ｅｕｒｏ－
ｐｅａｎ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ／ＦＥＢＳ，１９８５，１５０（１）：５３－６０．
［３０］　张　晖．米胚谷氨酸脱羧酶性质及其富集γ－氨基丁酸研究
［Ｄ］．江苏无锡：江南大学，２００４．
Ｚｈａｎｇ　Ｈ．Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ　ｏｆ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ
ａｎｄ　ａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎ　ｏｆγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｉｎ　ｒｉｃｅ　ｇｅｒｍ ［Ｄ］．
Ｗｕｘｉ，Ｊｉａｎｇｓｕ：Ｓｏｕｔｈｅｒｎ　Ｙａｎｇｔｚｅ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００４．
［３１］　张　磊．米糠中γ－氨基丁酸富集技术及保健饮料制作研究
［Ｄ］．南京：南京农业大学，２００８．
Ｚｈａｎｇ　Ｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓ　ｏｎγ－ａｍｉｎｏｂｕｔｙｒｉｃ　ａｃｉｄ　ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ　ｔｅｃｈｎｏｌｏ－
ｇｙ　ｉｎ　ｒｉｃｅ　ｂｒａｎ　ａｎｄ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｈｅａｌｔｈｙ　ｓｏｆｔ　ｄｒｉｎｋ［Ｄ］．Ｎａｎ－
ｊｉｎｇ：Ｎａｎｊｉｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００８．
［３２］　Ｚｈａｎｇ　Ｈ，Ｙａｏ　Ｈ　Ｙ，Ｃｈｅｎ　Ｆ，ｅｔ　ａｌ．Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｃｈａｒａｃｔｅｒ－
ｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｌｕｔａｍａｔｅ　ｄｅｃａｒｂｏｘｙｌａｓｅ　ｆｒｏｍ　ｒｉｃｅ　ｇｅｒｍ ［Ｊ］．Ｆｏｏｄ
Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００７，１０１（４）：１７０２－１７０８．
８４１ 西北农林科技大学学报（自然科学版） 第４４卷