全 文 ：第29卷第1期 齐 齐 哈 尔 大 学 学 报 Vol.29,No.1
2013 年 1 月 Journal of Qiqihar University Jan.,2013
猴腿蹄盖蕨化学成分研究
冀承，张美薇，张树军，赵明
（齐齐哈尔大学 化学与化学工程学院，黑龙江 齐齐哈尔 161006）

摘要：将猴腿蹄盖蕨（Athyrium multidentatum）用无水乙醇浸泡提取，提取液浓缩后依次用正己烷、乙酸乙酯
和正丁醇萃取，制得 3种溶剂萃取物，其中正己烷萃取物对番茄霜霉病菌显示较强的抑菌活性；通过硅胶柱层析
等分离方法对正己烷萃取物进行分离，得到 5个化合物，通过理化性质和波谱数据分析鉴定它们的结构分别为：
β-谷甾醇 (1)、二十四碳酸 (2)、己二酸 (3)、绵马素 BB (4)和 α-菠甾醇 (5)，其中化合物 2, 3, 4 为首次从该植
物中分离得到。
关键词：猴腿蹄盖蕨；抑菌活性；绵马素 BB
中图分类号：R284.1 文献标志码：A 文章编号：1007-984X(2013)01-0076-03

猴腿蹄盖蕨（Athyrium multidentatum） 蹆 蹆又名多齿蹄盖蕨，别名猴 菜，猴 儿，属蹄盖蕨科，是多年
生蕨类植物。主要产于世界温带和亚热带的高山林下，我国有 100 余种，以西南高山为分布中心，华北和
东北地区也有分布；具有清热解毒，润肺理气，补虚舒络，止血杀虫的功效，经常食用可治疗高血压、头
昏、子宫出血、关节炎等症，并对麻疹、流感有预防作用[1]。为进一步研究猴腿蹄盖蕨植物资源，开发新
型药物，本文对猴腿蹄盖蕨不同溶剂提取物对几种植物病菌的抗菌活性及正己烷提取物的化学成分进行了
研究。
1 实验部分
1.1 仪器和材料
Bruker AM-400 型超导核磁共振波谱仪，TMS 为内标；熔点仪：X-6 显微熔点测定仪 (北京泰克仪器
有限公司)；层析柱硅胶（48~75 μm）和薄层色谱硅胶 GF254 为青岛海洋化工有限公司产品；旋转蒸发器
RE-52AA，上海亚荣生化仪器厂。
实验所用猴腿蹄盖蕨全草于 2008 年 5 月 3日采于五大连池风景区，经鉴定为 A. multidentatum 。试验
菌菌种：番茄霜霉病菌 （Tomato frost cactorum）、西瓜枯萎病菌（Fusarium oxyspirum f. sp. niveum）、水稻纹
枯病菌（Rhizoctonia solani）、水稻稻瘟病菌（Pyricularia grisea）由齐齐哈尔四友化工有限公司提供。
1.2 提取物的制备
将干燥的猴腿蹄盖蕨全草（3.3 kg）切碎。在室温下用无水乙醇 15 L 浸泡6 d，将浸提液过滤浓缩，重
复提取5次，合并共得浸膏900 mL，加入1 000 mL 去离子水后，依次用正己烷、乙酸乙酯、正丁醇分级萃取，
每种溶剂萃取4次，收集上层萃取液，浓缩蒸干，得正己烷萃取物145.8 g、乙酸乙酯萃取物54.5 g、正丁醇
萃取物45.5 g。
1.3 抗菌活性试验
分别将蹄盖蕨正己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取物配制成浓度为 300.0，100.0，50.0，10.0 mg·mL-1的
乙醇溶液，备用。采用滤纸片扩散法，用无菌吸管分别吸取1.0 mL 的番茄霜霉病菌、西瓜枯萎病菌、水稻
纹枯病菌和水稻稻瘟病菌的菌悬液，分别加人装有已灭菌的PDA培养基的培养皿中，用已灭菌的 6 mm滤
纸片分别蘸取不同浓度的不同提取物的乙醇溶液，置于含菌培养皿中，并用相应溶剂作对照，重复3次，观
察抑菌效果。

收稿日期：2012-08-20
作者简介：冀承（1986-），女，天津人，在读硕士，主要从事天然有机物的分离、结构鉴定等方面的研究，jicheng0928@163.com。

第 1 期 猴腿蹄盖蕨化学成分研究 ·77·
1.4 提取物的分离
称取正己烷萃取物28.0 g，用硅胶柱层析分离，依次用正己烷/乙酸乙酯=95/5（6.0 L）, 5/5（2.7 L），乙
酸乙酯（4.5 L）洗脱，以150 mL 为单位接收流出液，根据TLC分析跟踪监测结果，合并相同馏分，得到6
个部分 (F1 - F6)。其中F2经硅胶柱层析分离、重结晶得到化合物1（235.3 mg），2（43.6 mg），3（12.1 mg）；
F4经柱层析分离、重结晶纯化得化合物4（679.4 mg），F5重结晶得到化合物5（23.7 mg）。
2 结果与讨论
2.1 结构鉴定
化合物1：无色针状结晶（EtOAc），m.p. 135.1~136.2℃，1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ5.35（1H，br
d，J = 4.8 Hz，H-6），3.54（1H，tt，J = 9.6，4.8 Hz，H-3），1.01（3H，s，H-18），0.92（3H，d，J = 6.7
Hz，H-21），0.86（3H，t，J = 8.0 Hz，H-26），0.84（3H，d，J = 7.2 Hz，H-28），0.81（3H，d，J = 7.2
Hz，H-29），0.68（3H，s，H-19），0.9~2.5（29H，m）。以上数据与文献[2]报道的β-谷甾醇对照基本一致，
且与标准品混合熔点不升高，故鉴为β-谷甾醇。
化合物2：白色固体（CDCl3），m.p. 77~79℃。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ 2.34（2H，t，J = 7.5 Hz，
H-2），1.63（2H，m，H-3），1.19 ~1.32（36H，m），0.88（3H，t，J = 6.9 Hz，H-24）。以上数据与文献[3]
一致，故鉴定该化合物为二十四碳酸。
化合物3：白色晶体（MeOH），m.p. 42~43℃，1H NMR（400 MHz，DMSO-d6）δ 12.18（2H，s，—COOH），
2.20（4H，t，J = 1.6 Hz，H-2, 2′），1.50（4H, m, H-3, 3′），该化合物水溶液显酸性，与己二酸标准品混合
熔点不降低，鉴定为己二酸。
化合物4：淡黄色针晶（EtOAc），93~94.5℃，1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ 1.01（6H，m，H-11，11′） ，
1.53（6H，s，H-5′a），1.76（4H，m，H-10，10′），2.13（3H，s，H-5a），3.07（2H，t，H-9′），3.17（2H，
t，H-9），3.55（2H，s，H-7），3.73（3H，s，H-4a），10.02（1H，s，OH），11.52（1H，s，OH），15.65
（1H，s，OH），18.57（1H，s，OH）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ 206.9（C-8），206.7 （C-8′），161.7
（C-2），160.3（C-6），160.1（C-4），159.8（C-2′），159.5（C-6′），156.4（C-4′），112.1（C-1），107.8
（C-7），106.3（C-3），105.7（C-1′），103.9（C-5′），101.8（C-3′），61.5（C—OMe），45.8（C-9），44.3
（C-9′），18.2（C-10，10′），16.1（C-7），14.0（C-11），13.9（C-11′），9.1（5-Me），7.5（5′-Me）。以上
数据与文献[3]对照基本一致，鉴定为绵马素-BB。
化合物5：白色针晶（EtOAc），m.p. 170~171℃，1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ 0.57（3H，s，18-Me），
0.81（3H，s，19-Me），0.82（3H，s，26-Me），0.83（3H，s，27-Me）0.87（3H，d，J = 6.6 Hz，29-Me），
1.04（3H，d，J = 6.6 Hz，21-Me），3.60（1H，m，H-3），5.03（1H，dd，J = 15.2，8.7 Hz，H-23），5.17
（1H，dd，J = 15.2，8.8 Hz，H-22），5.36（1H，m，H-7）。13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ 31.2（C-1），
31.5（C-2），71.1（C-3），38.0（C-4），40.3（C-5），29.7（C-6），117.5（C-7），139.6（C-8），49.5（C-9），
34.2（C-10），21.4（C-11），39.5（C-12），43.3（C-13），55.1（C-14），23.0（C-15），28.5（C-16），55.9
（C-17），12.0（C-18），13.0（C-19），40.8（C-20），21.0（C-21），138.1（C-22），129.5（C-23），51.3
（C-24），31.9（C-25），21.6（C-26），19.0（C-27），25.4（C-28），12.2（C-29）。以上数据与文献[4]中
的α-菠甾醇一致，鉴定为α-菠甾
醇。
2.2 抑菌活性
将蹄盖蕨乙醇提取物的正己
烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取物在不
同浓度下对番茄霜霉病菌、西瓜枯
萎病菌、水稻纹枯病菌和水稻稻瘟
病菌等植物病菌进行抑菌活性测
试，结果如表1。
表 1 三种萃取物在不同浓度下的抑菌活性
正己烷萃取物 乙酸乙酯萃取物 正丁醇萃取物 提取物
浓度/mg· mL-1 300 100 500 10 300 100 50 10 300 100 50 10
番茄霜霉病菌 +++ +++ ++ ++ - - - - - - - -
西瓜枯萎病菌 - - - - - - - - - - - -
水稻纹枯病菌 - - - - - - - - - - - -
水稻稻瘟病菌 - - - - - - - - - - - -
注：+++ 表示抑菌效果强，++ 表示抑菌效果中等，- 表示不显活性。

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由表 1中结果可知，蹄盖蕨乙醇浸出物的正己烷萃取物对番茄霜霉病菌显示较强的抑菌活性，而对西
瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌和水稻稻瘟病菌等植物病菌则不显活性；乙酸乙酯和正丁醇萃取物萃取物对番
茄霜霉病菌、西瓜枯萎病菌、水稻纹枯病菌和水稻稻瘟病菌等植物病菌均不显活性。
3 结论
干燥的猴腿蹄盖蕨全草乙醇浸出液依次用正己烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取，所得 3种萃取物中，正己
烷萃取物对番茄霜霉病菌显示较强的抑菌活性；利用硅胶柱层析等从蹄盖蕨正己烷萃取物中分离得到了 5
个化合物，它们的结构分别鉴定为：β-谷甾醇 (1)、二十四碳酸 (2)、己二酸 (3)、绵马素-BB (4)和 α-菠甾
醇 (5)，其中含量最多的是绵马素 BB，其含量占正己烷萃取物的质量分数为 2.4%。
参考文献
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Chemical constituents of Athyrium multidentatum
JI Cheng，ZHANG Mei-Wei，ZHANG Shu-Jun，ZHAO Ming
（College of Chemistry and Chemical Engineering，Qiqihar University，Heilongjiang Qiqihar 161006，China）

Abstract：The dried Athyrium multidentatum was concentrated with anhydrous ethanol. The solution were extracted
by Hexane, EtOAc and n-Butanol, respectively. The Hexane extract showed strong antibacterial activity to Tomatoes
downy mildew disease germs. As the results of chemical constituent analysis, five compounds β-sitosterol (1)，
tetracosanoic acid (2)，adipid acid (3)，aspidin-BB (4)，and α-spinasterol (5) were isolated form the Hexane extract
part by the methods of column chromatography and HPLC. The structures of these compounds were elucidated on the
basis of classical chemical methods and modern spectrometric approaches. And compounds 2，3，and 4 were isolated
from this plant for the first time.
Key words: Athyrium multidentatum；antibacterial activity；aspidin-BB