全 文 ：文章编号: 1009 - 5276( 2003) 11 - 1867 - 02 中图分类号: R931. 6 文献标识码: A 收稿日期: 2003 - 02 - 20
费菜不同器官中总黄酮的含量比较及其薄层鉴别
陈华珍 陈建伟
(南京中医药大学, 210029,江苏南京 / /第一作者女, 1977 年生, 2001 级硕士研究生)
摘 要: 目的:比较费菜不同器官中的总黄酮含量。方法: 用紫外分光光度法做含量测定, 以芦丁作为对照
品,在波长 500nm 处测定; 用聚酰胺薄层层析法做定性鉴别, 以槲皮素作为对照品, 无水乙醇: 水:二乙胺( 9: 1:
0. 1)为展开剂。结果:黄酮在 0. 008~ 0. 048mg /ml范围呈良好的线性关系( r= 0. 9991, n= 6)。结论:黄酮在费菜
不同器官中含量高低依次为: 老叶( 4. 079% )、嫩叶( 3. 514% )、花( 2. 106% )、茎( 1. 126% )。该法简便、快速、重现
性好, 适用于费菜不同器官中的总黄酮的含量测定。
关 键 词: 费菜; 黄酮; 紫外分光光度; 含量测定
费菜 Sedum kamtschaticum Fisch. 系景天科景天属植物
费菜的带根全草,始载于5救荒本草6, 其性平、味酸; 具有活
血、止血、宁心、消肿、解毒等功效。民间用于治疗跌打损伤、
咳血、吐血、便血、心悸、痈肿等疾病。112文献报道了费菜中的
谷甾醇能阻止人体对胆固醇的吸收,降血脂, 防止血管硬化;
黄酮类可扩张心脑血管, 促进血液循环;齐墩果酸还可保护
肝脏,起到延缓老年性肝组织纤维化的作用, 经常服用,能有
益健康,延年益寿。122费菜含马栗树皮素、杨梅树皮苷、金丝
桃苷、槲皮素、山奈酚、杨梅黄素 3 -葡萄糖苷等黄酮及黄酮
甙类。132本文采用分光光度法分别测定了费菜中老叶、嫩叶、
花及茎中总黄酮的含量, 并用薄层层析对槲皮素进行了鉴
别,方法简便, 结果准确,可作为费菜及其制剂质量标准的控
制。
1 仪器与试剂
费菜(采自江苏沛县, 经南京中医药大学陈建伟教授鉴
定为景天科景天属植物费菜的带根全草, 分别取其老叶、嫩
叶、花及茎, 叶子颜色发黄者为老叶 ,颜色嫩绿者为嫩叶, 并
记老叶、嫩叶、花及茎为 1、2、3及 4) ; 752 型紫外光栅分光光
度计(上海精密科学仪器有限公司) : 槲皮素对照品(中国药
品生物制品检定所, 批号为 081 - 9003) ; 芦丁对照品(中国
药品生物制品检定所,批号为 760706) ; 层析聚酰胺片 (浙江
黄岩化学实验厂) ; 其他试剂均为分析纯。
2 含量测定与结果
芦丁标准液的配制 精密称取在 120e 减压干燥至恒
重的芦丁对照品 200mg, 置 100ml容量瓶中, 加甲醇 70ml,
置水浴上微热使溶解,放冷, 加甲醇置刻度,摇匀。精密吸取
10ml,置 100ml容量瓶中加水置刻度摇匀, 即得(每 1ml中含
无水芦丁 0. 2mg)。
标准曲线的制备 精密量取对照品溶液 0、1. 0、2. 0、3.
0、4. 0、5. 0ml与 6. 0ml, 分别置于 25ml量瓶中各加水至
6ml, 加 5%亚硝酸钠溶液 1ml, 使混匀, 放置 6 分钟, 加 10%
硝酸铝溶液 1ml, 摇匀, 放置 6 分钟, 加氢氧化钠试液 10ml,
再加水至刻度,摇匀, 放置 15 分钟,在 500nm 的波长处测定
吸收度。回归方程为: A= 0. 009333+ 8. 4107C,C= 0. 9991;
结果表明, 芦丁浓度在 0. 008~ 0. 048mg /ml范围呈良好的
线性关系。
费菜中总黄酮的提取 从植株上分别取老叶、嫩叶、花
及茎, 洗净,于 60e 烘箱中干燥 24 小时至恒重, 粉碎, 精密
称取 60 目筛粉末 0. 1g, 置 50ml具塞容瓶中 ,加入甲醇定容
至 50ml,静置于阴暗处 24 小时, 超声提取 1 小时,过滤。
样品测定 精密吸取老叶、嫩叶滤液各 5ml,花、茎滤液
各 10ml置 25ml容量瓶中, 按标准曲线项下方法测定吸光
度,代入回归方程计算含量, 结果见表 1。
表 1 费菜中老叶、嫩叶、花及茎中总黄酮的测定结果
( n= 3)
总黄酮的含量( % ) RSD( % )
1 4. 079 1. 61
2 3. 514 1. 99
3 2. 106 1. 86
4 1. 126 0. 21
3 薄层鉴别方法与结果
1.老叶 2.嫩叶 3.花 4.茎 S .槲皮素
图 1 费菜薄层色谱图
取老叶、嫩叶、花及茎粉末各 10g, 置索氏提取器中, 加
石油醚( 30~ 60 e ) 150ml, 水浴提取 1 小时, 弃去石油醚, 加
甲醇 200ml, 超声提取 1 小时,蒸干, 加甲醇 20ml, 使溶解, 作
为供试品溶液。另取槲皮素对照品, 加甲醇制成每 1ml含
1mg的溶液作为对照品溶液。吸取上述溶液各 10ul,分别点
于层析聚酰胺片上,以无水乙醇 - 水 - 二乙胺 ( 9B1B0. 1)为
展开剂,展开, 取出, 晾干, 喷以 3% FeCl3 乙醇液, 置紫外灯
( 365nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位
置,显相同的黄绿色荧光。 (下转第 1917页)
#1867#
中 医 药 学 刊 2003 年 11月第 21 卷第 11 期
DOI：10.13193/j.archtcm.2003.11.73.chenhzh.039
六味地黄加麦冬、五味子大剂滋下为主,则水升火降而咳喘
自定。º若干咳日久,咳动引百骸, 自觉气从脐下逆冲,连声
顿咳,似喘非喘, 为肾虚失纳之冲咳。首当潜阳镇冲,以三甲
复脉汤加补骨脂、紫石英, 不专治咳而咳自止。
寒饮壅肺 肾阴亏损 证见外感寒邪、恶寒咳喘、咳痰
稀白、咽干、手足心热,腰膝酸软, 舌红少苔。治宜宣肺化饮,
平补肾阴,方选金水六君汤加味。
提示: 此症阴虚痰饮, 治实恐妨其虚, 用温恐伤其液, 滋
阴恐恋其饮。初感新邪病程短,当治上宜快, 实邪一去,补剂
即随;迁延日久, 上实多为痼疾,治其上可缓, 或虚实并治。
水热互结 少阴虚有热, 水热互结于下焦, 上逆犯肺而
见咳嗽欲呕,渴欲饮水, 小便不利 ,心烦,甚或下利不止。治
用猪苓汤养阴清热, 利水止咳,水气得去, 阴津得复, 诸证可
愈。
7 上虚下实
肺气虚足肿 证见长期咳嗽、气喘、动则短气、心悸、面
恍、懒言, 继则下肢水肿, 舌淡脉细弱。治宜益肺温阳、佐以
利水。方药用黄芪防己汤合补肺汤加减: 黄芪、党参、苍术、
白术、肉桂、防己、茯苓皮、麻黄、杏仁、淮山药、附子等。
提示:此所谓先喘后肿者治在肺, 益肺则源清水道通调,
应以益肺温阳为主。若单治其实, 愈利则肺气愈伤, 水益不
行,而肿益甚, 每见水未行而喘脱已矣。
(上接第 1867页)
4 讨 论
芦丁结构中有黄酮的特征共轭体系,与费菜中的总黄酮
在相同的波长 500nm 处有最大吸收, 故用芦丁作为含量测
定的指标成分。
费菜叶绿素对薄层显色有较强的干扰,故用石油醚将其
除掉。
从测定结果可以看出费菜中的总黄酮含量老叶最高, 其
次为嫩叶, 茎中最低, 这个结果也比较符合植物中次生代谢
产物的生物合成规律。
费菜无苦味、口感好, 对心脏病、肝病、高血压病等疾病
都有奇特的疗效,而且无任何毒副反应,是一种多功能的绿
色保健蔬菜和值得大力开发的新药。
本文采用比色法测定费菜中的总黄酮含量, 此法简便,
重现性好,适用于费菜及其制剂中的总黄酮含量测定。
参考文献
112国家医药管理局5中华本草6编委会. 中华本草1M2. ( 上册) , 上
海:上海科学技术出版社。1999, 721
122中国药科大学、中国医药科技出版社.中药辞海1M2. (第一卷) ,
北京:中国医药科技出版社, 1993, 1855
132李宋香.费菜的栽培技术及其药用价值1J2. 海峡药学, 2001, 13
( 4) : 61
(上接第 1874页) 讨 论 本病祖国医学属于瞳神疾病
范畴,症属危急, 治疗不及时,可造成各种并发症,如瞳神干
缺,乌风内障、圆翳内障、云雾移睛等。中医认为,本症的发
生由于感染风湿热邪, 因为本症发病, 多出现发热、头痛、呕
恶、耳鸣、脱发、毛发变白等先驱症状, 它主要是由风湿热邪
循肝胆二经经脉上窜空窍与肌肤的缘故。眼为肝窍,葡萄膜
为风轮属肝,风湿热邪上窜目窍, 所以,出现前部或后部葡萄
膜炎症,胆经之脉绕耳前后, 风热上壅, 涉及胆经之络, 致使
经气壅塞,故突然耳鸣、耳聋,发为血之余, 风盛血燥,毛发失
荣,而出现脱发, 毛发变白,风湿热邪搏于肌肤, 气血失和, 所
以皮肤发生白斑。治疗方面,内治实证常用清热泻火, 利湿
祛痰,疏肝理气, 凉血止血, 活血化瘀等法,虚证一般多从补
肝肾,养阴血方面着手, 虚实夹杂证则需补虚泻实,以滋阴降
火,柔肝熄风, 健脾利湿,益气活血等法运用较多。也可配合
局部用药、针灸、手术等法综合治疗。
本院在治疗本病中的经验是:
其一,分期与分型相结合。初期, 患者邪气盛正气不衰,
眼部及全身症状明显,这时以湿、热象为主,治以清热解毒除
湿,方选龙胆泻肝汤、丹栀逍遥散、抑阳酒连散加减。疾病后
期或慢性期,正虚邪不盛, 眼部色素膜炎症较轻,视网膜呈晚
霞状改变。这时以虚象为主,治宜滋补肝肾, 滋阴降火,方选
明目地黄汤或知柏地黄汤加减。
其二,在中医辨证治疗的同时, 结合现代中医药理研究。
在疾病早期,患者多表现免疫功能亢进,选用龙胆草、茯苓、
防己、黄连、黄柏、泽泻、柴胡等清热解毒、清热利湿药, 它们
有抑制免疫或双向调节免疫的作用。清热解毒与凉血活血
化瘀药同用,如丹皮、丹参、赤芍、川芎、当归、红花等,也有抑
制变态反应或双向调节作用。在疾病晚期,患者多表现免疫
功能低下,可选用枸杞、女贞子、黄精、旱莲草、山茱萸、淫羊
藿、黄芪、太子参等,这些补益肝肾的药物,有提高 T 细胞比
值,提高淋巴细胞转化率, 提高吞噬功能,促进免疫功能的作
用。我院收治的病人,经过中西医结合治疗后, 免疫功能普
遍得到改善, E - 玫瑰花总花结、淋巴细胞转化率、补体 C3
数值均有所提高。
其三,积极应用中医药, 利于激素的减量和撤退。西医
在治疗葡萄膜大脑炎的过程中, 以激素为首选,但长期应用
其副反应不可忽视, 在停药过程中还可引起病情反复或加
重,中药应用得当可减轻激素的副反应, 协助减量和停药。
生地、知母、甘草、防己、淫羊藿等均具有激素样作用但无激
素的副反应,可对症选用。
其四,在激素应用方面, 一定要避免大剂量滥用, 要根据
病情需要适当应用。我们提倡能不用就不用, 能局部应用就
不要全身用。但是对于急性严重的患者, 要足量应用,有的
患者开始时剂量不够, 炎症控制不理想,以后加大剂量也难
以控制了。在局部点眼时, 也存在同样的问题, 在急性期和
病情严重时要频繁点,我们通常所遵循的一日四次的量是不
够的。炎症控制住后可适当减量, 但要注意逐渐减量,避免
病情反复,可同时配合中药使用。
总之,本院在治疗葡萄膜大脑炎的过程中, 发现中西医
结合治疗,对控制病情,缩短病程, 减轻激素的副作用,预防
复发及并发症方面有较明显的优势。中西医结合是医学发
展的大趋势,也必将在防病治病方面做出更大的贡献。
参考文献
112刘家琦.实用眼科学1M2. 第二版, 北京:人民卫生出版社, 2002,
366
122廖品正.中医眼科学1M2.第三版,上海: 上海科学技术出版社,
1985, 101 - 105
132郭霞.蔡华松治疗葡萄膜大脑炎的经验1J2.四川中医, 1999, 7: 2
#1917#
中 医 药 学 刊 2003 年 11月第 21 卷第 11 期 临 床 研 究 传 真